齊紅莉,呂湘琳,劉家樂(lè)

(天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300392)

亞硝酸鹽是水生生態(tài)系統(tǒng)中氮循環(huán)的自然組成部分,是一種常見(jiàn)的環(huán)境污染物[1-2]。在天然水體中,亞硝酸鹽通常保持在較低質(zhì)量濃度(<0.02 mg·L-1)[3-4],隨著近年來(lái)含氮污水、集約化養(yǎng)殖、高氮排泄物和高投餌量的影響,水體中亞硝酸鹽質(zhì)量濃度急劇增長(zhǎng)。在廢水中,亞硝酸鈉質(zhì)量濃度可達(dá)到90 mg·L-1的水平[5]。此外,在水生生物集約養(yǎng)殖的水域中,亞硝酸鹽增加,其中在封閉的金魚(yú)(Carassiusauratus)幼魚(yú)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中亞硝酸鹽質(zhì)量濃度為0.24～0.30 mg·L-1[6];工業(yè)化養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦(Penaeusvarlnamei)水體中亞硝酸鹽質(zhì)量濃度可達(dá)4.70 mg·L-1[7]。高濃度的亞硝酸鹽是引發(fā)水生生物壓力的潛在因素,對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)中亞硝酸鹽的生態(tài)毒性研究引起了學(xué)者的關(guān)注[8]。

纖毛蟲(chóng)被廣泛認(rèn)為是環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)早期預(yù)警的指示生物,它們獨(dú)特的生物特性,如高度多樣性、生命周期短、世界性分布、易于收集、數(shù)量大以及對(duì)環(huán)境干擾反應(yīng)迅速[5]。此外,纖毛蟲(chóng)作為評(píng)估污染物毒理效應(yīng)的模型生物[9-11]。鹽蠶豆蟲(chóng)(Fabreasalina)隸屬于纖毛蟲(chóng)門(mén)(Ciliophora)多膜綱(Polyhymenophora)異毛目(Hetootricha)蠶豆蟲(chóng)屬(Fabrea)。其環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng),繁殖周期快,作為海洋魚(yú)類(lèi)幼魚(yú)階段的活飼料可進(jìn)行大規(guī)模養(yǎng)殖[12-14]。氮營(yíng)養(yǎng)鹽可被原生動(dòng)物利用,但高濃度的氮營(yíng)養(yǎng)鹽可對(duì)其產(chǎn)生脅迫作用。纖毛蟲(chóng)對(duì)亞硝酸鹽的耐受性較高,是富營(yíng)養(yǎng)浮游生態(tài)系統(tǒng)反硝化的主要貢獻(xiàn)者[15-16]。因此,探究氮對(duì)原生動(dòng)物的作用將為揭示原生動(dòng)物對(duì)水體營(yíng)養(yǎng)化水平的響應(yīng)機(jī)制提供依據(jù)。

本文以鹽蠶豆蟲(chóng)為材料,研究亞硝酸鹽對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的毒理學(xué)作用,以確定環(huán)境中氮營(yíng)養(yǎng)鹽變化對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的種群動(dòng)力學(xué)特征和抗氧化酶系統(tǒng)的影響,為原生動(dòng)物對(duì)亞硝態(tài)氮脅迫的響應(yīng)機(jī)制提供數(shù)據(jù)支持,為水生生態(tài)環(huán)境的亞硝態(tài)氮污染的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

鹽蠶豆蟲(chóng)(F.salina)采自天津市北大港沿岸濕地[17]。試驗(yàn)前,使用鹽度為50 g·L-1的滅菌人工海水進(jìn)行培養(yǎng)[18],以商業(yè)干酵母為食,在溫度(28±1)℃、光照度2 000 lx、光/暗培養(yǎng)時(shí)間為14 h/10 h恒溫培養(yǎng)箱中擴(kuò)大培養(yǎng),當(dāng)其密度達(dá)到4×104個(gè)·L-1時(shí),開(kāi)展試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 亞硝酸鈉脅迫毒性試驗(yàn)采用水生生物毒性試驗(yàn)方法[19],預(yù)試驗(yàn)測(cè)定出亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的96 h半致死濃度(LC50)為2 358.27 mg·L-1,最低有效濃度(LOEC)為154 mg·L-1。以96 h LOEC為最大濃度,按等對(duì)數(shù)間距法設(shè)置正式試驗(yàn)濃度,分別為:0、9.63、19.25、38.50、77.00和154.00 mg·L-1。在六孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔加入3 mL鹽度為50 g·L-1的人工海水,鹽蠶豆蟲(chóng)的接種密度為4 個(gè)·mL-1,每隔24 h于解剖鏡下觀察計(jì)數(shù)鹽蠶豆蟲(chóng)的種群密度[20],每個(gè)質(zhì)量濃度組重復(fù)3次,計(jì)數(shù)重復(fù)2次,計(jì)數(shù)誤差不超過(guò)15%。

1.2.2 抗氧化酶活性的毒性試驗(yàn)參考Li等[21]的方法,將鹽蠶豆蟲(chóng)轉(zhuǎn)移到設(shè)置好濃度的處理組中用于藥物處理試驗(yàn)。以亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的96 h LC50的1/10為最大濃度,按等對(duì)數(shù)間距法設(shè)置的亞硝酸鈉質(zhì)量濃度為0、91.0、153.0和235.8 mg·L-1。在50 mL錐形瓶中進(jìn)行試驗(yàn),每個(gè)處理重復(fù)3次,鹽蠶豆蟲(chóng)的密度約為1×106個(gè)·L-1。不同處理組,在不同間隔時(shí)間點(diǎn)(12、24、36和48 h)用5 μm孔徑的濾膜于真空泵中抽濾并分別收集待測(cè)定鹽蠶豆蟲(chóng),隨后在研缽中加入1 mL裂解緩沖液進(jìn)行粗酶提取,全過(guò)程在冰浴中完成。將研磨好的樣品在4 ℃、3 000 r·min-1離心5 min,取上清液,按照南京建成試劑盒說(shuō)明測(cè)定鹽蠶豆蟲(chóng)抗氧化酶活性(SOD、CAT、POD、GPx、總蛋白)。

1.3 種群動(dòng)力學(xué)參數(shù)及綜合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)的計(jì)算

原生動(dòng)物的比生長(zhǎng)率(μ)根據(jù)式(1)[22]計(jì)算,世代時(shí)間(G)與比生長(zhǎng)率(μ)之間的關(guān)系根據(jù)式(2)計(jì)算,綜合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)值根據(jù)Kim等[23]的方法計(jì)算:

μ=[ln(Ct)-ln(C0)]/t

(1)

G=ln 2/μ

(2)

式中:μ為比生長(zhǎng)率,即假設(shè)纖毛蟲(chóng)的生長(zhǎng)為指數(shù)生長(zhǎng)時(shí)的生長(zhǎng)率[24];C0為初始纖毛蟲(chóng)的種群密度;Ct為時(shí)間t時(shí)纖毛蟲(chóng)的種群密度;t為試驗(yàn)時(shí)間(d),即纖毛蟲(chóng)指數(shù)生長(zhǎng)期的持續(xù)時(shí)間;G為世代時(shí)間。

1.4 數(shù)據(jù)分析與處理

采用Excel 2010軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和圖表繪制,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,應(yīng)用SPSS 23軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,采用單因素方差(one-way ANOVA)對(duì)種群生長(zhǎng)參數(shù)以及抗氧化酶活性數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)種群生長(zhǎng)的影響

不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫顯著影響鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)(P<0.05)。亞硝酸鈉處理1 d,鹽蠶豆蟲(chóng)生長(zhǎng)處于停滯期,然后種群生長(zhǎng)進(jìn)入指數(shù)增長(zhǎng)期并呈現(xiàn)出明顯的差異,5 d后達(dá)到最大種群密度,38.50和154.00 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)于2 d的穩(wěn)定期后進(jìn)入衰退期,其他處理組穩(wěn)定期不明顯(圖 1-A)。鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度隨亞硝酸鈉質(zhì)量濃度的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)(圖 1-B)。與其他處理組相比,9.63、19.25 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度升高,其中9.63 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度顯著高于對(duì)照組,顯著促進(jìn)鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)(P<0.05)。而38.50、77.00和154.00 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度則顯著低于對(duì)照組(P<0.05),抑制鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)。

圖1 鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下的種群密度(A)和最大種群密度(B)Fig.1 The population densities(A)and maximum population densities(B)of Fabrea salina underdifferent concentration of sodium nitrite stress不同小寫(xiě)字母表示組間差異顯著(P<0.05)。下同。Different small letters indicate significant differences at 0.05 level among treatment groups. The same as follows.

從表1可知:各處理組的鹽蠶豆蟲(chóng)比生長(zhǎng)率呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。與對(duì)照組相比,9.63 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)率增加了8.8%,而19.25、38.50、77.00和154.00 mg·L-1處理抑制鹽蠶豆蟲(chóng)的比生長(zhǎng)率,其中154.00 mg·L-1處理抑制作用最強(qiáng),比生長(zhǎng)率顯著下降了20.59%(P<0.05)。各處理組的鹽蠶豆蟲(chóng)的世代時(shí)間呈先縮短后延長(zhǎng)的變化趨勢(shì),世代時(shí)間的峰值出現(xiàn)在154.00 mg·L-1處理組(P<0.05),最低值出現(xiàn)在9.63 mg·L-1處理組。

表1 鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下的比生長(zhǎng)率(μ)和世代時(shí)間(G)

2.2 亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)抗氧化酶活性的影響

從圖2可知:亞硝酸鈉脅迫下,12、24和48 h時(shí)鹽蠶豆蟲(chóng)SOD活性隨亞硝酸鈉質(zhì)量濃度的增加呈先升高后降低的趨勢(shì)。24 h時(shí),不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下SOD活性變化不顯著(P>0.05);36 h時(shí),亞硝酸鈉處理組的SOD活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。12和24 h時(shí)鹽蠶豆蟲(chóng)CAT活性呈先上升后下降的趨勢(shì),91.0和153.0 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)CAT的活性均顯著上升,并在24 h達(dá)到峰值,分別為對(duì)照組的4.32倍和4.55倍(P<0.05);在36 h時(shí),CAT活性與對(duì)照組水平相當(dāng)(P>0.05)。12和24 h時(shí),鹽蠶豆蟲(chóng)的GPx活性總體上呈先上升后下降的趨勢(shì);36 h時(shí),153.0和235.8 mg·L-1處理組鹽蠶豆蟲(chóng)的GPx活性顯著增加(P<0.05)。鹽蠶豆蟲(chóng)POD活性隨亞硝酸鈉質(zhì)量濃度的增加而增加,高濃度處理組(153.0和235.8 mg·L-1)鹽蠶豆蟲(chóng)的POD活性顯著增加(P<0.05),而低濃度處理組(91.0 mg·L-1)的POD活性與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖2 鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下的抗氧化酶活性Fig.2 Antioxidant enzyme activity of F.salina under different concentration of sodium nitrite stress

2.3 亞硝酸鈉對(duì)綜合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)的影響

在亞硝酸鈉脅迫下,不同處理時(shí)間鹽蠶豆蟲(chóng)的劑量-效應(yīng)分析見(jiàn)圖3。153.0和235.8 mg·L-1處理組中IBR值隨處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈先下降后上升的趨勢(shì),91.0 mg·L-1處理組在不同處理時(shí)間下變化不明顯,并且始終低于對(duì)照組。12 h時(shí),高濃度組(153.0和235.8 mg·L-1)IBR值高于低濃度組(0和91.0 mg·L-1),153.0 mg·L-1組于24～36 h時(shí)下降,且低于對(duì)照組,48 h時(shí)增加。235.8 mg·L-1處理組36～48 h時(shí)IBR呈上升趨勢(shì),高于其他處理組。

圖3 鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下的整合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)的變化Fig.3 Changes of integrated biomarker response(IBR)ofF.salina under different concentration ofsodium nitrite stress

生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)(IBR)星狀圖見(jiàn)圖4。由4種生物標(biāo)志物(SOD、CAT、GPx、POD)響應(yīng)得分構(gòu)成的星狀圖面積即為IBR值,星狀圖面積越大則代表亞硝酸鈉脅迫對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的毒性越大。12 h時(shí),SOD對(duì)星狀圖貢獻(xiàn)最大,與對(duì)照組相比,153.0 mg·L-1亞硝酸鈉處理組星狀圖覆蓋面積最大;24 h時(shí),CAT對(duì)星狀圖貢獻(xiàn)最大,0和153.0 mg·L-1處理組星狀圖面積較大,91.0和235.8 mg·L-1處理組對(duì)GPx和CAT響應(yīng)較小;36 h時(shí),不同濃度亞硝酸鈉對(duì)生物標(biāo)志物的響應(yīng)情況不同,0 mg·L-1處理組主要引起SOD的響應(yīng),235.8 mg·L-1處理組主要引起GPx和POD的響應(yīng),其中235.8 mg·L-1處理組星狀圖面積最大,153.0 mg·L-1處理組星狀圖面積最小;48 h時(shí),與對(duì)照組相比各亞硝酸鈉處理組抑制GPx的響應(yīng),引起CAT和SOD響應(yīng),235.8 mg·L-1處理組星狀圖面積最大,IBR值最高。

圖4 鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉脅迫下的IBR星狀圖Fig.4 IBR star plots of F.salina under different concentration of sodium nitrite stress

3 討論

3.1 亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)種群生長(zhǎng)的影響

纖毛蟲(chóng)種群生長(zhǎng)均符合邏輯斯蒂增長(zhǎng)曲線,即細(xì)胞在進(jìn)行分裂前都有一段停滯期,隨后進(jìn)入指數(shù)生長(zhǎng)期、穩(wěn)定期及衰退期[25]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,鹽蠶豆蟲(chóng)在不同質(zhì)量濃度亞硝酸鈉水體中的種群增長(zhǎng)符合邏輯斯蒂增長(zhǎng)曲線,隨亞硝酸鈉質(zhì)量濃度的增加,對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)種群生長(zhǎng)呈低濃度促進(jìn)高濃度抑制的趨勢(shì)。其中,高質(zhì)量濃度組(77.00～154.00 mg·L-1)組亞硝酸鈉脅迫鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度和比生長(zhǎng)率顯著低于對(duì)照組,對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)產(chǎn)生了抑制作用。推斷在一定濃度范圍內(nèi)亞硝酸鹽可以作為機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),但是超過(guò)閾值就會(huì)對(duì)水生生物產(chǎn)生抑制效果。陳強(qiáng)等[26]的研究也證實(shí)了水生動(dòng)物對(duì)亞硝酸鹽有一定的適應(yīng)能力,但亞硝酸鹽濃度過(guò)高會(huì)對(duì)水生生物造成免疫損傷。

亞硝酸鹽作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中常見(jiàn)的污染物,多數(shù)學(xué)者研究了亞硝酸鹽對(duì)水生生物的毒性。韋永春等[27]研究發(fā)現(xiàn)紅螯蝦(Cheraxquadricariratus)對(duì)亞硝酸鹽的安全濃度為2.2 mg·L-1;Huang等[28]發(fā)現(xiàn)南美白對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)可以承受低于6.67 mg·L-1的亞硝酸鹽;王煜恒等[29]研究發(fā)現(xiàn)正常溶氧條件下亞硝酸鹽對(duì)中華絨螯蟹(Eriocheirsinenisis)的安全濃度為5.27 mg·L-1。本試驗(yàn)中,在低質(zhì)量濃度組(9.63 mg·L-1)亞硝酸鈉脅迫下鹽蠶豆蟲(chóng)的最大種群密度顯著高于對(duì)照組,促進(jìn)鹽蠶豆蟲(chóng)的種群生長(zhǎng)。與上述水生生物對(duì)亞硝酸鹽的耐受性相比,鹽蠶豆蟲(chóng)對(duì)亞硝酸鹽的耐受性較高,因此,纖毛蟲(chóng)具有維持和改善富營(yíng)養(yǎng)化的水生生態(tài)系統(tǒng)的潛力,并可作為探究亞硝酸鹽毒理學(xué)機(jī)制的模式生物。

3.2 亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)抗氧化酶活性的影響

亞硝酸鹽是自然水體中存在的一類(lèi)物質(zhì),正常濃度范圍內(nèi)不會(huì)產(chǎn)生毒性。若有大量的亞硝酸鹽沉積在養(yǎng)殖水體中,其會(huì)進(jìn)入水生生物的血液和其他組織中,進(jìn)而加速水生動(dòng)物體內(nèi)活性氧的形成,當(dāng)生物系統(tǒng)中活性氧的濃度瞬時(shí)或長(zhǎng)期增強(qiáng)時(shí),導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷或死亡[30-31]。本試驗(yàn)中,鹽蠶豆蟲(chóng)SOD、CAT、GPx和POD的活性均隨亞硝酸鹽處理時(shí)間和濃度的增加而顯著變化,說(shuō)明海洋類(lèi)纖毛蟲(chóng)可通過(guò)抗氧化酶系統(tǒng)進(jìn)行解毒。

SOD是一種重要的抗氧化酶,SOD催化超氧陰離子分解為過(guò)氧化氫,隨后通過(guò)CAT或GPx降解為水和氧氣[32]。在本研究中,當(dāng)鹽蠶豆蟲(chóng)暴露于亞硝酸鈉時(shí),SOD活性總體上呈先上升后下降的趨勢(shì)。這與Ruan等[33]的研究基本一致,在苯酚脅迫下扇形游仆蟲(chóng)(Euplotesvannus)SOD活性也有類(lèi)似變化。鹽蠶豆蟲(chóng)SOD活性的增加表明亞硝酸鈉脅迫會(huì)導(dǎo)致蟲(chóng)體活性氧的積累,為了應(yīng)對(duì)體內(nèi)的不利環(huán)境,SOD活性增加以去除體內(nèi)多余的活性氧自由基,而高濃度的亞硝酸鈉會(huì)影響鹽蠶豆蟲(chóng)正常的代謝活動(dòng),對(duì)蟲(chóng)體造成損傷,導(dǎo)致SOD活性被抑制[34]。

CAT和GPx均是清除過(guò)氧化氫的抗氧化酶。本研究中,在12和24 h時(shí)亞硝酸鈉各處理組CAT和GPx活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),中濃度組(91.0和153.0 mg·L-1)鹽蠶豆蟲(chóng)CAT和GPx活性增加,這與SOD活性變化的結(jié)果相印證。36 h時(shí)CAT活性變化不明顯,GPx活性則被顯著誘導(dǎo),表明在脅迫初期,CAT和GPx一同作用于蟲(chóng)體內(nèi)過(guò)氧化氫的清除,而脅迫后期GPx則成為鹽蠶豆蟲(chóng)體內(nèi)過(guò)氧化氫清除的主要作用酶。類(lèi)似的CAT和GPx的協(xié)同作用關(guān)系,在其他研究中也有報(bào)道[35]。

POD能清除機(jī)體的過(guò)氧化物或氧化物,并且能夠調(diào)節(jié)氧含量,使細(xì)胞免受高濃度氧毒害。本研究結(jié)果表明,在亞硝酸鈉的脅迫下,鹽蠶豆蟲(chóng)POD活性隨亞硝酸鈉濃度增加總體上呈升高趨勢(shì),高濃度組顯著高于對(duì)照組,這與Hu等[36]研究尖吻鱸(Latescalcarifer)在亞硝酸鹽脅迫后POD酶活性增加的變化趨勢(shì)結(jié)果相似,亞硝酸鹽脅迫會(huì)引起機(jī)體過(guò)氧化物反應(yīng),導(dǎo)致POD活性升高。

3.3 亞硝酸鈉對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)IBR的影響

由于水生生物的生物標(biāo)志物響應(yīng)與水生環(huán)境中的污染物暴露有關(guān),使用各種生物標(biāo)志物對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)中環(huán)境污染物的生態(tài)毒性評(píng)估引起了人們?cè)絹?lái)越濃厚的興趣。然而單一生物標(biāo)志物不能完全評(píng)價(jià)污染物對(duì)水生生物的毒性作用,因此使用IBR可以全面了解生物體如何對(duì)污染物暴露做出響應(yīng)[37-38]。在本研究中,12 h時(shí)高濃度亞硝酸鈉(153.0和235.8 mg·L-1)處理組IBR高于對(duì)照組,試驗(yàn)初期鹽蠶豆蟲(chóng)在高濃度亞硝酸鈉脅迫下產(chǎn)生了氧化應(yīng)激,這與GPx和POD活性的變化趨勢(shì)相似,并且可見(jiàn)抗氧化酶系統(tǒng)是較敏感的生物標(biāo)志物。低濃度亞硝酸鹽(91.0 mg·L-1)處理組IBR值在整個(gè)處理期間低于對(duì)照組,這與SOD、GPx和POD活性的變化趨勢(shì)相印證,說(shuō)明該濃度并未引起鹽蠶豆蟲(chóng)的氧化應(yīng)激作用,而鹽蠶豆蟲(chóng)生長(zhǎng)受到亞硝酸鹽抑制的原因需要進(jìn)一步探究。153.0和235.8 mg·L-1處理組IBR值在48 h明顯升高,對(duì)鹽蠶豆蟲(chóng)產(chǎn)生了毒性,鹽蠶豆蟲(chóng)的抗氧化酶系統(tǒng)開(kāi)始響應(yīng)并逐漸升高以更好地保護(hù)機(jī)體不受到損害。因此,IBR指數(shù)可以大體反映鹽蠶豆蟲(chóng)抗氧化酶活性的變化,但無(wú)法完全揭示亞硝酸鹽對(duì)鹽蠶豆種群生長(zhǎng)的影響。