黃 慧，張 武，閆妮娜

(浙江長(zhǎng)三角化學(xué)品安全評(píng)價(jià)有限公司，杭州 310023)

氨磺樂(lè)靈(oryzalin)，又名氨磺靈、黃草消，化學(xué)名稱為3,5-二硝基-N′,N′-二丙基對(duì)氨基苯磺酰胺，是一種低毒選擇性芽前除草劑，其通過(guò)破壞幼苗分生細(xì)胞的有絲分裂，從而抑制雜草幼芽及幼根的生長(zhǎng)，主要用于大豆、花生、棉花、果樹(shù)等作物田防除一年生禾本科和闊葉雜草，也可用于水稻等作物田的雜草[1～3]。

氨磺樂(lè)靈在國(guó)內(nèi)已獲得登記[4]，但對(duì)于氨磺樂(lè)靈在環(huán)境中的檢測(cè)方法鮮有報(bào)道[5]。本研究擬采用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法建立氨磺樂(lè)靈在土壤和水等環(huán)境介質(zhì)中的殘留檢測(cè)方法，相對(duì)于目前已報(bào)導(dǎo)的高效液相色譜法[6]具有靈敏度高、可靠性強(qiáng)的特點(diǎn)，可為該除草劑在環(huán)境中的安全監(jiān)測(cè)提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試樣品與材料

98.0%氨磺樂(lè)靈標(biāo)準(zhǔn)品(CAS 號(hào)19044 88 3，上海源葉生物科技有限公司)；乙腈、甲酸(均為色譜純，美國(guó)TEDIA 公司)；自來(lái)水；潮棕土：自然風(fēng)干后過(guò)2 mm 篩。

1.2 儀器

LCMS 8040 高效液相質(zhì)譜聯(lián)用儀(日本島津公司)；XSE205DU 電子天平(美國(guó)梅特勒 托利多公司)；VELOCITY 14 Pro 離心機(jī)(英國(guó)Dynamica 公司)；MS 3 BASIC 渦旋混合器(德國(guó)艾卡公司)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

依據(jù)《農(nóng)藥登記 土壤和水中化學(xué)農(nóng)藥分析方法建立和驗(yàn)證指南》(NY/T 3151—2017)[7]、《農(nóng)作物中農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》(Y/T 788—2018)[8]，分別進(jìn)行水、土中的添加回收試驗(yàn)。

準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用乙腈溶解配制儲(chǔ)備液；用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液逐步稀釋配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。以氨磺樂(lè)靈的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。并以水/土中的基質(zhì)溶液配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別考察基質(zhì)效應(yīng)；當(dāng)基質(zhì)效應(yīng)＜20%，可使用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，否則需用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 溶液配制

以乙腈為溶劑，配制得到質(zhì)量濃度為1 000 mg/L的儲(chǔ)備液1。

溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線：以乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液為溶劑，逐級(jí)稀釋配制質(zhì)量濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，待儀器穩(wěn)定后依次連續(xù)注入上述標(biāo)準(zhǔn)溶液，以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度回歸分析，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

水中基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線：以空白自來(lái)水為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度回歸分析，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

土中基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線：以空白土壤提取液為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。以峰面積對(duì)質(zhì)量濃度回歸分析，制得標(biāo)準(zhǔn)曲線。

用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液稀釋制得質(zhì)量濃度為0.1 mg/L的儲(chǔ)備液2 和1.0 mg/L 的儲(chǔ)備液3，待用。

1.4.2 水中添加回收試驗(yàn)

分別設(shè)置1.0、10μg/L 2 個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平設(shè)置5 個(gè)平行，同時(shí)設(shè)置1 個(gè)空白對(duì)照。

量取10 mL 空白自來(lái)水，分別加入質(zhì)量濃度為0.1 mg/L 的儲(chǔ)備液2 和1.0 mg/L 的儲(chǔ)備液3 各100 μL，使添加水平分別為1.0、10μg/L，搖晃混勻。靜置片刻后，過(guò)0.22μm 濾膜，LC MS/MS 測(cè)定。

1.4.3 土壤中添加回收試驗(yàn)

分別設(shè)置0.001、0.01 mg/kg 2 個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平設(shè)置5 個(gè)平行，同時(shí)設(shè)1 個(gè)空白對(duì)照。

稱取空白土壤10.0 g 于100 mL 離心管中，分別加入質(zhì)量濃度為0.1 mg/L 的儲(chǔ)備液2 和1.0 mg/L 的儲(chǔ)備液3 各100μL，使添加水平分別為0.001、0.01 mg/kg。待溶劑揮發(fā)后，加入5 mL乙腈和5 mL水，超聲10 min，180 r/min 振蕩20 min 混勻，然后1 000 r/min 離心5 min，取上層提取液過(guò)0.22μm 濾膜，LC MS/MS測(cè)定。

1.4.4 檢測(cè)條件

液相色譜條件：色譜柱：Agilent ZORBAX Extend C18(2.1 mm×50 mm，3.5μm)；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：10 μL；流速：0.4 mL/min。

表1 流動(dòng)相洗脫程序

MS 條件：掃描模式：ESI MRM Negative，噴霧氣流速：3 L/min，DL 溫度：250 ℃，加熱塊溫度：400 ℃，干燥氣流速：15 L/min。

表2 離子對(duì)及參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 重復(fù)性

將5.0μg/L 氨磺樂(lè)靈標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)進(jìn)樣7 次，檢測(cè)該方法中保留時(shí)間和響應(yīng)值(峰面積)的重復(fù)性。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，保留時(shí)間平均值為0.487 0 min，RSD 為0.110%；峰面積平均值為1.06×105，RSD 為1.91%。符合分析方法質(zhì)量控制要求。

表3 氨磺樂(lè)靈檢測(cè)重復(fù)性

2.2 水中添加回收試驗(yàn)

溶劑配標(biāo)為0.5～50.0μg/L 時(shí)，氨磺樂(lè)靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=1.68×104x+4.01×103(r=0.999 9)，各質(zhì)量濃度點(diǎn)準(zhǔn)確度范圍為90.8%～111.0%；基質(zhì)配標(biāo)為0.5～50.0μg/L時(shí)，氨磺樂(lè)靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=1.14×104x+3.28×103(r=0.999 1)，各質(zhì)量濃度點(diǎn)準(zhǔn)確度范圍為88.5%～109%。

利用斜率計(jì)算基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果為31.9%，基質(zhì)效應(yīng)>20%，因此以基質(zhì)配標(biāo)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量。基質(zhì)效應(yīng)的計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果

水中添加回收試驗(yàn)分別設(shè)置1.0、10μg/L 2 個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平設(shè)置5 個(gè)平行，同時(shí)設(shè)1 個(gè)空白對(duì)照，空白自來(lái)水在目標(biāo)出峰處無(wú)干擾。1.0、10 μg/L 添加水平的平均回收率分別為104%和109%，RSD 分別為4.62%和2.40%。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5 及圖1。

圖1 水中添加回收試驗(yàn)質(zhì)譜圖

表5 氨磺樂(lè)靈水中加標(biāo)回收率

2.3 土壤中添加回收試驗(yàn)

溶劑配標(biāo)為0.5～50.0μg/L 時(shí)，氨磺樂(lè)靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=1.80×104x+4.24×103(r=0.999 9)，各質(zhì)量濃度點(diǎn)準(zhǔn)確度范圍為86.9%～107%?；|(zhì)配標(biāo)為0.5～50μg/L時(shí)，氨磺樂(lè)靈的峰面積與質(zhì)量濃度呈線性相關(guān)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=7.60×103x+2.21×103(r=0.999 3)，各質(zhì)量濃度點(diǎn)準(zhǔn)確度范圍為86.9%～113%。利用斜率計(jì)算基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果為57.8%，基質(zhì)效應(yīng)>20%，因此以基質(zhì)配標(biāo)得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量?；|(zhì)效應(yīng)計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果

土壤中添加回收試驗(yàn)分別設(shè)置0.001、0.01 mg/kg 2 個(gè)添加水平，每個(gè)添加水平設(shè)置5 個(gè)平行，同時(shí)設(shè)1 個(gè)空白對(duì)照，空白土壤提取液在目標(biāo)出峰處無(wú)干擾。0.001、0.01mg/kg 的平均回收率分別為94.8%和85.4%，RSD 分別為3.53%和4.78%。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7 及圖2。

表7 氨磺樂(lè)靈土壤中添加回收率

圖2 土壤中添加回收試驗(yàn)質(zhì)譜圖

3 結(jié)論

對(duì)氨磺樂(lè)靈在水和土壤中的殘留量檢測(cè)研究中，建立了高效液相液質(zhì)聯(lián)用儀(LCMS/MS)的分析方法。測(cè)得在水中1.0、10.0μg/L 和土壤中0.001、0.01 mg/kg 共4 個(gè)添加水平下平均回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，均符合《農(nóng)藥登記 土壤和水中化學(xué)農(nóng)藥分析方法建立和驗(yàn)證指南》(NY/T 3151—2017)和《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763—2012)要求。該方法靈敏、有效，適合實(shí)驗(yàn)室大批量檢測(cè)。