盧維濤，王加存，宋全勝

臨沂金鑼醫(yī)院腎病科，山東臨沂 276000

糖尿病是一種常見(jiàn)的臨床疾病，它是由多種原因引起的血糖代謝紊亂。長(zhǎng)期血糖升高對(duì)身體非常有害，可能導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥[1]。常見(jiàn)的并發(fā)癥包括微血管疾病、神經(jīng)病變、腎病和眼底疾病。糖尿病腎病是一種由于糖尿病所引起的腎臟病變，是糖尿病患者比較常見(jiàn)的并發(fā)癥，易引起腎功能衰竭，增加患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于糖尿病腎病做到早期預(yù)防并加強(qiáng)規(guī)范化慢性病管理至關(guān)重要[2]。糖尿病腎病患者發(fā)病早期癥狀表現(xiàn)并不明顯，隨病情進(jìn)展機(jī)體代謝紊亂進(jìn)而威脅生命健康，所以對(duì)于糖尿病腎病做到早期預(yù)防和早期診斷及治療至關(guān)重要[3]?；诖?，本文選取2021年9 月—2022年11 月于臨沂金鑼醫(yī)院接受早期檢測(cè)的98 例糖尿病腎病患者為研究對(duì)象，分析尿蛋白和尿微量白蛋白檢測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院接受早期檢測(cè)的98 例糖尿病腎病患者作為研究組，其中男50 例，女48 例；年齡40～60歲，平均（54.17±5.59）歲。選擇同期98 名健康體檢者作為參照組，其中男49 名，女49 名；年齡38～62歲，平均（55.19±5.59）歲。兩組研究對(duì)象的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性?；颊呒凹覍僦獣源舜窝芯浚栽竻⒓?；本研究經(jīng)過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究組為糖尿病腎病患者；②無(wú)其他合并癥者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并腫瘤性疾病者；②合并血液系統(tǒng)疾病者；③合并免疫系統(tǒng)疾病者。

1.3 方法

兩組研究對(duì)象均實(shí)施尿蛋白和尿微量白蛋白檢測(cè)。儀器設(shè)備包括尿液分析儀及其配套試劑，用于尿常規(guī)的檢驗(yàn)中；以免疫比濁法檢測(cè)尿微量白蛋白。兩組受試者均需要采集10 mL 中段尿液，并將其分裝至a 試管和b 試管中，其中a 試管內(nèi)尿液樣本需離心，時(shí)間為5 min，3 000 r∕min，檢測(cè)尿微量白蛋白，檢測(cè)結(jié)果判定：尿微量白蛋白＜31 mg∕L 即為陰性，尿微量白蛋白≥31 mg∕L 為陽(yáng)性。b 試管內(nèi)尿液樣本應(yīng)用于尿蛋白檢驗(yàn)，尿蛋白的檢測(cè)結(jié)果判定：尿蛋白≤150 mg∕24 h即為陰性，150 mg∕24 h＜尿蛋白＜3 500 mg∕24 h 為蛋白尿，≥3 500 mg∕24 h 為大量蛋白尿，即可作為腎病綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組檢測(cè)結(jié)果，包括尿微量白蛋白、尿蛋白水平。比較尿蛋白和尿微量白蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢驗(yàn)的特異度、靈敏度及準(zhǔn)確性。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，組間差異比較進(jìn)行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或(%)表示，組間差異比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象的尿蛋白和尿微量白蛋白水平比較

研究組的尿蛋白和尿微量白蛋白水平高于參照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象尿蛋白和尿微量白蛋白水平比較(±s)

表1 兩組研究對(duì)象尿蛋白和尿微量白蛋白水平比較(±s)

組別研究組（n=98）參照組（n=98）t 值P 值尿微量白蛋白（mg∕24 h）42.51±25.68 7.29±1.62 13.550＜0.001尿蛋白（g∕h）96.37±43.21 0.13±0.02 22.049＜0.001

2.2 尿蛋白和尿微量白蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢驗(yàn)的診斷效能比較

尿蛋白和尿微量白蛋白聯(lián)合檢驗(yàn)的靈敏度、特異度與準(zhǔn)確性高于單獨(dú)檢測(cè)，且尿蛋白檢測(cè)的靈敏度、特異度與準(zhǔn)確性高于尿微量白蛋白和尿蛋白單一檢測(cè)。見(jiàn)表2。

表2 尿蛋白和尿微量白蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢驗(yàn)的診斷效能比較

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病患者重要的并發(fā)癥之一，在我國(guó)發(fā)病率不斷增高，由于代謝紊亂會(huì)發(fā)展為終末期腎臟疾病，相比其他腎臟疾病更加難以治療[4]。糖尿病腎病的發(fā)生與以下因素有密切的關(guān)系：①腎小球血流動(dòng)力學(xué)改變。腎小球血流動(dòng)力學(xué)改變是糖尿病腎病發(fā)展的重要因素，腎小球損害會(huì)加速腎小球硬化及腎功能衰竭，對(duì)患者自身調(diào)節(jié)產(chǎn)生嚴(yán)重阻礙[5]。馬統(tǒng)雄[6]學(xué)者認(rèn)為，腎小球血流動(dòng)力學(xué)改變是糖尿病腎病的主要特征，腎小管上皮細(xì)胞受到影響會(huì)發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)等多重反應(yīng)，分泌多種細(xì)胞因子，導(dǎo)致糖尿病腎病的發(fā)生與發(fā)展。肖建波[7]學(xué)者認(rèn)為，腎小球血流動(dòng)力學(xué)可有效監(jiān)測(cè)糖尿病腎病患者內(nèi)瘺吻合口徑，進(jìn)行疾病探查，而且在維護(hù)血管通路及監(jiān)測(cè)方面具有顯著效果。②足細(xì)胞損傷。足細(xì)胞損傷是指腎小球基膜出現(xiàn)終末期分化，足突突起所致。足細(xì)胞具有特殊結(jié)構(gòu)，特殊功能為過(guò)濾蛋白分子屏障、電荷屏障、抵抗腎小球內(nèi)壓力、維持腎小球毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)、維持腎小球基底膜（glomerular basement membrane, GBM）完整性及腎小球內(nèi)皮細(xì)胞功能完整性等，是腎小球?yàn)V過(guò)膜的最后屏障，在保護(hù)腎臟方面發(fā)揮著積極作用[8]。張淑敏[9]學(xué)者認(rèn)為，足細(xì)胞損傷是糖尿病腎病產(chǎn)生的重要原因，極大程度影響了疾病調(diào)控與進(jìn)展。足細(xì)胞損傷會(huì)加重患者糖尿病腎病嚴(yán)重程度，因此降低足細(xì)胞損傷程度是糖尿病腎病治療的重要措施。

一般情況下，在健康的成人尿液中排出蛋白質(zhì)總數(shù)約為（0.08±0.024）g∕24 h，可包括少部分來(lái)源于腎小球的血漿蛋白，如白蛋白、免疫球蛋白β2-微球蛋白以及由腎小管細(xì)胞所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，如Tamm-Horsfall 蛋白質(zhì)及一些腎臟衍生蛋白等，以常規(guī)方式檢查為陰性，但在一些特殊生理狀況下也可發(fā)生短暫性增高[10]。當(dāng)腎臟發(fā)生腎小球、腎小管損害時(shí)，尿蛋白常出現(xiàn)異常增高現(xiàn)象。故對(duì)尿蛋白的有無(wú)、蛋白質(zhì)濃度的高低及其蛋白質(zhì)組成的分析測(cè)定，對(duì)于腎功能疾病的診斷、鑒別診斷以及病情的嚴(yán)重程度、診斷療效評(píng)估和預(yù)后確定都有著重要意義。對(duì)尿蛋白定性的檢查方法也比較多，主要包括：①磺基水楊酸法，又名磺硫酸法[11]，基本原理是生物堿試品在酸性環(huán)境下，酸和陽(yáng)離子與蛋白質(zhì)融合形成不溶性的蛋白鹽。本法操作簡(jiǎn)單，敏感性較高，尿液中的白蛋白、球蛋白、糖蛋白、本-周蛋白等都可為陽(yáng)性。缺點(diǎn)則是由于各種原因可致結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。②加熱醋酸法[12]，原理為在酸性條件下加熱或煮沸使蛋白質(zhì)變性并沉淀。本方法的影響因素較小，且結(jié)論可信，是目前對(duì)尿蛋白定性檢驗(yàn)最可靠的方式。缺點(diǎn)則是敏感度稍低，操作也較復(fù)雜，且無(wú)法規(guī)范。③干生化試紙帶法，由于尿液自動(dòng)分析儀的廣泛應(yīng)用，尿蛋白干燥生化試紙帶法是目前在臨床上使用的較為廣泛的檢驗(yàn)方式[13]。其基本原理是：通過(guò)用試帶模塊將指示器溴酚藍(lán)的過(guò)氧負(fù)離子和尿液蛋白質(zhì)氨基酸中的氨基置換，使指示器的黃色變?yōu)辄S綠色或青綠色，顏色改變的程度與蛋白質(zhì)（主要為白蛋白）濃度的比率相關(guān)。該技術(shù)簡(jiǎn)單、快捷且適合大量的檢驗(yàn)，不足之處為敏感性較低，對(duì)血液中的球蛋白、黏蛋白和本-周蛋白均有敏感性，并易受血液pH、鹽類成分、藥物和蛋白質(zhì)濃度等因素干擾而出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。

尿微量白蛋白在正常人血液和尿液中很少出現(xiàn)，如果尿液中顯著增多，表示腎臟發(fā)生蛋白質(zhì)滲漏情況。糖化血紅蛋白主要由血糖與紅細(xì)胞結(jié)合而成，兩者之間將出現(xiàn)不可逆的反應(yīng)，其存活于人體血液的時(shí)間大概為120 d，所以通過(guò)尿常規(guī)能有效檢測(cè)120 d 內(nèi)的血糖濃度，其可以特異性地反應(yīng)葡萄糖水平[14]。當(dāng)人體在高糖環(huán)境下，諸多蛋白質(zhì)因體內(nèi)非酶糖基化反應(yīng)加速致使蛋白質(zhì)出現(xiàn)不可逆性糖化，同時(shí)糖化功能發(fā)生異常，將嚴(yán)重?fù)p害糖尿病患者的器官。其特點(diǎn)主要是反映血糖控制狀況，進(jìn)食后實(shí)施測(cè)定，形成糖化血紅蛋白的過(guò)程緩慢，在每次檢驗(yàn)血糖時(shí)，只能代表實(shí)時(shí)的血糖水平，無(wú)法表示以往血糖的變化，該方法可以提示8 周或者12 周之前的血糖情況。通常尿液中含有一定量的蛋白質(zhì)，但含量很少，因此尿液中的蛋白質(zhì)不一定意味著蛋白尿，在一定范圍內(nèi)蛋白質(zhì)含量就是尿中的蛋白質(zhì)。目前臨床定義尿液中蛋白質(zhì)含量＞150 mg 為“蛋白尿”。尿常規(guī)檢查時(shí)，要將試紙放在尿中檢查，如果尿液中的蛋白質(zhì)太多，試紙就會(huì)變色，得出結(jié)果：（-）為陰性、（+-）為微量、（+）（++）、（+++）、（++++）為尿液中合不同程度蛋白。血清素是一種蛋白質(zhì)成分，約占血漿總蛋白的60%。白蛋白有負(fù)電性，半徑為3.6 nm。在正常情況下，腎小球基底膜有5.5 nm 的平均孔徑，并且均勻地附著一層負(fù)電荷。一般情況下，白蛋白通過(guò)腎小球基底膜的概率非常小，只有小部分為白蛋白，但近90%的白蛋白在近曲小管附近重吸收。結(jié)果表明，人尿中僅殘留少量的白蛋白。

本文研究結(jié)果表明，研究組的尿微量白蛋白水平高于參照組[（42.51±25.68）mg∕24 h vs （7.29±1.62）mg∕24 h]（P＜0.05）；翟偉偉[15]學(xué)者研究結(jié)果表明，糖尿病腎病患者尿微量白蛋白水平高于正常人群[（7.11±1.02）mg∕24 h vs（43.15±20.68）mg∕24 h]（P＜0.05）；本文研究結(jié)果表明，尿微量白蛋白+尿蛋白檢測(cè)靈敏度、特異度與準(zhǔn)確性較高，分別為71.43%、87.76%、79.59%。鄧志航等[16]學(xué)者認(rèn)為，尿微量白蛋白+尿蛋白檢測(cè)靈敏度為38.02%、特異度為80.16%、準(zhǔn)確性為79.59%，與本文結(jié)果類似。本文結(jié)果表明，與單一檢測(cè)方式對(duì)比，尿微量白蛋白數(shù)據(jù)顯著提高。究其原因，尿白蛋白是腎臟損害的早期臨床癥狀，白蛋白分子作為一種較小的蛋白質(zhì)，吸收于近曲小管，當(dāng)損傷腎小球時(shí)，蛋白質(zhì)吸收率低于濾過(guò)率將使尿液中產(chǎn)生微量白蛋白，尿微量白蛋白屬于腎臟損傷的早期征兆，尿微量白蛋白作為功能各異、種類繁多、數(shù)目復(fù)雜的泌尿系統(tǒng)的排泄產(chǎn)物，包含微球蛋白、尿微量蛋白、免疫球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，因此該檢測(cè)方式便于早期反應(yīng)腎臟受損和早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病的一項(xiàng)重要指標(biāo)。尿微量白蛋白由肝內(nèi)產(chǎn)生，尿液中濃度降低，腎小球出現(xiàn)疾病后，尿微量白蛋白含量才會(huì)出現(xiàn)異常，所以可以用來(lái)輔助診斷腎功能損害，同時(shí)臨床檢驗(yàn)中應(yīng)當(dāng)盡可能地選擇聯(lián)合檢測(cè)手段。

綜上所述，將尿蛋白結(jié)合尿微量白蛋白檢測(cè)應(yīng)用于糖尿病腎病檢驗(yàn)中的價(jià)值顯著，可作為糖尿病腎病的早期檢測(cè)手段，值得推廣。