孫瑜嬬 胡一帆

(1.陜西中醫(yī)藥大學(xué),陜西 咸陽(yáng) 712046;2.陜西省中醫(yī)體質(zhì)與疾病防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 咸陽(yáng) 712046;3.咸陽(yáng)市中心血站,陜西 咸陽(yáng) 712046)

中醫(yī)體質(zhì)學(xué)說(shuō)源于《黃帝內(nèi)經(jīng)》,是以中醫(yī)理論為指導(dǎo),研究體質(zhì)的基本特征、形成因素、變化規(guī)律、分類辨識(shí)、養(yǎng)生預(yù)防、易感轉(zhuǎn)歸、辯證用藥及預(yù)后影響等問(wèn)題的綜合學(xué)說(shuō)。體質(zhì)是人群及人群中的個(gè)體在先天稟賦和后天環(huán)境共同作用基礎(chǔ)上,在生長(zhǎng)發(fā)育和衰老過(guò)程中,形成的形態(tài)體態(tài)、生理特點(diǎn)、情志性格方面整體的、綜合的、穩(wěn)定的固有特性;在生理上表現(xiàn)為人體代謝和對(duì)外界刺激的個(gè)體差異,在病理上表現(xiàn)為對(duì)致病因素的易感性、傳變性和轉(zhuǎn)歸的個(gè)體傾向性[1-5]。氣血精液是構(gòu)成人體和維持人體基本生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),不同個(gè)體之所以存在臟腑陰陽(yáng)、氣血偏頗、情志活動(dòng)和機(jī)能代謝的體質(zhì)差異,究其根本,源于氣血精液的盛衰變化,氣血精液作為體質(zhì)評(píng)價(jià)的核心要素,用于體質(zhì)的分類辨識(shí)[6]。腎虛體質(zhì)就是以腎中精氣虛損、陰陽(yáng)趨衰、臟腑功能低下為主要特征的病理體質(zhì),屬于腎藏象理論研究范疇[7]。腎虛邪伏學(xué)說(shuō)源于清代溫病學(xué)家劉寶怡,侵入人體、未立即發(fā)病的病邪稱為伏邪或伏氣。腎虛邪伏,就是指因人體腎氣虧虛,致使外邪侵入至虛之處耗損正氣,久而發(fā)病。腎虛邪伏理論揭示了腎虛體質(zhì)機(jī)體抗病能力不足、防御修復(fù)能力變差,對(duì)外邪和其他致病因素易感性增強(qiáng),易招致外邪,罹患多種疾病,且多為虛弱性疾病、慢性疾病和老年性疾病的根本病因在于腎精不足、正氣虧虛[8]。越來(lái)越多的證據(jù)表明腎虛體質(zhì)存在機(jī)體免疫功能失衡,低下、紊亂的免疫功能是腎虛體質(zhì)病理演變的核心[9]。樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)在機(jī)體錯(cuò)綜復(fù)雜的免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要且多樣的作用,不僅體現(xiàn)在固有免疫,在適應(yīng)性免疫中更是至關(guān)重要,與腎虛體質(zhì)免疫失衡具有重要聯(lián)系,可作為改善腎虛體質(zhì)免疫失衡的關(guān)鍵載體調(diào)節(jié)機(jī)體免疫失衡。核因子-κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)及其信號(hào)通路被證實(shí)對(duì)DC的成熟分化具有調(diào)控作用,能通過(guò)DC來(lái)影響整個(gè)免疫系統(tǒng)發(fā)揮免疫效應(yīng),腎虛體質(zhì)狀態(tài)下,NF-κB及其信號(hào)通路表達(dá)異常。因此,NF-κB信號(hào)通路調(diào)控DC異常,可能是腎虛體質(zhì)免疫失衡引發(fā)多種相關(guān)疾病的重要機(jī)制之一。

1 免疫功能失衡是腎虛體質(zhì)病理演變的核心

體質(zhì)的形成秉承于先天、得養(yǎng)于后天,與個(gè)體健康和疾病息息相關(guān)。人體之所以表現(xiàn)為亞健康狀態(tài),是受病理體質(zhì)的影響。正常體質(zhì)到病理體質(zhì)的轉(zhuǎn)變,引發(fā)了個(gè)體出現(xiàn)健康-亞健康-疾病的演變[10]。作為病理體質(zhì)類型之一的腎虛體質(zhì),既是個(gè)體體質(zhì)的病理改變,也是腎虛體質(zhì)向腎虛證候轉(zhuǎn)化的中間環(huán)節(jié),具有腎虛證相關(guān)疾病發(fā)生的高度傾向性,是腎虛相關(guān)疾病發(fā)生的重要病理基礎(chǔ)和前階性表現(xiàn)。

中醫(yī)學(xué)中腎的功能,不僅包括解剖學(xué)中的腎臟,還涵蓋泌尿、生殖、血液、神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫等多個(gè)系統(tǒng),以腎臟功能低下、氣血精液虧虛為特征的腎虛體質(zhì)必然伴隨免疫調(diào)節(jié)失衡,發(fā)生多種與腎虛相關(guān)的免疫性疾病[11]。腎主生殖,腎虛體質(zhì)免疫異常不孕癥患者出現(xiàn)封閉抗體表達(dá)低下、免疫球蛋白、淋巴細(xì)胞異常和抗原抗體特異性反應(yīng)的異常[12];腎虛型復(fù)發(fā)性流產(chǎn)小鼠子宮IFN-γ、CD4+、IFN-γ/IL-4、CD4+/CD8+表達(dá)升高,IL-4、CD8+表達(dá)降低,證實(shí)以腎虛為病因?qū)е碌膹?fù)發(fā)性流產(chǎn)小鼠出現(xiàn)免疫失衡[13-17];腎虛質(zhì)母體反復(fù)胚胎種植失敗者中同樣出現(xiàn)免疫耐受、T細(xì)胞亞群表達(dá)失調(diào)現(xiàn)象,經(jīng)補(bǔ)腎中藥治療調(diào)節(jié)了T細(xì)胞亞群分化、逆轉(zhuǎn)了Th1/Th2細(xì)胞比例漂移,從而改善母胎的免疫耐受和免疫失衡[18-19]。腎主骨生髓,腎虛體質(zhì)與骨代謝息息相關(guān),輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)可通過(guò)其分泌的細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、促骨吸收細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-17、抑骨吸收細(xì)胞因子IL-4、IL-10、雙向作用轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、前列腺素等細(xì)胞因子通過(guò)NF-κB受體依賴或非依賴途徑影響骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的成熟分化,影響骨代謝[20-21]。腎在液為唾,腎虛唾液免疫學(xué)研究發(fā)現(xiàn),腎虛體質(zhì)模型動(dòng)物唾液腺發(fā)生萎縮、損傷,唾液腺分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、IL-6表達(dá)異常,證實(shí)腎虛體質(zhì)唾液腺分泌異常,唾液免疫功能失衡[22]。提取腎虛體質(zhì)模型動(dòng)物外周免疫器官脾臟總淋巴細(xì)胞RNA進(jìn)行免疫相關(guān)基因譜研究,亦發(fā)現(xiàn)12條與腎虛體質(zhì)直接相關(guān)的免疫基因[23]。

綜上所述,腎虛體質(zhì)狀態(tài)下,機(jī)體出現(xiàn)免疫功能的異常和紊亂,免疫失衡是腎虛體質(zhì)病理演變的核心,促進(jìn)免疫系統(tǒng)恢復(fù)平衡是改善腎虛體質(zhì)的關(guān)鍵。

2 樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)腎虛體質(zhì)免疫失衡的影響

樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)源于骨髓多能造血干細(xì)胞,因其分化成熟后伸出許多樹(shù)突狀或偽足樣突起而得名,廣泛分布于皮膚、氣道、外周血和淋巴器官,是公認(rèn)的功能最強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞,被譽(yù)為免疫應(yīng)答的關(guān)鍵啟動(dòng)者、調(diào)控者,在抗感染、移植免疫、腫瘤免疫、自身免疫性疾病等領(lǐng)域具有重要意義。未成熟的DC表達(dá)低水平的協(xié)同刺激分子CD40、CD80、CD86、黏附分子、主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)分子,具有強(qiáng)大的抗原吞噬能力,但對(duì)T細(xì)胞的刺激能力較低;受到抗原刺激時(shí),未成熟的DC對(duì)抗原發(fā)揮高效攝取、加工、處理、提呈能力,并分化為成熟DC從非淋巴器官遷移到淋巴器官,同時(shí)表達(dá)高水平的黏附分子、MHC類分子和協(xié)同刺激分子CD80、CD86,并大量分泌Ⅰ型輔助性T細(xì)胞因子(Th細(xì)胞)IL-12、IL-18,激活T細(xì)胞活化增殖,可誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)生成,表達(dá)IL-2R同時(shí)大量分泌IL-2,發(fā)生Th1型免疫應(yīng)答,同時(shí)分泌對(duì)DC具有重要調(diào)節(jié)作用的趨化因子,進(jìn)一步增強(qiáng)T細(xì)胞增殖、聚集、活化,也可直接將抗原肽呈遞給CD8+T細(xì)胞,在活化的CD4+T細(xì)胞輔助作用下活化CD8+T細(xì)胞,發(fā)揮機(jī)體的免疫應(yīng)答能力[24-26]。DC強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)具有雙刃劍作用,正常生理狀態(tài)下,DC表達(dá)低水平的協(xié)同刺激分子,如CD40、CD80、CD86分子和MHC分子,結(jié)合抗原后誘導(dǎo)免疫耐受;在炎性刺激下,DC和外來(lái)抗原大量結(jié)合,協(xié)同共刺激分子和MHCⅡ類分子表達(dá)增強(qiáng),DC抗原提呈能力相應(yīng)增強(qiáng),并遷移到T細(xì)胞分布更為廣泛的次級(jí)淋巴組織,從而激活適應(yīng)性免疫應(yīng)答。

大量實(shí)驗(yàn)和臨床研究表明腎虛體質(zhì)伴DC異常,通過(guò)調(diào)節(jié)并恢復(fù)DC功能對(duì)腎虛體質(zhì)相關(guān)疾病具有良好療效。慢性乙肝發(fā)病符合腎虛邪伏理論,病因病機(jī)與腎虛體質(zhì)相關(guān)[27],乙肝腎虛型患者占慢性肝炎患者80%以上,研究發(fā)現(xiàn)慢性乙肝患者外周血單核細(xì)胞來(lái)源的DC出現(xiàn)成熟障礙和功能異常,DC表面標(biāo)志性分子CD83、CD86、CD80、HLA-DR表達(dá)降低,DC分泌IL-12水平降低,抑制DC分泌IL-12且抑制DC分化成熟的抑制性細(xì)胞因子IL-10分泌升高,患者體內(nèi)DC介導(dǎo)的免疫功能出現(xiàn)失調(diào)[28-29]。腎虛體質(zhì)機(jī)體免疫低下、免疫失衡易發(fā)生炎癥反應(yīng),導(dǎo)致腎臟DC表達(dá)和遷移出現(xiàn)異常。腎臟DC來(lái)源于骨髓中的巨噬細(xì)胞和DC前體細(xì)胞,主要分布于腎小管間質(zhì)[30],腎臟DC細(xì)胞表面趨化因子受體CCR1可為DC提供抗原提呈和加工途徑,研究發(fā)現(xiàn)腎虛腎小球腎炎患者CCR1表達(dá)增強(qiáng),增強(qiáng)的CCR1使DC抗原提呈能力進(jìn)一步強(qiáng)化加重細(xì)胞浸潤(rùn)和疾病發(fā)展[31-32];炎癥發(fā)生時(shí)致炎因子刺激腎臟DC細(xì)胞從腎臟間質(zhì)遷移到腎臟淋巴結(jié),并同時(shí)向腎臟髓質(zhì)區(qū)-T淋巴細(xì)胞區(qū)遷移,促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖并介導(dǎo)免疫炎性反應(yīng)[33]。在腎虛免疫紊亂致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的實(shí)驗(yàn)中,DC作為平衡免疫耐受和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的關(guān)鍵載體,可通過(guò)調(diào)節(jié)其亞群恢復(fù)正常重塑促炎因子與抑炎因子平衡,進(jìn)而改善腎虛型潰瘍性結(jié)腸炎的炎癥反應(yīng)[34]。腎虛體質(zhì)者正虛邪實(shí)易引發(fā)腫瘤,腫瘤日久不愈又加重腎虛,腎虛伴隨腫瘤發(fā)生發(fā)展全過(guò)程[35-37],DC作為一種安全性良好的天然佐劑,常用來(lái)誘導(dǎo)腫瘤抗原特異性記憶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞,增強(qiáng)患者T細(xì)胞活性達(dá)到抗腫瘤效果[38-39]。

綜上所述,DC對(duì)腎虛體質(zhì)免疫功能紊亂具有調(diào)控作用,維持并恢復(fù)DC的正常生理功能是改善腎虛體質(zhì)免疫失衡的有效途徑。

3 NF-κB信號(hào)通路對(duì)腎虛體質(zhì)及其相關(guān)疾病的影響

NF-κB是分子結(jié)構(gòu)相關(guān)聯(lián)的一組蛋白質(zhì)家族,1986年,Sen和Baltimore最早發(fā)現(xiàn)并成功提取了NF-κB?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)該家族包含5組成員,分別是p50(NF-κB1)、p52(NF-κB2)、p65(RelA)、RelB和cRel。該家族成員在分子結(jié)構(gòu)上均有一個(gè)由300個(gè)氨基酸組成的氨基末端同源區(qū)Rel,家族成員二聚體化、與DNA、κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IKB)結(jié)合均發(fā)生在此部位[40]。Rel家族各成員之間可通過(guò)兩兩結(jié)合形成多種同源或異源二聚體,形成的結(jié)構(gòu)不同的二聚體具有不同的功能,對(duì)靶目標(biāo)DNA識(shí)別亦不同,其中異源性二聚體p50/p65(RelA)幾乎存在于所有細(xì)胞中,含量最豐富,是NF-κB發(fā)揮生理活性的主要形式,p50/p65(RelA)、p50/cRel可以激活轉(zhuǎn)錄,p50/p50、p52/p52則對(duì)轉(zhuǎn)錄具有抑制作用[41-42]。當(dāng)細(xì)胞處于靜息狀態(tài)時(shí),NF-κB與IKB形成三聚體復(fù)合物,以無(wú)活性的形式駐留在胞質(zhì)中,當(dāng)細(xì)胞受到不同的刺激因子如腫瘤壞死因子、脂多糖、白細(xì)胞介素、病毒、紫外線、活性氧等刺激時(shí),NF-κB被激活同時(shí)IKB被快速磷酸化,經(jīng)短暫的泛素化修飾后被蛋白酶降解。激活后的NF-κB可誘導(dǎo)多種基因表達(dá)并分泌多種細(xì)胞因子,參與機(jī)體炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答[43]。

在對(duì)腎虛體質(zhì)大鼠的唾液研究中發(fā)現(xiàn),不管是腎虛體質(zhì)還是腎虛證候,大鼠腮腺NF-κB表達(dá)均較正常組升高[44]。腎與生殖密切相關(guān),多位學(xué)者對(duì)腎虛血瘀致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和臨床研究,發(fā)現(xiàn)模型孕小鼠脫膜組織NF-κB蛋白表達(dá)較正常組升高;臨床收集流產(chǎn)患者脫膜組織并采集血液進(jìn)行檢測(cè),同樣發(fā)現(xiàn)患者血清和脫膜組織中NF-κB均較正常妊娠者高;運(yùn)用補(bǔ)腎活血方能靶向調(diào)節(jié)NF-κB通路表達(dá),從而調(diào)節(jié)母胎免疫平衡達(dá)到安胎作用[45-47]。腎與骨相關(guān),肝腎陰虛型原發(fā)性骨質(zhì)疏松動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和臨床研究均表明,原發(fā)性骨質(zhì)疏松伴NF-κB信號(hào)通路異常,滋腎健骨方具有骨保護(hù)作用,其機(jī)制可能是調(diào)控了Nrf/HO-1/NF-κB信號(hào)通路[48]。腎虛血瘀為病機(jī)的小兒原發(fā)性腎病綜合征患者血清中,NF-κB水平較健康兒童明顯升高,經(jīng)過(guò)補(bǔ)腎中藥聯(lián)合免疫抑制劑治療后,可顯著降低并阻斷NF-κB信號(hào)通路而提高療效[49]。

綜上所述,NF-κB及其信號(hào)通路在腎虛體質(zhì)及其相關(guān)疾病中表達(dá)異常,可能與NF-κB及其信號(hào)通路參與機(jī)體炎癥反應(yīng)相關(guān);補(bǔ)腎中藥可通過(guò)抑制或阻斷該信號(hào)通路而緩解病情、提高臨床療效。

4 NF-κB信號(hào)通路具有調(diào)控樹(shù)突狀細(xì)胞的作用

作為功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞,DC在調(diào)控T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著舉足輕重的左右。DC抗原提呈能力和對(duì)T細(xì)胞刺激能力的強(qiáng)弱又受其自身分化成熟的制約,即DC越成熟,抗原提呈能力越強(qiáng)、對(duì)T細(xì)胞的激活能力越強(qiáng);而DC的成熟分化,與NF-κB信號(hào)通路調(diào)控相關(guān)[50]。

作為一種多效的核蛋白因子,研究表明NF-κB家族幾乎所有成員均參與了DC細(xì)胞的成熟與分化。相較于家族其它成員,NF-κB家族成員RelB作為與抗原提呈功能相關(guān)基因的重要轉(zhuǎn)錄因子,經(jīng)刺激后可直接誘導(dǎo)DC分化,在DC成熟中具有最重要的意義[51],成員p50(NF-κB1)、p65(RelA)、RelB和cRel可以通過(guò)易位參與不同的途徑調(diào)控DC,從而發(fā)揮不同的生理功能[52]。NF-κB信號(hào)通路被激活后促進(jìn)多種炎癥因子釋放[53],并上調(diào)DC的CD80/86等表面的共刺激分子,誘導(dǎo)DC的成熟和表達(dá),上調(diào)的共刺激分子與細(xì)胞表面相應(yīng)配體結(jié)合,作為第二信號(hào)提供給T細(xì)胞,隨之大量的T細(xì)胞被活化,引發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答,作用整個(gè)免疫系統(tǒng)發(fā)揮效應(yīng)[54-55]。

5 結(jié)語(yǔ)

腎虛體質(zhì)狀態(tài)下,機(jī)體的免疫功能出現(xiàn)異常。一方面,DC作為功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞,對(duì)腎虛體質(zhì)失衡的免疫功能具有調(diào)節(jié)作用;另一方面,腎虛體質(zhì)狀態(tài)伴NF-κB信號(hào)通路異常且NF-κB及其信號(hào)通路參與DC的成熟分化,可通過(guò)作用DC調(diào)控免疫系統(tǒng),不僅作用于固有免疫,對(duì)適應(yīng)性免疫應(yīng)答同樣具有重要影響。因此,通過(guò)NF-κB信號(hào)通路調(diào)控DC,可作為調(diào)節(jié)腎虛體質(zhì)免疫失衡的關(guān)鍵,這一機(jī)制的闡釋,為中醫(yī)藥改善腎虛體質(zhì)提供了新的研究思路和治療靶點(diǎn),具有重要的研究?jī)r(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。