楊 乾
(張掖市甘州區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心,甘肅 張掖 734000)
甘州區(qū)是農(nóng)業(yè)大區(qū),全區(qū)農(nóng)產(chǎn)品種類多,且市場供應(yīng)量較大。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)受到化肥、農(nóng)藥等諸多因素的影響,農(nóng)產(chǎn)品極易出現(xiàn)質(zhì)量問題,質(zhì)量不達標的農(nóng)產(chǎn)品流入市場,會對消費者身體健康造成極大的影響和威脅。近年來,甘州區(qū)高度重視農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作,并將該項工作常態(tài)化、制度化、規(guī)范化,重點對民眾需求量大的農(nóng)產(chǎn)品實施嚴格的檢驗檢測,及時發(fā)現(xiàn)農(nóng)藥、獸藥、微生物、重金屬殘留超標的農(nóng)產(chǎn)品并銷毀,杜絕不合格農(nóng)產(chǎn)品進入市場,提升農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測、保障水平,規(guī)避農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題的發(fā)生,確保民眾舌尖上的安全[1]。
農(nóng)作物生產(chǎn)時,部分農(nóng)業(yè)生產(chǎn)者缺乏正確的用藥意識,濫用一些違禁農(nóng)藥,如:六六六,滴滴涕,毒殺芬等,或者超劑量使用農(nóng)藥,極易導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品出現(xiàn)農(nóng)藥殘留超標的現(xiàn)象,因此農(nóng)藥殘留檢測是一項重要內(nèi)容,常用檢測技術(shù)如下。
農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測中,儀器分析法的應(yīng)用極為常見,包括:氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥活性成分以小分子有機化合物為主,在實際檢測中色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的應(yīng)用最為廣泛,可同時完成對農(nóng)產(chǎn)品多種農(nóng)藥殘留成分的檢測。應(yīng)結(jié)合農(nóng)藥與化合物類型靈活選用檢測法,確保獲得準確的檢測結(jié)果。如:檢測農(nóng)產(chǎn)品有機氯、有機磷等農(nóng)藥殘留時,可應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測,但若農(nóng)藥分析密度大,熱性不穩(wěn)定,則應(yīng)使用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測。實踐表明,儀器分析法應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測中,具備較高的準確性和靈敏度,但儀器設(shè)備采購成本較高,并且在基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測機構(gòu)開展檢測和樣本預(yù)處理存在一定的難度[2]。
酶抑制法是常用的快檢技術(shù)。應(yīng)用酶抑制法時,利用有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥可抑制昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酯酶活性,并對神經(jīng)傳導(dǎo)造成破壞,導(dǎo)致昆蟲中毒,乙酰膽堿酯酶和樣品發(fā)生反應(yīng)后,結(jié)合乙酰膽堿酯酶活性是否被抑制,可判斷農(nóng)產(chǎn)品是否有農(nóng)藥殘留。但需要注意,酶抑制法檢測農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留種類有限,主要以檢測有機磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥為主,并且在檢測時無法實現(xiàn)定性和定量檢測分析。近年來,農(nóng)藥殘留速測儀的應(yīng)用越來越廣泛,利用其實現(xiàn)對農(nóng)產(chǎn)品有機磷、氨基甲酸酯、神經(jīng)毒素等多種農(nóng)藥殘留的檢測,具備較高的靈敏度和重現(xiàn)性,并且覆蓋范圍較廣,是農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留現(xiàn)場快速檢測之一。
當(dāng)前,農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測環(huán)節(jié),生物傳感器法的應(yīng)用已很常見,其具備較短的響應(yīng)時間和檢測靈敏度,檢測儀器設(shè)備具備較高的自動化程度。生物傳感器屬分析裝置,通過檢測分析農(nóng)產(chǎn)品的pH 值等辦法,掌握農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留情況。應(yīng)用生物傳感器時,需添加酶、全細胞、細胞器、受體、抗休的檢測工作,尤其是免疫傳感器技術(shù)和光導(dǎo)纖維傳感器的應(yīng)用,可顯著提升靈敏度,縮短檢測時間,提高檢測效率。
免疫分析法,亦是一項快速檢測技術(shù),指的是將抗體抗原反應(yīng)和現(xiàn)代測試手段相結(jié)合進而達到現(xiàn)場快速檢測的目的,其具備較高的靈敏性和抗體反應(yīng)、特異性、成本低等諸多優(yōu)勢,非常適用于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測,尤其是在有機磷農(nóng)藥檢測環(huán)節(jié)。但需要注意,免疫分析法操作時僅可實現(xiàn)對一種、一類劇毒農(nóng)藥的檢測,并且產(chǎn)品研發(fā)需要投入大量時間和精力。
活體檢測法是直接檢測分析活性生物,了解農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量狀況。例如:農(nóng)藥和細菌發(fā)生反應(yīng)后,會對細菌發(fā)光度造成影響,然后分析判斷農(nóng)產(chǎn)品是否有藥物殘留。再例如:農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留會造成家蠅中毒的現(xiàn)象,此時結(jié)合家蠅死亡率即可測定出農(nóng)藥殘留量,整個過程僅需5 h 左右,過程簡單、不需使用復(fù)雜儀器,但無法精準判斷殘留農(nóng)藥種類,檢測耗時較長,因此大多被應(yīng)用于田間未采收的農(nóng)產(chǎn)品檢驗檢測中[3]。
農(nóng)產(chǎn)品微生物殘留檢測中,免疫學(xué)檢測法是一項常用技術(shù),該技術(shù)主要由抗原抗體技術(shù)、自動ELISA 系統(tǒng)檢測技術(shù)組成??乖贵w技術(shù)被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品大腸桿菌、沙門氏菌等微生物殘留的檢測中,其具有操作簡便、適用廣泛、成本低廉、安全可靠等諸多優(yōu)勢。自動ELISA 系統(tǒng)檢測技術(shù)被廣泛應(yīng)用于食源性微生物檢測中,其具有靈敏度高、成本費用低以及自動化水平高等優(yōu)勢。但需要注意,無論是抗原抗體檢測技術(shù)還是自動ELISA 系統(tǒng)檢測技術(shù),均易于出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象,因此要重點關(guān)注和分析。
農(nóng)產(chǎn)品市場快速檢測中,試劑盒檢測法的應(yīng)用非常廣泛,其由微生物試劑盒、自動化檢測儀器組成,是利用固相夾心法酶聯(lián)實驗原理完成對農(nóng)產(chǎn)品微生物殘留檢測工作的。按照檢測方法的不同,可將試劑盒分類酶聯(lián)免疫法、化學(xué)發(fā)光法、酶抑制法等多種。以酶抑制試劑盒檢測法為例,是利用酶催化一系列生物化學(xué)反應(yīng),最終產(chǎn)生可用現(xiàn)有檢測方法測定的物質(zhì)。目前,酶抑制法快速檢測試劑盒常和紫外分光光度計聯(lián)用,進而達到定量檢測的目的,檢測過程耗時短,反應(yīng)快速,可實現(xiàn)對農(nóng)產(chǎn)品營養(yǎng)物質(zhì)成分的精準有效檢測。
分子生物法是利用RNA、DNA 提取、重組原理完成檢測工作,其能夠有效避免檢測環(huán)節(jié)假陽性現(xiàn)象的發(fā)生,保證檢測結(jié)果的準確性和有效性。目前,分子生物法常被應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品和農(nóng)產(chǎn)品微生物種類、含量的檢測中。但需要注意,分子生物法的操作難度較大,成本較高,并且對操作人員專業(yè)技術(shù)水平有較高的要求,這在一定程度上限制著其應(yīng)用[4]。
該法是利用放射性核素標記抗原、抗體,和被測抗體、抗原相結(jié)合,最終形成抗原抗體復(fù)合物進而實現(xiàn)對樣品檢測分析的。目前,反射免疫分析法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品DDT、馬拉硫磷、對硫磷、克百威、百草枯、氯霉素、青霉素等農(nóng)藥和獸藥的殘留檢測中,具有較高的靈敏度和特異性,但檢測時易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)以及交叉反應(yīng)等現(xiàn)象,影響檢測結(jié)果準確性可靠性。
該法是在抗原、抗體分子上標記特定酶,然后結(jié)合抗原、抗體反應(yīng)的特異性以及酶催化顯色反應(yīng)的高效性完成對樣品獸藥殘留檢測工作的。酶免疫分析法中,酶聯(lián)免疫吸附分析法的應(yīng)用最為常見,其屬于非均相免疫測定方法,可在固液相間同時進行抗原反應(yīng)和抗體反應(yīng),當(dāng)反應(yīng)平衡之后進行兩相分離,明確農(nóng)產(chǎn)品獸藥殘留含量。目前,該法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品中有機磷、擬除蟲菊酯、三嗪類、磺胺類、氟喹諾酮類農(nóng)藥和獸藥的殘留檢測中,其具有檢測快、費用低、靈敏度高、可現(xiàn)場檢驗等諸多優(yōu)勢,但也有操作繁瑣、特異性差等劣勢,因此有待進一步優(yōu)化提升。
該法種類較多,常見的包括:時間分辨熒光免疫分析法、熒光偏振免疫分析法、熒光猝滅免疫分析法、熒光增強免疫分析法等等。其檢測原理是以熒光物質(zhì)為標記物,基于免疫反應(yīng)完成樣品檢測工作的。目前,熒光免疫分析法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品中敵草隆、甲草胺、沙丁胺醇農(nóng)藥和獸藥的殘留檢測中,其具有操作簡單、現(xiàn)象直觀、特異性強等優(yōu)勢,但會對抗體和抗原反應(yīng)造成一定限制,這導(dǎo)致其實際應(yīng)用范圍有限。
該法是以發(fā)光物質(zhì)標記抗原、抗體,當(dāng)其和樣品產(chǎn)生反應(yīng)之后進行分離、洗滌等程序,然后再加入適量的氧化劑,促使其發(fā)光,通過對化學(xué)發(fā)光強度進行測量,并利用標準曲線測定樣品含量,即可完成檢測工作。當(dāng)前,化學(xué)發(fā)光免疫分析法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品中甲基對硫磷、涕滅威、克百威、氯氰菊酯、氯霉素、鏈霉素、鹽酸克倫特羅等諸多小分子獸藥殘留檢測當(dāng)中,其具有靈敏度高、檢測快速、檢測范圍寬、敏感度高、安全性高等諸多優(yōu)勢,但也有發(fā)光時間短、儀器設(shè)備故障率高、試劑不穩(wěn)定等缺陷[5]。
該法是利用納米金顆粒對抗體進行標記,隨著標記抗體數(shù)量的不斷增加并且達到既定密度后,會出現(xiàn)紫紅色,此時即可測定抗原、抗體反應(yīng)結(jié)果。目前,該方法在實踐應(yīng)用中大多是將其制作成膠體金免疫層析測試條,進而快速完成農(nóng)產(chǎn)品獸藥殘留檢測工作的。其具有操作簡單、方便快捷、成本低、特異性強、應(yīng)用范圍廣、理化性質(zhì)穩(wěn)定、安全環(huán)保等諸多優(yōu)勢,但也有通量不高等缺點,并且試紙準確性依賴于抗體特異性。
近年來,受到化工污水排放、塑料垃圾隨意丟棄、濫用化學(xué)肥料等諸多因素的影響,導(dǎo)致部分耕地土壤重金屬含量超標,進而導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品出現(xiàn)重金屬殘留的現(xiàn)象。認真做好農(nóng)產(chǎn)品重金屬殘留檢測工作,重點對農(nóng)產(chǎn)品中鉛、鎘、總汞、無機砷、錫、鉻、苯并芘進行檢測,確保其符合食品安全國家標準。常用檢測技術(shù)如下。
該法較為傳統(tǒng),應(yīng)用較早,檢測時需先將土壤徹底風(fēng)干,然后對風(fēng)干的土壤進行消毒、定容處理,再制備標準溶液,然后進行測量。測量時,利用待測物品的共振輻射,通過原子蒸氣測定其吸光度,待測物品可呈現(xiàn)出單光束、雙光束、雙波道、多波道等多種結(jié)構(gòu)形式,進而分析判斷土壤農(nóng)產(chǎn)品重金屬含量。該法具有靈敏度高、精密度好、操作簡便、準確度高、應(yīng)用廣泛等諸多優(yōu)勢,可實現(xiàn)對農(nóng)產(chǎn)品中70 多種微量金屬元素的測定,但也具有一定的劣勢,如檢測多種元素時需更換燈源、檢測基體復(fù)雜樣品時易受到干擾、元素共振線處于非真空紫外區(qū)內(nèi)會影響正常檢測等。
農(nóng)產(chǎn)品若含有重金屬,能夠和不同的顯色劑產(chǎn)生特定的反應(yīng),并形成有色分子團,利用固定波長的分光光度計即可快速完成農(nóng)產(chǎn)品重金屬殘留檢測工作。試劑比色檢測法成本低、技術(shù)成熟、所應(yīng)用的儀器設(shè)備體積小。檢測前需對樣本進行消解處理,成為溶液后方可檢測。目前,試劑比色檢測法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品砷、鉛、汞、鎘、鉻等多種重金屬成分的檢測中。
重金屬快速檢測試紙法應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品重金屬殘留檢測中,準確率高達95%,并且可實現(xiàn)現(xiàn)場快檢測,10 min 內(nèi)即可獲取檢測結(jié)果,對重金屬檢測靈敏度可達0.01~20.00 mg/kg,目前被廣泛應(yīng)用于鉻、汞、鎘等重金屬殘留量的檢測中。
新時期,甘州區(qū)相關(guān)部門要充分意識到農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測的必要性,科學(xué)規(guī)范應(yīng)用各項技術(shù)做好對農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥、獸藥、微生物、重金屬殘留的檢測,掌握檢測技術(shù)要點,加強農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測的管理,提高檢測工作效率和質(zhì)量,準確掌握農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量狀況,杜絕“問題”農(nóng)產(chǎn)品流入市場和餐桌,保障消費者舌尖上的安全,推動社會和諧穩(wěn)定發(fā)展。