賀鈺云,簡瑩娜,胡 勇,李秀萍,馬利青*

(1.青海省天峻縣畜牧獸醫(yī)站, 青海 天峻 817299; 2.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院,青海 西寧 810016)

羊傳染性胸膜肺炎可感染任何品種和年齡的羊群,一年四季均可發(fā)生,呈地方流行性,主要通過空氣飛沫經(jīng)呼吸道傳播,也可以通過接觸傳播。該病的流行特點為發(fā)病率高,發(fā)病較隱蔽,早期從臨床上不易判定,且傳播速度快,一旦發(fā)病很難控制,常常導(dǎo)致羊群反復(fù)感染,一般預(yù)后不良,最終給養(yǎng)殖者造成嚴重損失[1]。青海省傳染性胸膜肺炎血清學(xué)調(diào)查研究常用間接血凝方法(IHA),經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),該病主要感染羊群包括柴達木絨山羊、小尾寒羊以及其他一些引進品羊只。近年來,隨著羊只的頻繁調(diào)運以及該病的不時發(fā)生,養(yǎng)羊業(yè)遭受了極大的經(jīng)濟損失。因此,對來自天峻縣快爾瑪鄉(xiāng)某養(yǎng)殖戶的病死羊只進行了實驗室診斷,現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1發(fā)病史調(diào)查

養(yǎng)殖戶共養(yǎng)殖300余只藏系羊,均為自繁自育,2022年3月開始陸續(xù)發(fā)病,呈慢性死亡。截至5月份,累計發(fā)病31只,死亡11只。期間按照防疫要求給羊群注射過小反芻獸疫、羊四聯(lián)和羊痘疫苗,同時,在年初進行過1次驅(qū)蟲。羊群采取全放牧方式,母羊產(chǎn)羔前給予適當補飼,羊舍環(huán)境干燥且塵土較多。

1.2臨床癥狀

主訴:發(fā)病羊群主要癥狀為咳嗽、發(fā)燒,無明顯鼻液、膿液咳出,逐漸消瘦,直至死亡。發(fā)病羊只膘情較差,被毛雜亂,不時咳嗽,后期不思飲食、臥地不起、偶有腹瀉。

1.3剖檢變化

對病死羊只進行剖檢,剖檢變化主要為心包積液、胸腔積液;心臟腫大,心臟冠狀溝脂肪有出血;肝臟正常,膽囊充盈;脾臟邊緣有點狀出血;肺臟氣腫且實變,呈大葉性肺炎,與胸腔粘連,肺門淋巴結(jié)腫大;腹腔有大量積液;腸系膜淋巴結(jié)腫大;膀胱充盈;氣管環(huán)有粘液且?guī)аz。

1.4樣品采集

現(xiàn)場無菌采集病死羊的心、肝、脾、肺、腎等組織2份,置于冰盒中及時送至實驗室進行檢測。

1.5細菌分離培養(yǎng)

將組織樣品無菌接種至普通營養(yǎng)肉湯、鮮血平板和厭氣肉肝湯中,在37℃條件下培養(yǎng)24～48 h,然后染色鏡檢。

1.6綿羊肺炎支原體檢測

對上述2份病料組織中的脾臟、肺臟進行組織DNA提取,利用綿羊肺炎支原體特異性引物進行PCR擴增并做瓊脂糖凝膠檢測,其中樣品編號見表1。

2 結(jié)果

2.1細菌分離培養(yǎng)

普通營養(yǎng)肉湯、鮮血平板和厭氣肉肝湯培養(yǎng)物經(jīng)染色鏡檢未發(fā)現(xiàn)可疑致病菌。

2.2綿羊肺炎支原體檢測

經(jīng)綿羊肺炎支原體(MO)PCR擴增及瓊脂糖凝膠電泳檢測,陰性、陽性對照均成立,1#、2#羊肺臟組織以及1#脾臟組織中檢測到MO特異性條帶(見圖1)。

圖1 綿羊肺炎支原體PCR結(jié)果圖

3 討論

3.1綜合臨床癥狀、細菌分離培養(yǎng)以及綿羊肺炎支原體PCR檢測結(jié)果,判定此羊群感染了綿羊肺炎支原體,從而導(dǎo)致了傳染性胸膜肺炎。在以往的血清學(xué)調(diào)查中,青海省祁連縣2011年和2014年的陽性檢出率分別為31.08%和6.5%[2,3];海晏縣2010年和2012年陽性檢出率分別為25.45%和12.6%[4,5];河南縣2015年陽性檢出率為0.5%[6];天峻縣2009及2010年陽性檢出率分別為71.38%和57.59%[7,8]。從血清學(xué)檢測結(jié)果來看,青海省牧區(qū)的藏羊群中存在綿羊肺炎支原體感染。

3.2通過調(diào)查綿羊傳染性胸膜肺炎的流行情況,制定相應(yīng)的防控措施,防止該病的傳播蔓延是防治該病的關(guān)鍵,免疫接種也是預(yù)防本病的有效措施[9]。帶菌或患病羊只的引入及其運輸過程是造成該病傳播的主要途徑。因此,引進羊只運輸期間應(yīng)注重通風,避免羊群過于擁擠,到達后必須隔離檢疫 1 個月以上,確認健康時方可混入大群。

3.3對于已確診傳染性胸膜肺炎的病例,需及時采取隔離、封鎖、消毒、治療等一系列措施;對于已受到污染的羊舍、飼養(yǎng)管理工具等,應(yīng)使用碘制劑、百毒殺進行全面消毒;對病羊糞便做無害化處理;對于同一養(yǎng)殖場中的閑置圈舍,可以用20%生石灰消毒,對在此基礎(chǔ)上再用火焰消毒[10]。

3.4對自繁自育的羊群宜按照科學(xué)的免疫程序進行免疫,疫苗首選傳染性胸膜肺炎疫苗。建議新生羔羊15日齡左右進行首次免疫,頸部皮下注射,免疫劑量為2 mL/只;每隔半年加強免疫一次,頸部皮下注射3 mL/只。免疫接種時可添加1～2 g頭孢防止接種部位細菌感染。

3.5對患病羊只進行治療時采用的

藥物有多種,推薦用大環(huán)內(nèi)酯類藥物如泰樂菌素、替米考星、紅霉素、加米霉素;喹諾酮類藥物如恩諾沙星、氧氟沙星;四環(huán)素類藥物如土霉素、強力霉素;頭孢類藥物如頭孢噻呋等。結(jié)合清肺中獸藥,如麻杏石甘散、清肺散進行治療,療程為7～10 d。

致謝

在采樣過程中得到天峻縣快爾瑪鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站工作人員的大力支持,在檢測過程中得到青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院獸醫(yī)生物技術(shù)研究室工作人員的幫助,在此一并致謝。