劉 明,關(guān) 莉,王勤國,何婷婷

(1.大連航海時代生物技術(shù)有限公司,遼寧 大連116000;2.大連海洋大學(xué),遼寧 大連116000)

加利福尼亞海獅(Zalophuscalifornianus,以下簡稱加州海獅)是一種高度群聚的物種,是最大型的海洋哺乳動物群之一。國外曾觀測到海獅幼崽死亡率從厄爾尼諾現(xiàn)象前的13%到厄爾尼諾現(xiàn)象期間的100%不等,死亡率與獵物的可用性相關(guān)。當(dāng)獵物供應(yīng)不足時,海獅墮胎也更頻繁。厄爾尼諾現(xiàn)象后海獅幼崽死亡率很高,可能是因為厄爾尼諾現(xiàn)象對種群動態(tài)和隨后的母體行為產(chǎn)生了間斷性的短期影響。在母海獅長期食物供應(yīng)不足情況下,幼海獅出生時間會延后;長期食物供應(yīng)充足情況下,幼海獅會提前出生[1]。根據(jù)國外研究可知,野外加州雌海獅的墮胎頻繁發(fā)生,雌海獅妊娠期的身體狀況也明顯較孕前糟糕,幼海獅存活率非常低,海獅生存面臨極大的風(fēng)險。對擱淺活體和圈養(yǎng)加州海獅血清樣本中孕酮和總雌激素濃度的季節(jié)性變化研究表明,擱淺海獅和圈養(yǎng)海獅孕期激素水平的差異可能與營養(yǎng)水平不同有關(guān);擱淺動物黃體酮水平較低可能與健康狀況或壓力有關(guān)[2]。

1 加州海獅的生物學(xué)特性

加州海獅是高度群聚的大型海洋哺乳動物,白天在大海中度過,晚上到岸上睡覺,潛水通常持續(xù)2 min,但可持續(xù)長達(dá)10 min,平均潛水深度為26～98 m,最深可達(dá)200 m。聽覺、嗅覺特別好。通常在太平洋海岸的開放水域捕魚。經(jīng)馴服后可被用作表演或軍事用途。主食各種水生動物,如太平洋鱈魚、鯖魚,也取食頭足類動物(如魷魚)等海洋生物,偶有機(jī)會亦會捕食海鳥。平均壽命為15～24歲,年齡在4～5歲達(dá)到性成熟。體長1.8～2.1 m,體重100～350 kg。頭骨長約330 mm,呈凸形,頭部上外廓呈直線形。外耳殼小,吻端圓。利用前肢作為滑槳前進(jìn),后肢則被動地拖在身后。成年雄性頸部具有擴(kuò)大的鬃毛,通常頭頂有白色毛皮,背部為深棕色,腹部和側(cè)面著色較淺;雌性則看起來呈棕褐色。加州海獅繁殖季節(jié)從5月開始,此時成年雄性開始爭奪領(lǐng)地,這期間會發(fā)生爭斗,大多數(shù)雄性爭斗失敗會撤退到海邊或附近的單身海獅海灘。成功的雄性海獅守衛(wèi)自己的領(lǐng)地,并保持界限,日常會頻繁地吠叫以展示自己的雄風(fēng)。據(jù)報道,雄性可以占據(jù)自己的領(lǐng)地長達(dá)45 d。雌性在5—6月期間會生下一只小海獅,并且在分娩28 d后準(zhǔn)備再次交配,整個妊娠期持續(xù) 8～12個月。加州海獅雄性比雌性體型大很多,且存在一定的外觀差異[3]。

2 材料與方法

2.1 試驗動物及飼養(yǎng)管理

雌海獅莉莉(10歲)、雄海獅楠楠(9歲)、海獅胎兒,來源于大連海洋館。雌、雄海獅于2011年9月由美國加利福尼亞州引進(jìn)大連海洋館。

在雌海獅發(fā)情期每天投喂3次凝結(jié)芽孢桿菌,第1次6片,之后每次投喂3片。凝結(jié)芽孢桿菌可以調(diào)節(jié)海獅腸道內(nèi)微生物菌群的平衡、提高機(jī)體的免疫力、減少腸道疾病的發(fā)生。凝結(jié)芽孢桿菌在腸道中還會分泌淀粉酶和蛋白酶,促進(jìn)機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。海獅缺鐵性貧血發(fā)病率一直較高。妊娠期間鐵元素需求量明顯增大,增加了缺鐵性貧血發(fā)生風(fēng)險,妊娠期患缺鐵性貧血可影響胎兒發(fā)育,增加不良妊娠風(fēng)險,需積極干預(yù)[4]。為此,在雌海獅妊娠期投喂琥珀酸亞鐵。妊娠中后期海獅鐵需要量增加,是補(bǔ)鐵最佳時期[5-6]。另外,給雌海獅每日投喂2次大蒜油,每次1粒,以促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、提高免疫力及調(diào)節(jié)胃腸道微生態(tài)平衡[7-9]。

2.2 主要儀器和設(shè)備

3C型獸用B超儀,四川靈通B超廠制造;2000型獸用B超儀,深圳威爾德B超廠制造;醫(yī)用超聲耦合劑,天津市南開區(qū)華科醫(yī)療器械廠生產(chǎn);影像采集設(shè)備由筆記本電腦、視頻采集卡及視頻線組成。

2.3 影像采集及處理方法

2.3.1 影像采集方法

將視頻采集卡插入筆記本電腦網(wǎng)卡口,按軟件要求安裝視頻采集驅(qū)動程序。檢查操作時用視頻線一端連接B超視頻輸出口,一端連接視頻采集卡的視頻輸入端口。這樣實際檢查操作的所有影像資料都被錄制成MPEG格式的文件保存在電腦中,并按照不同的懷孕日期進(jìn)行編號。

2.3.2 影像處理方法

整理錄制好的影像文件,然后用采集卡附帶的軟件進(jìn)行播放和編輯。通過對比,在其中挑選出有代表性的圖像進(jìn)行保存和編號,這樣可以把不同時期的典型影像整理出來。

2.4 測定項目

2.4.1 妊娠前行為觀測

2018年9月25日雌海獅與雄海獅合籠后,第3天09:00兩只海獅交配,觀測雌、雄海獅行為變化。

2.4.2 妊娠期觀測

雌海獅與雄海獅于2018年9月28日交配,44 d后技術(shù)人員用獸用B超儀對雌海獅進(jìn)行檢查,檢測出胎心;之后每隔2周對海獅進(jìn)行一次B超檢測,觀察胎兒發(fā)育是否健康;2019年1月4日開始測量胎兒胸廓大小(胎兒發(fā)育指標(biāo))。

3 結(jié)果與分析

3.1 懷孕前的攝食及行為狀態(tài)

2018年9月25日雌海獅與雄海獅合籠后,雄海獅就開始劇烈發(fā)聲,并不斷地圍繞雌海獅轉(zhuǎn),展示其強(qiáng)大以吸引雌海獅的注意。第3天09:00,雌海獅對雄海獅表現(xiàn)出強(qiáng)烈的興趣,很興奮,12:30兩只海獅開始交配。一個月后雌海獅的戶外活動逐漸減少、對雄性海獅表現(xiàn)出攻擊等排斥行為,睡眠時間加長,攝食量逐漸增加。

3.2 體重、采食量、健康狀況等監(jiān)測結(jié)果

根據(jù)B超測得數(shù)據(jù)大概可以推測雌海獅在上一年9—10月受孕,妊娠后體重有一定的增加(82～89 kg),妊娠期攝食量較之前有大幅度的增加(27～40 kg),妊娠期海獅胎兒的胸廓在逐步擴(kuò)大(4.55～10.30 cm)。2018年11月11日,雌海獅食量達(dá)40 kg/周,為妊娠期最大食量,伴隨體重增加。

妊娠期補(bǔ)充治療劑量的鐵對海獅胎兒和雌海獅哺乳沒有不良影響。

3.3 孕期監(jiān)測數(shù)據(jù)

見表1。

表1 雌海獅孕期監(jiān)測數(shù)據(jù)和狀態(tài)Tab.1 Monitoring data and status of female sea lions during pregnancy

3.4 雌海獅B超檢測結(jié)果

見圖1。

圖1 早期胎兒發(fā)育B超圖像Fig.1 B-mode ultrasonography of early fetal development

圖2 中期胎兒發(fā)育B超圖像 Fig.2 B-mode ultrasonography of mid-term fetal development

圖3 晚期胎兒發(fā)育B超圖像 Fig.3 B-mode ultrasonography of late fetal development

圖4 胎兒胸部直徑變化情況Fig.4 Development of fetal chest diameter index

4 討 論

4.1 孕期的B超監(jiān)測

B超是一種經(jīng)濟(jì)、實用、可重復(fù)、無損傷的檢查手段,采用高頻率聲波使內(nèi)部組織、器官成像,便于觀察組織的形態(tài)[10]。不同于X光片、CT有電離輻射,B超對動物機(jī)體比較安全。在產(chǎn)科中,B超應(yīng)用范圍得到空前的拓展,有著無痛、無創(chuàng)、瞬時成像、操作檢查相對簡單、無電離輻射(即使對未出生的胎兒也不會有影響)、安全等幾大優(yōu)點(diǎn)[11]。為研究妊娠早期胚胎、妊娠中期及妊娠晚期的胎兒發(fā)育情況與過程,利用B超評估早期胚胎的發(fā)育、胎兒結(jié)構(gòu)是否異常、是否有多胎妊娠、胎兒大小及懷孕周期等狀況有著十分重要的意義,在臨床上也被廣泛應(yīng)用于心內(nèi)科、消化內(nèi)科、泌尿科和婦產(chǎn)科疾病的診斷[12]。

是否能以加州海獅胎兒胸圍數(shù)據(jù)推測分娩時間還未見報道,但是通過此次對加州海獅妊娠期胎兒的B超監(jiān)測、國外的獸醫(yī)顧問的建議和以往海獅的繁育經(jīng)驗,預(yù)估胸部直徑為12～13 cm時胎兒發(fā)育成熟娩出[13-14]。海獅科動物一般在交配妊娠后存在3個月左右胚胎著床延遲,整個妊娠期在8～11個月。妊娠期相差3個月之久,可能是雌、雄海獅之前存在交配行為而未被發(fā)現(xiàn),但從B超測得數(shù)據(jù)大概可以推測雌海獅在2018年9—10月受孕,預(yù)產(chǎn)期為2019年8—9月。自然界加州海獅在5—6月發(fā)情,館養(yǎng)海獅受室內(nèi)溫度、水溫、光照的影響會在6—7月發(fā)情,妊娠期11個月左右,每胎僅生一仔,剛出生的幼仔為純黑色,幾個月之后才顏色變淺。幼海獅出生時體長約為100 cm,體重約為20 kg,海獅前5年迅速成長[15]。誕下小海獅約28 d后,成年海獅可再次交配,直到小海獅斷奶,這個時間為10～12個月。加州海獅的乳汁也是哺乳動物中唯一一種不含乳糖成分的。

在整個繁育過程中,需注意室內(nèi)溫度的控制、食物的新鮮衛(wèi)生、水溫的控制、環(huán)境的熟悉、是否有應(yīng)激、日常維生素的補(bǔ)充等,B超監(jiān)測和日常醫(yī)療檢查和基礎(chǔ)數(shù)據(jù)分析尤為重要。飼養(yǎng)人員應(yīng)提供良好繁育環(huán)境和醫(yī)療手段,迎接小海獅的誕生。

4.2 投喂藥的作用

大蒜油的作用:①大蒜油可抑制革蘭氏陽性菌、 革蘭氏陰性菌和耐酸菌的生長。大蒜油除了可以抑制、殺滅腸道有害菌外,還可以抑制枯草桿菌、 嗜熱鏈球菌及保加利亞乳桿菌等益生菌的活性[16-17]。②大蒜油抗巨細(xì)胞病毒、腸道病毒、鼠肝炎病毒、生殖器皰疹方面的研究已經(jīng)有了初步進(jìn)展。 據(jù)報道,兒童和成人服用大蒜油后普通感冒的發(fā)病率降低[18-19]。③大蒜精油具有抑制血小板聚集的作用[20-21]。④研究表明,大蒜油能夠預(yù)防四氯化碳及對乙酰氨基酚引起的急性肝損傷,并且能夠預(yù)防大鼠試驗性的非酒精性脂肪肝[22-23]。

乳酸菌素是純?nèi)樗峋x產(chǎn)生的,是將脫脂乳經(jīng)殺菌和真空濃縮后,再經(jīng)乳酸菌發(fā)酵、干燥而制成的乳酸菌代謝產(chǎn)物混價粉狀物,是改善腸道環(huán)境和調(diào)節(jié)腸道功能的傳統(tǒng)藥物,具有熱穩(wěn)定性和耐熱性,不受加工條件限制,安全性高,價格低廉,易儲藏。乳酸菌素片是常用的調(diào)節(jié)腸道功能的非處方藥物[24-25]。

5 小 結(jié)

綜上所述,海獅整個妊娠期胎兒發(fā)育情況良好,在雌海獅妊娠期投喂大蒜油、乳酸菌素片、凝結(jié)芽孢桿菌、葉酸片、琥珀酸亞鐵等藥劑和營養(yǎng)劑有利于海獅胎兒的健康發(fā)育。海獅的墮胎率居高不下,與雌海獅在妊娠期面臨食物不足、溫度變化大、周圍環(huán)境情況惡劣和病毒細(xì)菌感染等危害有關(guān),應(yīng)大力開展對海獅繁殖、健康管理相關(guān)研究,為海獅飼養(yǎng)保駕護(hù)航。