金夢如，胡永華，孫冬梅

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，大慶 163319；2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所）

1 殺魚愛德華氏菌

1.1 殺魚愛德華氏菌簡介

殺魚愛德華氏菌（Edwardsiella piscicida），之前又稱遲緩愛德華氏菌（Edwardsiella tarda），屬于革蘭氏陰性致病菌，其分類地位歸屬于變形菌門、γ-變形菌綱、腸桿菌目、腸桿菌科、愛德華菌屬。該菌最初從日本鰻鱺中分離到，之后從一些爬行動(dòng)物和哺乳動(dòng)物中分離到。1965 年，Ewing 等[1]將這類細(xì)菌命名為遲緩愛德華氏菌。2013 年，Abayneh 等[2]通過表型和遺傳特征分析發(fā)現(xiàn)從病魚分離的愛德華氏菌不屬于遲緩愛德華氏菌或同屬的其他種，將其重新命名為殺魚愛德華氏菌，其模式菌株為ET883T。隨后Shao等[3]發(fā)現(xiàn)從患病鰻鱺中分離到的愛德華氏菌株并不能歸為殺魚愛德華氏菌，而是一個(gè)新種，命名為鰻愛德華氏菌（Edwardsiella anguillarum），模式菌株為ET080813T。至此，愛德華氏菌屬分為5 個(gè)種，殺魚愛德華氏菌、鰻愛德華氏菌、遲緩愛德華氏菌、鯰愛德華氏菌（Edwardsiella ictaluri）和?？茞鄣氯A氏菌（Edwardsiella hoshinae）[3]。在所有愛德華氏菌屬中，殺魚愛德華氏菌是研究的最多也是最深入的一個(gè)致病菌，并已成為研究腸道、細(xì)胞內(nèi)病原菌、系統(tǒng)性感染等方面的模式菌株。

殺魚愛德華氏菌可以感染大菱鲆、牙鲆、羅非魚、鱖魚、中華鱉等多種重要經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)動(dòng)物。近年來，研究人員從患病石斑魚和斑鱸魚中分離到了該菌[4]，表明其侵染對(duì)象在不斷擴(kuò)大。殺魚愛德華氏菌感染后常會(huì)引起魚類的腹水病以及肝、腸、腎壞死等病癥，這些病癥被統(tǒng)稱為愛德華氏菌病（Edwardsiellosis）。愛德華氏菌病在亞洲、歐洲、美洲和非洲等地范圍內(nèi)均有發(fā)生，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大損失[3]。

1.2 殺魚愛德華氏菌的毒力因子

殺魚愛德華氏菌的致病機(jī)制復(fù)雜，有多種毒力因子參與。病原菌從外界入侵到宿主期間既要應(yīng)對(duì)外界如鐵缺乏、氧化脅迫等逆境又要抵御宿主體內(nèi)的免疫防御系統(tǒng)等。在入侵宿主時(shí)，病原菌首先是利用周生鞭毛和粘附因子等開始附著和黏附；隨后在溶血素、侵襲素等輔助蛋白的協(xié)助下入侵宿主。特定情況下該菌可以侵染到宿主較深部位，從而被吞噬細(xì)胞吞噬，而被吞噬的殺魚愛德華氏菌可以在吞噬細(xì)胞內(nèi)生存和繁殖，以此躲避免疫系統(tǒng)的殺傷，這是該菌的一個(gè)典型特征[5]；進(jìn)入宿主后細(xì)菌開始在宿主內(nèi)定植和繁殖，這一過程T3SS 和T6SS 發(fā)揮主要作用，研究的也相對(duì)深入[6]；在宿主內(nèi)到達(dá)一定數(shù)量后，殺魚愛德華氏菌可擴(kuò)散到更深的位置，即血液和淋巴[6]，殺魚愛德華氏菌具有顯著的抗宿主血清殺菌能力，這是該菌的另一個(gè)典型特征。已有多個(gè)具有逃逸血清殺傷作用的因子被發(fā)現(xiàn)，包括Sip 1、Ivy、MliC 以及HigB 等[7-8]。

近年來，在殺魚愛德華氏菌致病機(jī)制研究中又有諸多新發(fā)現(xiàn)，例如揭示了一種由c-di-GMP 介導(dǎo)的新型非典型鐵死亡（ferroptosis）途徑，并發(fā)現(xiàn)該途徑具有調(diào)節(jié)致病性的功能[9]；發(fā)現(xiàn)硫氧還蛋白與細(xì)菌致病性密切相關(guān)，并抑制宿主ASK1-MAPKs 信號(hào)通路而促進(jìn)感染[10]；發(fā)現(xiàn)T6SS 中，除EvpP 效應(yīng)因子外，又鑒定到一個(gè)新的EvpQ 效應(yīng)因子[11]；發(fā)現(xiàn)抗酸系統(tǒng)CadBA 貢獻(xiàn)于細(xì)菌的致病性[12]；新鑒定到Ⅱ型毒素-抗毒素系統(tǒng)并發(fā)現(xiàn)其參與了細(xì)菌耐藥性、生物膜形成、抵抗血清殺傷和感染宿主等過程[7]；發(fā)現(xiàn)氨基酸代謝等多種途徑都與殺魚愛德華氏菌的抗逆性和致病性密不可分[13]；以及新鑒定到的多個(gè)與毒力相關(guān)的調(diào)控因子包括FabR、EvrA 等[14-15]。

2 殺魚愛德華氏菌雙組分調(diào)控系統(tǒng)

雙組分調(diào)控系統(tǒng)（two-component regulatory system，TCS）廣泛存在于各種原核生物中，能快速響應(yīng)不同外界環(huán)境并轉(zhuǎn)換為輸入信號(hào)，使細(xì)菌能夠迅速處理不利或有利的新情況。該系統(tǒng)一般包括兩個(gè)基本組分：位于細(xì)胞內(nèi)膜上的組氨酸激酶（Histidine kinase，HK）和位于細(xì)胞質(zhì)的應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白（Response regulator，RR）。其中，HK 含有信號(hào)感應(yīng)區(qū)，并將信號(hào)輸入至RR。雙組分系統(tǒng)在細(xì)菌眾多信號(hào)調(diào)控系統(tǒng)中處于非常重要的中心地位，對(duì)細(xì)菌生命活動(dòng)發(fā)揮著至關(guān)重要的調(diào)控作用。它們已被證明可以在許多過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，例如毒力、群體感應(yīng)、生物膜形成和抗生素耐藥性等[16]。其作用可使病原菌有效地適應(yīng)各種外界環(huán)境并對(duì)宿主發(fā)揮毒力。大腸桿菌（Escherichia coli）中的雙組分調(diào)控系統(tǒng)眾多，已證明TCS可參與細(xì)菌耐藥性、磷酸鹽調(diào)控以及致病性等多種作用[17]，其中OmpR 和PhoB 被廣泛研究。在殺魚愛德華氏菌中共發(fā)現(xiàn)24 種TCS[2]。目前，僅有5 種TCS被研究，其中研究最深入的是EsrA-EsrB 系統(tǒng)。

2.1 EsrA-EsrB 雙組分系統(tǒng)

EsrA-EsrB 系統(tǒng)是由T3SS 基因簇編碼的，其中EsrA 是組氨酸激酶，EsrB 是調(diào)控因子，受EsrA 激活。EsrA-EsrB 系統(tǒng)與沙門氏菌中（Salmonella）SPI-2編碼的SsrA-SsrB 系統(tǒng)同源[18]。在腸道沙門氏菌（Salmonella enterica）中，SsrA-SsrB 系統(tǒng)不僅調(diào)節(jié)Ⅲ型分泌系統(tǒng)等毒力相關(guān)因子的表達(dá)[19]，還與細(xì)菌鞭毛形成、生物膜形成、抗酸性等重要生理性能密切相關(guān)，是沙門氏菌重要的毒力調(diào)節(jié)系統(tǒng)[20]。在鯰愛德華氏菌中也存在與SsrA-SsrB 同源的EsrA-EsrB 毒力調(diào)控系統(tǒng)[21]。

研究發(fā)現(xiàn)，EsrA-EsrB 系統(tǒng)可促進(jìn)殺魚愛德華氏菌在逆境下生存，如低溫海水、鐵缺乏、氧化壓力以及酸性壓力等。EsrB 在調(diào)控細(xì)菌生理反應(yīng)方面起著重要的作用[22]。并且在殺魚愛德華氏菌中，EsrB 被認(rèn)為是全局調(diào)控因子，以及大量的研究表明EsrA-EsrB最重要的作用是對(duì)殺魚愛德華氏菌毒力的調(diào)控，因?yàn)镋srA-EsrB 可以調(diào)控殺魚愛德華氏菌毒力Ⅲ型分泌系統(tǒng)和VI 型分泌系統(tǒng)（T3SS 和T6SS）的表達(dá)以及相關(guān)蛋白分泌[22]。此外，有研究表明EsrA-EsrB 系統(tǒng)受到了PhoQ-PhoP 雙組分系統(tǒng)的調(diào)控[23]。

2.2 PhoQ-PhoP 雙組分系統(tǒng)

腸桿菌科細(xì)菌的PhoQ-PhoP 雙組分系統(tǒng)主要感知環(huán)境變化并積極作出響應(yīng)，調(diào)節(jié)細(xì)菌生存所必需的一些功能，其中PhoQ 是組氨酸激酶，PhoP 是反應(yīng)調(diào)節(jié)因子[24]。鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）中，PhoQ-PhoP 負(fù)責(zé)響應(yīng)周質(zhì)Mg2+濃度變化，同時(shí)也是該菌中重要的毒力調(diào)控因子[25]。大腸桿菌中，PhoQ-PhoP 可以感知Mg2+濃度、低pH 值、陽離子抗菌肽的存在以及高滲透壓等逆境條件[26]。殺魚愛德華氏菌中，PhoQ-PhoP 同樣可以快速感知不同酸堿pH、溫度變化、低Mg2+濃度、毒素以及抗菌肽的脅迫環(huán)境并進(jìn)行相應(yīng)的響應(yīng)以使細(xì)菌適應(yīng)逆境[27]。例如，phoP 或phoQ 的敲除均減弱了殺魚愛德華氏菌的抗氧化壓力能力、生物膜形成能力以及對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰的致病性[24]；Lv 等[23]認(rèn)為PhoQ-PhoP 也是殺魚愛德華氏菌中重要的毒力調(diào)節(jié)因子之一。

2.3 其他雙組分系統(tǒng)

除了上述2 個(gè)雙組分系統(tǒng)外，QseC-QseB、PhoR-PhoB 和Cpx 雙組分系統(tǒng)在殺魚愛德華氏菌中也有研究報(bào)道。其中QseC-QseB 雙組分系統(tǒng)膜傳感器激酶QseC 可將QseB 磷酸化而使后者激活并發(fā)揮調(diào)控作用。在大腸桿菌中QseB-QseC 信號(hào)通路調(diào)控50多個(gè)編碼鞭毛蛋白和毒力相關(guān)蛋白的基因表達(dá)[28]。當(dāng)殺魚愛德華氏菌入侵宿主后，QseB-QseC 能響應(yīng)宿主體內(nèi)腎上腺素濃度的變化并做出反應(yīng)，調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)從而影響細(xì)菌鞭毛的產(chǎn)生、對(duì)宿主的入侵以及在體內(nèi)的定植等[29]。

PhoR-PhoB 雙組分系統(tǒng)參與細(xì)菌磷酸鹽調(diào)控。PhoB 包含接收區(qū)和效應(yīng)區(qū)，組氨酸激酶PhoR 可使受體區(qū)域磷酸化，引起PhoB 全長蛋白的構(gòu)象變化，從而促進(jìn)DNA 的結(jié)合和轉(zhuǎn)錄。銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）中，在磷酸鹽消耗條件下調(diào)控因子PhoB 激活部分相關(guān)基因以響應(yīng)磷酸鹽變化[30]。殺魚愛德華氏菌中的PhoR-PhoB 也具有響應(yīng)磷酸鹽濃度的功能[31]。

CpxRA 雙組分系統(tǒng)是細(xì)菌重要的包膜應(yīng)激感應(yīng)系統(tǒng)，由錨定在內(nèi)膜上的組氨酸激酶CpxA 和胞內(nèi)的調(diào)控蛋白CpxR 組成。CpxA 是這一系統(tǒng)的關(guān)鍵成分，通常由兩個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域、一個(gè)周質(zhì)感受域和一個(gè)胞質(zhì)傳輸域組成。已有的研究表明CpxA 同時(shí)具有磷酸激酶和磷酸酶活性[32]。CpxR 被CpxA 磷酸化后，以5'-GTAAA（n5）GTAAA-3'作為其共有識(shí)別序列與啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合調(diào)控靶基因的表達(dá)。此外，位于CpxRA下游的CpxP，是一種周質(zhì)輔助蛋白，可以負(fù)反饋調(diào)節(jié)CpxRA，被認(rèn)為是CpxRA 系統(tǒng)的第三個(gè)成分[32]。研究發(fā)現(xiàn)CpxRA 系統(tǒng)激活Ysc-Yop Ⅲ型分泌系統(tǒng)及其效應(yīng)因子YopS，以調(diào)控假結(jié)核耶爾森菌（Yersinia pseudotuberculosis）對(duì)宿主細(xì)胞的粘附、入侵和抵抗淋巴細(xì)胞的吞噬能力[33]。殺魚愛德華氏菌中失活CpxRA 對(duì)藍(lán)曼龍的毒力顯著減弱[34]。

3 雙組分系統(tǒng)的調(diào)控作用與機(jī)制

3.1 響應(yīng)環(huán)境應(yīng)激的調(diào)控

為了能夠在外界環(huán)境和宿主中存活，細(xì)菌必須要克服各種不利的外部環(huán)境條件，包括抗生素、滲透壓、氧化壓力、酸堿脅迫等。在殺魚愛德華氏菌中，當(dāng)phoP 敲除后細(xì)菌對(duì)克林霉素、多粘菌素B 和多粘菌素硫酸鹽三種抗生素敏感性顯著增加，多粘菌素B和多粘菌素硫酸鹽屬于陽離子抗菌肽；進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn)phoP 的缺失導(dǎo)致病原菌對(duì)多種抗菌肽的敏感性都顯著增加[23]。隨后，Lv 等[35]發(fā)現(xiàn)PhoP 通過激活ugd 的表達(dá)發(fā)揮抗菌肽的作用。此外還發(fā)現(xiàn)，殺魚愛德華氏菌phoQ 或phoP 的缺失導(dǎo)致細(xì)菌在過氧化氫條件下的存活能力顯著降低，在酸性條件下細(xì)菌的生長略有降低[24]。這些結(jié)果表明，PhoQ-PhoP 雙組份系統(tǒng)參與了殺魚愛德華氏菌的抗逆作用。對(duì)PhoRPhoB 系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)其可以通過調(diào)控phoU 以適應(yīng)磷酸鹽環(huán)境，由于phoB 具有自身啟動(dòng)子，能夠激活磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)pstSCAB-phoU，幫助病原菌在黏附和侵染到胞內(nèi)后適應(yīng)宿主環(huán)境中的低磷酸鹽濃度，以便病原菌更好的在宿主體內(nèi)定植[31]。

3.2 對(duì)T3SS/T6SS 的調(diào)控

T3SS/T6SS 分泌系統(tǒng)是殺魚愛德華氏菌最重要的毒力系統(tǒng)，在細(xì)菌抗逆性、生物膜形成、入侵細(xì)胞、胞內(nèi)定植、抑制宿主免疫防御等方面發(fā)揮重要作用，并且其表達(dá)受到雙組份系統(tǒng)的調(diào)控（如圖1）[29，36]。多項(xiàng)研究證實(shí)殺魚愛德華氏菌T3SS/T6SS 受到了EsrA-EsrB 等系統(tǒng)的嚴(yán)格調(diào)控[22，37-39]。研究表明，EsrB 激活T3SS 和T6SS 系統(tǒng)，調(diào)控兩個(gè)系統(tǒng)胞外蛋白的分泌[22]。Lv 等[23]發(fā)現(xiàn)當(dāng)esrB 缺失后，殺魚愛德華氏菌分泌蛋白中幾乎檢測不到T3SS 中的EseB 蛋白和T6SS中的EvpC 蛋白，以及phoP 缺失也在一定程度上降低了EseB 蛋白和EvpC 蛋白的分泌，但PhoP 對(duì)其不是直接調(diào)控，而是通過調(diào)節(jié)EsrB 對(duì)T3SS 和T6SS 部分基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。Chakraborty 等[31]發(fā)現(xiàn)PhoB通過與PhoU 相互作用激活EsrC 從而調(diào)控T6SS 基因的表達(dá)。此外，Wang 等[29]發(fā)現(xiàn)當(dāng)殺魚愛德華氏菌入侵宿主后，qseC/qseB 以及T3SS 部分基因表達(dá)都有所上調(diào)，且qseC/qseB 突變后T3SS 部分基因下調(diào)明顯，表明QseC-QseB 也對(duì)T3SS 具有調(diào)控作用。T3SS和T6SS 系統(tǒng)或許還受其他雙組份系統(tǒng)的調(diào)控，這有待于后續(xù)研究的繼續(xù)和深入。

圖1 雙組分系統(tǒng)參與的對(duì)T3SS/T6SS 系統(tǒng)及溶血素等因子的調(diào)控作用Fig.1 Regulation of T3SS/T6SS system and factors such as hemolysin by two-component system

3.3 對(duì)其他毒力因子的調(diào)控

宿主在應(yīng)對(duì)病原菌感染時(shí)，會(huì)激發(fā)自身免疫應(yīng)答反應(yīng)，例如血清殺傷、巨噬細(xì)胞吞噬并釋放活性氧、免疫相關(guān)因子等以消滅入侵的病原菌，而病原菌為了應(yīng)對(duì)宿主的免疫反應(yīng)和體內(nèi)不利的逆境條件，需要充分發(fā)揮其抗逆性和毒力系統(tǒng)，包括黏附能力、運(yùn)動(dòng)能力、生物被膜形成能力、抗酸能力、抗氧化能力以及毒力相關(guān)因子等，病原菌的這些生理性能和毒力系統(tǒng)等往往受到雙組份系統(tǒng)的調(diào)控。對(duì)殺魚愛德華氏菌33 個(gè)反應(yīng)調(diào)節(jié)基因分析發(fā)現(xiàn)，相比于野生株，esrB 缺失株和phoP 缺失株生長緩慢且細(xì)胞密度較低，esrB 缺失株的生物膜形成能力以及感染能力顯著降低；進(jìn)一步構(gòu)建esrB-phoP 雙敲株發(fā)現(xiàn)雙敲株比單敲株的毒力明顯降低，這表明EsrA-EsrB 和PhoQ-PhoP 既可以獨(dú)立發(fā)揮作用，又可以相互作用[23]。phoQ 缺失或phoP 缺失導(dǎo)致殺魚愛德華氏菌生物被膜形成能力、抗血清殺傷能力以及對(duì)宿主的侵染能力均顯著降低[24]。研究發(fā)現(xiàn)EsrA-EsrB 系統(tǒng)對(duì)EthA具有負(fù)調(diào)控作用（圖1）[29]，并且發(fā)現(xiàn)在esrB 缺失株中ethA 的表達(dá)還受到溫度的影響，在37 ℃時(shí)ethA 表達(dá)量顯著高于25 ℃時(shí)的表達(dá)量[22]。對(duì)QseC-QseB 系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)，qseC 或qseB 缺失明顯降低了殺魚愛德華氏菌的運(yùn)動(dòng)能力以及鞭毛相關(guān)基因的表達(dá)，減弱了殺魚愛德華氏菌對(duì)斑馬魚的致死率，表明該系統(tǒng)在調(diào)控鞭毛基因和毒力方面發(fā)揮著作用[29]。此外，cpxR 以及Cpx 的缺失都會(huì)使病原菌的毒力降低[40]。已有的研究結(jié)果表明，雙組分系統(tǒng)在多個(gè)方面參與了對(duì)殺魚愛德華氏菌毒力的調(diào)控。

3.4 對(duì)其他途徑的調(diào)控

T3SS/T6SS 蛋白的分泌與溫度和Mg2+濃度有關(guān)。據(jù)報(bào)道，Mg2+的濃度對(duì)T3SS/T6SS 蛋白的分泌有一定影響。研究表明，PhoQ-PhoP 系統(tǒng)可以感應(yīng)溫度和Mg2+濃度的變化，PhoQ 在Mg2+濃度低的時(shí)候?qū)⒘姿嵝盘?hào)傳遞到PhoP，調(diào)節(jié)因子PhoP 將所感知的外界環(huán)境條件傳遞給EsrA-EsrB 雙組分系統(tǒng)，進(jìn)而調(diào)節(jié)T3SS/T6SS 蛋白的表達(dá)，而在Mg2+濃度高時(shí)，PhoQ 可以與Mg2+結(jié)合，結(jié)構(gòu)隨之發(fā)生改變從而無法傳遞磷酸化信號(hào)[22]。此外，PhoP 正向調(diào)控9 個(gè)ATP 合酶基因的轉(zhuǎn)錄，并且通過與atpI 的啟動(dòng)子直接結(jié)合發(fā)揮這一作用[41]。

谷氨酰胺合成酶（Glutamine synthetase，GS）在谷氨酸轉(zhuǎn)化為谷氨酰胺過程中起著至關(guān)重要的作用，還參與微生物多種調(diào)節(jié)機(jī)制和伴侶活動(dòng)。殺魚愛德華氏菌GS 包括GlnA、GlnR、GlnL 和GlnG，其中GlnA 是GS 的重要組成部分[18]。蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，ΔesrB 與野生株之間有19 個(gè)表達(dá)點(diǎn)存在顯著差異，其中7 個(gè)蛋白質(zhì)在ΔesrB 中表達(dá)下調(diào)，12 個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)并且有3 個(gè)與氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝有關(guān)的GS。隨后驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)EsrB 可以與glnA 啟動(dòng)子結(jié)合，并且對(duì)GlnA 的表達(dá)具有負(fù)調(diào)控作用[38]。此外，EsrB 還調(diào)控抗氧化相關(guān)蛋白如超氧化物歧化酶和巰基過氧化物酶[42]，其他相關(guān)研究也證實(shí)EsrB 對(duì)抵抗ROS 的相關(guān)基因具有抑制作用[37]。

4 雙組分系統(tǒng)受調(diào)控作用

4.1 EsrA-EsrB 受到的正調(diào)控

最近研究表明，EsrA-EsrB 發(fā)揮毒力調(diào)控作用時(shí)受多因素影響，一些基因可以正向調(diào)控esrB。例如Shao 等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)abR 在感應(yīng)長鏈不飽和脂肪酸時(shí)可以與esrB 的啟動(dòng)子結(jié)合激活esrB，從而調(diào)控T3SS 的表達(dá)，以響應(yīng)長鏈不飽和脂肪酸濃度的變化。此外，另一項(xiàng)研究表明，EvrA 作為一種轉(zhuǎn)錄激活因子，可以與甘露糖-6-磷酸結(jié)合并激活esrB 的表達(dá)，從而導(dǎo)致T3SS/T6SS 表達(dá)增加（如圖2）[15]。

圖2 殺魚愛德華氏菌甘露糖激活esrB 調(diào)控毒力基因Fig.2 esrB regulation of virulence genes by mannose activation in E.piscicida

4.2 EsrA-EsrB 受到的負(fù)調(diào)控

EsrA-EsrB 除受到正調(diào)控外，還會(huì)受到其他基因的負(fù)調(diào)控。例如，RpoS 可以拮抗esrB 的表達(dá)從而抑制T3SS/T6SS，導(dǎo)致細(xì)菌毒力減弱[43]；Yin 等[37]發(fā)現(xiàn)在細(xì)菌早期生長時(shí)PepA 對(duì)esrB 發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用。以及另一項(xiàng)研究表明MviN 對(duì)esrB 在細(xì)菌生長前期和后期有著不同的調(diào)控作用，通過加入蔗糖的培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)MivN 在病原菌生長前期可以激活EsrB的表達(dá)，生長后期又可以抑制EsrB 的表達(dá)[44]；Ye 等[45]發(fā)現(xiàn)在ΔuhpA 中esrB 表達(dá)上調(diào)，說明UhpA 可以抑制esrB 的表達(dá)；Ma 等[46]證實(shí)EnrR 可以結(jié)合并抑制esrB 的啟動(dòng)子活性。此外，在鐵存在的情況下，F(xiàn)ur 能結(jié)合esrB 啟動(dòng)子并抑制其表達(dá)最終使細(xì)菌毒力減弱；相反，在缺鐵情況下，EsrB 能夠激活T3SS/T6SS和鐵吸收系統(tǒng)。表明Fur-EsrB 的相互作用是殺魚愛德華氏菌適應(yīng)宿主體內(nèi)環(huán)境和海水環(huán)境所必需的[39]。

研究表明，EsrB 在作為全局調(diào)控因子的同時(shí)也受到了其上游基因的調(diào)控。

5 結(jié)語

雙組分調(diào)控系統(tǒng)不但可以幫助病原菌適應(yīng)外界環(huán)境變化，而且在病原菌毒力作用方面發(fā)揮著重要的調(diào)控功能。近年來，隨著分子生物學(xué)的不斷快速發(fā)展，對(duì)于殺魚愛德華氏菌的研究越來越多，更多的雙組分系統(tǒng)也隨之被發(fā)現(xiàn)，逐漸成為了殺魚愛德華氏菌中的研究熱點(diǎn)。但雙組分調(diào)控系統(tǒng)在殺魚愛德華氏菌致病機(jī)制中的研究還不夠全面、透徹，目前有效的病原菌防治方法多為抗生素治療法，而長期的藥物殘留會(huì)引發(fā)許多問題，因此應(yīng)探尋更安全、有效的防治措施，這需要對(duì)病原菌發(fā)揮毒力的機(jī)制進(jìn)行更全面的了解、更深入的研究。為此，深入掌握雙組分系統(tǒng)的作用機(jī)制以及更多發(fā)揮作用的雙組分系統(tǒng)是目前十分必要的，可以為更好地防治殺魚愛德華氏菌引起的病害提供理論基礎(chǔ)。