袁東華，吳家勝，張瑩瑩，王承芳，陳秀，張頌函

(1.上海萬力華生物科技有限公司，上海 201611；2.上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心，上海 201103)

根腫病(clubroot)是危害十字花科作物的一種世界性土傳病害，由蕓薹根腫菌(Plasmodiophora brassicae)引起，主要侵染作物根部，作物整個生育期都可感病，可造成20%~60%的減產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)損失[1-2]，嚴(yán)重影響十字花科作物產(chǎn)量和品質(zhì)[3-5]。目前對根腫病的控制主要采取噴施化學(xué)農(nóng)藥、撒施石灰改良土壤理化性質(zhì)、選擇適宜抗病品種等措施[6]。但是，部分化學(xué)藥劑防效不穩(wěn)定且易造成環(huán)境污染；長期施用生石灰容易造成土壤板結(jié)和堿性化。近年來，國內(nèi)外已有利用有益微生物防治十字花科根腫病的報道。

多粘類芽孢桿菌(Bacillus polymyxoides)作為一種生防菌，已廣泛應(yīng)用于植物病害的生物防治。經(jīng)前期研究發(fā)現(xiàn)，多粘類芽孢桿菌P1 對廣東菜心根腫病有一定的防治效果[7]。本文在前期研究的基礎(chǔ)上，探索不同的施藥方法下多粘類芽孢桿菌制劑對廣東菜心根腫病的防治效果，以期為多粘類芽孢桿菌在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用找到一種科學(xué)合理的使用方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)條件

1.1.1 試驗(yàn)對象、作物和品種

試驗(yàn)對象為根腫病(Plasmodiophora brassicae)；供試作物為廣東菜心，品種為“四九菜心”。

1.1.2 作物栽培及環(huán)境條件

試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在上海鴻宇蔬菜園藝場，2 塊試驗(yàn)地中設(shè)施栽培地前茬作物為杭白菜，大田露地前茬作物為小青菜。2 塊試驗(yàn)地均為十字花科蔬菜連作地塊，根腫病發(fā)病率高。試驗(yàn)地廣東菜心的種植按照常規(guī)田間管理統(tǒng)一管理。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計和安排

1.2.1 供試藥劑

15 億CFU/mL 多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑(上海萬力華生物科技有限公司)。

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計

試驗(yàn)共設(shè)5 個處理，處理1~4 為藥劑處理，處理5 為空白對照(表1)。處理1~4 均分為播前藥劑處理和出苗后藥劑處理，共施藥2 次，主要探索不同的播前處理模式對廣東菜心根腫病的防治效果。每個處理3 次重復(fù)，共15 個小區(qū)。每個小區(qū)30 m2，小區(qū)按照隨機(jī)區(qū)組排列。

表1 15 億CFU/mL 多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑不同處理方式試驗(yàn)方案

第1 次施藥時間均為廣東菜心播種前24 h。處理1 和2 將藥劑按照試驗(yàn)劑量2 L/667 m2兌水300 L/667 m2，均勻噴淋于土壤表面。土壤噴淋前應(yīng)將大塊土壤打碎，并保證土壤濕度。處理1 土壤噴淋后不作混土處理，處理2 土壤噴淋后作混土處理。處理3 將藥劑稀釋100 倍進(jìn)行浸種30 min，浸泡完畢后晾干。處理4 按照藥種比1∶50 拌種，拌種完畢后晾干。均于第2 天播種。第2 次施藥時間為廣東菜心長至2 葉1 心期時，將藥劑按照試驗(yàn)劑量2 L/667 m2兌水300 L/667 m2，均勻噴淋在廣東菜心上。按照試驗(yàn)方案，分別于2022 年3 月、9 月在設(shè)施地、露地大田開展了試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)調(diào)查

在廣東菜心發(fā)病明顯或收獲期對發(fā)病程度進(jìn)行調(diào)查。采用五點(diǎn)取樣法，每個點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查20 株，根據(jù)分級標(biāo)準(zhǔn)記錄各級病株數(shù)，并計算病情指數(shù)及其防治效果。分級標(biāo)準(zhǔn)：0 級：沒有附著根腫；1 級：根腫只附著在側(cè)根上，數(shù)量占根系全部的1%~25%；2 級：主根上有根腫附著，側(cè)根上根腫數(shù)量占根系全部25%以上；3 級：根腫數(shù)量占50%~75%的根系，主根上有根腫附著；4 級：根腫數(shù)量占75%以上的根系，主根上有根腫附著。

1.4 統(tǒng)計方法

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用Excel、SPSS 19.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

設(shè)施地和露地多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑防治廣東菜心根腫病的試驗(yàn)結(jié)果見表2 和表3。試驗(yàn)地廣東菜心根腫病發(fā)生程度為偏重發(fā)生，設(shè)施地根腫病發(fā)病率為63.67%、病情指數(shù)為49.53，露地根腫病發(fā)病率為58.67%、病情指數(shù)為35.53。設(shè)施地處理1~4 對廣東菜心根腫病的病株防效分別為46.60%、58.12%、23.56%、22.51%，病指防效分別為62.99%、67.36%、46.84%、39.43%。露地處理1~4 對廣東菜心根腫病的病株防效分別為67.76%、72.10%、41.06%、36.00%，病指防效分別為75.44%、82.13%、55.23%、52.88%。兩地的試驗(yàn)結(jié)果均表明，播前采用土壤噴淋的處理1 和2 對廣東菜心根腫病的防效顯著優(yōu)于采用浸種和拌種的處理3 和4。土壤噴淋后采用混土的方式處理2 防效略高于不混土的處理1，但方差分析顯示差異不顯著。采用浸種的處理3 防效顯著高于采用拌種的處理4。

表2 多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑不同處理方式對廣東菜心根腫病防治效果(設(shè)施地)

表3 多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑不同處理方式對廣東菜心根腫病防治效果(露地)

3 結(jié)論與討論

通過在設(shè)施地和下半年在露地大田開展試驗(yàn)，研究結(jié)果表明15 億CFU/mL 多粘類芽孢桿菌P1 懸浮劑采用播前土壤噴淋(制劑量2 L/667 m2)和2 葉1 心期根莖噴淋相結(jié)合的方式防治廣東菜心根腫病的效果優(yōu)于種子處理(100 倍浸種、1∶50 倍拌種)和2 葉1 心期根莖噴淋相結(jié)合的方式。研究數(shù)據(jù)顯示，采用播前土壤噴淋(制劑量2 L/667 m2)和2 葉1 心期根莖噴淋相結(jié)合的方式對廣東菜心根腫病的防效顯著，病指防效為62.99%~82.13%，可滿足生產(chǎn)上防治需求，為今后在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣東菜心根腫病防治技術(shù)開發(fā)與應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

因本研究僅在上海一地開展了試驗(yàn)，且多粘類芽孢桿菌尚未在廣東菜心上登記，為增強(qiáng)數(shù)據(jù)的代表性和說服力，建議在全國其他省份開展相應(yīng)試驗(yàn)，以期能夠推進(jìn)多粘類芽孢桿菌制劑在廣東菜心根腫病上的登記。