朱天生，李亦婷，傅麗容 ，史海濤

（海南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，熱帶島嶼生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?571158）

龜類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育受諸多外界環(huán)境因素的影響，水溫直接關(guān)系其攝食、代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖等生命過(guò)程。極端的天氣現(xiàn)象、臺(tái)風(fēng)后養(yǎng)殖池遭雨水入侵、高溫運(yùn)輸引起中暑或是引入地和養(yǎng)殖地之間溫差過(guò)大等原因，均會(huì)引起龜鱉的應(yīng)激反應(yīng)（曹鑫盛等，2019）。中國(guó)急性溫度變化多發(fā)生于5—10 月，6、7 月尤為集中（Zhanget al.，2015）。急性低溫脅迫可對(duì)中華鱉Pelodiscus sinensis不同腸段的腸道黏膜結(jié)構(gòu)造成不同程度損傷，導(dǎo)致大腸黏膜的機(jī)械屏障功能下降，消化吸收功能減弱（邢瀟等，2019），且隨著急性溫度脅迫的程度加劇和時(shí)間延長(zhǎng)，中華鱉的血漿抑菌效果和免疫力會(huì)降低（申思仙，2018；申思仙等，2018）；急性低溫脅迫亦可損傷虹鱒Oncorhynchus mykiss肝臟，導(dǎo)致其代謝能力下降（管標(biāo)等，2014），造成中華鱘Acipenser sinensi（管敏等，2019）、銀鯧Pampus argenteus幼魚(yú)（謝明媚等，2015）體內(nèi)產(chǎn)生大量活性氧自由基，從而造成細(xì)胞和組織損傷。冬眠狀態(tài)下的黃喉擬水龜Mauremys mutica遭受急性高溫脅迫時(shí)會(huì)產(chǎn)生一定程度的氧化損傷（陳威等，2019）。由此可見(jiàn)，急性溫度脅迫會(huì)嚴(yán)重影響水產(chǎn)動(dòng)物的體質(zhì)健康和生長(zhǎng)發(fā)育。

如何采取有效抗應(yīng)激措施已引起人們的關(guān)注。維生素E（vitamin E，VE），又被稱為生育酚、生殖維生素等（王磊，2021），具有抗氧化、提高生育能力、增強(qiáng)免疫力、維持細(xì)胞呼吸等多重功能（夏兆飛，2003），常作為免疫佐劑添入飼料中以提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能和抗應(yīng)激能力。VE在緩解溫度應(yīng)激帶來(lái)的不利影響方面具有良好效果。飼料中添加適量的VE 可顯著提高冷應(yīng)激下籠養(yǎng)蛋鴨（陳鑫等，2008）和羅非魚(yú)Oreochromis niloticus幼魚(yú)（Xuet al.，2020）的生長(zhǎng)性能，增加體重，降低飼料轉(zhuǎn)化率；亦可顯著降低日本鵪鶉Coturnix coturnix japonica血清中丙二醛和膽固醇水平（Sahinet al.，2003），在冷脅迫下羅非魚(yú)幼魚(yú)中同樣發(fā)現(xiàn)VE 顯著降低肝臟、肌肉和血清中的丙二醛含量，并伴隨超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、總抗氧化力的顯著上升（Xuet al.，2020）。VE 對(duì)緩解高溫脅迫的作用在禽類(lèi)養(yǎng)殖中被廣泛研究。Calik 等（2022）研究發(fā)現(xiàn)，高溫應(yīng)激下VE 與硒連用顯著降低了HSPs、TLR2、TNFa、IFNg 等多種與氧化應(yīng)激、免疫和腸道完整性相關(guān)基因的mRNA 豐度，減輕了高溫造成的不利影響。Pirgozliev 等（2020）的研究發(fā)現(xiàn)，VE 改善了高溫應(yīng)激導(dǎo)致的肝臟和脾臟重量降低，這可能與VE 增加胃腸道中的飼料通過(guò)率，進(jìn)而提高消化酶活性有關(guān)。Gouda 等（2020）在飼料中添加200 IU·kg-1VE顯著提高了40日齡日本鵪鶉的體重、采食量，降低了飼料轉(zhuǎn)化率，血液總抗氧化能力、過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶也得到了顯著改善。Mazur-Ku?nirek 等（2019）同樣報(bào)道了飼料添加200 mg·kg-1VE對(duì)高溫應(yīng)激ROSS 308肉仔雞氧化損傷的緩解。在龜鱉動(dòng)物中，250 mg·kg-1是提高機(jī)體抗應(yīng)激能力的適宜劑量（Zhouet al.，2004；雷金洪等，2022）。

紅耳龜Trachemys scripta elegans個(gè)體大、生長(zhǎng)快、生命力強(qiáng)，因飼養(yǎng)成本低受到養(yǎng)殖戶的青睞而被大規(guī)模養(yǎng)殖，在國(guó)內(nèi)龜鱉養(yǎng)殖類(lèi)市場(chǎng)中占據(jù)了絕對(duì)的數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)（李韶清，2016；周鵬，2020）。本研究聚焦環(huán)境溫度急劇升高和降低對(duì)紅耳龜腸道消化酶和血清抗氧化指標(biāo)的影響，探索溫度急性變化影響龜鱉動(dòng)物消化功能和免疫功能的作用機(jī)理，并采取日糧中添加VE 的干預(yù)方式，研究VE 對(duì)急性溫度變化引起應(yīng)激反應(yīng)的防御作用，為龜鱉養(yǎng)殖過(guò)程中緩解應(yīng)激、減少損失提供理論參考和實(shí)踐指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

紅耳龜幼龜購(gòu)自海南省?？谑袞|山泓旺養(yǎng)殖場(chǎng)，飼養(yǎng)于龜鱉研究室，飼養(yǎng)箱長(zhǎng)48 cm×寬36 cm×高21 cm，30 ℃室溫下暫養(yǎng)，每2 d 于18∶00 定時(shí)投喂1 次，4 h 后清理剩余飼料。所用飼料為佛山市順德區(qū)?；蕦?shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)的鱉（甲）魚(yú)配合飼料（表1），將餌料添加少量水和成面團(tuán)后投喂，投喂量保證每次有剩余。暫養(yǎng)2周，待試驗(yàn)用龜充分適應(yīng)環(huán)境后，挑選健康個(gè)體開(kāi)始試驗(yàn)。

表1 基礎(chǔ)日糧主要營(yíng)養(yǎng)成分及其含量Table 1 Approximate nutritional ingredient and contents of basal diet

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取112 只健康紅耳龜幼龜個(gè)體，體重為108.58 g±19.06 g，隨機(jī)均分成未添加VE 組和添加VE 組，每組分為室溫組（30 ℃，n=8）、急性高溫脅迫組（35 ℃，n=24）和急性低溫脅迫組（17 ℃，n=24），組間個(gè)體體重差異不顯著（P＞0.05）。在30 ℃下馴化飼養(yǎng)4 周，脅迫前禁食24 h，將裝有幼龜?shù)酿B(yǎng)殖箱放入恒溫培養(yǎng)箱中，使養(yǎng)殖箱中水體溫度在2 h內(nèi)達(dá)到脅迫溫度。

1.3 處理與采樣

室溫組直接取樣，急性高溫脅迫組與急性低溫脅迫組分別于達(dá)到脅迫溫度后0 h、6 h、12 h 采樣。每個(gè)溫度脅迫組隨機(jī)選取8只幼龜，斷頸法迅速處死并采血。血樣4 ℃中靜置2 h，4 ℃ 3 500 r·min-110 min，取上清液-80 ℃保存。另取適量小腸用SCIENTZ-48高通量組織研磨機(jī)制備成10%的組織勻漿，4℃ 10 000 r·min-110 min，取上清液-80 ℃保存。

1.4 消化酶及抗氧化酶活性的測(cè)定

試驗(yàn)選用南京建成生物研究所生產(chǎn)的試劑盒，測(cè)定血清中的SOD、CAT 活性和谷胱甘肽（GSH）含量，以及組織勻漿上清液中的胃蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。具體操作方法嚴(yán)格按照各說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)用Excel 2010 整理，酶活性均用xˉ±SE 表示。采用F檢驗(yàn)各組方差齊性，采用SPSS 19.0進(jìn)行單因素方差分析，不同處理間多重比較采用LSD 法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，并利用Origin 2019b繪圖。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同處理對(duì)紅耳龜腸道消化酶活性的影響

2.1.1 急性溫度脅迫對(duì)胃蛋白酶活性的影響及VE 的干預(yù)效應(yīng)未添加VE 組中，急性低溫脅迫組各時(shí)段胃蛋白酶活性與室溫組均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；急性高溫脅迫組隨脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，胃蛋白酶活性表現(xiàn)為先升后降，6 h 時(shí)最高（P＜0.01）（圖1：A）。

圖1 不同處理下紅耳龜胃蛋白酶活性Fig. 1 Pepsin activity in Trachemys scripta elegans under different treatment conditions

添加VE 組在室溫下的胃蛋白酶活性顯著高于未添加VE 組（P＜0.05）；在急性低溫脅迫下的變化與未添加VE 組的趨勢(shì)一致，隨時(shí)間增加，呈先上升后下降的趨勢(shì)，且各時(shí)段明顯高于未添加VE 組，6 h 時(shí)的差異極顯著（P＜0.01），12 h 時(shí)的差異不顯著（P＞0.05）（圖1：B）。在急性高溫脅迫下，添加VE 組胃蛋白酶0 h 時(shí)的活性高于未添加VE 組（P＜0.05），隨后下降，各時(shí)段變化不明顯，添 加VE 組6 h 時(shí)未出現(xiàn)突增高 峰（P＜0.01）（圖1：C）。

2.1.2 急性溫度脅迫對(duì)淀粉酶活性的影響及VE的干預(yù)效應(yīng)未添加VE 組中，急性低溫脅迫組的淀粉酶活性逐漸上升，至12 h 時(shí)顯著高于室溫組；急性高溫脅迫組的淀粉酶活性稍有波動(dòng)，但與室溫組間的差異均不顯著（P＞0.05）（圖2：A）。

圖2 不同處理下紅耳龜?shù)矸勖富钚訤ig. 2 Amylase activity in Trachemys scripta elegans under different treatment conditions

添加VE 組的淀粉酶活性在急性低溫脅迫下表現(xiàn)為先上升后下降，從30 ℃降溫到17 ℃時(shí)，活性升至最高（P＜0.05），隨著脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，活性下降，6 h 后，低于未添加VE 組（P＞0.05）（圖2：B）。在急性高溫脅迫下，添加VE 組的淀粉酶活性先下降后上升，從30 ℃升溫到35 ℃時(shí)，活性下降，隨后逐漸升高，12 h 時(shí)顯著高于未添加VE 組（P＜0.05）（圖2：C）。

2.1.3 急性溫度脅迫對(duì)脂肪酶活性的影響及VE的干預(yù)效應(yīng)在急性低溫脅迫過(guò)程中，未添加VE組各時(shí)段的腸道脂肪酶活性均高于室溫組，其中脅迫6 h時(shí)的差異顯著（P＜0.05）。急性高溫脅迫組的脂肪酶活性較室溫組均略有上升，但差異不顯著（P＞0.05）（圖3：A）。

圖3 不同處理下紅耳龜脂肪酶活性Fig. 3 Lipase activity in Trachemys scripta elegans under different treatment conditions

急性低溫脅迫過(guò)程中，添加VE 組的脂肪酶活性變化趨勢(shì)與未添加VE 組相似，且各時(shí)段均低于未添加VE 組，6 h 時(shí)的組間差異顯著（圖3：B）。在急性高溫脅迫下，添加VE 組的脂肪酶活性呈上升趨勢(shì)，均高于未添加VE 組，但差異不顯著（P＞0.05）（圖3：C）。

2.2 不同處理對(duì)紅耳龜抗氧化功能的影響

2.2.1 急性溫度脅迫對(duì)SOD活性的影響及VE的干預(yù)效應(yīng)未添加VE 組經(jīng)過(guò)急性低溫脅迫和急性高溫脅迫處理后的SOD 變化趨勢(shì)相似，均表現(xiàn)為先上升后下降（圖4：A）。急性低溫脅迫組各時(shí)段的SOD 活性均與室溫組的差異不顯著。急性高溫脅迫組從開(kāi)始至脅迫12 h，SOD 活性均顯著高于室溫組（P＜0.05），6 h 后稍有下降，但仍高于室溫組。

圖4 不同處理下紅耳龜超氧化物歧化酶活性Fig. 4 Superoxide dismutase （SOD） activity in Trachemys scripta elegans under different treatment conditions

添加VE 組的SOD 活性在急性低溫脅迫和急性高溫脅迫下略低于未添加VE 組，急性低溫脅迫下的組間差異不顯著（P＞0.05）；急性高溫脅迫下，SOD 活性在0 h 和6 h 時(shí)，添加VE 組顯著低于未添加VE組（P＜0.05）（圖4：B，C）。

2.2.2 急性溫度脅迫對(duì)血清CAT 活性的影響及VE 的干預(yù)效應(yīng)同一急性溫度處理內(nèi)未添加VE組的血清CAT 活性稍有波動(dòng)，但相互間無(wú)顯著差異（P＞0.05）（圖5：A）。急性低溫、高溫脅迫下添加VE 組的CAT 活性均略高于不添加VE 組，差異不顯著（P＞0.05）（圖5：B，C）。

2.2.3 急性溫度脅迫對(duì)GSH 含量影響及VE 的干預(yù)效應(yīng)未添加VE組在急性低溫、高溫脅迫下，GSH 含量均明顯低于室溫組（P＜0.05）（圖6：A）。在室溫下，添加VE 組的GSH 含量顯著低于未添加VE 組（P＜0.05），急性低溫脅迫導(dǎo)致添加VE 組的GSH 含量上升，且接近未添加VE 組，至無(wú)顯著差異（P＞0.05）（圖6：B）；急性高溫脅迫6 h 時(shí)，添加VE 組的GSH 含量上升，顯著高于未添加VE 組（P＜0.05），脅迫12 h 下降，顯著低于未添加VE 組（P＜0.05）（圖6：C）。

圖6 不同處理下紅耳龜血清中的谷胱甘肽含量Fig. 6 Glutathione （GSH） content in the serum of Trachemys scripta elegans under different treatment conditions

3 討論

3.1 急性溫度脅迫對(duì)紅耳龜消化酶活性的影響及VE的干預(yù)效應(yīng)

養(yǎng)殖溫度的急劇變化深刻影響著動(dòng)物體的各項(xiàng)生理機(jī)能（Zhouet al.，2010）。急性低溫脅迫可降低水產(chǎn)動(dòng)物的攝食量和酶活性，亦可導(dǎo)致肝臟損傷和生長(zhǎng)相關(guān)基因表達(dá)下降，從而降低代謝速率和生長(zhǎng)速度（管標(biāo)等，2014；劉玲等，2018）；急性高溫脅迫可使體內(nèi)酶失活，攝食量不穩(wěn)定，破壞消化、排泄系統(tǒng)，進(jìn)而影響正常生理功能（劉玲等，2018；張晨光等，2021）。管敏等（2019）的研究發(fā)現(xiàn)，急性低溫脅迫導(dǎo)致中華鱘子二代個(gè)體腸道淀粉酶活性顯著降低，而脂肪酶和胃蛋白酶活性沒(méi)有顯著變化。本研究中，急性低溫脅迫使紅耳龜?shù)哪c道脂肪酶和淀粉酶的活性升高，并分別在脅迫6 h 和12 h 時(shí)達(dá)到顯著差異水平。紅耳龜?shù)臏囟饶褪苄暂^強(qiáng)（李貴生，唐大由，2001），推測(cè)其在受到急性低溫脅迫時(shí)，機(jī)體淀粉酶和脂肪酶活性上調(diào)，增強(qiáng)了糖類(lèi)和脂類(lèi)的氧化分解，從而保證能量供應(yīng)。雖然急性低溫脅迫過(guò)程中胃蛋白酶活性與室溫組間始終無(wú)顯著差異，但脅迫6 h 時(shí)酶活性顯著高于脅迫0 h 和12 h，提示急性低溫亦可能影響胃蛋白酶活性。張晨光等（2021）報(bào)道，急性高溫脅迫6 h 時(shí)，翹嘴鱖Siniperca chuatsi幼魚(yú)胃蛋白酶活性顯著降低，脂肪酶活性顯著升高，而淀粉酶活性沒(méi)有變化，但在脅迫48 h 后，胃蛋白酶和淀粉酶的活性顯著升高，脂肪酶活性顯著降低。本研究結(jié)果表明，紅耳龜胃蛋白酶活性在急性高溫脅迫6 h 較室溫組有極顯著升高，12 h 又恢復(fù)到室溫水平。劉丹（2011）報(bào)道紅耳龜幼龜偏好動(dòng)物性食物，且飼料中蛋白質(zhì)占比較高，據(jù)此推測(cè)胃蛋白酶活性的增強(qiáng)更利于其消化食物和提供能量以應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫。淀粉酶和脂肪酶活性在急性高溫脅迫下無(wú)顯著變化，可能是其在應(yīng)對(duì)此脅迫中不起主要作用，也可能由于脅迫周期較短未能觀察到之后的變化。

VE 可通過(guò)提高動(dòng)物采食量和飼料利用率、增強(qiáng)腸道生長(zhǎng)發(fā)育、提高消化酶活性等途徑提高生長(zhǎng)性能（羅輝，2006）。日糧添加VE 后，中華鱉的抗應(yīng)激能力有所提高，機(jī)體生長(zhǎng)加快（周顯青等，2003；Zhouet al.，2004）。雷金洪等（2021）研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期高溫脅迫下飼料添加VE 可顯著提高紅耳龜胃蛋白酶活性，抑制脂肪酶活性，并提高特定生長(zhǎng)率。本研究中急性低溫脅迫下，飼料添加VE 組的蛋白酶活性顯著升高，而脂肪酶活性則有降低的趨勢(shì)，提示在應(yīng)對(duì)急性低溫脅迫時(shí)，VE可通過(guò)增強(qiáng)紅耳龜?shù)牡鞍踪|(zhì)消化吸收增加能量供給。Liu等（2019）在對(duì)七彩魚(yú)Symphysodon haraldi的研究中同樣觀察到添加VE 組胃蛋白酶的升高和脂肪酶的降低；He 等（2017）報(bào)道，飼料添加50 mg·kg-1或100 mg·kg-1VE 能顯著提高斑點(diǎn)叉尾Ictalurus punctatus的脂肪酶活性。這可能是不同物種對(duì)膳食中VE 的響應(yīng)機(jī)制不同，導(dǎo)致消化酶活性的具體變化不一致。面臨急性高溫脅迫時(shí)，添加VE 組的胃蛋白酶活性極顯著低于未添加VE 組，淀粉酶活性顯著高于未添加VE 組，脂肪酶活性較室溫組顯著升高，推測(cè)受急性高溫脅迫時(shí)，VE提高了紅耳龜腸道淀粉酶和脂肪酶在抗應(yīng)激中的作用，減少了蛋白質(zhì)的損耗。這與雷金洪等（2021）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同，可能是急性脅迫和長(zhǎng)期脅迫機(jī)體供能機(jī)制有所不同，在長(zhǎng)期高溫應(yīng)激下VE 能持續(xù)有效保護(hù)和修復(fù)紅耳龜受損腸道，加強(qiáng)絨毛上皮細(xì)胞吸收，而以提高飼料中蛋白質(zhì)利用率的方式提供更多能量以適應(yīng)長(zhǎng)期高溫脅迫（羅輝，2006）。就消化酶而言，急性高、低溫度脅迫造成的生理影響不同，飼喂VE 的改善效果與作用方式亦不同，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.2 急性溫度脅迫對(duì)紅耳龜抗氧化功能的影響及VE干預(yù)效應(yīng)

抗氧化酶是生物體內(nèi)保護(hù)預(yù)防相關(guān)的酶類(lèi)，機(jī)體內(nèi)的CAT 和SOD 活力能夠反映出機(jī)體清除自由基的能力（洪美玲等，2007）。外界溫度突然變化會(huì)引起龜鱉類(lèi)動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)，刺激其體內(nèi)的活性氧增多（Zhanget al.，2017）。面對(duì)急性高溫脅迫，黃喉擬水龜北種群組織中SOD 活力升高，過(guò)氧化氫酶活力不受溫度處理影響（陳威等，2019），與本研究結(jié)果相似，故推測(cè)，面對(duì)急性高溫脅迫，CAT可能在清除自由基的過(guò)程中不起主導(dǎo)作用，而SOD對(duì)緩解急性高溫應(yīng)激較為重要。在急性低溫脅迫下，紅耳龜?shù)腟OD 和CAT 活性均無(wú)顯著變化，但CAT 活性出現(xiàn)下降趨勢(shì)（P＞0.05），可能是低溫對(duì)CAT 活性有一定的抑制作用。而管敏等（2019）研究報(bào)道，急性低溫脅迫造成子二代中華鱘的CAT活性顯著升高，但SOD 活性無(wú)顯著變化，可能是實(shí)驗(yàn)物種的不同導(dǎo)致了反應(yīng)模式存在差異（Mourenteet al.，2002）。本研究中未添加VE 組的GSH 含量在急性高、低溫度脅迫情況下均顯著降低，推測(cè)由于脅迫引起氧化損傷，造成紅耳龜體內(nèi)活性氧增多，血清中大量GSH 被用于活性氧的清除而被消耗。同時(shí)急性溫度脅迫還可能影響谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、谷胱甘肽還原酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的活性進(jìn)而間接影響GSH含量（管敏等，2019）。

相關(guān)研究表明，日糧中添加適量的VE 可以在滿足水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育需要的同時(shí)提高機(jī)體的抗氧化能力（許友卿等，2011），還可作為免疫調(diào)節(jié)物增強(qiáng)體液、細(xì)胞免疫和吞噬作用（夏兆飛，2003；曹?chē)?guó)弟，趙恒壽，2007）。在對(duì)中華絨鰲蟹Eriocheirsinensis幼體進(jìn)行亞硝酸鹽脅迫時(shí)，雖然添加VE 后沒(méi)有完全阻止SOD 活性的上升，但其上升幅度減小，與本研究結(jié)果相似。在受到脅迫產(chǎn)生活性氧時(shí)，機(jī)體可通過(guò)酶促和非酶促抗氧化防御機(jī)制，以及抗氧化劑清除氧自由基（Suraiet al.，2019）。本研究結(jié)果表明，VE 對(duì)紅耳龜抗氧化酶活性影響較小，其提高紅耳龜抗應(yīng)激能力、減少超氧陰離子產(chǎn)生的效果可能主要是通過(guò)VE 的抗氧化劑特性實(shí)現(xiàn)，進(jìn)而減緩了SOD 響應(yīng)應(yīng)激的強(qiáng)度（洪美玲，2007）。飼料添加VE 造成急性高、低溫度脅迫紅耳龜血清CAT 活性上升，但變化不顯著，這與謝盛蘭（2020）的研究結(jié)果一致，進(jìn)一步說(shuō)明了紅耳龜應(yīng)對(duì)急性溫度脅迫造成的氧化損傷時(shí)，CAT可能并不起主導(dǎo)作用，也可能是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)添加的VE 量尚不是最適宜的，無(wú)法大幅提高紅耳龜?shù)目寡趸芰?，有待后續(xù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。VE使急性高、低溫度脅迫下GSH 含量升高，這與李鵬飛等（2016）結(jié)果一致，在常溫下，VE 可能作為非酶抗氧化因子存在于幼龜血液中，使血清中GSH 含量低于正常水平，但在面對(duì)急性溫度脅迫時(shí)又可迅速引起非酶抗氧化系統(tǒng)的反應(yīng)，引起GSH 含量的上升，而高水平的GSH可以迅速消除任何形式的活性氧（Joneset al.，1981），對(duì)經(jīng)受氧化應(yīng)激的生物體而言十分重要。

4 結(jié)論

急性高、低溫脅迫均可導(dǎo)致紅耳龜發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，龜體腸道消化酶活性和血液抗氧化酶活性也會(huì)發(fā)生不同程度的變化以應(yīng)對(duì)脅迫，盡可能維持龜體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，而飼料添加適宜劑量的VE 可能優(yōu)化了龜體應(yīng)對(duì)急性溫度脅迫的酶策略，進(jìn)一步節(jié)省自身能量、緩解氧化應(yīng)激，更有利于保持體質(zhì)健康和生長(zhǎng)發(fā)育。因而，在紅耳龜養(yǎng)殖生產(chǎn)、運(yùn)輸?shù)冗^(guò)程中應(yīng)當(dāng)盡量避免急劇的溫度變化，減少龜體應(yīng)激，同時(shí)在日常喂食適宜劑量的VE 以增強(qiáng)龜體的抗逆性能。