沙 靜,陳秀華,胡雪靚,李 莉

(1.新疆生產建設兵團醫(yī)院 婦產科,新疆 烏魯木齊830092;2.新疆維吾爾自治區(qū)婦幼保健,新疆 烏魯木齊830001;3.新疆維吾爾自治區(qū)腫瘤醫(yī)院 婦外一科,新疆 烏魯木齊830011)

宮頸癌為女性群體常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,宮頸鱗癌為其常見病理類型,疾病為宮頸鱗狀上皮內瘤變(CIN)至浸潤性癌的持續(xù)進展過程[1-2]。宮頸鱗癌具備發(fā)病隱匿、進展緩慢等特征,疾病早期多無特異性臨床表現,出現癥狀就診時疾病通常已屬中晚期,喪失最佳治療時機[3-4]。因此,如何對疾病進行準確的評估以指導臨床進行針對性治療,從而保證疾病預后轉歸效果仍是研究熱點。臨床研究指出,宮頸鱗癌為多種基因協(xié)同作用的結果,故通過測定腫瘤細胞特異性抗原對疾病進行評估成為可能[5]。P53為臨床公認抑癌基因,其失活/突變和多種惡性腫瘤疾病的發(fā)病及進展具有密切關聯性,其過表達狀態(tài)和腫瘤病情及預后密切相關,同時,腫瘤患者中P53喪失保護基因組完整性的作用[6]。Ki67為重要的核增殖標記物,可預測宮頸癌、宮頸炎發(fā)病及進展,其異常表達可反映宮頸鱗癌細胞生物學行為[7]。ELF5為Ets轉錄因子家族重要成員,可對細胞發(fā)育與分化凋亡予以調節(jié),還可影響細胞增殖、腫瘤發(fā)病[8]?；诖?本研究選取新疆生產建設兵團醫(yī)院宮頸鱗癌患者進行分析研究,旨在明確宮頸鱗癌患者組織中ELF5、Ki67、P53表達特征及與疾病分期、預后的關聯性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年5月—2021年9月新疆生產建設兵團醫(yī)院宮頸鱗癌患者30例設為宮頸鱗癌組、低級別CIN患者20例設為低級別CIN組、高級別CIN患者20例設為高級別CIN組、慢性宮頸炎患者20例設為慢性宮頸炎組。納入標準:(1)宮頸鱗癌組符合《宮頸癌診斷與治療指南(第四版)》[9]中宮頸鱗癌診斷標準;(2)經病理檢查確診;(3)臨床資料完整;(4)均有術后隨訪,主要包括門診、電話及微信隨訪。排除標準:(1)存在其他良惡性腫瘤者;(2)妊娠期、哺乳期女性;(3)納入研究前接受放化療等相關治療者;(4)存在免疫系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)、內分泌系統(tǒng)病變者;(5)存在全身性感染性疾病者。宮頸鱗癌組年齡39～71歲,平均(54.97±12.05)歲,疾病FIGO分期:Ⅰ期7例、Ⅱ期14例、Ⅲ期9例;低級別CIN組年齡36～70歲,平均(56.01±10.97)歲;高級別CIN組年齡35～73歲,平均(55.45±11.71)歲;慢性宮頸炎組年齡31～76歲,平均(55.79±10.82)歲。四組年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),且本研究經我院醫(yī)學倫理委員會審批通過。

1.2 方法

標本均來自2019年5月—2021年9月新疆生產建設兵團醫(yī)院婦科行手術治療的患者在病理科存檔的組織蠟塊,采取免疫組織化學法測定各個組織內P53、Ki67、ELF5表達情況,經顯微鏡輔助進行閱片:P53、Ki67、ELF5陽性細胞定位在細胞核,以出現黃色或棕黃色顆粒作評定標準,參照染色強度和陽性細胞比值評定為陽性/陰性;陽性細胞比例:0分:<1%,1分:1%～25%,2分:26%～50%,3分:51%～75%,4分:>75%;染色強度:0分:無染色,1分:淺棕黃色,2分:棕黃色,3分:棕褐色;陽性細胞比例和染色強度乘積為0～2分評定為陰性,乘積≥3分則評定為陽性[10];P53、Ki67、ELF5單克隆抗體均購于北京博奧森生物技術有限公司,三者均制作2張切片一同上機實施染色處理,封片后由科室內經驗豐富的醫(yī)師2名通過雙盲法閱片,若意見存在不同則重新染色后再次閱片,并商討結果。

1.3 觀察指標

(1)統(tǒng)計4組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。(2)統(tǒng)計宮頸鱗癌組不同FIGO分期、患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。(3)統(tǒng)計分析P53、Ki67、ELF5陽性表達情況與宮頸鱗癌FIGO分期的關聯性。(4)統(tǒng)計不同預后(將治療后12個月內影像學檢查疾病進展、復發(fā)者分為預后不良,其余評定為預后良好)的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達率(33.33%)低于低級別CIN組(85.00%)、高級別CIN組(75.00%)、慢性宮頸炎組(90.00%),P53、Ki67陽性表達率(76.67%、83.33%)高于低級別CIN組(20.00%、25.00%)、高級別CIN組(45.00%、55.00%)、慢性宮頸炎組(5.00%、5.00%),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。

表1 四組P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

2.2 不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),且隨著FIGO分期增高,ELF5陽性表達率持續(xù)降低,P53、Ki67陽性表達率持續(xù)增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同FIGO分期宮頸鱗癌者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

2.3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關聯性分析

檢驗可知,P53、Ki67陽性表達率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著正相關關系,ELF5陽性表達率與宮頸鱗癌FIGO分期間存在顯著負相關關系(P<0.05),見表3。

表3 P53、Ki67、ELF5與宮頸鱗癌FIGO分期關聯性分析

2.4 不同預后者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較

本組30例患者中預后良好者19例、預后不良者11例(其中疾病復發(fā)9例、病死2例),預后不良者ELF5陽性表達率(10.53%)低于預后良好者(72.73%),P53、Ki67陽性表達率(94.74%、100.00%)高于預后良好者(45.45%、45.45%),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表4。

表4 不同預后者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況比較[n(%)]

3 討論

宮頸鱗癌在女性群體中較常見,近年來其發(fā)病率持續(xù)增高,且發(fā)病人群趨向年輕化,對患者身心健康及生存質量均造成了嚴重威脅[11]。研究指出,宮頸鱗癌主要是由癌前病變(CIN)逐漸進展至浸潤性癌,但CIN不一定均會進展為惡性腫瘤,CIN發(fā)病至進展為宮頸癌通常需10年左右,受疾病缺乏典型表現及主觀因素等影響,導致其存在一定的誤診或漏診風險,以致部分患者接受了過度治療[12-13]。因此,準確對疾病進行診斷評估極為重要,可保證治療方案的針對性及有效性。

隨著臨床研究深入發(fā)現,細胞生長周期紊亂在腫瘤疾病發(fā)生及進展中具有重要作用,P53基因為臨床已知的和腫瘤疾病關聯性最緊密的抑癌基因,P53產物主要定位于細胞核,屬細胞周期相關蛋白[14]。同時,P53蛋白包括突變型及野生型,其中突變型P53蛋白在惡性腫瘤組織內呈異常高表達狀態(tài),且無抑癌作用,可促進細胞過度增殖,造成腫瘤發(fā)病與惡變;野生型P53蛋白則于正常細胞內呈低表達[15]。白菊萍等[16]研究結果顯示,慢性炎癥組、CIN組及宮頸癌組患者P53陽性表達情況存在顯著差異,且隨著病情程度加劇而持續(xù)增高。本研究結果表明,宮頸鱗癌組P53陽性表達率高于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且不同疾病分期的宮頸鱗癌患者P53陽性表達率存在顯著差異(P<0.05),與上述學者研究結果具有一致性,表明P53過表達在宮頸鱗癌發(fā)病與進展過程中具有重要作用,通過測定其水平可對宮頸鱗癌的早期診斷提供一定參考依據。

Ki67屬細胞增殖相關蛋白,在腫瘤細胞增殖能力評估中具有重要作用,其表達情況和惡性腫瘤惡性程度、預后存在密切關聯性,可參與惡性腫瘤的轉移及侵襲等過程[17]。臨床研究證實,Ki67可作為評估惡性腫瘤人群高危個體的重要生物學標記物,其陽性表達和多種惡性腫瘤發(fā)病與進展、轉移、浸潤等關系密切[18]。另有研究指出,多種惡性腫瘤和癌前病變患者Ki67均為過表達,故推測Ki67可能為原癌基因,其陽性表達過高可造成惡性腫瘤發(fā)病及進展[19]。錢琳等[20]對宮頸鱗癌患者組織內Ki67表達情況進行探究,結果顯示宮頸鱗癌患者陽性表達率異常增高(80.8%),且侵襲浸潤者Ki67陽性表達率(92.6%)高于無侵襲浸潤者(60.0%)。劉瑞等[21]研究也證實,宮頸鱗癌患者及高/低級別鱗狀上皮內病變患者Ki67呈高表達狀態(tài),并隨病變級別增高而增高。本研究結果顯示,宮頸鱗癌組Ki67陽性表達率高于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且隨著疾病分期增高,宮頸鱗癌患者Ki67陽性表達率持續(xù)增高(P<0.05),與上述學者研究結果相一致,提示宮頸鱗癌發(fā)病及進展中細胞增殖活性持續(xù)強化,進一步證實宮頸鱗癌發(fā)病為逐漸進展的過程,Ki67在CIN和宮頸鱗癌的診斷評估中也具有重要作用。

此外,Ets家族成員可調節(jié)細胞發(fā)育、增殖、分化、凋亡等生理活動,ELF5為Ets家族重要成員,其包括2個可辨別結構域,即1個包含所有Ets轉錄因子且可結合TTCC核心序列的基因序列與1個參與蛋白相互作用的結構域[22]。當前臨床關于ELF5的研究多集中于乳腺癌、乳腺細胞等,ELF5主要由乳腺導管前體細胞生成,為乳腺腺泡細胞發(fā)育的調節(jié)因子,不僅能影響腺泡細胞,且能調節(jié)妊娠期乳腺泌乳小泡結構,影響胚胎形成和乳腺小泡增生[23]。近年來臨床研究證實,ELF5屬潛在腫瘤抑制因子,其在惡性腫瘤發(fā)病與進展過程中可發(fā)揮抑癌基因作用,細胞系內ELF5表達降低,故推測調節(jié)ELF5轉錄水平可為惡性腫瘤的臨床治療提供新的方向[24]。本研究對宮頸疾病患者組織內ELF5表達情況進行探究,結果顯示宮頸鱗癌患者ELF5陽性表達率低于低級別CIN組、高級別CIN組、慢性宮頸炎組,且ELF5陽性表達率與宮頸鱗癌患者FIGO分期存在顯著負相關關系(P<0.05),表明ELF5在宮頸鱗癌發(fā)病及進展中也具有重要作用。本研究對不同預后的宮頸鱗癌患者P53、Ki67、ELF5陽性表達情況進行探究,結果顯示預后不良者ELF5陽性表達率低于預后良好者,P53、Ki67陽性表達率高于預后良好者(P<0.05),上述指標在宮頸鱗癌的預后預測中具有較高價值,可通過測定上述指標陽性表達情況對宮頸鱗癌的預后進行早期預測,指導臨床制定或調整干預方案,保證疾病良好轉歸。

綜上所述,宮頸鱗癌組織中P53、Ki67情況異常增高,其增高幅度與疾病分期具有密切關聯性,ELF5在宮頸鱗癌組織表達降低,且不同預后情況者上述指標表達間存在顯著差異,其可用于疾病預后的預測。