李 理 張宇沖 劉金陽(yáng) 張學(xué)峰 單曉雪 廖子龍 劉靖椿 陳晉瑩

(1 中儲(chǔ)糧質(zhì)檢中心有限公司 610000)(2 中國(guó)儲(chǔ)備糧管理集團(tuán)有限公司黑龍江分公司 150006)(3 中儲(chǔ)糧成都儲(chǔ)藏研究院有限公司 610000)

撲草凈,又名割草佳,分子式為C10H19N5S[1],難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,在中性、微酸性或微堿性介質(zhì)中能夠穩(wěn)定存在,遇強(qiáng)堿和強(qiáng)酸則比較容易分解[2]。撲草凈是我國(guó)現(xiàn)行登記范圍內(nèi)允許使用的一種選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型除草劑[3-4],被廣泛用于稻谷、小麥、棉花等農(nóng)作物,可防除雜草的生長(zhǎng)[5]。由于撲草凈的廣泛使用導(dǎo)致其在農(nóng)作物中的殘留,通過(guò)食物鏈可以直接對(duì)人類身體造成健康危害,因此,建立快速、靈敏且準(zhǔn)確的撲草凈殘留檢測(cè)技術(shù)顯得十分有必要[6]。目前,國(guó)內(nèi)外報(bào)道的關(guān)于食品中撲草凈殘留量的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法(FID檢測(cè)器)[7]、液相色譜法[8]、氣相色譜-質(zhì)譜法[9]、液相色譜-質(zhì)譜法[10]。本文運(yùn)用氣相色譜-質(zhì)譜法(SN/T 1968-2007)對(duì)大米中的撲草凈殘留量進(jìn)行了測(cè)定,驗(yàn)證了該方法測(cè)定大米中撲草凈的殘留量在實(shí)驗(yàn)室中的適用性,為實(shí)際工作中運(yùn)用此方法檢測(cè)大米中撲草凈的殘留量奠定了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

水:蒸餾水;乙腈、正己烷(均為分析純,色譜純);乙酸乙酯、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉(均為分析純);無(wú)水硫酸鈉(在650℃灼燒4 h,貯于干燥器中,冷卻后備用);磷酸鹽緩沖溶液(濃度為0.5 mol/L,pH 7.0,制備方法:稱取52.7 g磷酸氫二鉀和30.2 g磷酸二氫鉀,加水1 L溶解,用2 mol/L氫氧化鈉調(diào)pH值至7.0);乙酸乙酯+正己烷混合溶液(1+4,制備方法:量取20 mL乙酸乙酯和80 mL正己烷,混勻);撲草凈標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(純度大于等于99%,CAS No.7287-19-6);撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液(準(zhǔn)確稱取適量的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用乙腈配成濃度為100.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液,4℃下避光保存。根據(jù)需要用乙腈將儲(chǔ)備液稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,現(xiàn)用現(xiàn)配):石墨化碳黑固相萃取柱(Envi-Carb,規(guī)格:500 mg,6 mL);N-丙基乙二氨鍵合硅膠固相萃取柱(PSA,規(guī)格:200 mg,3 mL)。

1.2 儀器與設(shè)備

美國(guó)Agilent7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜儀,配有電子轟擊源。

1.3 檢測(cè)方法

采用氣相色譜-質(zhì)譜法法進(jìn)行檢測(cè)。色譜柱規(guī)格為HP-5MS毛細(xì)管柱,柱長(zhǎng)30 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚度0.25 μm;色譜柱溫度要求為70℃,保持1 min,以25℃/min升溫到180℃,再以5℃/min升溫到220℃,再以15℃/min升溫到280℃保持3 min;載氣為氦氣,純度不低于99.999%;進(jìn)樣口溫度為260℃;流速為1.0 mL/min;進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量為1.0 μL;電子轟擊電離源能量為70 eV;離子源溫度為230℃;四級(jí)桿溫度為150℃;色譜-質(zhì)譜接口溫度為280℃;監(jiān)測(cè)離子(m/z)為241、184、226、199。

1.4 實(shí)驗(yàn)步驟

1.4.1 試樣的制備 取有代表性大米樣品500 g,粉碎并使其全部通過(guò)孔徑為2.0 mm的樣品篩?；旌暇鶆?裝入潔凈的容器內(nèi),密封并標(biāo)識(shí)。

1.4.2 試樣的提取 稱取5 g試樣(精確至0.01 g)于250 mL錐形瓶中,加10 mL水放置15 min,加入30 mL乙腈,于振蕩器振蕩20 min,靜置10 min,過(guò)濾并收集濾液于250 mL分液漏斗中。殘?jiān)偌尤?0 mL乙腈提取一次,過(guò)濾,合并兩次濾液。濾液中加入25 g氯化鈉和60 mL磷酸鹽緩沖液,振搖15 min,靜置分層,棄去水層,乙腈層過(guò)無(wú)水硫酸鈉后,于40℃濃縮至干,殘?jiān)?.0 mL乙酸乙酯+正己烷混合溶液(1+4)溶解。

1.4.3 試樣的凈化 用Envi-Carb和PSA固相萃取柱凈化。Envi-Carb小柱和PSA小柱分別用10 mL和4 mL乙酸乙酯+正己烷混合溶液(1+4)活化,將活化好的PSA小柱連接在Envi-Carb小柱底部。轉(zhuǎn)移提取液至串聯(lián)柱上,控制流速小于等于2 mL/min,用3×2 mL乙酸乙酯+正己烷混合溶液(1+4)洗滌雞心瓶,并將洗滌液轉(zhuǎn)移到串聯(lián)柱中,收集全部流出液,于40℃在氮吹儀上吹干,用1.0 mL乙腈定容,供氣象色譜-質(zhì)譜測(cè)定。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系

準(zhǔn)確移取10 mL濃度為100 μg/mL的撲草凈儲(chǔ)備溶液,用乙腈定容至100 mL,得到10 μg/mL的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液。

準(zhǔn)確移取0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.8 mL、4.0 mL的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中,用乙腈定容得到0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL、0.4 μg/mL、0.8 μg/mL、4.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。分別將撲草凈標(biāo)準(zhǔn)系列溶液注入氣質(zhì)聯(lián)用儀中,得到撲草凈的峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中撲草凈濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖1。

圖1 撲草凈標(biāo)準(zhǔn)曲線

由圖1可以看到,撲草凈在0.05 μg/mL～4.0 μg/mL范圍內(nèi)與檢測(cè)信號(hào)的峰面積呈良好的線性關(guān)系,回歸方程Y=3206704.73X+13694.62,相關(guān)系數(shù)R2為0.9998。

2.2 定性測(cè)定

按照SN/T 1968-2007方法中的色譜條件,檢測(cè)空白加標(biāo)回收的大米樣品,做全離子掃描,得到的撲草凈與標(biāo)準(zhǔn)溶液相比保留時(shí)間變化范圍在±0.1 min之內(nèi)。在扣除樣品背景后的質(zhì)譜圖中,撲草凈的監(jiān)測(cè)離子241、184、226、199均出現(xiàn),與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)離子的相對(duì)離子豐度相比,最大允許偏差均小于定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差要求,判斷該大米樣品為撲草凈陽(yáng)性檢出。

2.3 精密度

按照SN/T 1968-2007方法,測(cè)定某一加標(biāo)大米樣品的撲草凈含量,稱樣量5.00 g,最終定容體積為1 mL。相同條件下測(cè)定6次,結(jié)果見表1。本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)大米中的撲草凈殘留量的相對(duì)偏差為3.0%,說(shuō)明該方法具有良好的重復(fù)性。

表1 撲草凈精密度測(cè)試

2.4 檢出限

取5 g加0.1 μg/mL撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液的大米樣品按步驟提前后進(jìn)行分析,進(jìn)樣量1 μL。做信噪比檢測(cè),選擇離子為241,信噪比為481.0,通過(guò)計(jì)算得到該方法檢出限為0.00062 μg/mL(0.125 μg/kg)。而SN/T 1968-2007方法測(cè)定低限為10 μg/kg,與標(biāo)準(zhǔn)方法比較,儀器的靈敏度滿足實(shí)驗(yàn)室要求。

2.5 回收率

將大米樣品添加三個(gè)不同濃度(20 μg/kg、100 μg/kg、800 μg/kg)的撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液,按SN/T 1968-2007所述方法進(jìn)行殘留量的測(cè)定,驗(yàn)證方法的回收率,結(jié)果見表2。

表2 回收率測(cè)定結(jié)果

由表2的結(jié)果表明,按SN/T 1968-2007所述的方法測(cè)定大米中撲草凈殘留量,添加20 μg/kg、100 μg/kg、800 μg/kg三種水平,回收率在85.4%～104.4%,平均回收率93.2%,回收率范圍在檢測(cè)方法要求范圍內(nèi)。

3 結(jié)論

通過(guò)驗(yàn)證,在本實(shí)驗(yàn)室條件下,按照SN/T 1968-2007的操作步驟,撲草凈在0.05 μg/L～4.0 μg/L范圍內(nèi)與檢測(cè)信號(hào)的峰面積呈良好的線性關(guān)系,回歸方程Y=3206704.73X+13694.62,相關(guān)系數(shù)R2為0.9998;檢出限為0.125 μg/kg;平均回收率為93.2%。

從以上數(shù)據(jù)可以看出,撲草凈的回收率在合理范圍內(nèi)。因此,該方法檢測(cè)大米中撲草凈的殘留量結(jié)果準(zhǔn)確可靠,可以在實(shí)際工作中運(yùn)用。