任秋月，胡春燕，曠媛媛

成都醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院 急診科，四川 成都 611730

急性呼吸窘迫綜合征是導(dǎo)致呼吸衰竭的主要原因，其病理特征是由于促炎和氧化途徑的激活，引發(fā)快速而強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致炎性細(xì)胞的積累、肺間質(zhì)水腫和肺泡上皮損傷，隨后肺細(xì)胞外基質(zhì)重塑[1]。急性呼吸窘迫綜合征的發(fā)病率和死亡率均較高，據(jù)報(bào)道，全球每年有300 多萬病例和7.5萬死亡病例[2]。以往認(rèn)為急性呼吸窘迫綜合征的發(fā)病機(jī)制局限于氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、炎癥、缺氧[3]，最近的研究表明，鐵死亡亦參與了急性呼吸窘迫綜合征發(fā)展，抑制鐵死亡可有效緩解病情[4]。鐵死亡是一種新的細(xì)胞調(diào)控死亡形式，其特征是鐵依賴的脂質(zhì)過氧化物的積累，而形態(tài)學(xué)、生物學(xué)明顯不同于凋亡、壞死、自噬和其他形式的細(xì)胞死亡[5]。鐵死亡過程涉及眾多信號(hào)通路調(diào)控，其中沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）/核因子E2 相關(guān)因子2（Nrf2）信號(hào)通路被認(rèn)為是關(guān)鍵性信號(hào)通路之一，激活該通路可減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，進(jìn)而抑制鐵死亡[6]。漆黃素是一種類黃酮類化合物，常見于植物和各種水果蔬菜中，如煙樹、葡萄、蘋果、草莓、柿子、黃瓜和洋蔥等，具有廣泛的藥理作用，包括抗炎、抗氧化、抗癌、神經(jīng)保護(hù)等[7]。有研究報(bào)道，漆黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性呼吸窘迫綜合征有保護(hù)作用，能夠明顯減輕肺損傷[8]。因此，本研究采用氣管內(nèi)滴注脂多糖法建立急性呼吸窘迫綜合征模型，觀察漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠鐵死亡的影響，探究SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路作為其作用機(jī)制的可能性。

1 材料與動(dòng)物

1.1 試劑與儀器

脂多糖（質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%，貨號(hào)A2313，北京康瑞納生物科技公司）；漆黃素（質(zhì)量分?jǐn)?shù)＞98%，貨號(hào)T2879，南京賽泓瑞生物科技有限公司）；SIRT1抑制劑（EX-527，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%，貨號(hào)E7034，Sigma-Aldrich 公司）；白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）ELISA 檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)EEL-R0015c、E-EL-R2856c，Elabscience 公司）；DHE熒光探針檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)HR8685-UAR，北京百奧萊博科技有限公司）；鐵檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)ab83366，Abcam 公司）；谷胱甘肽（GSH）檢測(cè)試劑盒、丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒、HE 染色試劑盒、RIPA 裂解液、核蛋白抽提試劑盒、BCA 試劑盒（貨號(hào)S0052、S0131S、C0105S、P0013B、P0028、P0012S，上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；兔源一抗anti-β-actin、anti-SIRT1、anti-Nrf2、anti-Histone H3、山羊源二抗（貨號(hào)ab115777、ab189494、ab92946、ab176842、ab6721，Abcam 公司）。

Nikon E100 光學(xué)顯微鏡（上海普赫生物科技有限公司）；Thermo LS-O410 烘箱（上海輔澤商貿(mào)有限公司）；Thermo Multiskan FC 酶標(biāo)儀（北京昊諾斯科技有限公司）；HS-B7126-B 型石蠟包埋機(jī)、HS-S7120-A 型石蠟切片機(jī)購(gòu)自沈陽恒松科技有限公司。

1.一般治療。調(diào)整飲食，供給乳母和患病幼畜富含維生素的食物。喂幼畜母乳的同時(shí)應(yīng)治療乳母，必要時(shí)暫停母乳喂養(yǎng)。改善飼養(yǎng)管理，調(diào)整日糧組成，提供富含維生素B1的全價(jià)飼料，如優(yōu)質(zhì)青草、發(fā)芽谷物、麩皮、米糠或飼用酵母等；犬、貓應(yīng)增加肝、乳、肉的供給；幼齡動(dòng)物給予足量的全奶或酸奶，也可在日糧中補(bǔ)加硫胺素，劑量每公斤體重為5～10 mg，或按每千克體重30～60 μg計(jì)算。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

6～8 周齡SPF 級(jí)SD 大鼠，雌性，體質(zhì)量220～240 g，購(gòu)自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號(hào)SYXK（京）2019-0022。適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d 后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，喂養(yǎng)環(huán)境：濕度45%～55%，溫度22～26 ℃，12 h 光/暗交替模式，自由攝食、進(jìn)水。本研究經(jīng)成都醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院動(dòng)物倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，審批號(hào)20210905。

2 方法

2.1 分組和模型制備

將84 只SD 大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組以及漆黃素1、2、4 mg/kg 組[8]和漆黃素（4 mg/kg）＋SIRT1 抑制劑（10 mg/kg EX-527）組[9]，每組各14只。漆黃素、SIRT1 抑制劑于造模前30 min ip 給藥，對(duì)照組、模型組ip 給予等量生理鹽水。

結(jié)合表3不同植被恢復(fù)模式AWCD的方差分析表明，刺槐+山杏+紫花苜蓿(0.94±0.44)和油松+旱柳+紅豆草混交林(0.65±0.38)土壤微生物利用碳源的量顯著高于自然恢復(fù)（P<0.01），而青海云杉+油松+河北楊和刺槐+油松混交模式下土壤微生物利用碳源的量顯著低于自然恢復(fù)（P<0.01），即刺槐+山杏+紫花苜?；旖涣滞寥牢⑸锎x活性最強(qiáng)，而刺槐+油松(0.45±0.32)和青海云杉+油松+河北楊混交林(0.26±0.18)相對(duì)于自然恢復(fù)土壤微生物代謝活性相對(duì)較弱。

參考姚草原等[10]方法，除對(duì)照組外，其余各組大鼠均采用氣管內(nèi)滴注脂多糖法建立模型。將大鼠麻醉后暴露氣管，向氣管內(nèi)滴注3 mg/kg 脂多糖100 μL，對(duì)照組滴注等量生理鹽水，隨后翻轉(zhuǎn)大鼠，使脂多糖均勻分布于肺中。若大鼠出現(xiàn)呼吸急促、少動(dòng)、精神萎靡等癥狀，則表明模型制備成功。相應(yīng)各組大鼠均造模成功。脂多糖留置6 h 后處死大鼠、采集樣本。

2.2 檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液（BALF）中炎性因子水平

1.2 研究方法 對(duì)照組予以鹽酸拉貝洛爾(江蘇迪賽諾制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H32026120)治療，即取100 mg的鹽酸拉貝洛爾加入500 ml濃度為5%的葡萄糖溶液中行靜脈滴注，1次/d，以7 d為1個(gè)療程。觀察組則予以復(fù)方丹參注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z33020177)聯(lián)合鹽酸拉貝洛爾治療。其中鹽酸拉貝洛爾治療方式與對(duì)照組一致，另取16 ml的復(fù)方丹參注射液加入500 ml濃度為5%的葡萄糖溶液中行靜脈滴注，1次/d，以7 d為1個(gè)療程。

2.3 測(cè)定肺組織濕/干質(zhì)量（W/D）比值

對(duì)于含有揮發(fā)油尤其是揮發(fā)油起功效作用的中成藥制劑的質(zhì)量控制是一大難點(diǎn)，特別是含多種揮發(fā)油的制劑，應(yīng)盡量采取體現(xiàn)揮發(fā)油質(zhì)量的指標(biāo)[27]。同時(shí)在了解揮發(fā)油的作用、組成成分、配伍規(guī)律的基礎(chǔ)上[28]，采用多指標(biāo)、多手段的質(zhì)量控制模式。另外，亟需加大力度制訂并完善揮發(fā)油在中成藥中的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系?！吨袊?guó)藥典》2015年版一部中只有7種中成藥制訂了其揮發(fā)油成分的含量要求，而對(duì)大部分含有揮發(fā)油的中成藥來說，其揮發(fā)油成分的含量未作要求。制藥企業(yè)還應(yīng)嚴(yán)格把控含有揮發(fā)油中成藥的儲(chǔ)存條件。由于揮發(fā)油具有易氧化、易揮發(fā)、不穩(wěn)定等性質(zhì)，藥品應(yīng)密封、遮光，置陰涼處保存，否則對(duì)其質(zhì)量有一定影響。

2.4 HE 染色觀察肺組織病理改變

急性呼吸窘迫綜合征是急性肺損傷的一種嚴(yán)重形式，可由感染、創(chuàng)傷、缺血再灌注等多種因素導(dǎo)致，其中由革蘭陰性菌主要成分脂多糖引發(fā)的感染是最常見的致病因素。急性呼吸窘迫綜合征常伴有彌漫性肺泡炎癥或肺泡間質(zhì)水腫綜合征，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致呼吸衰竭、休克、器官功能障礙綜合征，甚至死亡[11]。本研究中，脂多糖誘導(dǎo)的急性呼吸窘迫綜合征大鼠BALF 中IL-6、TNF-ɑ 水平升高，肺組織W/D 比值升高且發(fā)生明顯病理改變，表明急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織存在水腫、炎性損傷。

2.5 檢測(cè)肺組織中鐵死亡相關(guān)指標(biāo)水平

取保存的左肺組織，剪碎后進(jìn)行勻漿，離心收集上清，利用DHE 熒光探針檢測(cè)試劑盒、鐵檢測(cè)試劑盒、GSH 檢測(cè)試劑盒、MDA 檢測(cè)試劑盒分別測(cè)定上清中ROS、鐵、GSH、MDA 水平，根據(jù)說明書操作。

2.6 免疫印跡法檢測(cè)肺組織中SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)情況

與對(duì)照組比較，模型組的肺組織中ROS、鐵、MDA 水平升高，GSH 水平降低（P＜0.05）；與模型組比較，各劑量漆黃素組肺組織中ROS、鐵、MDA 水平降低，GSH 水平升高，且4 mg/kg 漆黃素組干預(yù)效果優(yōu)于1、2 mg/kg 漆黃素組（P＜0.05）；與4 mg/kg 漆黃素組比較，4 mg/kg 漆黃素＋SIRT1抑制劑組肺組織中ROS、鐵、MDA 水平升高，GSH水平降低（P＜0.05）。見表3。

2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

每組隨機(jī)選取7 只大鼠，常規(guī)取BALF，離心收集上清，利用ELISA 試劑盒測(cè)定上清中IL-6、TNF-α 水平，依據(jù)說明書操作。

3 結(jié)果

3.1 漆黃素對(duì)BALF 中炎性因子的影響

與對(duì)照組比較，模型組BALF 中IL-6、TNF-α水平升高（P＜0.05）；與模型組比較，漆黃素各劑量組BALF 中IL-6、TNF-α 水平降低，且漆黃素4 mg/kg 組低于1、2 mg/kg 組（P＜0.05）；與漆黃素4 mg/kg 組比較，漆黃素4 mg/kg＋SIRT1 抑制劑組BALF 中IL-6、TNF-α 水平均升高（P＜0.05），見表1。

表1 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠BALF 中炎性因子水平的影響（，n =7）Table 1 Effect of fisetin on levels of inflammatory factors in BALF in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

表1 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠BALF 中炎性因子水平的影響（，n =7）Table 1 Effect of fisetin on levels of inflammatory factors in BALF in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

與對(duì)照組比較：*P＜0.05；與模型組比較：#P＜0.05；與漆黃素1 mg?kg?1組比較：&P＜0.05；與漆黃素2 mg?kg?1 組比較：@P＜0.05；與漆黃素4 mg?kg?1 組比較：▲P＜0.05*P <0.05 vs control group;#P <0.05 vs model group;&P <0.05 vs fisetin 1 mg?kg?1 group;@P <0.05 vs fisetin 2 mg?kg?1 group;▲P <0.05 vs fisetin 4 mg?kg?1 group

3.2 漆黃素對(duì)肺組織W/D 比值和病理改變的影響

與對(duì)照組比較，模型組肺組織W/D 比值升高（P＜0.05），同時(shí)發(fā)生明顯病理改變，包括肺結(jié)構(gòu)破壞、肺泡間隔增厚、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺間質(zhì)和肺泡水腫等；經(jīng)各劑量漆黃素干預(yù)后，肺組織W/D 比值降低（P＜0.05），上述病理改變減輕，且4 mg/kg 漆黃素干預(yù)后減輕更明顯；在4 mg/kg 漆黃素干預(yù)的基礎(chǔ)上增加SIRT1 抑制劑干預(yù)后，4 mg/kg 漆黃素的改善作用被削弱。見圖1、表2。

圖1 各組肺組織病理改變（HE，×100）Fig.1 Pathological changes of lung tissues in each group (HE,×100)

表2 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織W/D 比值的影響（，n =7）Table 2 Effect of fisetin on W/D ratio of lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

表2 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織W/D 比值的影響（，n =7）Table 2 Effect of fisetin on W/D ratio of lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

與對(duì)照組比較：*P＜0.05；與模型組比較：#P＜0.05；與漆黃素1 mg?kg?1 組比較：&P＜0.05；與漆黃素2 mg?kg?1 組比較：@P＜0.05；與漆黃素4 mg?kg?1 組比較：▲P＜0.05*P <0.05 vs control group;#P <0.05 vs model group;&P <0.05 vs fisetin 1 mg?kg?1 group;@P <0.05 vs fisetin 2 mg?kg?1 group;▲P <0.05 vs fisetin 4 mg?kg?1 group

3.3 漆黃素對(duì)肺組織中鐵死亡相關(guān)指標(biāo)的影響

取保存的右肺組織，使用RIPA 裂解液提取總蛋白或利用核蛋白抽提試劑盒提取核蛋白，BCA 法測(cè)定其濃度，隨后變性處理，經(jīng)凝膠電泳、轉(zhuǎn)印、封閉后孵育兔源一抗anti-β-actin、anti-SIRT1、anti-Nrf2、anti-histone H3，而后孵育山羊源二抗，最后滴加ECL 發(fā)光液，置于凝膠成像分析儀中拍照，利用Image J 軟件進(jìn)行灰度分析。

在注重質(zhì)量管理的同時(shí)，也要提高對(duì)安全管理的重視程度，確保PPP投資型項(xiàng)目安全管理效果。制定完善的安全管理制度，嚴(yán)格落實(shí)安全管理責(zé)任制，明確每個(gè)施工班組和施工人員的安全管理職責(zé)[4]，讓他們認(rèn)真遵守施工安全管理制度，提升安全管理水平，避免發(fā)生安全事故，讓PPP投資型項(xiàng)目建設(shè)取得更好效果。

表3 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中鐵死亡相關(guān)指標(biāo)的影響（，n =7）Table 3 Effect of fisetin on ferroptosis-related indicators in lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

表3 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中鐵死亡相關(guān)指標(biāo)的影響（，n =7）Table 3 Effect of fisetin on ferroptosis-related indicators in lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

與對(duì)照組比較：*P＜0.05；與模型組比較：#P＜0.05；與漆黃素1 mg?kg?1組比較：&P＜0.05；與漆黃素2 mg?kg?1 組比較：@P＜0.05；與漆黃素4 mg?kg?1 組比較：▲P＜0.05*P <0.05 vs control group;#P <0.05 vs model group;&P <0.05 vs fisetin 1 mg?kg?1 group;@P <0.05 vs fisetin 2 mg?kg?1 group;▲P <0.05 vs fisetin 4 mg?kg?1 group

3.4 漆黃素對(duì)肺組織中SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響

4 mg/kg 漆黃素對(duì)鐵死亡相關(guān)指標(biāo)的改善效果最佳，故選取4 mg/kg 漆黃素探究其作用機(jī)制。與對(duì)照組比較，模型組肺組織中SIRT1、核Nrf2 蛋白水平降低（P＜0.05）；與模型組比較，4 mg/kg 漆黃素組肺組織中SIRT1、核Nrf2 蛋白水平升高（P＜0.05）；與4 mg/kg 漆黃素組相比較，4 mg/kg 漆黃素＋SIRT1 抑制劑組肺組織中SIRT1、核Nrf2 蛋白水平降低（P＜0.05）。見圖2、表4。

圖2 各組肺組織中SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平Fig.2 SIRT1/Nrf2 signaling pathway-related protein expression levels in lung tissues of each group

表4 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響（，n =7）Table 4 Effect of fisetin on expression levels of SIRT1/Nrf2 signaling pathway-related proteins in lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

表4 漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響（，n =7）Table 4 Effect of fisetin on expression levels of SIRT1/Nrf2 signaling pathway-related proteins in lung tissues in acute respiratory distress syndrome rats (,n =7)

與對(duì)照組比較：*P＜0.05；與模型組比較：#P＜0.05；與漆黃素4 mg?kg?1組比較：▲P＜0.05*P <0.05 vs control group;#P <0.05 vs model group;▲P <0.05 vs fisetin 4 mg?kg?1 group

4 討論

將每組剩余7 只大鼠處死之后直接取右下肺組織，置于4%多聚甲醛中固定24 h，隨后脫水、石蠟包埋，制作4 μm 厚的切片，烤干后進(jìn)行常規(guī)HE 染色，于光學(xué)顯微鏡下觀察肺組織病理改變。將左肺組織、剩余的右肺組織保存于?80 ℃?zhèn)溆谩?/p>

取BALF 之后，取整個(gè)肺組織稱定質(zhì)量，為濕質(zhì)量，然后將其放入60 ℃烘箱中脫水，24 h 后再次稱定質(zhì)量為干質(zhì)量，計(jì)算W/D 比值。

越來越多的證據(jù)表明，鐵死亡在急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的病理過程中發(fā)揮重要作用，如Li 等[12]、Dong 等[13]報(bào)道鐵死亡參與腸缺血/再灌注誘導(dǎo)的急性肺損傷；此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，抑制鐵死亡能夠減輕海水溺水或脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷[14-15]。鐵死亡是一種鐵相關(guān)的程序性細(xì)胞死亡，不同于其他類型的細(xì)胞死亡，如凋亡、壞死和自噬等，其機(jī)制主要涉及細(xì)胞內(nèi)鐵超載和ROS 積累導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化，從而產(chǎn)生大量脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA，此外，抗氧化物如GSH 表達(dá)量的降低也是導(dǎo)致鐵死亡的重要機(jī)制[16-17]。本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，急性呼吸窘迫綜合征組大鼠肺組織中ROS、鐵、MDA 水平升高，GSH 水平降低，表明急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中發(fā)生了鐵死亡，抑制鐵死亡可為急性呼吸窘迫綜合征的治療提供一種有前景的策略。

目前急性呼吸窘迫綜合征的治療僅限于支持性措施，直接針對(duì)急性呼吸窘迫綜合征病理生理的治療手段較少，對(duì)急性呼吸窘迫綜合征不良預(yù)后改善效果不理想[2]。漆黃素是一種黃酮類化合物，已被研究證實(shí)具有強(qiáng)抗炎、抗氧化活性。Hada 等[18]報(bào)道漆黃素能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)；Jiang 等[19]報(bào)道漆黃素可減輕子宮內(nèi)膜炎小鼠的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)。此外，F(xiàn)eng 等[8]報(bào)道漆黃素能夠抑制脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征大鼠BALF 中炎性因子釋放，減輕肺組織損傷。本研究結(jié)果顯示，急性呼吸窘迫綜合征大鼠經(jīng)1、2、4 mg/kg 漆黃素干預(yù)后，其BALF 中IL-6、TNFα 水平降低，肺組織W/D 比值降低、病理改變減輕，且肺組織中ROS、鐵、MDA 水平降低，GSH 水平升高，且4 mg/kg 漆黃素干預(yù)改善更顯著，表明漆黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性呼吸窘迫綜合征有保護(hù)作用，能夠改善鐵死亡，且4 mg/kg 漆黃素效果更佳，故選取4 mg/kg 漆黃素探究其作用機(jī)制。

此外，為了進(jìn)一步發(fā)揮農(nóng)田水利工程的灌溉效益，提高水資源利用效率，還應(yīng)該重視對(duì)基礎(chǔ)水利設(shè)施的建設(shè)和保護(hù)，要進(jìn)一步劃分責(zé)任，明確責(zé)任方，確保農(nóng)田水利工程運(yùn)行完好，不存在開裂滲透現(xiàn)象。同時(shí)，還應(yīng)該進(jìn)一步對(duì)照大規(guī)模的灌溉區(qū)域，實(shí)行統(tǒng)一化的管理，實(shí)現(xiàn)農(nóng)戶之間的有效監(jiān)督，避免各自為政，使得先進(jìn)的節(jié)水灌溉技術(shù)難以在廣大基層地區(qū)推廣應(yīng)用。

在調(diào)控鐵死亡的眾多信號(hào)通路中，SIRT1/Nrf2信號(hào)通路越來越受到研究者的重視。SIRT1 是一種去乙酰化酶，與細(xì)胞代謝、衰老、凋亡、炎癥和氧化應(yīng)激等生物學(xué)過程密切相關(guān)，其功能的發(fā)揮在很大程度上依賴于活化Nrf2，通過促使Nrf2 從細(xì)胞質(zhì)移位至細(xì)胞核大量累積，進(jìn)而激活核內(nèi)相關(guān)蛋白的表達(dá)而發(fā)揮作用。已有大量研究表明，激活SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路能夠減少ROS 的產(chǎn)生、激活抗氧化物的產(chǎn)生，從而減輕鐵死亡[20-21]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)4 mg/kg 漆黃素干預(yù)后，急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織中SIRT1、核Nrf2 蛋白水平升高，提示漆黃素改善急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織鐵死亡的活性可能與激活SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路有關(guān)。在4 mg/kg 漆黃素干預(yù)的基礎(chǔ)上增加SIRT1抑制劑干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，漆黃素對(duì)急性呼吸窘迫綜合征大鼠肺組織鐵死亡的改善作用被削弱，表明SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路可能是漆黃素的作用機(jī)制。

綜上所述，漆黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性呼吸窘迫綜合征有保護(hù)作用，能夠改善鐵死亡，可能是通過激活SIRT1/Nrf2 信號(hào)通路而實(shí)現(xiàn)，因此希望本研究能為漆黃素成為治療急性呼吸窘迫綜合征的候選藥物提供參考。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突