尹靖凱，盧正義，張媛媛，崔培，喬秀亭，程鎮(zhèn)燕

葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉生長(zhǎng)和體色的影響

尹靖凱，盧正義，張媛媛，崔培，喬秀亭，程鎮(zhèn)燕通信作者

（天津農(nóng)學(xué)院 水產(chǎn)學(xué)院 天津市水產(chǎn)生態(tài)與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300392）

為研究葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉的著色效果，在基礎(chǔ)飼料中分別添加200 mg/kg的葉黃素和葉黃素酯，將270尾平均體重26.03±0.07 g的黃金錦鯉分成3個(gè)處理組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)水箱30尾魚(yú)，養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)42 d。結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，添加葉黃素和葉黃素酯后對(duì)生長(zhǎng)沒(méi)有顯著影響（＞0.05），但添加葉黃素酯可使魚(yú)體更加修長(zhǎng)，顯著提高了錦鯉體長(zhǎng)/體高比值 （＜0.05）。與對(duì)照組相比，添加葉黃素減少了魚(yú)體內(nèi)水分，增加了脂肪含量（＜0.05）；3個(gè)處理組之間魚(yú)體蛋白含量無(wú)顯著差異（＞0.05）。添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)錦鯉的紅度（）和亮度（）沒(méi)有顯著影響（＞0.05），但顯著提高了魚(yú)體的黃度（），添加葉黃素和葉黃素酯14 d后，魚(yú)體的黃度值即可達(dá)到與42 d相似的效果。與葉黃素相比，葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉著色效果更快、更顯著。

葉黃素；葉黃素酯；錦鯉；生長(zhǎng)；體色

黃金錦鯉（）屬鯉形目，鯉科，鯉亞科，鯉屬，有“水中活寶石”的美稱，具有很高的觀賞和飼養(yǎng)價(jià)值[1]。體色是評(píng)價(jià)觀賞魚(yú)品質(zhì)的重要依據(jù)之一，魚(yú)體內(nèi)類胡蘿卜素、葉黃素等色素在皮膚積累能直接影響體表的顏色，且觀賞魚(yú)體內(nèi)大部分色素不能自身合成，需要從飼料中獲得，因此對(duì)于飼料添加劑和增色飼料的研究顯得尤為重要[2]。目前對(duì)鮭鱒魚(yú)類肌肉的色澤問(wèn)題研究表明，在飼料中添加蝦青素可使鮭鱒魚(yú)類肌肉呈現(xiàn)出紅色，能滿足市場(chǎng)需求[3]。

類胡蘿卜素分為胡蘿卜素類和葉黃素類，其中蝦青素和葉黃素均屬葉黃素類[4]。目前，葉黃素已作為一種天然的飼料添加劑在家禽和水產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用，相關(guān)研究表明其具有一定的抗氧化能力，能抑制一些自由基的活性，增強(qiáng)體質(zhì)和免疫能力[5-6]。孫學(xué)亮等[7]發(fā)現(xiàn)在飼料中適量添加葉黃素能明顯增強(qiáng)血鸚鵡（）的體表黃度和抗氧化酶活性；宋雪璐等[8]研究表明，在飼料中添加適量濃度的葉黃素可有效改善七彩神仙魚(yú)（）體表的黃度，對(duì)魚(yú)體內(nèi)肝臟組織的總抗氧化能力起到增強(qiáng)作用，若添加過(guò)量，則會(huì)使生長(zhǎng)機(jī)能減弱。葉黃素酯是一種重要的類胡蘿卜素脂肪酸酯，在代謝過(guò)程中可轉(zhuǎn)化為葉黃素作為增色劑，添加在魚(yú)類飼料當(dāng)中，可改善魚(yú)類的體色狀況，且葉黃素酯對(duì)于光、氧的穩(wěn)定性也優(yōu)于葉黃素，不易降解氧化[9]；故本試驗(yàn)選取葉黃素和葉黃素酯兩種著色劑，比較其對(duì)黃金錦鯉生長(zhǎng)和體色的影響，為生產(chǎn)上優(yōu)化黃金錦鯉著色飼料配方提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料設(shè)計(jì)與制作

在基礎(chǔ)飼料中分別添加1.0%的葉黃素（純度2%）和0.2%的葉黃素酯（純度10%），即添加量均為200 mg/kg。所有原料粉碎后，過(guò)60目篩，均勻混合后由飼料擠壓機(jī)壓制成直徑約為2.0 mm的硬顆粒沉性飼料，晾干備用。試驗(yàn)飼料配方和營(yíng)養(yǎng)成分詳情如表1。

表1 試驗(yàn)飼料配方及組成（風(fēng)干基礎(chǔ)） %

原料組成對(duì)照組葉黃素組葉黃素酯組 豆粕25.0025.0025.00 雙低菜粕15.0015.0015.00 發(fā)酵豆粕5.005.005.00 進(jìn)口魚(yú)粉10.0010.0010.00 進(jìn)口雞肉粉5.005.005.00 面粉15.0015.0015.00 麩皮8.408.408.40 膨潤(rùn)土7.006.006.80 葉黃素2%10.001.000.00 葉黃素酯10%10.000.000.20 防霉劑0.100.100.10 豆油6.006.006.00 氯化膽堿0.200.200.20 鹽0.300.300.30 磷酸二氫鈣2.002.002.00 預(yù)混料21.001.001.00 營(yíng)養(yǎng)成分分析 蛋白質(zhì)35.4134.0735.24 脂肪8.168.358.23 粗灰分14.4014.0613.82

注：1本試驗(yàn)采用純度為2％的葉黃素，由晨光生物科技集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)提供；采用的葉黃素酯純度為10％，來(lái)自西安岳達(dá)生物科技股份有限公司；2購(gòu)買自帝斯曼（中國(guó)）有限公司

1.2 試驗(yàn)過(guò)程

1.2.1 試驗(yàn)用魚(yú)養(yǎng)殖及管理

本試驗(yàn)采用的黃金錦鯉均來(lái)自天津市金水族水產(chǎn)養(yǎng)殖公司。暫養(yǎng)7 d后，將平均體長(zhǎng)為12.75±1.96 cm，平均體重26.03±0.07 g的黃金錦鯉270 尾，隨機(jī)分配在9個(gè)帶有循環(huán)系統(tǒng)的水箱內(nèi)，每個(gè)水箱放30尾。養(yǎng)殖期間，每天按照體重的1%～3%投喂3次（8:30、12:30、16:30）。在養(yǎng)殖期間定期檢測(cè)水質(zhì)，保持水溫20～25 ℃，溶解氧濃度6～7 mg/L，pH 7.5～8.2左右，養(yǎng)殖周期為42 d。

1.2.2 樣品收集

投喂試驗(yàn)結(jié)束后（42 d），所有魚(yú)饑餓24 h，采用MS-222麻醉，稱重，計(jì)數(shù)，測(cè)量形體指標(biāo)（體長(zhǎng)、體高）。隨機(jī)取5尾魚(yú)，解剖取肝臟，內(nèi)臟團(tuán)，并稱重。另取5尾魚(yú)做全魚(yú)體成分分析，于-80 ℃冰箱中保存。

1.2.3 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

存活率（，%）＝100×N/N；

增重率（，%）＝100×（W-W）/W；

飼料系數(shù)（）＝/（W-W）；

肥滿度（，%）＝100×W/L；

內(nèi)臟指數(shù)%（，%）＝100×W/W；

形體指數(shù)＝（）/（）

式中：W為試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)體重（g）；W為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體重（g）；為飼料攝入量干重（g）；W為肝胰臟質(zhì)量（g）；L為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體長(zhǎng)（cm）；為試驗(yàn)天數(shù)（d）；N為終末存活尾數(shù)；N為初始放養(yǎng)尾數(shù)；W為內(nèi)臟團(tuán)質(zhì)量；體高（）魚(yú)體最高處垂直直線長(zhǎng)度；體長(zhǎng)（）吻前段到尾鰭基部的水平直線長(zhǎng)度（cm）。

1.2.4 魚(yú)體和飼料組分測(cè)定

魚(yú)體及飼料樣品常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析根據(jù)AOAC（1990）標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行，即采用常壓恒溫烘干法、550 ℃灼燒法、凱氏定氮法及索氏抽提法測(cè)定水分、灰分、粗蛋白質(zhì)及粗脂肪。

1.2.5 皮膚色差測(cè)定

試驗(yàn)分別于養(yǎng)殖0、14、28、42 d，每缸隨機(jī)取3尾魚(yú)，于側(cè)線和背鰭之間體表部分，用色差計(jì)（WSC-S colorimeter）來(lái)測(cè)量體表的色差值，記錄體表的紅度（*）、黃度（*）和亮度（*）值。

1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±..）表示，采用SPSS 17.0軟件中單因子方差分析進(jìn)行方差分析，采用Tukey法進(jìn)行組間多重比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉生長(zhǎng)性能的影響

根據(jù)表2可知，與對(duì)照組相比，飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉的成活率、增重率、餌料系數(shù)都沒(méi)有顯著影響（＞0.05），但是添加葉黃素酯后顯著影響了錦鯉部分形體指標(biāo)，表現(xiàn)為顯著提高了錦鯉體長(zhǎng)/體高的比值（＜0.05），添加葉黃素后錦鯉體長(zhǎng)/體高的比值也有一定提高，但與對(duì)照組相比差異不顯著。添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)魚(yú)體的肥滿度和內(nèi)臟指數(shù)沒(méi)有影響 （＜0.05）。

表2 葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉生長(zhǎng)和形體指標(biāo)的影響

組別對(duì)照組葉黃素葉黃素酯 成活率/% 98.33±1.67 98.33±1.67 96.97±1.67 初始體重/g 26.17±0.08 25.83±0.08 26.08±0.08 末期體重/g 32.47±0.16 32.03±0.18 32.12±0.47 增重率/%124.73±3.09123.06±1.19123.37±2.44 餌料系數(shù) 1.32±0.05 1.34±0.03 1.36±0.05 體長(zhǎng)/體高 4.04±0.12a 4.21±0.29a 4.58±0.46b 肥滿度/% 2.01±0.31 2.10±0.51 2.09±0.33 內(nèi)臟指數(shù)/% 8.44±0.89 8.20±0.37 7.35±0.42

注：同行中標(biāo)有不同字母者表示組間有顯著性差異（＜0.05），標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異（＞0.05）

2.2 飼料添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)錦鯉體成分的影響

與對(duì)照組相比，飼料中添加葉黃素顯著影響了魚(yú)體水分和粗脂肪含量，魚(yú)體的水分低于對(duì)照組，但粗脂肪含量顯著高于對(duì)照組（＜0.05），對(duì)魚(yú)體的粗蛋白和灰分沒(méi)有顯著影響。添加葉黃素酯后，魚(yú)體的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分與對(duì)照組相比均沒(méi)有顯著差異（＞0.05）（表3）。

表3 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)錦鯉的體成分影響（W/W）

組別水分粗蛋白粗脂肪 對(duì)照組74.16±0.39a13.75±0.197.83±0.31b 葉黃素組72.29±0.58b14.34±0.379.86±0.37a 葉黃素酯組73.41±0.23ab14.49±0.287.99±0.29b

注：同列中標(biāo)有不同字母者表示組間有顯著性差異 （＜0.05），標(biāo)有相同字母者表示組間無(wú)顯著性差異（＞0.05）

2.3 葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉體色的影響

由表4可知，錦鯉體表的紅度*值都呈現(xiàn)負(fù)值（正值代表紅色，負(fù)值代表綠色），說(shuō)明黃金錦鯉的體表并未向紅色系伸展。添加葉黃素和葉黃素酯后，體表紅度與對(duì)照組無(wú)顯著差異，對(duì)魚(yú)體的亮度（）也沒(méi)有顯著影響（＞0.05）。添加葉黃素和葉黃素酯顯著提高了魚(yú)體的黃度（*），各組的黃度值隨著養(yǎng)殖周期延長(zhǎng)顯著提高（＜0.05），同一處理組之間14 d、28 d、42 d魚(yú)體的黃度值沒(méi)有顯著差異，但均顯著高于初始值，即添加葉黃素和葉黃素酯2周后，魚(yú)體的黃度值即可達(dá)到與42 d相似的效果。

表4 葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉體表紅度（a*）、黃度（b*）和亮度（L*）的影響

組別初始14d28d42d 體表a*值 對(duì)照組-2.69±0.10-3.42±0.86-3.20±0.67-3.83±0.27 葉黃素組-2.75±0.10-3.82±0.92-3.96±0.25-4.52±0.17 葉黃素酯組-2.73±0.09-4.44±0.56-4.18±0.03-4.18±0.40 體表b*值 對(duì)照組20.81±1.61b25.07±2.58aC25.42±3.00aB26.93±1.55aB 葉黃素組20.59±0.35b29.84±2.27aB30.43±1.66aA34.05±1.20aA 葉黃素酯組20.08±0.38b31.45±1.89aA30.89±1.39aA36.98±0.86aA 體表L*值 對(duì)照組84.61±0.9085.13±0.2185.16±0.8482.53±1.91 葉黃素組83.93±1.1282.64±3.0384.29±1.1579.36±0.58 葉黃素酯組84.22±1.1485.73±1.7183.14±1.2177.43±0.91

注：表中同行數(shù)值右上角標(biāo)不同小寫(xiě)字母代表同組之間不同周次內(nèi)影響顯著（＜0.05）；同列標(biāo)大寫(xiě)字母的代表同一周次內(nèi)不同組之間的顯著影響（＜0.05）；標(biāo)有相同字母的代表組內(nèi)或組間無(wú)顯著影響（＞0.05）

3 討論

3.1 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉生長(zhǎng)和形體指標(biāo)的影響

相關(guān)研究結(jié)果表明，添加50～200 mg/kg葉黃素對(duì)七彩神仙魚(yú)的增重率無(wú)顯著影響[8]；在血鸚鵡上的研究也表明飼料中添加0.5％葉黃素與0.3％維生素E混合物對(duì)魚(yú)體的生長(zhǎng)指標(biāo)無(wú)顯著影響[7]。本研究也發(fā)現(xiàn)添加1%葉黃素和2%葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉的生長(zhǎng)性能（成活率、增重率、餌料系數(shù)）無(wú)顯著影響。但也有學(xué)者認(rèn)為24.2～1 700.0 mg/kg的天然葉黃素能夠提高飼料的利用率，對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)有促進(jìn)作用[10]，這與本試驗(yàn)研究結(jié)果不同，可能是養(yǎng)殖的品種不同，觀賞魚(yú)與食用魚(yú)生長(zhǎng)速度、消化酶活性都不盡相同的原因?qū)е碌模豸敳ǖ萚10]認(rèn)為天然葉黃素能夠促進(jìn)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)很可能是由于添加濃度范圍能夠顯著刺激黃顙魚(yú)某些胃腸道消化酶發(fā)揮活性，從而提高了飼料的利用率和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率，而表現(xiàn)出了明顯促生長(zhǎng)效果。

在錦鯉鑒賞中，體型指標(biāo)最受關(guān)注，如常用肥滿度、臟體比、體長(zhǎng)/體高、體重/體長(zhǎng)等來(lái)評(píng)價(jià)錦鯉形體狀態(tài)，肥滿度表示魚(yú)體的肥瘦程度，臟體比則表示身體健康狀況，體長(zhǎng)比體高則表示錦鯉體型，錦鯉常見(jiàn)的兩種體型為長(zhǎng)紡錘形和寬紡錘形，其中長(zhǎng)紡錘形的錦鯉更具有觀賞價(jià)值[11-12]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比對(duì)照組和葉黃素組，添加葉黃素酯后顯著提高了錦鯉體長(zhǎng)/體高比值，使其體型更加修長(zhǎng)，但目前關(guān)于黃金錦鯉形態(tài)鑒賞方面，還沒(méi)有具體的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定形體指標(biāo)的一些理想范圍。

3.2 飼料添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)錦鯉體成分的影響

魚(yú)體營(yíng)養(yǎng)成分可直接體現(xiàn)魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的高低。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)飼料中加入葉黃素和葉黃素酯提高了蛋白含量，但與對(duì)照組相比無(wú)顯著影響，這一點(diǎn)與王魯波等[10]發(fā)現(xiàn)飼料中添加75 mg/kg天然葉黃素可顯著提高黃顙魚(yú)的蛋白累積量這一結(jié)論不同，可能是由于試驗(yàn)中所添加的天然葉黃素刺激黃顙魚(yú)某些蛋白酶發(fā)揮活性，從而提高了飼料的蛋白利用率。本試驗(yàn)中魚(yú)體的脂肪含量上升，可能是由于葉黃素和葉黃素酯具有抗氧化功能，有效減少機(jī)體用于抵抗外界應(yīng)激的能量消耗，增加機(jī)體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)儲(chǔ)存，提高了魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)成 分[13]，具體原因還有待進(jìn)一步探討。

3.3 飼料中添加葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉體色的影響

在有鰭魚(yú)類中蝦青素和葉黃素是分布最為廣泛的類胡蘿卜素，其在體表積累會(huì)使體表展現(xiàn)出不同的顏色[14]。已有研究表明，在飼料中添加葉黃素和螺旋藻的混合物后，雜交黃顙魚(yú)的黃度及飽和度有明顯升高的趨勢(shì)，紅度值有所下降但無(wú)明顯趨勢(shì)[15]；單獨(dú)添加適量濃度的葉黃素也可增強(qiáng)黃顙魚(yú)的體表顏色[10]；飼料添加200～300 mg/kg葉黃素會(huì)顯著提高金魚(yú)[16]、七彩神仙魚(yú)[14]體表黃度。本試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)葉黃素或葉黃素酯添加量為200 mg/kg時(shí)黃金錦鯉呈現(xiàn)出黃度（*）值顯著增加，說(shuō)明黃金錦鯉可積累葉黃素在體表呈現(xiàn)出黃色。添加葉黃素和葉黃素酯后，隨著養(yǎng)殖周期延長(zhǎng)，黃金錦鯉體表的黃度逐漸升高，體表的紅度逐漸降低，但無(wú)顯著影響，對(duì)亮度無(wú)顯著效果。

本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，添加葉黃素和葉黃素酯后，魚(yú)體體表的黃度均顯著高于對(duì)照組，但黃度值在28 d、42 d與14 d沒(méi)有顯著差異，說(shuō)明葉黃素和葉黃素酯能快速讓魚(yú)體著色。在第14天時(shí)，葉黃素酯組著色效果略高于葉黃素組，可能是由于葉黃素以與脂肪酸結(jié)合的形式存在，穩(wěn)定性更強(qiáng)[17]，不易氧化分解。本試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)葉黃素和葉黃素酯組魚(yú)體的黃度在28 d和42 d沒(méi)有顯著差異，可能是由體內(nèi)兩種色素積累達(dá)到限度所致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，添加200 mg/kg的葉黃素和葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響；但添加葉黃素酯顯著提高了錦鯉體長(zhǎng)/體高比值，使錦鯉更加修長(zhǎng)，提高觀賞價(jià)值。

葉黃素和葉黃素酯對(duì)錦鯉的紅度（*）和亮度（*）沒(méi)有顯著影響，但顯著提高了魚(yú)體的黃度（*），添加葉黃素和葉黃素酯14 d后，魚(yú)體的黃度值即可達(dá)到與42 d相似的效果。

葉黃素和葉黃素酯均能提高黃金錦鯉的體色，且葉黃素酯對(duì)黃金錦鯉著色效果更快、更顯著。

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Effects of lutein and lutein ester on growth and body color of golden Koi,

Yin Jingkai, Lu Zhengyi, Zhang Yuanyuan, Cui Pei, Qiao Xiuting, Cheng ZhenyanCorresponding Author

（Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300392, China）

This experiment was conducted to study the effects of lutein and lutein ester on the growth and body color of Koi,. 200 mg/kg lutein and lutein ester were supplemented to the basal diet, and270 golden Koi with an average weight of 26.03±0.07 g were divided into three groups. Each group had three replicates. There were 30 fish in each tank. The culture experiment lasted for 42 d. The results showed that the addition of lutein and lutein ester had no significant effect on the growth of fish compared with the control group（＞0.05）, but the addition of lutein ester significantly improved the body indexes（body length/body height）of Koi（＜0.05）. After adding lutein, the body moisture content of fish decreased significantly, but the lipid content was significantly higher than that of the control group（＜0.05）. There was no significant difference in protein content among the treatment groups. The addition of lutein and lutein ester had no significant effect on the redness（）and brightness （）of Koi（＞0.05）, but significantly improved the yellowness（*）, the yellowness of each group increased gradually with the extension of the experiment period（＜0.05）. Generally, after adding lutein and lutein ester for 14 d, the yellowness value of fish could reach a similar effect as that of 42 d. Compared to the lutein, lutein ester had a faster and more significant coloring effect on golden koi.

lutein; lutein esters; Koi,; growth; body color

1008-5394（2023）02-0027-04

10.19640/j.cnki.jtau.2023.02.006

S963.73

A

2022-05-19

天津市科技幫扶提升項(xiàng)目（20ZYCGSN00360）；天津市規(guī)劃和自然資源局（ML2020－HP－F059）

尹靖凱（1999—），男，碩士在讀，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail：2279719144@qq.com。

程鎮(zhèn)燕（1981—），女，副教授，博士，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料研究。E-mail：chengzhenyan2005@126.com。

責(zé)任編輯：張愛(ài)婷