［摘要］目的研究腫瘤壞死因子α（TNF-α）、miRNA-107和血清胃蛋白酶原（PG）Ⅰ/Ⅱ聯(lián)合檢測對胃癌的診斷價值。方法選取2018年6月～2019年6月確診為胃癌的患者51例為胃癌組（早期胃癌23例、進展期胃癌28例），并選取同期就診的60例良性胃病患者（良性胃病組）及60例健康體檢者（健康組）。檢測三組miRNA-107、TNF-α和PGⅠ、PGⅡ水平，以miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ為自變量，以是否發(fā)生胃癌為因變量進行多因素logistic分析，建立聯(lián)合檢測的預測模型，以ROC曲線評估各指標對胃癌的診斷效能。結(jié)果各組miRNA-107、TNF-α及PGⅠ/Ⅱ比較，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。胃癌組PGⅠ/Ⅱ水平低于健康組和良性胃病組（Plt;0.05），miRNA-107、TNF-α水平高于健康組和良性胃病組（Plt;0.05）；良性胃病組PGⅠ/Ⅱ水平低于健康組（Plt;0.05），miRNA-107、TNF-α水平高于健康組（Plt;0.05）。胃癌進展期PGⅠ/Ⅱ水平低于胃癌早期（Plt;0.05），miRNA-107與TNF-α水平高于胃癌早期（Plt;0.05）。ROC分析結(jié)果顯示：三者聯(lián)合診斷的曲線下面積最高，其診斷效能高于各指標的單獨檢測（Plt;0.05）。結(jié)論PGⅠ/Ⅱ指標降低和miRNA-107、TNF-α水平升高均與胃癌的發(fā)生發(fā)展存在密切關聯(lián)，三者聯(lián)合檢測可有效提高胃癌診斷的準確度和靈敏度，對早期胃癌診斷具有重要臨床價值。

［關鍵詞］腫瘤標志物；胃癌；聯(lián)合檢測；診斷

doi：10.3969/j.issn.1674-7593.2023.05.017

the Value of Combined Detection of miRNA-107，TNF-α and Serum PepsinogenⅠ/Ⅱ in the Diagnosis of Gastric Cancer

Li Jianfeng1，Jiang Junlin2

1Linpu Community Healthcare Center，Xiaoshan District，Hangzhou，Hangzhou311215;2Xiaoshan First People's Hospital，Hangzhou，Hangzhou311215

［Abstract］ObjectiveTo investigate the diagnostic value of combined detection of tumor necrosis factor-α（TNF-α），miRNA-107 and serum pepsinogen（PG）Ⅰ/Ⅱ in gastric cancer.Methods51 patients diagnosed with gastric cancer from June 2018 to June 2019 were selected as gastric cancer group（23 cases of early gastric cancer and 28 cases of advanced gastric cancer），and 60 patients with benign gastric disease（benign gastric disease group） and 60 healthy subjects（healthy group） who visited the hospital during the same period were selected.The levels of miRNA-107，TNF-α，PGⅠ and PGⅡ in the three groups were measured，and multivariate logistic analysis was performed with miRNA-107，TNF-α and PGⅠ/Ⅱ as independent variables and the presence or absence of gastric cancer as dependent variable to establish a prediction model for combined detection，and ROC curves were used to assess the diagnostic efficacy of each index for gastric cancer.ResultsThere were significant differences in miRNA-107，TNF-α and PGⅠ/Ⅱ among the groups（Plt;0.05）.In gastric cancer group，the levels of PGⅠ/Ⅱ were lower than those in healthy group and benign gastropathy group（Plt;0.05），and the levels of miRNA-107 and TNF-α were higher than those in healthy group and benign gastropathy group（Plt;0.05）;the levels of PGⅠ/Ⅱ in benign gastropathy group were lower than those in healthy group（Plt;0.05），and the levels of miRNA-107 and TNF-α were higher than those in healthy group（Plt;0.05）.PG Ⅰ/Ⅱ levels in advanced gastric cancer were lower than those in early gastric cancer（Plt;0.05），and miRNA-107 and TNF-α levels were higher than those in early gastric cancer（Plt;0.05）.ROC analysis showed that the area under the curve of the combined diagnosis of the three was the highest，and its diagnostic efficacy was higher than that of the single detection method of each index（Plt;0.05）.ConclusionDecreased PGⅠ/Ⅱ index and increased levels of miRNA-107 and TNF-α are closely related to the occurrence and development of gastric cancer，and the combined detection of the three can effectively improve the accuracy and sensitivity of gastric cancer diagnosis and has important clinical value for the diagnosis of early gastric cancer.

［Key words］Tumor markers;Gastric cancer;Combined detection;Diagnosis

胃癌屬臨床常見惡性腫瘤，其發(fā)病機制與個人生活習慣、遺傳因素及幽門螺桿菌等因素有關，但目前已有研究證實東部沿海地區(qū)和西北地區(qū)胃癌發(fā)生率明顯高于南方［1］。研究發(fā)現(xiàn)，在我國胃癌多好發(fā)于50歲以上人群，發(fā)病早期治愈率較高，但晚期5年生存率僅為20%［2］。有效的腫瘤標志物檢查可提高臨床確診率，因此早期尋找到有效的防治和診斷方案可增加患者生存率，還可降低患者痛苦增加胃癌篩查敏感性［3］。miRNA-107、腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、血清胃蛋白酶原（Pepsinogen，PG）Ⅰ/Ⅱ這3個指標單獨檢測均被證實可用于胃癌的診斷［4］。但三者聯(lián)合檢測能否提高診斷效能目前尚無定論，本研究旨在通過分析miRNA-107、TNF-α、PGⅠ/Ⅱ聯(lián)合檢測對胃癌診斷效能的影響，以期為胃癌的診斷提供新的思路。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2018年6月～2019年6月收治的51例胃癌患者為胃癌組（早期胃癌23例、進展期胃癌28例），并選取同期就診的良性胃病患者60例為良性胃病組，健康體檢者60例為健康組。胃癌組男32例，女19例，年齡61～77歲，平均（67.08±8.11）歲；良性胃病組男34例，女26例，年齡62～75歲，平均（67.13±7.82）歲；健康組男33例，女27例，年齡60～75歲，平均（66.37±9.25）歲。三組臨床一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。納入標準：①胃癌患者經(jīng)病理學檢查確診；②良性胃病組患者經(jīng)胃鏡檢查確診；③患者意識清醒，可配合相關檢查與治療；④簽署知情同意書。排除標準：①入組前接受過相關治療；②合并有心、肝、腎等其他重要臟器疾病；③合并有其他惡性腫瘤。本研究經(jīng)醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1材料ELISA試劑盒由北京美康生物技術研究中心提供、酶標儀由奧地利Anthos公司提供。TNF-α采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒由Genzyme公司提供。PGⅠ、Ⅱ測定采用羅氏cobas e411電化學發(fā)光分析儀及配套試劑、配套校準品和質(zhì)控品。

1.2.2檢測方法所有對象空腹抽取靜脈血3 mL，肝素抗凝，30 min內(nèi)常規(guī)離心，血清標本于-80℃冰箱保存待用，操作步驟均按試劑說明書進行。采用雙抗體夾心ELISA法測定TNF-α水平，利用化學發(fā)光分析法測定PGⅠ、PGⅡ水平。使用RT-PCR熒光定量聚合酶鏈式反應檢測miRNA-107水平，根據(jù)GenBank設計引物（a：正義引物；b：反義引物），miRNA-107-Fa：GTGAAATGTTTAGGACCACTAGAA，miRNA-107-Rb：GCTGTCAACGATACGCTACGT；U6 RNA-Fa：CGCTTCGGCAGCACATATAC，U6 RNA-Rb：TTCACGAATTTGCGTGTCAT。

1.3統(tǒng)計學方法

應用SPSS15.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布計量資料采用±s表示，多組間比較采用單因素方差分析（任意兩組比較采用LSD-t檢驗）；計數(shù)資料采用χ2檢驗；采用多因素logistic回歸分析建立聯(lián)合檢測模型，以ROC曲線評估各指標對胃癌的診斷效能，曲線下面積之比行Z檢驗，Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1各組miRNA-107、TNF-α及PGⅠ/Ⅱ比較

各組miRNA-107、TNF-α及PGⅠ/Ⅱ比較，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。胃癌組PGⅠ/Ⅱ低于健康組和良性胃病組（Plt;0.05），miRNA-107、TNF-α水平高于健康組和良性胃病組（Plt;0.05）；良性胃病組PGⅠ/Ⅱ低于健康組（Plt;0.05），miRNA-107、TNF-α水平高于健康組（Plt;0.05），見表1。

2.2胃癌組早期與進展期miRNA-107、TNF-α及PGⅠ/Ⅱ比較

胃癌進展期PGⅠ/Ⅱ低于胃癌早期，miRNA-107與TNF-α高于胃癌早期，差異均有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表2。

2.3miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ?qū)ξ赴┑脑\斷價值

以miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ為自變量，以是否發(fā)生胃癌為因變量進行多因素logistic分析，建立聯(lián)合檢測的預測模型，見表3。miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ聯(lián)合檢測使用logistic回歸分析預測概率作為預測值，ROC分析結(jié)果顯示：三者聯(lián)合診斷的曲線下面積最高，其診斷效能均高于各指標的單獨檢測，見表4、圖1。

3討論

世界衛(wèi)生組織報道2018年全球共計新發(fā)胃癌患者為100萬例，在諸多癌癥中胃癌發(fā)病率排第5，死亡率排第3，且男性發(fā)病率高于女性［5-6］。研究發(fā)現(xiàn)我國胃癌發(fā)病率占全球的40%以上，且僅2014年新發(fā)胃癌41萬例，占諸多癌癥的10.79%［7-8］。早期確診胃癌治療5～10年生存率高達95%，因此早期確診可有效提高患者的生存率，且有效的腫瘤標志物對患者病情的判斷和臨床預后具有重要應用價值［9-10］。PG主要由胃底腺細胞合成，經(jīng)胃酸或已存在活性PG直接作用于胃蛋白酶，PG在臨床中分為PGⅠ和PGⅡ，其中PGⅠ可反映胃酸分泌是否升高，或胃黏膜腺體萎縮PGⅠ水平則開始逐漸下降，PGⅡ水平升高與異型增殖、胃上皮化生或胃底線管萎縮等存在密切關聯(lián)，而PGⅠ/Ⅱ比值水平降低則與胃黏膜萎縮進展有關，當胃黏膜發(fā)生病理變化時，血清PG含量也隨之改變，被稱為胃黏膜的“血清學活檢”［11-12］。近年來臨床上胃癌的檢測大多先采用PG檢查，再依據(jù)所得結(jié)果進行胃鏡檢查，兩者聯(lián)合檢查有效提高了患者的5年生存率［13］。本研究中胃癌組組PGⅠ/Ⅱ低于健康組和良性胃病組（Plt;0.05），證實胃癌發(fā)病與PGⅠ/Ⅱ水平含量存在明顯關聯(lián)。

研究表明，當胃癌患者胃底腺黏膜出現(xiàn)病變時會導致胃底腺主細胞減少，造成PGⅠ分泌能力降低［14］。有研究發(fā)現(xiàn)，PGⅠ降低時與致癌誘導因子有關，當基因發(fā)生突變時導致PGⅠ分泌能力喪失從而造成PGⅠ降低；而PGⅡ主要基于成熟腺細胞中所產(chǎn)生與癌細胞分化無明顯相關性［15］。胃癌在早期初篩時應用PG檢測具有重要的臨床應用價值，但單獨檢測時其敏感性較低。有研究發(fā)現(xiàn)miRNA-107與胃癌的發(fā)生發(fā)展存在明顯相關性，且隨著病情的進展miRNA-107水平會出現(xiàn)異常表達［16-17］。TNF-α是由激活淋巴細胞和巨噬細胞分泌形成的，此指標具備廣泛的生物學活性。TNF-α在機體內(nèi)大量釋放會嚴重破壞免疫平衡，且TNF-α可通過上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-9等起到促腫瘤生長和轉(zhuǎn)移。為了提高早期胃癌診斷率，本實驗將miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ聯(lián)合檢測顯示其三者聯(lián)合有較高的靈敏度和準確性。曲線下面積明顯高于單獨檢測結(jié)果。本研究中，胃癌進展期患者miRNA-107與TNF-α水平明顯高于早期者，且PGⅠ/Ⅱ水平低于早期患者，說明3種腫瘤標志物與胃癌的發(fā)展存在明顯關聯(lián)，此3項標志物聯(lián)合檢測可起到互補作用，有效提高了胃癌的確診率。因miRNA-107、TNF-α和PGⅠ/Ⅱ標志物缺乏對腫瘤分型和發(fā)生部位的特異性，因此應結(jié)合臨床綜合數(shù)據(jù)結(jié)果進行分析確診。

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（2020-08-06收稿）