鄧 濤, 夏賢仁, 李先才, 吳 凱, 吳姝俊, 王全貞, 郭啟超, 余森申*

(1.云南省煙草公司 曲靖市公司, 云南 曲靖 655000; 2.云南師范大學(xué) 能源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院, 云南 昆明 650500; 3.云南五佳生物科技有限公司, 云南 昆明 650106)

0 引言

【研究意義】烤煙是重要的經(jīng)濟(jì)作物,在國(guó)民經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。我國(guó)烤煙產(chǎn)量約占全球總產(chǎn)量的一半,同時(shí)也面臨著巨大的病蟲(chóng)害防控壓力,常見(jiàn)的煙草病害如煙草黑脛病、根黑腐病、野火病、赤星病、青枯病和花葉病等在我國(guó)各大煙區(qū)均普遍存在,據(jù)統(tǒng)計(jì),每年由于病害造成的損失在總產(chǎn)量的10%～15%[1-2]。目前,化學(xué)防治方法依然是最為普遍、有效、低成本、受限因素小的病害防治手段,但化學(xué)農(nóng)藥的大量使用帶來(lái)了農(nóng)殘問(wèn)題,影響煙葉品質(zhì)及安全性,威脅人體健康,此外,長(zhǎng)期大量使用化學(xué)農(nóng)藥促使病原菌、害蟲(chóng)等的抗藥性增加,廣譜性化學(xué)農(nóng)藥易對(duì)害蟲(chóng)天敵造成誤殺,防效變得越來(lái)越差[3-4],同時(shí)伴隨著一系列的環(huán)境污染問(wèn)題。近年來(lái),生產(chǎn)觀念改變及科技投入提高,生物防治得到了前所未有的重視,其中,微生物源農(nóng)藥是生物制劑中的重要類(lèi)型之一,利用微生物自身或產(chǎn)生的活性成分對(duì)害蟲(chóng)、病原菌等農(nóng)業(yè)上有害的生物因素進(jìn)行殺滅[5],具有安全、高效、對(duì)環(huán)境友好等作用?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】微生物菌劑兼具防病、促產(chǎn)、提質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)。施河麗等[6]研究表明,微生物菌劑與黃腐酸協(xié)同處理的烤煙在移栽后120 d其青枯病發(fā)病率從81.11%降至41.11%,發(fā)病率和病情指數(shù)顯著降低;同時(shí)改變了土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。鄒朔飛等[7]通過(guò)平板對(duì)峙及田間防效試驗(yàn)篩選出郝氏鏈霉菌(Streptomyceshalstedii)作為防治煙草黑脛病的拮抗菌,其在田間對(duì)黑脛病的相對(duì)防效達(dá)75.30%,高于化學(xué)藥劑甲霜·噁霉靈水劑。師超等[8]在利川煙區(qū)對(duì)比3種微生物菌劑對(duì)煙草黑脛病和青枯病的防治效果表明,認(rèn)為熒光假單胞菌粉劑對(duì)煙草黑脛病防治效果顯著,并具有明顯的促產(chǎn)作用,產(chǎn)量、產(chǎn)值的增幅分別達(dá)到10.86%和10.06%。微生物菌劑也是改善由連作引起的土壤退化問(wèn)題的重要途徑,劉紅杰等[9]研究表明,微生物菌劑(微生物復(fù)合肥、摩西球囊霉、幼套球囊霉及根內(nèi)球囊霉)能顯著影響土壤酶活性,進(jìn)而影響各種代謝活動(dòng)?！狙芯壳腥朦c(diǎn)】宣威煙區(qū)是全國(guó)煙葉產(chǎn)量最大的縣級(jí)煙區(qū),也面臨著使用化學(xué)農(nóng)藥帶來(lái)的一系列問(wèn)題。目前,生物制劑在宣威煙區(qū)的研究應(yīng)用較少,僅徐洪宇等[10]在宣威煙區(qū)對(duì)比了普通有機(jī)肥及其與枯草芽孢桿菌配施對(duì)土壤條件及烤煙產(chǎn)質(zhì)量的影響,對(duì)指導(dǎo)煙葉生產(chǎn)的作用有限?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】擬在宣威北部煙區(qū)現(xiàn)有化學(xué)藥劑防治主要土傳病害的現(xiàn)狀條件下,通過(guò)對(duì)比分析枯草芽孢桿菌、木霉菌和苦參硫磺3種生物制劑對(duì)土壤理化性質(zhì)、微生物多樣性、烤煙農(nóng)藝性狀及煙葉品質(zhì)的影響,明確最佳的綠色生物源農(nóng)藥及其使用方法,保障煙區(qū)的可持續(xù)發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2021年在云南省宣威市寶山鎮(zhèn)(104.466°E, 26.298°N)進(jìn)行,平均海拔2 050.92 m,土壤類(lèi)型為紅壤,肥力中等。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 烤煙品種 供試烤煙為云煙100,種子由玉溪中煙種子有限責(zé)任公司提供,由宣威市寶山煙葉站育苗。

1.2.2 菌劑 枯草芽孢桿菌(有效活菌100億個(gè)/g)及木霉菌(有效活菌2億個(gè)/g),均購(gòu)自云南星耀生物制品有限公司;苦參硫磺(總有效成分含量13.7%),購(gòu)自山東省成武縣有機(jī)化工廠。

1.2.3 肥料 煙草專(zhuān)用復(fù)合肥(N∶P2O5∶K2O=14∶10∶24);商品有機(jī)肥(總養(yǎng)分≥5.0%,有機(jī)質(zhì)≥60%),均購(gòu)自云南云葉化肥股份有限公司;硝酸鉀(N∶P2O5∶K2O=13.5∶0∶44.5),購(gòu)自四川米高化肥有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì),共設(shè)6個(gè)處理:CK,不施藥(均用等量清水淋根);A,還苗期用枯草芽孢桿菌1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根,14 d后施用第2次(藥劑和用量與第1次相同,下同);B,還苗期用木霉菌1 500 g/hm2用量稀釋600倍噴施+淋根,14 d后施用第2次;C,還苗期用13.7%苦參硫磺1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根,14 d后施用第2次;AC,還苗期用13.7%苦參硫磺1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根,14 d后用枯草芽孢桿菌1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根;BC,還苗期用13.7%苦參硫磺1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根,14 d后用木霉菌1 500 g/hm2稀釋600倍噴施+淋根。每個(gè)處理3次重復(fù),共計(jì)18個(gè)小區(qū),小區(qū)面積67 m2,株行距為120 cm×55 cm。各處理烤煙統(tǒng)一于4月14日移栽。煙草專(zhuān)用復(fù)合肥和商品有機(jī)肥作為基肥,用量均為600 kg/hm2,烤煙移栽15 d后,用硝酸鉀150 kg/hm2進(jìn)行追肥。田間栽培管理措施按當(dāng)?shù)貎?yōu)質(zhì)煙栽培技術(shù)要點(diǎn)進(jìn)行,煙葉采收后分類(lèi)裝爐、統(tǒng)一烘烤。

1.3.2 指標(biāo)測(cè)定

1) 植煙土壤理化性質(zhì)。于烤煙生長(zhǎng)成熟期采集土壤樣品測(cè)定pH及有機(jī)質(zhì)、全氮、全磷、全鉀、堿解氮、速效磷、速效鉀含量,分別參照《土壤檢測(cè) 第2部分:土壤pH的測(cè)定》(NY/T 1121.2—2006)、《土壤檢測(cè) 第6部分:土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定》(NY/T 1121.6—2006)、《土壤檢測(cè) 第24部分:土壤全氮的測(cè)定自動(dòng)定氮儀法》(NY/T 1121.24—2012)、《土壤全磷測(cè)定法》(GB 9837—1988)、《土壤全鉀測(cè)定法》(GB 9836—1988)、《森林土壤水解性氮的測(cè)定》(LY/T 1229—1999)、《土壤檢測(cè) 第7部分:土壤有效磷的測(cè)定》(NY/T 1121.7—2014)、《土壤速效鉀和緩效鉀含量的測(cè)定》《NY/T889—2004》進(jìn)行檢測(cè);通過(guò)環(huán)刀法測(cè)定土壤容重、比重和總孔隙度,胡敏酸、富里酸及富敏素的提取和分離參考《森林土壤腐殖質(zhì)組成的測(cè)定》(LY/T 1238—1999)及文獻(xiàn)[11]的方法進(jìn)行。

2) 微生物多樣性。參照盧慧等[12]的方法采用高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)成熟期土壤微生物群落進(jìn)行測(cè)序。

3) 煙草主要病害調(diào)查。參照《煙草病蟲(chóng)害分級(jí)及調(diào)查方法》(GB/T 23222—2008)分別調(diào)查并計(jì)算各試驗(yàn)區(qū)煙草黑脛病和根黑腐病的發(fā)病率及相對(duì)防效。

煙株發(fā)病率=病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%

相對(duì)防效=(對(duì)照發(fā)病率-處理發(fā)病率)/對(duì)照發(fā)病率×100%

4) 田間農(nóng)藝性狀調(diào)查。參照《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測(cè)量方法》(YC/T 142—2010),在成熟期測(cè)定各處理煙株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬、節(jié)距、莖圍和有效葉數(shù)。

5) 煙葉的物理特性。參照《煙草及煙草制品 試樣的制備和水分測(cè)定 烘箱法》(YC/T 31—1996)測(cè)定煙葉平衡含水率,煙葉抗張力、葉面密度和含梗率均參照文獻(xiàn)[13]的方法進(jìn)行測(cè)定。

6) 煙葉的常規(guī)化學(xué)成分。參照《煙草及煙草制品 水溶性糖的測(cè)定 連續(xù)流動(dòng)法》(YC/T 159—2002)、《煙草及煙草制品 總植物堿的測(cè)定 連續(xù)流動(dòng)法》(YC/T 160—2002)、《煙草及煙草制品 總氮的測(cè)定 連續(xù)流動(dòng)法》(YC/T 161—2002)、《煙草及煙草制品 氯的測(cè)定 連續(xù)流動(dòng)法》(YC/T 162—2011)、《煙草及煙草制品 鉀的測(cè)定 火焰光度法》(YC/T 173—2003)對(duì)煙葉常規(guī)化學(xué)成分進(jìn)行檢測(cè)。參照文獻(xiàn)[14]的方法進(jìn)行優(yōu)質(zhì)煙葉評(píng)價(jià)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 23.0和Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用Duncan法進(jìn)行多重比較;煙葉常規(guī)化學(xué)成分采用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)的數(shù)據(jù)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 各處理烤煙主要病害的發(fā)病率與防效

從表1看出,不同施藥處理成熟期烤煙田間主要病害的發(fā)生情況存在差異。根黑腐病:各處理的發(fā)病率為1.76%～3.59%,相對(duì)防效為28.77%～65.08%,發(fā)病率和相對(duì)防效分別依次為A>B>C>AC>BC和BC>AC>C>B>A,各處理的發(fā)病率均較CK(5.04%)低,除A外其余處理均顯著低于CK。黑脛病:各處理的發(fā)病率為2.25%～3.00%,相對(duì)防效為31.82%～48.86%,發(fā)病率和相對(duì)防效分別依次為A>C>B>BC>AC和AC>BC>B>C>A,各處理的發(fā)病率均較CK(4.40%)低,除A外其余處理均顯著低于CK?？傮w看,單施枯草芽孢桿菌(A)時(shí),煙草根黑腐病和黑脛病發(fā)病率均不同程度降低,但與CK均未達(dá)顯著水平,其相對(duì)防效分別為28.77%和31.82%;單施木霉菌(B)和苦參硫磺(C)使得根黑腐病和黑脛病發(fā)病率均較CK顯著降低,且其對(duì)根黑腐病的相對(duì)防效分別為53.57%和54.96%,對(duì)黑脛病的相對(duì)防效分別為46.82%和35.68%;苦參硫磺與木霉菌(BC)及苦參硫磺與枯草芽孢桿菌(AC)配施的防治效果最好,其根黑腐病和黑脛病發(fā)病率均顯著降低,AC和BC對(duì)根黑腐病的相對(duì)防效分別為55.56%和65.08%,對(duì)黑脛病的相對(duì)防效分別為48.86%和47.05%,二者又以BC防效更佳。此外,各處理對(duì)根黑腐病的防效優(yōu)于對(duì)黑脛病的防效。

表1 不同處理烤煙根黑腐病和黑脛病的發(fā)病率及相對(duì)防效

2.2 土壤特性

2.2.1 土壤養(yǎng)分 從表2看出,不同處理成熟期植煙土壤養(yǎng)分含量存在差異。試驗(yàn)地塊土壤肥力整體較高,有機(jī)質(zhì)含量為56.20～61.35 g/kg,B最高,AC最低;全氮含量為2.42～2.85 g/kg,CK最高,AC最低;全磷含量為1.82～2.46 g/kg,B最高,C最低;全鉀含量為6.89～7.85 g/kg,CK最高,AC最低;水解性氮含量為177.74～219.58 mg/kg,A最高,AC最低;有效磷含量為49.29～65.90 mg/kg,B最高,BC最低;速效鉀含量為412.27～790.73 mg/kg,B最高,AC最低。AC土壤速效鉀含量顯著低于A和B,其余土壤養(yǎng)分各成分不同處理間無(wú)顯著差異。

表2 不同處理植煙土壤的養(yǎng)分含量

2.2.2 土壤理化特性 從表3看出,施用不同生物菌劑對(duì)土壤物理特性影響較小,各處理間的物理特性均無(wú)顯著差異。各處理的土壤容重為0.95～0.97 g/cm3,A、B與CK最大,其余處理較CK(0.97 g/cm3)低;比重為2.26～2.43 g/cm3,除B外其余處理均高于CK(2.30 g/cm3);孔隙度為56.80%～60.83%,除B外其余處理均高于CK(57.44%);胡敏酸碳含量為2.73～3.07 g/kg,除AC外其余處理均高于CK(2.75 g/kg);富里酸碳含量為4.97～5.55 g/kg,各處理均低于CK(5.98 g/kg);富敏素碳含量為24.90～27.12 g/kg,各處理均高于CK(24.87 g/kg)。綜上看,單施苦參硫磺(C)及苦參硫磺分別配施枯草芽孢桿菌(AC)和木霉菌(BC)可使土壤容重呈降低趨勢(shì),孔隙度呈上升趨勢(shì)。

表3 不同處理植煙土壤的理化特性

2.2.3 土壤微生物多樣性 Shannon指數(shù)可用于表征群落的多樣性,值越大表明群落的多樣性越高。由圖1看出,不同處理土壤細(xì)菌和真菌的多樣性存在差異。細(xì)菌:土壤細(xì)菌多樣性指數(shù)為8.06～8.60,依次為AC>C>BC>B>CK>A,各處理間無(wú)顯著差異,除A稍低于CK外,其余處理均高于CK。真菌:土壤真菌多樣性指數(shù)為6.80～7.59,依次為BC>C>B>AC>CK>A,其中,BC(7.59)顯著高于CK(6.86);C(7.54)與CK差異不顯著,B(7.34)顯著高于CK;其余處理間無(wú)顯著差異。

注：不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.3 不同處理烤煙的產(chǎn)質(zhì)量

2.3.1 農(nóng)藝性狀 由表4可知,不同處理烤煙成熟期的農(nóng)藝性狀存在差異。株高:各處理為105.6～128.0 cm,依次為AC>C>BC>B>A>CK,C、AC和BC顯著高于CK,與其余處理無(wú)顯著差異。葉面積:各處理為0.153～0.185 m2,依次為B>C>BC>AC>A>CK,B、C、AC和BC顯著高于CK,與A無(wú)顯著差異,其余處理間差異不顯著。各處理有效葉片數(shù)為17.6～19.4片,莖圍為9.488～10.179 cm,2個(gè)指標(biāo)各處理間及其與CK均無(wú)顯著差異。節(jié)距:各處理為6.780～7.212 cm,依次為AC>B>BC>A>C>CK,B和AC顯著高于CK,與其余處理間無(wú)顯著差異。整體看,AC、BC和B煙株田間長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)較好,CK較差。

表4 不同處理烤煙成熟期的農(nóng)藝性狀

2.3.2 煙葉物理特性 從表5看出,不同處理烤后煙葉物理特性存在差異。

表5 不同處理各部位煙葉的物理特性

1) 中部葉(C3F)。各處理葉面密度為45.23～67.65 g/cm2,依次為C>BC>B>AC>CK>A,除A外其余處理均高于CK;抗張力為1.53～2.40 N,依次為BC>A>AC>C>B>CK,各處理均高于CK;平衡含水率為16.35%～17.50%,依次為AC>B>CK>A>BC>C,除AC和B外其余處理均低于CK;含梗率為28.38%～35.81%,依次為A>B>AC>CK>C>BC,除C和BC外其余處理均高于CK;物理特性總分為0.74～0.88分,依次為C>BC>B>AC>CK>A,除A外其余處理均高于CK,C最高,BC其次,原因在于2個(gè)處理的葉面密度相對(duì)較高,含梗率較低,而A較低則原因在于其葉面密度最低,含梗率最高。

2) 上部葉(B2F)。各處理葉面密度為65.71～101.06 g/cm2,依次為BC>A>C>CK>AC>B,除AC和B外其余處理均高于CK;抗張力為2.11～3.44 N,依次為B>A>BC>C=AC>CK,各處理均高于CK;平衡含水率為14.87%～16.47%,依次為B>AC>A>C>BC>CK,各處理均高于CK;含梗率為22.22%～29.39%,依次為B>CK>C>A>AC>BC,除B外其余處理均低于CK;物理特性總分為0.78～0.95分,依次為AC>CK=C=BC>A>B,除AC高于CK,C和BC與CK相等外其余處理均低于CK,AC最高,原因在于葉面密度和含梗率均較優(yōu),符合優(yōu)質(zhì)煙葉標(biāo)準(zhǔn),CK、C及BC次之,3個(gè)處理葉面密度相對(duì)偏高,但其含梗率較低,B總分最低,原因在于其含梗率偏高,葉面密度較低。綜合中部葉和上部葉來(lái)看,AC、BC烤煙物理特性表現(xiàn)較好。

2.3.3 煙葉的化學(xué)成分 從表6看出,不同處理烤后煙葉化學(xué)成分存在差異。

表6 不同處理各部位煙葉的化學(xué)成分

1) 中部葉(C3F)。各處理總糖含量為25.16%～39.08%,CK最高;還原糖含量為19.78%～28.03%,除AC外其余處理均低于CK(28.02%);總氮含量為1.82%～2.06%,CK最低;總植物堿含量為1.31%～1.64%,除B外其余處理均高于CK(1.59%);鉀含量為1.02%～1.86%,CK最高;氯含量為0.44%～1.35%,除AC外其余處理均高于CK(0.77%);糖堿比為17.46～26.65,除AC外其余處理均低于CK(24.61);氮堿比為1.14～1.49,CK最低;鉀氯比為1.33～2.31,CK最高;綜合總分為0.34～0.49分,依次為CK>A>B>C>BC>AC;除A的總糖和還原糖含量接近優(yōu)質(zhì)煙葉標(biāo)準(zhǔn)[14]外,其余處理均偏高,導(dǎo)致糖堿比偏高,且各處理總植物堿含量略低,氮堿比偏高,氯離子含量整體偏高,鉀氯比偏低,AC鉀離子含量偏低且其綜合得分最低,其次為BC。

2) 上部葉(B2F)。各處理總糖含量為19.43%～31.46%,除B和BC外其余處理均高于CK(29.53%);還原糖含量為11.42%～20.35%,除A和C外其余處理均低于CK(19.00%);總氮含量為2.04%～3.65%, CK最低;總植物堿含量為2.92%～3.79%,除BC外其余處理均低于CK(3.58%);鉀含量為1.55%～2.08%,除BC和C外其余處理均低于CK(1.96%);氯含量為0.31%～0.79%,除C外其余處理均高于CK(0.44%);糖堿比為6.59～10.36,除B和BC外其余處理均高于CK(8.26);氮堿比為0.57～1.25,CK最低;鉀氯比為1.95～6.69,除C外其余處理均低于CK(4.50);綜合總分為0.54～0.72分,依次為A=C>AC>CK>BC>B,除A、C和AC外其余處理均低于CK;B綜合總分最低,原因在于其還原糖含量偏低,總植物堿含量偏高,A和C除總糖含量偏高,其余指標(biāo)均較好,總分最高,其次為AC,CK略低于AC。綜合平均各處理中部葉和上部葉的總分看出,A(0.60分)綜合總分較高,CK和C(0.59分)次之,AC(0.52分)、BC(0.51分)和B(0.50分)較低。

3 討論

大田病害調(diào)查結(jié)果顯示,枯草芽孢桿菌、木霉菌和苦參硫磺3種生物菌劑對(duì)煙草黑脛病和根黑腐均有一定的防治效果。木霉菌是一種高效廣譜生防因子,廣泛存在于土壤、空氣和植物表面等生態(tài)環(huán)境,其防病機(jī)制包括競(jìng)爭(zhēng)作用、重寄生作用、抗生作用和誘導(dǎo)植物抗性作用等多種[16-17]。大量研究表明,木霉菌對(duì)煙草黑脛病和根黑腐病等土傳病害具有明顯抑制效果。李小杰等[18]從煙株根際土壤中篩選出3株對(duì)煙草疫霉菌具有較強(qiáng)抑制作用的木霉屬生防菌,其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物對(duì)疫霉菌有一定程度的滅殺作用。劉利佳等[19]研究表明,接種木霉菌前后,存在大量差異代謝產(chǎn)物,對(duì)煙草疫霉菌的抗病響應(yīng)在代謝水平發(fā)生變化,導(dǎo)致煙株對(duì)煙草疫霉菌的抗性增強(qiáng)。陳小均等[20]研究植煙土壤中的優(yōu)勢(shì)微生物種群與木霉菌之間的相互作用發(fā)現(xiàn),木霉菌對(duì)多種優(yōu)勢(shì)真菌均表現(xiàn)出較好的抑制作用,表明木霉菌是多種煙草真菌病害的潛在拮抗菌。優(yōu)勢(shì)放線(xiàn)菌群落對(duì)木霉菌具有抑制作用,但對(duì)抑制土壤病原茄病鐮刀菌又具有協(xié)同作用,優(yōu)勢(shì)細(xì)菌能夠促進(jìn)木霉菌產(chǎn)孢,利于其在土壤中定植,可見(jiàn)木霉菌與土壤微生物的關(guān)系是復(fù)雜多樣。在本研究中,無(wú)論是單施還是與苦參硫磺配合施用,木霉菌均表現(xiàn)出良好的生防效果,并使得土壤真菌多樣性顯著提高,與李小杰等[18-20]的研究結(jié)論一致?？鄥⒘蚧鞘怯煽鄥A改進(jìn)而來(lái),主要用于病毒病的防治,目前并無(wú)此類(lèi)生物菌劑的相關(guān)研究報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn),苦參硫磺與木霉菌或枯草芽孢桿菌配合使用對(duì)煙草黑脛病和根黑腐的防治效果最佳。

枯草芽孢桿菌菌劑是當(dāng)前市面上應(yīng)用最為廣泛的生物菌劑之一,其有效菌是一種廣泛分布于各種不同生活環(huán)境中的嗜溫性好氧革蘭氏陽(yáng)性桿狀細(xì)菌,通過(guò)定殖至植物根際、體表或體內(nèi),同病原菌形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,其分泌的代謝產(chǎn)物對(duì)一些病原菌具有抑制作用,還可誘導(dǎo)植物防御系統(tǒng)抵御病原菌入侵,從而達(dá)到生防的目的[21]。韓騰等[22]研究表明,枯草芽孢桿菌粉劑灌根后,烤煙根際微生物群落發(fā)生變化,細(xì)菌多樣性和豐富度顯著提高。張成省等[23]從煙草葉面生境分離鑒定了一株枯草芽孢桿菌,其發(fā)酵產(chǎn)物具有較廣的抗菌譜,對(duì)煙草常見(jiàn)病害如赤星病、炭疽病、根黑腐病、黑脛病及青枯病等病原菌均具有不同程度的抑制作用,且具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性,對(duì)煙草普通花葉病毒(TMV)具有較強(qiáng)的鈍化作用,同時(shí)可促進(jìn)煙葉內(nèi)多種酶活性的提高[24]。任鵬舉等[25]研究認(rèn)為,枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的脂肽化合物表面活性素誘導(dǎo)了煙草防衛(wèi)相關(guān)基因的表達(dá)以抵御TMV侵染。在本研究中,單施枯草芽孢桿菌對(duì)根黑腐病和黑脛病的防治效果未達(dá)預(yù)期,這也反映了生物菌劑在病害防治方面的一大問(wèn)題,即菌劑在根際的定植受環(huán)境因素的影響較大,當(dāng)與苦參硫磺配合使用后,防效顯著提高,根黑腐病和黑脛病發(fā)病率顯著降低,微生物多樣性也有一定程度的提高,側(cè)面反映了苦參硫磺改善土壤微環(huán)境的潛力。當(dāng)前,由于生產(chǎn)成本、土壤微環(huán)境的復(fù)雜性等多種原因,各大煙區(qū)病害防治仍以化學(xué)農(nóng)藥為主,然后輔以生物農(nóng)藥。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用,基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的蓬勃發(fā)展,綠色、安全的生物源農(nóng)藥具有廣闊的應(yīng)用前景。

4 結(jié)論

苦參硫磺與木霉菌或枯草芽孢桿菌配合施用均對(duì)煙草黑脛病和根黑腐病具有良好的防治效果,煙草農(nóng)藝性狀表現(xiàn)較優(yōu),并改善了煙葉物理特性。單施木霉菌或苦參硫磺與木霉菌配施使土壤真菌群落多樣性顯著提高,但對(duì)煙葉化學(xué)成分的改善不理想。推薦用藥方案:還苗期施用苦參硫磺(按1 500 g/hm2用量稀釋600倍噴施+淋根),14 d后,施用木霉菌或枯草芽孢桿菌(按1 500 g/hm2用量稀釋600倍噴施+淋根)。