曾華芳

摘 要：目的：參加福建省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳組織的2022年度農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證項(xiàng)目，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室白菜中農(nóng)藥殘留定量檢測(cè)能力，提高實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員檢測(cè)水平。方法：根據(jù)作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 23200.121—2021中基本操作步驟，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)考核樣進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)定量法。結(jié)果：樣品空白未檢出農(nóng)藥殘留；樣品白菜中吡唑醚菌酯檢測(cè)值為0.17 mg·kg-1。一個(gè)月后考核結(jié)果為合格，通過(guò)能力驗(yàn)證。結(jié)論：參加該次能力驗(yàn)證活動(dòng)，發(fā)現(xiàn)并解決了檢驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在的問(wèn)題，提升了檢驗(yàn)人員的檢測(cè)能力。

關(guān)鍵詞：白菜；農(nóng)藥殘留；檢測(cè)能力驗(yàn)證

Abstract： Objective： To participate in the 2022 pesticide residue detection capacity verification project organized by Fujian Provincial Department of Agriculture and Rural Affairs， to evaluate the laboratorys ability to quantitatively detect pesticide residues in Chinese cabbage， and to improve the testing level of laboratory inspectors. Method： According to the operation guide， referring to the basic operation steps in the national standard GB 23200.121—2021， liquid chromatography-mass spectrometry was used to test the assessment samples with external standard quantitative method. Result： No pesticide residues were detected in the sample blank; the detection value of pyraclostrobin in the sample Chinese cabbage was 0.17 mg·kg-1. The result of the assessment after one month was qualified and passed the proficiency testing. Conclusion： Participating in this detection capacity verification project has identified and solved the problems of the inspectors in the experimental process， and improved the detection capacity of the inspectors.

Keywords： Chinese cabbage; pesticide residues; detection capacity verification

隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)對(duì)農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)依賴(lài)日益加深。農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中使用量較大、農(nóng)藥不規(guī)范使用以及農(nóng)藥本身質(zhì)量問(wèn)題等都是農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留超標(biāo)的原因。因此農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)是把控農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和安全的第一道關(guān)口，關(guān)乎著人們的食品安全、農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和社會(huì)穩(wěn)定[1]。本文依托于參加福建省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳開(kāi)展的2022年農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證項(xiàng)目，介紹了白菜中的農(nóng)藥殘留量測(cè)定能力驗(yàn)證的整個(gè)流程[2]，并總結(jié)了能力驗(yàn)證需要注意的幾點(diǎn)關(guān)鍵事項(xiàng)，目的在于加強(qiáng)交流學(xué)習(xí)，促進(jìn)縣級(jí)檢測(cè)中心農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)和管理水平的提升。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的盲樣由福建省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)中心統(tǒng)一制備發(fā)放，本次盲樣的基質(zhì)為白菜，樣品處于冷凍勻漿狀態(tài)，樣品包括1份約為200 g的考核樣和1份約為200 g的空白樣。

19種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、多菌靈、噻嗪酮、噻菌靈、克百威、嘧菌酯、烯酰嗎啉、噻螨酮、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、茚蟲(chóng)威、滅多威、3-羥基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和莠滅凈），質(zhì)量濃度為100 ?g·mL-1，壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心；乙腈（HPLC）、甲醇（色譜純）、冰乙酸（AR）和甲酸（HPLC），賽默飛有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

LX50-QSight110液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)珀金埃爾默公司）、電子天平（福州志華科學(xué)儀器有限公司）、振蕩器（江蘇省金壇市江南儀器廠）和漩渦儀等。

1.3 方法

1.3.1 驗(yàn)證項(xiàng)目和方法

本次參加能力驗(yàn)證的項(xiàng)目共19種，包括吡蟲(chóng)啉、啶蟲(chóng)脒、多菌靈、噻菌靈、克百威、嘧菌酯、烯酰嗎啉、咪鮮胺、吡唑醚菌酯、茚蟲(chóng)威、滅多威、3-羥基克百威、甲萘威、抗蚜威、戊唑醇、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、噻嗪酮、噻螨酮、莠滅凈[3]，根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定證書(shū)附表中的承檢范圍確定。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際條件，能力驗(yàn)證選擇的方法是《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中331種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.121—2021）[4]。樣品用有機(jī)溶劑乙腈進(jìn)行提取，所得提取液經(jīng)凈化進(jìn)行液質(zhì)聯(lián)用儀上機(jī)檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)條件

（1）液相色譜條件。色譜柱：C18柱（100 mm×2.1 mm，2.7 μm）；柱溫：35 ℃；流動(dòng)相：A為2 mmol·L-1甲酸銨-甲酸水溶液，B為2 mmol·L-1甲酸銨-甲酸甲醇溶液；進(jìn)樣量：2.0 μL；流速：0.25 mL·min-1；流動(dòng)相梯度洗脫見(jiàn)表1。

（2）質(zhì)譜條件。離子源類(lèi)型：ESI電噴霧離子源；正離子掃描方式；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；電噴霧電壓：5 000 V；霧化器溫度：180 ℃；離子源溫度：250 ℃。19種農(nóng)藥及其代謝物的質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表2。

1.4 能力驗(yàn)證測(cè)定

1.4.1 樣品領(lǐng)取

樣品的領(lǐng)取是能力驗(yàn)證較重要的步驟之一。樣品是省廳檢測(cè)中心直接用順豐冷鏈速運(yùn)，檢測(cè)人員應(yīng)隨時(shí)跟蹤快遞信息，確保及時(shí)收到樣品，收到樣品時(shí)應(yīng)檢查樣品是否存在破裂撒漏等現(xiàn)象，若出現(xiàn)上述現(xiàn)象應(yīng)立即與省廳檢測(cè)中心聯(lián)系。

1.4.2 樣品的提取

分別稱(chēng)取解凍至室溫的樣品白菜和樣品空白各10 g于50 mL離心管中，各3個(gè)平行，另外取空離心管做試劑空白。分別加入10 mL乙腈、1顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min；加入提取鹽包（內(nèi)含4 g無(wú)水硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉二水合物、0.5 g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物），劇烈振蕩1 min，4 200 r·min-1離心5 min。

1.4.3 樣品的凈化

從每個(gè)離心管吸取上層乙腈溶液5.00 mL，分別加入凈化鹽管（內(nèi)含除水劑和凈化材料），再經(jīng)混勻用渦旋儀渦旋1 min，4 200 r·min-1離心5 min，吸取上清液經(jīng)過(guò)濾膜，等候測(cè)定。

1.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

將上述1.1中的19種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（濃度為100 ?g·mL-1）用乙腈配制成濃度為2 ?g·mL-1的19種農(nóng)藥混標(biāo)溶液A，再將混標(biāo)溶液A稀釋成濃度梯度分別為0.005 ?g·mL-1、0.010 ?g·mL-1、0.020 ?g·mL-1、0.050 ?g·mL-1和0.100 ?g·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，上機(jī)測(cè)定，建立標(biāo)曲曲線。

1.4.5 結(jié)果上報(bào)

上機(jī)檢測(cè)完畢后，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)及時(shí)打印檢測(cè)結(jié)果并分析數(shù)據(jù)得到結(jié)果，收集色譜圖以及做好原始記錄的完善，結(jié)果數(shù)據(jù)分析確認(rèn)無(wú)誤后，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)提交驗(yàn)證結(jié)果以及報(bào)送圖譜與原始記錄等，然后針對(duì)此次能力驗(yàn)證進(jìn)行全面梳理，及時(shí)進(jìn)行分析總結(jié)與整理歸檔工作。

2 結(jié)果與分析

2.1 定性和定量檢測(cè)結(jié)果

為防止待測(cè)液目標(biāo)未知物衰減，樣品處理結(jié)束后立即安排上機(jī)檢測(cè)，允許的情況下，每個(gè)樣品上機(jī)重復(fù)測(cè)定3次以上，減少系統(tǒng)誤差。初檢結(jié)果顯示，樣品空白未檢出農(nóng)藥殘留；樣品白菜檢測(cè)出含有吡唑醚菌酯，其余18種農(nóng)藥均未檢出，檢出結(jié)果如表3所示。

2.2 回收率試驗(yàn)

根據(jù)初檢結(jié)果，樣品白菜含有的吡唑醚菌酯平均濃度為0.202 mg·kg-1。稱(chēng)取3個(gè)空白樣品10 g，分別加入1 mL 混標(biāo)溶液A以及9 mL的乙腈，剩余步驟與1.4.2、1.4.3步驟一致，獲得加標(biāo)待測(cè)液，再進(jìn)行上機(jī)測(cè)定，計(jì)算回收率[回收率=（加標(biāo)濃度-初檢濃度）/質(zhì)控添加濃度×100%]，結(jié)果如表4所示。

2.3 能力驗(yàn)證結(jié)果

通過(guò)對(duì)樣品空白、樣品白菜以及加標(biāo)回收質(zhì)控樣進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)分析，質(zhì)控回收率滿足70%～120%這一要求的范圍。為使結(jié)果更為準(zhǔn)確，將樣品檢出值經(jīng)質(zhì)控回收率矯正后上報(bào)結(jié)果，即考核盲樣中檢出農(nóng)藥及含量：樣品空白為未檢出；樣品白菜中檢出吡唑醚菌酯檢測(cè)值為0.17 mg·kg-1，結(jié)果上報(bào)1個(gè)月后收到反饋結(jié)果為合格，通過(guò)此次能力驗(yàn)證。

3 農(nóng)殘檢測(cè)能力驗(yàn)證的注意事項(xiàng)

3.1 樣品保存

收到的樣品處于冷凍狀態(tài)，樣品可能存在水和冰晶，此時(shí)應(yīng)重新勻漿再取樣檢測(cè)。

3.2 稱(chēng)量

稱(chēng)量樣品時(shí)應(yīng)注意是否具有代表性，盡量用比較大的稱(chēng)量勺，減少樣品間的差異性；瓜果類(lèi)冷凍蔬菜樣品，需要在完全解凍后再均勻混合處理進(jìn)行稱(chēng)量，以保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性[5]。稱(chēng)量樣品時(shí)應(yīng)注意是否過(guò)度解凍；稱(chēng)量之前應(yīng)該充分?jǐn)嚢瑁环Q(chēng)量時(shí)盡量使用開(kāi)口較大的容器，可以避免樣品粘在容器邊緣；稱(chēng)量前應(yīng)規(guī)劃好樣品的用量，防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)過(guò)失時(shí)需要重新稱(chēng)取樣品而樣品量不夠的情況。

3.3 提取

根據(jù)實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作，應(yīng)注意樣品是深綠色時(shí)，如青菜椒、菠菜、菜心等，可以在均質(zhì)前加入石墨粉先將大部分色素去除，再進(jìn)行提??；樣品為汁液時(shí)，如桃汁、菠菜汁等，這類(lèi)樣品含水分多且呈酸性，建議在稱(chēng)取之前先將pH調(diào)制中性，再進(jìn)行提取。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)品配制

（1）標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按說(shuō)明書(shū)要求來(lái)存放。濃度為500～1 000 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品，一般存放溫度在-18 ℃左右，有效期為6個(gè)月；濃度為1～10 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品，一般存放溫度在0～5 ℃，有效期為1個(gè)月；濃度為0.5～1.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品，一般存放溫度在0～5 ℃，有效期為2～3周。

（2）實(shí)驗(yàn)室管理標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)該做到規(guī)范并且可追溯，應(yīng)建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理臺(tái)賬和配制領(lǐng)用臺(tái)賬。每種標(biāo)準(zhǔn)品都能溯源到所購(gòu)買(mǎi)標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)證書(shū)。

（3）標(biāo)準(zhǔn)品在配制時(shí)應(yīng)逐級(jí)稀釋?zhuān)龅浆F(xiàn)配現(xiàn)用，應(yīng)使用在保質(zhì)期內(nèi)且新開(kāi)封的標(biāo)準(zhǔn)品，避免標(biāo)準(zhǔn)品放置時(shí)間過(guò)久出現(xiàn)濃度變化的情況。

（4）當(dāng)標(biāo)液濃度與樣品的濃度相差較大時(shí)若使用單點(diǎn)校準(zhǔn)，容易導(dǎo)致結(jié)果偏差較大，因此本實(shí)驗(yàn)采用五點(diǎn)校準(zhǔn)。

3.5 檢測(cè)過(guò)程中質(zhì)量控制

①先做試劑空白，根據(jù)空白值高低來(lái)判斷試劑是否有問(wèn)題或者是器皿是否被污染。②質(zhì)量控制加標(biāo)時(shí)盡量使用混標(biāo)進(jìn)行添加，避免因添加溶劑體積過(guò)大而對(duì)結(jié)果造成影響。③回收率試驗(yàn)時(shí)，可用樣品空白進(jìn)行添加，添加的濃度應(yīng)盡量與考核樣品初步定量一致，以確保數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.6 儀器設(shè)備維護(hù)

在接到能力驗(yàn)證通知時(shí)，檢測(cè)人員應(yīng)對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行全方位維護(hù)[5]，對(duì)儀器狀態(tài)有清晰的把握，及時(shí)確定儀器設(shè)備的準(zhǔn)確度、靈敏度、穩(wěn)定性等各項(xiàng)關(guān)鍵參數(shù)?？蓪⑿屡渲频臉?biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行上機(jī)測(cè)定，與之前記錄的標(biāo)準(zhǔn)溶液響應(yīng)值進(jìn)行比較，響應(yīng)值一致，則表明儀器設(shè)備正常，否則需一一排查是否需要更換色譜柱、更換進(jìn)樣隔墊、清洗離子源等，最終使設(shè)備處于最佳運(yùn)行狀態(tài)。

3.7 數(shù)據(jù)處理

（1）在日常實(shí)驗(yàn)中，需要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的前處理過(guò)程，否則容易出現(xiàn)結(jié)果不平行、回收率偏高或偏低等。如若出現(xiàn)兩個(gè)樣品結(jié)果不平行的情況，首先要排除儀器問(wèn)題，再排查前處理環(huán)節(jié)問(wèn)題。

（2）原始記錄應(yīng)及時(shí)填寫(xiě)，不能補(bǔ)記；所填寫(xiě)的信息應(yīng)該完整并且可追溯；填寫(xiě)有效數(shù)字的數(shù)位要正確，并且使用國(guó)家規(guī)定的法定計(jì)量單位；有效數(shù)字計(jì)算應(yīng)符合有效數(shù)字運(yùn)算規(guī)定；數(shù)值修約應(yīng)符合GB/T 8170—2008標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定；農(nóng)藥殘留和農(nóng)藥污染物檢測(cè)的計(jì)算結(jié)果一般保留2位有效數(shù)字，若含量超過(guò)1 mg·L-1時(shí)，保留3位有效數(shù)字。

4 結(jié)論

農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證結(jié)果是否合格直接反映了實(shí)驗(yàn)室是否具備農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力。要想順利通過(guò)能力驗(yàn)證，檢驗(yàn)人員應(yīng)夯實(shí)基本功，規(guī)范各項(xiàng)操作規(guī)程，不斷分析總結(jié)，提升檢測(cè)水平，最終為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全以及人們的身體健康提供保障。本文以福建省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳組織的農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證為例，分享整個(gè)實(shí)踐過(guò)程中應(yīng)注意的各項(xiàng)關(guān)鍵點(diǎn)，旨在于加強(qiáng)交流學(xué)習(xí)，為農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)機(jī)構(gòu)提高能力驗(yàn)證水平提供參考和借鑒。

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