于汪洋，高悅鵬

（深圳市質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)研究院（深圳市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心），廣東 深圳 518118）

牛肉是滋補(bǔ)佳品，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，深受消費(fèi)者喜愛，牛結(jié)節(jié)性皮膚病，也被人們稱為牛結(jié)節(jié)疹或結(jié)節(jié)性皮炎，這是一種在養(yǎng)牛業(yè)中常見的疾病。在我國(guó)，它被列為二類動(dòng)物傳染病，每年的發(fā)病率在2%～45%，而致死率則在10%～20%。該病對(duì)養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展構(gòu)成了重大威脅。如何有效診斷并防控牛結(jié)節(jié)性皮膚病，成為業(yè)內(nèi)研究思考的關(guān)鍵問題。

1 病原學(xué)特征

牛結(jié)節(jié)性皮膚病的病原體是牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（LSDV），這是一種雙鏈DNA 病毒，其直徑大約在260～320 nm，形狀呈橢圓形，有的則呈磚塊狀。這種病毒具有耐低溫的特性，即使在零下90 ℃的環(huán)境下也能存活數(shù)十年。然而，它在高溫下的穩(wěn)定性較差，只需在55 ℃的環(huán)境中待上兩小時(shí)就會(huì)失去活性。

2 流行病學(xué)

LSD 屬全身感染性疾病，只在牛之間傳播，并不傳染人，不屬于人畜共患病，我國(guó)于2019 年第一次在新疆伊犁確診發(fā)生本病，目前LSD 疫情已波及全國(guó)十多個(gè)省、自治區(qū)。本病的主要傳染源是患病牛，其脾臟、淋巴結(jié)、皮膚結(jié)節(jié)等部位以及精液、唾液等分泌物均攜帶大量的病毒，健康易感牛接觸后可能感染發(fā)病。LSDV 主要以節(jié)肢動(dòng)物（伊蚊、庫(kù)蚊、硬蜱）為媒介的方式進(jìn)行水平傳播，若水、飼料被污染，健康牛攝入后亦可能感染。若獸醫(yī)在注射時(shí)共用被病毒污染的針頭，則極易導(dǎo)致全群牛發(fā)病。公牛精液中攜帶病毒時(shí)，自然交配、人工授精等配種方式均可造成病毒的傳播擴(kuò)散。

3 臨床癥狀

大約經(jīng)過28 d 左右的潛伏期，LSD 病毒開始在牛群中爆發(fā)，其發(fā)病情況受到多種因素如病毒量和免疫力的影響，因此患病牛的臨床表現(xiàn)有很大的差異。

患病的牛體溫持續(xù)升高至約41 ℃，伴有明顯的淺表淋巴結(jié)腫大。它們的精神狀態(tài)變差，不愿意活動(dòng)，眼結(jié)膜發(fā)炎，流鼻涕，還會(huì)出現(xiàn)口水增多的癥狀。在持續(xù)高燒48 h 后，牛的頭部、外陰、乳房、肩部和頸部等多個(gè)部位的皮膚表面會(huì)出現(xiàn)許多直徑約10～50 mm 的結(jié)節(jié)。這些結(jié)節(jié)會(huì)不斷潰破，引來大量蠅蛆，導(dǎo)致潰瘍反復(fù)形成，數(shù)月都無法痊愈。

患病的牛口腔黏膜會(huì)出現(xiàn)水皰，然后破裂和潰爛。此外，它們的腹部和四肢可能會(huì)出現(xiàn)水腫，影響正常行走。公牛罹患該病后可能表現(xiàn)出不育癥狀，而懷孕的母牛則容易流產(chǎn)。奶牛感染LSD 后，產(chǎn)奶量和奶質(zhì)明顯下降。

4 病理變化

解剖一頭病死的牛，我們可以發(fā)現(xiàn)其呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)有明顯的結(jié)節(jié)病變。淋巴結(jié)出現(xiàn)水腫，伴隨著出血的癥狀。心臟的體積增大，心肌表面有斑塊狀的瘀血。肺臟有水腫現(xiàn)象，少量的出血點(diǎn)在其中。腎臟出血，氣管黏膜充血嚴(yán)重，內(nèi)部有許多黏液。肝臟也有水腫的現(xiàn)象，膽囊體積增大到正常大小的3 倍。

5 診斷要點(diǎn)

5.1 初步臨床診斷在醫(yī)療領(lǐng)域擁有豐富經(jīng)驗(yàn)的獸醫(yī)，他們會(huì)根據(jù)病牛的明顯癥狀和死后尸體的解剖變化，再結(jié)合這種疾病的流行趨勢(shì)，從而做出準(zhǔn)確的診斷。

5.2 鑒別診斷雖然LSD 的急性病例可通過典型臨床癥狀進(jìn)行初步判別與診斷，但非典型或亞急性病例在臨床癥狀表現(xiàn)上和牛皰疹病毒病、疥螨病以及偽牛痘等疾病存在著一定的相似之處，現(xiàn)場(chǎng)很難進(jìn)行有效的鑒別診斷，必須借助實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確診。

5.3 實(shí)驗(yàn)室診斷對(duì)LSD 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷時(shí)，常用方法如下：在科學(xué)探索的過程中，我們經(jīng)常使用電鏡觀察法來獲得證據(jù)。這種方法涉及從病牛的患處取得新鮮皮膚結(jié)節(jié)或肝臟組織，然后將它們研磨成組織懸液。通過透射電鏡的觀察，我們可以發(fā)現(xiàn)大小為290 nm×270 nm 的粒子，形狀如磚塊或短管。如果這些粒子存在，那么就可以確診病情。此外，我們還可以使用血清學(xué)檢測(cè)，包括VNT、IFAT和ELISA 等方式。然而，由于牛群普遍受到LSDV病毒感染，這種感染引發(fā)的主要是細(xì)胞免疫反應(yīng)，因此機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體水平會(huì)相對(duì)較低，導(dǎo)致VNT 檢測(cè)靈敏度不高，此法僅可用于流調(diào)的初篩；而IFAT 雖然操作方便，易推廣，但此法敏感性不夠，特異性差；ELISA 方法因?yàn)榧虞d了雙抗，因而能同時(shí)檢測(cè)GTPV、SPPV 以及LSDV，但無法具體鑒別是以上哪種病毒產(chǎn)生的抗體。最后，分子生物學(xué)檢測(cè)，歷年來，各國(guó)研究人員通過限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（PCR-RFLP）、多重PCR 技術(shù)、Taq-Man-MGB 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 等多種核酸診斷技術(shù)對(duì)GTPV、SPPV 以及LSDV 進(jìn)行特異性區(qū)分與鑒別，取得了較為成功的經(jīng)驗(yàn)。

6 綜合防控措施

6.1 養(yǎng)殖場(chǎng)戶方面

6.1.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 為降低LSD 的發(fā)病率，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）做好飼養(yǎng)管理工作非常重要。養(yǎng)殖人員應(yīng)建立完善的飼養(yǎng)管理制度，確保飼養(yǎng)管理工作規(guī)范化開展：一是加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，確保日糧的營(yíng)養(yǎng)均衡，同時(shí)也要做到粗飼料與精飼料的配比更加合理、科學(xué)，與此同時(shí)也要根據(jù)牛日齡進(jìn)行及時(shí)調(diào)整，滿足牛生長(zhǎng)需求；二是妥善管理飼料，保證飼料儲(chǔ)存環(huán)境干燥、通風(fēng)，降低霉變的風(fēng)險(xiǎn)；三是靈活控制飼養(yǎng)密度，及時(shí)分群，避免擁擠；四是牛只每日應(yīng)保持適量運(yùn)動(dòng)，有助于提高抗病力；五是做好防寒保暖工作，預(yù)防冷熱應(yīng)激；六是確保牛舍有良好的光照和通風(fēng)條件，營(yíng)造舒適的環(huán)境，保證牛群健康生長(zhǎng)。

6.1.2 妥善處置糞污 糞污處置不當(dāng)可能會(huì)滋生病菌、吸引蚊蟲、傳播疾病，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）要建立衛(wèi)生消毒、效果評(píng)價(jià)等生物安全管理制度，制定科學(xué)的消毒計(jì)劃，重點(diǎn)做好對(duì)圈舍、器具、場(chǎng)地、道路、車輛的消毒工作，及時(shí)清理牛舍糞便和污水，清除傳染源頭，營(yíng)造清潔、衛(wèi)生的飼養(yǎng)環(huán)境?；鶎有竽莲F醫(yī)工作者要積極推廣糞污無害化處理技術(shù)，通過設(shè)置沼氣池、合理堆肥發(fā)酵等方式，減輕環(huán)境污染，同時(shí)將處理后的牛糞發(fā)酵產(chǎn)物應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，以此提高資源利用率。

6.1.3 殺滅吸血昆蟲 吸血昆蟲作為傳播LSDV 的重要媒介之一。因此，在養(yǎng)殖人員的生產(chǎn)生活中，我們需要提高驅(qū)蟲殺蟲意識(shí)，注重消毒滅源，以切斷傳播途徑，從而降低LSD 的發(fā)病率。為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，我們可以采取物理隔離、煙熏、光、電等手段驅(qū)趕蚊蠅。此外，在畜廄內(nèi)粉刷白墻也能有效防止牛虻飛入畜廄。我們還可以使用25%蠅毒磷粉劑制成0.6%水溶液噴施在牛體表進(jìn)行驅(qū)蟲，或者在牛舍內(nèi)噴施溴氰菊酯、雙甲脒、辛硫磷等殺蟲藥劑，以殺滅吸血昆蟲。最后，養(yǎng)殖人員應(yīng)及時(shí)填平、封閉牛舍附近的水坑，破壞吸血昆蟲生活繁殖的場(chǎng)所，從而減少牛舍內(nèi)吸血昆蟲的數(shù)量。

6.1.4 強(qiáng)化引種管理 養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）引種管理不當(dāng)，可能引入患病牛，進(jìn)而導(dǎo)致LSD 的傳播擴(kuò)散。養(yǎng)殖人員應(yīng)從正規(guī)牛場(chǎng)引種，引種前做好流行病學(xué)調(diào)查、臨床健康檢查、隔離檢疫等方面的工作，確保所引種的牛處于健康狀態(tài)。引種時(shí)要做好牛只防護(hù)工作，可提前飼喂電解多維、黃芪多糖，減輕運(yùn)輸時(shí)的應(yīng)激反應(yīng)。引種后的牛，應(yīng)至少隔離3～4 周，隔離期間除了觀察LSD 等疫病的臨床癥狀，還可以通過病原學(xué)檢測(cè)的方式剔除隱性感染牛，隔離期滿且無異常的情況下再合群飼養(yǎng)，以此有效防范LSD 的傳入和暴發(fā)。

6.1.5 落實(shí)免疫接種 在當(dāng)前階段，抵御LSD 的最簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、有效手段是通過疫苗接種。我國(guó)目前提供的商業(yè)化預(yù)防LSD 疫苗分為兩種類型：同源弱毒疫苗和異源性疫苗，比如Neethling 株同源弱毒疫苗和山羊痘疫苗等。養(yǎng)殖場(chǎng)或養(yǎng)殖戶需要雙管齊下，一方面提高疫苗免疫的認(rèn)識(shí)，認(rèn)識(shí)到這項(xiàng)工作的重要性，積極地履行免疫的責(zé)任；另一方面，應(yīng)當(dāng)從合法途徑購(gòu)買疫苗，以確保疫苗的質(zhì)量可靠。

在進(jìn)行疫苗接種時(shí)，應(yīng)當(dāng)采取皮內(nèi)注射或皮下注射的方法。推薦每頭牛注射0.2 mL 的疫苗（相當(dāng)于山羊痘疫苗的5 頭份）。鑒于并非每一頭牛都能在接種后獲得同樣高水平的免疫效果，養(yǎng)殖人員需要定期監(jiān)測(cè)免疫抗體水平。如果發(fā)現(xiàn)個(gè)別個(gè)體的免疫效果較弱，就應(yīng)當(dāng)迅速采取強(qiáng)化免疫措施，以確保對(duì)LSD 的有效預(yù)防和控制。

6.2 政府方面

6.2.1 加大宣傳培訓(xùn)力度 在國(guó)內(nèi)LSD 疫情高發(fā)的背景下，為營(yíng)造良好的防疫氛圍，動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督部門要及時(shí)通報(bào)疫情信息，深入廣大養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）做好動(dòng)物疫病防控宣傳培訓(xùn)工作，普及和LSD 相關(guān)知識(shí)以及防控技術(shù)，提高其發(fā)現(xiàn)、預(yù)防和處置能力。同時(shí)，有關(guān)部門可以發(fā)揮微信、抖音等新媒體的作用，通過制作、推送短視頻的方式，在肉牛、奶牛主產(chǎn)區(qū)廣泛宣傳LSD 的危害性，提高群防群控的意識(shí)，倡導(dǎo)每一個(gè)居民都有積極主動(dòng)配合防疫部門的義務(wù)，從而將可能發(fā)生的LSD 疫情扼殺在萌芽階段。

6.2.2 嚴(yán)查邊境或疫區(qū)疫情 LSD 是外來輸入性疫病，該病極有可能和跨國(guó)活牛貿(mào)易、走私有關(guān)，所以做好邊境、疫區(qū)檢查工作至關(guān)重要。動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督部門應(yīng)聯(lián)合進(jìn)出境管理部門，嚴(yán)格管控邊境活牛貿(mào)易市場(chǎng)，定期巡查巡檢，并嚴(yán)厲打擊活牛走私活動(dòng)。同時(shí)，要全面排查疫區(qū)的養(yǎng)殖場(chǎng)（戶），一旦發(fā)現(xiàn)疑似感染的牛，應(yīng)密切關(guān)注并隔離觀察[8]。此外，針對(duì)非疫區(qū)關(guān)口，也應(yīng)做好檢疫工作，禁止買賣疫區(qū)有疑似癥狀的活牛，防止疫情的傳播擴(kuò)散?；鶎有竽莲F醫(yī)部門要定期做好對(duì)區(qū)域內(nèi)牛的檢疫工作，督促養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）制定牛的健康檔案，為后期防疫工作的開展奠定有利的基礎(chǔ)。

6.2.3 嚴(yán)格處置染疫病牛 發(fā)生LSD 疫情后，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）應(yīng)及時(shí)上報(bào)，轄區(qū)政府根據(jù)疫情擴(kuò)散情況及時(shí)封鎖疫區(qū)，按照發(fā)生二類動(dòng)物疫病的處置流程開展相關(guān)工作，并暫停一切有關(guān)牛的調(diào)運(yùn)活動(dòng)。針對(duì)染疫病牛，應(yīng)及時(shí)組織撲殺，并按照相關(guān)規(guī)范進(jìn)行無害化處理。針對(duì)未發(fā)病但受威脅的易感牛群，動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督部門應(yīng)督促養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）緊急接種疫苗，并做好隔離觀察工作，同時(shí)必須做好疫點(diǎn)疫區(qū)環(huán)境、設(shè)備、器具、墊料、運(yùn)載車輛的消毒滅源工作，殺滅潛藏的病原。

7 結(jié) 語

LSD 這種新興的動(dòng)物疫病為我國(guó)的牛養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的威脅。因此，我們必須充分認(rèn)識(shí)到這種疾病的危害性，以及防控工作的重要性和必要性。結(jié)合該病的季節(jié)性和流行特點(diǎn)，我們需要制定科學(xué)且完善的防控措施，以阻止該病的蔓延趨勢(shì)，降低養(yǎng)殖區(qū)域的發(fā)病率，減少養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）的經(jīng)濟(jì)損失，保障養(yǎng)牛業(yè)的健康有序發(fā)展。