郭婷萍 趙常山 張志軍

摘要：該試驗(yàn)研究不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對(duì)草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）機(jī)體非特異免疫的影響。研究選擇體重約5g的健康草魚(yú)320尾，隨機(jī)分成4組，每組80尾。各組草魚(yú)依次飼喂在基礎(chǔ)餌料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的復(fù)方中草藥制劑的試驗(yàn)餌料。試驗(yàn)周期為8周，馴養(yǎng)1周。試驗(yàn)結(jié)束，采集各組草魚(yú)血液，檢測(cè)血清非特異性免疫指標(biāo)。結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，草魚(yú)餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚(yú)血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚(yú)血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）。研究表明，在草魚(yú)養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強(qiáng)草魚(yú)機(jī)體的非特異性免疫力，綜合各項(xiàng)數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

關(guān)鍵詞：復(fù)方中草藥；非特異性免疫；草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）

中圖分類號(hào)：S965.112文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）是中國(guó)主要淡水魚(yú)養(yǎng)殖品種之一，具有生長(zhǎng)快、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、耐粗飼等特點(diǎn)^[1-2]。但隨草魚(yú)養(yǎng)殖規(guī)模及養(yǎng)殖密度的增大，導(dǎo)致水質(zhì)污染、病害頻發(fā)，進(jìn)而影響草魚(yú)機(jī)體的免疫力及生產(chǎn)性能，致使養(yǎng)殖生產(chǎn)及經(jīng)濟(jì)效益受到影響^[3-4]。目前，飼料端禁抗政策實(shí)施以來(lái)，養(yǎng)殖行業(yè)尋找安全、高效的替抗產(chǎn)品迫在眉睫。近幾年，中草藥作為一種來(lái)源廣泛、種類品種繁多、天然綠色的一種飼料添加劑在養(yǎng)殖行業(yè)逐漸推廣應(yīng)用^[5-6]。中草藥既具有藥理價(jià)值，也具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，具有雙重作用，在養(yǎng)殖行業(yè)中的應(yīng)用具有廣泛的應(yīng)用前景^[7]。部分研究發(fā)現(xiàn)，中草藥在動(dòng)物生產(chǎn)中具有很好的免疫調(diào)節(jié)作用。在奶牛生產(chǎn)中，使用54g/（d·頭）的中草藥提取物可以有效提高血清中免疫球蛋白和干擾素含量，降低促炎因子腫瘤壞死因子-α水平^[8]。在大菱鲆幼魚(yú)生產(chǎn)中使用2%的中草藥湯藥，可以提高大菱鲆體內(nèi)相關(guān)的非特異性免疫指標(biāo)的數(shù)值（溶菌酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶）^[9]。蔡巖^[10]研究發(fā)現(xiàn)，中草藥可以通過(guò)調(diào)節(jié)石斑魚(yú)體內(nèi)與免疫相關(guān)的通路及基因來(lái)改善石斑魚(yú)機(jī)體的免疫功能。該試驗(yàn)中，以草魚(yú)幼魚(yú)為研究對(duì)象，探究不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對(duì)其機(jī)體非特異性免疫的影響，為中草藥在草魚(yú)養(yǎng)殖的高效推廣與利用提供數(shù)據(jù)資料。

1 試驗(yàn)材料

1.1 中草藥制劑

復(fù)方中草藥制劑主要有五味子、山楂、甘草、黨參、黃芪等組成，購(gòu)自當(dāng)?shù)刂兴幉拇笫袌?chǎng)。以上中草藥粉碎后過(guò)40目篩，按照等比例混勻，備用。

1.2 草魚(yú)

試驗(yàn)草魚(yú)購(gòu)買(mǎi)于當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖公司，平均體重為5.0±0.2 g，體質(zhì)健壯，無(wú)外傷。

1.3 免疫指標(biāo)試劑盒

溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、丙二醛等非特異性免疫指標(biāo)檢測(cè)試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

2 試驗(yàn)方法

2.1 試驗(yàn)分組及草魚(yú)餌料

研究選擇體重約5g的健康草魚(yú)320尾，隨機(jī)分成4組，每組80尾。各組草魚(yú)依次飼喂在基礎(chǔ)餌料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的復(fù)方中草藥制劑的試驗(yàn)餌料。試驗(yàn)周期為8周，馴養(yǎng)1周。試驗(yàn)結(jié)束，采集各組草魚(yú)血液，檢測(cè)血清非特異性免疫指標(biāo)。試驗(yàn)處理見(jiàn)表1。試驗(yàn)草魚(yú)餌料配方見(jiàn)表2。

2.2 草魚(yú)養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)草魚(yú)在進(jìn)行正式試驗(yàn)之前，先使用基礎(chǔ)餌料馴養(yǎng)1周，適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。草魚(yú)每日投喂3次（8：00、13：00、17：00），每天餌料投喂量約為草魚(yú)體重的3.5%。養(yǎng)殖期間，不間斷供氧，每3d換水一次，每次換水量約為1/3。水溫約27.5℃左右，pH值約7.5左右，氨氮含量低于0.18mg/L，溶解氧含量大于5.5mg/L。

2.3 免疫指標(biāo)檢測(cè)方法

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，所有草魚(yú)禁食12hrs，之后每組挑選8尾草魚(yú)，采集血液，經(jīng)離心后收集血清用于溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、丙二醛等非特異性免疫指標(biāo)的測(cè)定。

3 試驗(yàn)結(jié)果

不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對(duì)草魚(yú)免疫指標(biāo)的影響見(jiàn)表3，與對(duì)照組比較，草魚(yú)餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚(yú)血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚(yú)血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚(yú)血清中的超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）；而復(fù)方中草藥制劑對(duì)草魚(yú)血清中的過(guò)氧化氫酶和丙二醛含量未產(chǎn)生顯著性影響。研究表明，在草魚(yú)養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強(qiáng)草魚(yú)機(jī)體的非特異性免疫力，綜合各項(xiàng)數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

4 討論

溶菌酶是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)非特異性免疫因子，可以抵御養(yǎng)殖過(guò)程中病害對(duì)機(jī)體的危害；堿性磷酸酶是一種比較重要的生化指標(biāo)；超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，具有清除機(jī)體內(nèi)多余自由基的功能；丙二醛是脂質(zhì)氧化產(chǎn)生的物質(zhì)，可以預(yù)示機(jī)體的氧化程度。以上指標(biāo)在魚(yú)類機(jī)體非特異性免疫功能方面起著重要的作用。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組比較，草魚(yú)餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚(yú)血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚(yú)血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%，表明在草魚(yú)養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強(qiáng)草魚(yú)機(jī)體的非特異性免疫力，綜合各項(xiàng)數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。鄭善堅(jiān)等^[11]研究發(fā)現(xiàn)，在草魚(yú)生產(chǎn)中添加1%的復(fù)方中草藥可以提高草魚(yú)機(jī)體的超氧化物歧化酶水平，增加了MHCⅠ免疫基因的表達(dá)。邢玉娟等^[12]研究表明，在草魚(yú)養(yǎng)殖中使用適量的復(fù)方中草藥可以提高草魚(yú)體內(nèi)白細(xì)胞的吞噬能力，增強(qiáng)了超氧化物歧化酶活性及溶菌酶活性。以上研究均表明，草魚(yú)養(yǎng)殖中使用適量的中草藥可以增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能，主要是因?yàn)橹胁菟幹械母鞣N活性成分具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的功能。

5 結(jié)論

該試驗(yàn)研究表明，在草魚(yú)養(yǎng)殖中使用適量的復(fù)方中草藥制劑可以增強(qiáng)草魚(yú)血清中超氧化物歧化酶、溶菌酶活性，降低堿性磷酸酶活性，增強(qiáng)了機(jī)體的非特異性免疫力，綜合各項(xiàng)數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

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Effect of herbal preparations on the immunity of Ctenopharyngodon idella organism

GUO Tingping， ZHAO Changshan， ZHANG Zhijun

（Zhongwei City Shapotou District Animal Husbandry and Aquatic Technology Extension Service Center， Zhongwei 755000， Ningxia China）

Abstract：This experiment investigated the effect of different doses of compound herbal preparations on the non-specific immunity of grass carp （Ctenopharyngodon idella） organism. The study selected 320 healthy grass carp weighing about 5g and randomly divided into 4 groups of 80 fish each. Each group was fed in turn a test bait with 0%， 0.1%， 0.2% and 0.4% of a compound herbal preparation added to the basal bait. The test period was 8 weeks， with 1 week of domestication. At the end of the test， blood was collected from each group of grass carp and serum non-specific immune indexes were tested. The results showed that compared with the control group， the lysozyme activity in the serum of grass carp baits supplemented with 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparation significantly increased by 17.28% and 19.8% （P<0.05）; the addition of 0.2% of the compound herbal preparation reduced the alkaline phosphatase activity in the serum of grass carp by 14.02% and increased the superoxide dismutase activity by 34.19% （P<0.05）. The study showed that the use of 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparations in grass carp culture could enhance the non-specific immunity of the grass carp organism， and considering all the data， the optimum amount of the compound herbal preparations was 0.2%.

Keywords：Compound herbal medicine; Non-specific immunity; Grass carp （Ctenopharyngodon idella）