趙 欣，周雅琳，馮 霞

（重慶第二師范學(xué)院 重慶市功能性食品協(xié)同創(chuàng)新中心，重慶 400067）

牦牛乳富含蛋白質(zhì)和微量元素，營養(yǎng)價(jià)值優(yōu)于普通牛乳，自然發(fā)酵牦牛酸乳具有特殊的風(fēng)味和營養(yǎng)組成，還富含未經(jīng)鑒定和開發(fā)的微生物資源[1-2]。從自然發(fā)酵牦牛酸乳中分離的乳酸菌發(fā)酵酸奶具有腸道調(diào)節(jié)、減脂和等保健功效[3-6]。另外，自然發(fā)酵牦牛乳中含有的微生物不僅種類豐富，還具有良好的抗性，是潛在的益生菌發(fā)掘資源[7]。

狼瘡性腎炎是一種因免疫失調(diào)引發(fā)的腎炎，嚴(yán)重的腎臟疾病出現(xiàn)后常常導(dǎo)致狼瘡性腎炎，進(jìn)而引起腎小球炎癥[8]。狼瘡性腎炎發(fā)生后會(huì)引起機(jī)體一系列病變，除了腎小球炎癥外，還會(huì)出現(xiàn)淋巴結(jié)增生，嚴(yán)重時(shí)機(jī)體免疫失調(diào)，出現(xiàn)腎臟硬化、代謝及排毒失調(diào)，從而危及生命[9]。機(jī)體免疫系統(tǒng)中B細(xì)胞及T細(xì)胞被過度激活也是狼瘡性腎炎的主要表現(xiàn)，從而造成體內(nèi)的T細(xì)胞出現(xiàn)分化，影響正常的免疫系統(tǒng)工作。有研究顯示益生菌干預(yù)下能夠保持T細(xì)胞在機(jī)體中的平衡，發(fā)揮益生菌干預(yù)腎炎的作用[10]。益生菌自身的肽聚糖和脂磷壁酸等成分能夠激活和加強(qiáng)免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體免疫力；同時(shí)益生菌還能分泌出刺激免疫系統(tǒng)的活性物質(zhì)，也能發(fā)揮提高免疫力的作用，機(jī)體免疫力提高后，炎癥引起的體內(nèi)毒性物質(zhì)被加速排出，促進(jìn)了腎臟病變的恢復(fù)[11]。降植烷是一種能夠引起炎癥和使免疫失調(diào)的化學(xué)物質(zhì)，在動(dòng)物體內(nèi)能夠使T細(xì)胞和B細(xì)胞的平衡被打破，造成動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)中出現(xiàn)異常抵抗，進(jìn)而引發(fā)狼瘡性腎炎，因此常被用于構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性狼瘡性腎炎模型，以檢測藥物或功能性食品的功效[12-13]。Lactococcus lactissubsp.lactisHFY14（LLSLHFY14）是從四川紅原高原藏族牧民自然發(fā)酵酸奶中分離出的一株菌，本研究通過降植烷誘導(dǎo)狼瘡性腎炎建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，觀察Lactococcus lactissubsp.lactisHFY14的腎炎改善作用，并且通過進(jìn)一步的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)分析Lactococcus lactissubsp.lactisHFY14發(fā)揮提高免疫力作用的機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 菌株、動(dòng)物、材料與試劑

Lactococcus lactissubsp.lactisHFY14分離于四川阿壩藏族羌族自治州紅原縣的自然發(fā)酵牦牛酸乳，該菌經(jīng)過鑒定后在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心進(jìn)行了專利保藏，專利保藏號(hào)為CGMCC No.16647。

6 周齡的SPF級C57BL/J6小鼠，雌雄各半，共計(jì)50 只，體質(zhì)量為（23±2）g，購于重慶恩斯維爾生物科技有限公司。本研究中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)重慶市功能性食品協(xié)同創(chuàng)新中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號(hào)為2021050008B。

降植烷（純度≥98%） 美國Sigma公司；潑尼松（純度≥97%） 北京百靈威科技有限公司；白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-2、IL-12、干擾素γ（interferon gamma，IFN-γ）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（transforming growth factor beta，TGF-β）酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒以及血清肌酐（serum creatinine，SCr）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，ALB）、甘油三酯（triglyceride，TG）測定試劑盒 武漢賽培生物科技有限公司；TRIzol試劑、SYBR綠色聚合酶鏈反應(yīng)反應(yīng)混合物（SYBR Green PCR Master Mix）、十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）凝膠制備試劑盒、二喹林甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白濃度測定試劑盒 北京索萊寶科技有限公司；定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative polymerase chain reaction，qPCR）上下游引物、一抗、二抗 美國Thermo Fisher Scientific公司；其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

BX43顯微鏡 日本奧林巴斯公司；UV-2600i紫外-可見分光光度計(jì)、StoponePlus qPCR儀 美國Thermo Fisher Scientific公司；5500Multi化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)上海天能科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

C57BL/J6小鼠在控溫（（20±1）℃）控濕（30%～40%）環(huán)境下實(shí)用性喂養(yǎng)1 周。實(shí)驗(yàn)小鼠被隨機(jī)分為正常組、模型組、LLSLHFY14低濃度作用（LLSLHFY14-L）組、LLSLHFY14高濃度作用（LLSLHFY14-H）組和潑尼松組（藥物陽性組），每組10 只，雌雄各半。適應(yīng)性喂養(yǎng)結(jié)束后對正常組小鼠腹腔注射0.5 mL生理鹽水溶液，同時(shí)對其余各組小鼠腹腔注射0.5 mL降植烷[14]。注射降植烷后第2天開始，LLSLHFY14-L組和LLSLHFY14-H組小鼠每日按108CFU/kgmb和109CFU/kgmb劑量灌胃LLSLHFY14活菌溶液，潑尼松組小鼠每日按10 mg/kgmb劑量灌胃潑尼松溶液，正常組和模型組小鼠每日灌胃0.2 mL蒸餾水，各組灌胃樣品12 周。12 周后采用毛細(xì)管眼眶取血對小鼠實(shí)施采血，然后斷頸處死小鼠，解剖小鼠取內(nèi)臟，稱量胸腺和脾臟質(zhì)量，根據(jù)式（1）、（2）分別計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。

1.3.2 血清細(xì)胞因子質(zhì)量濃度測定

將收集到的小鼠血液在4 ℃下1 500 r/min離心10 min，分離得到上層血清，然后根據(jù)ELISA試劑盒的方法對血清中IL-2、IL-12、IFN-γ、IgG和TGF-β細(xì)胞因子質(zhì)量濃度進(jìn)行測定[15]。

1.3.3 血清指標(biāo)測定

通過1.3.2節(jié)方法分離出小鼠血清，按相應(yīng)試劑盒方法對小鼠血清中的SCr、BUN、TC、TG、TP和ALB水平進(jìn)行測定。

1.3.4 抗雙鏈脫氧核糖核酸抗體測定

注射降植烷后第2天開始每兩周（第2、4、6、8、10、12周）采用眼眶取血法對小鼠進(jìn)行采血，然后以1.3.2節(jié)方法分離出小鼠血清后加入微孔板中，37 ℃下放置120 min，然后再加入雙鏈脫氧核糖核酸（doublestranded deoxyribonucleic acid、dsDNA）抗體，與辣根過氧化物酶進(jìn)行標(biāo)記后與抗原結(jié)合，最后加入底物3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺進(jìn)行顯色，以顯色與否判斷是否為陽性[16]。

1.3.5 組織切片觀察

解剖小鼠取出小鼠的右腎，然后用10%福爾馬林進(jìn)行固定。48 h脫水處理后，用石蠟包埋腎臟組織，再將包埋的組織進(jìn)行切片，最后用蘇木精-伊紅（hematoxylineosin，H&E）染料對切片染色后用顯微鏡觀察組織的病理學(xué)變化[17]。

1.3.6 qPCR分析

取0.1 g小鼠的左腎組織，然后加入0.9 mL生理鹽水進(jìn)行勻漿。然后加入1.0 mL的RNAzol對組織中的RNA進(jìn)行提取。測定RNA提取液的OD260nm/OD280nm，計(jì)算RNA純度和濃度，再將RNA提取液的質(zhì)量濃度調(diào)整為1 μg/μL后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄得到cDNA。將1 μL cDNA、10 μL SYBR Green PCR Master Mix、7 μL 無菌蒸餾水、1 μL上游引物和1 μL下游引物進(jìn)行混合，于定量PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)（95 ℃、60 s；95 ℃、15 s；然后40 個(gè)循環(huán)：55 ℃、30 s；72 ℃、35 s；95 ℃、30 s；55 ℃、35 s），反應(yīng)后用2-ΔΔCt法對相關(guān)基因進(jìn)行計(jì)算和定量分析，以β-actin作為內(nèi)參進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，引物設(shè)計(jì)如表1所示[18]。

表1 本實(shí)驗(yàn)中使用的引物序列Table 1 Primer sequences used in this experiment

1.3.7 Western blot分析

取0.5 g小鼠的左腎組織，加入1 mL放射免疫沉淀裂解液和10 μL苯甲基磺酰氟進(jìn)行裂解，然后在4 ℃下12 000 r/min離心4 min，除去中間蛋白層溶液，然后用BCA蛋白定量試劑盒對蛋白進(jìn)行定量并將蛋白稀釋到質(zhì)量濃度50 μg/mL。按4∶1體積比將稀釋的蛋白液與緩沖液混合后在100 ℃下保溫5 min，接著將混合液加入預(yù)制膠中進(jìn)行垂直凝膠電泳，持續(xù)50 min后開始聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）轉(zhuǎn)膜。轉(zhuǎn)膜完成后用含1 mol/L Tris-HCl緩沖鹽溶液（Tris-HCl buffer salt with tween，TBST）的5%脫脂牛乳對PVDF膜進(jìn)行1 h封閉，封閉完成后用TBST溶液洗膜。處理后的PVDF膜在25 ℃下于抗體稀釋溶液中浸泡，在1∶500（IL-4、IL-1β或TGF-β抗體與TBST體積比）稀釋的單克隆一抗中孵育2 h后再在1∶1 000（抗體與TBST體積比）稀釋的羊抗鼠IgG二抗中孵育2 h。最后用Supersignal West Pico PLUS對PVDF膜進(jìn)行填充后置于成像系統(tǒng)中觀察[18]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

對待檢測的指標(biāo)進(jìn)行3 次的平行測定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。使用單因素方差分析方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析，并用Excel 2016軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠免疫器官指數(shù)分析結(jié)果

如圖1所示，通過計(jì)算小鼠的器官指數(shù)發(fā)現(xiàn)，正常組小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)高于其他各組，而模型組胸腺和脾臟器官指數(shù)則顯著低于其他各組（P＜0.05）。相比模型組小鼠，LLSLHFY14-L、LLSLHFY14-H和潑尼松均能夠使胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著提高（P＜0.05），LLSLHFY14-H和潑尼松提高的程度高于LLSLHFY14-L。

圖1 小鼠的胸腺指數(shù)（A）和脾臟指數(shù)（B）Fig.1 Thymus (A) and spleen (B) indices in mice

2.2 小鼠血清中IL-2、IL-12、IFN-γ、TGF-β和IgG質(zhì)量濃度分析結(jié)果

如圖2所示，模型組小鼠血清中的IL-2質(zhì)量濃度和IL-12質(zhì)量濃度顯著低于其他各組（P＜0.05），而IFN-γ、TGF-β質(zhì)量濃度和IgG質(zhì)量濃度顯著高于其他各組（P＜0.05）。正常組小鼠血清中的IL-2、IL-12、IFN-γ、TGF-β質(zhì)量濃度和IgG質(zhì)量濃度呈現(xiàn)出和模型組相反的趨勢，IL-2和IL-12水平顯著高于其他組，IFN-γ、TGF-β質(zhì)量濃度和IgG質(zhì)量濃度低于其他組。與模型組相比，LLSLHFY14能夠使狼瘡性腎炎小鼠血清中的IL-2、IL-12質(zhì)量濃度升高并使TGF-β、IFN-γ、IgG質(zhì)量濃度降低，且效果呈現(xiàn)劑量依賴性，高濃度的LLSLHFY14（LLSLHFY14-H）效果接近藥物潑尼松，能使IL-2、IL-12、IFN-γ、TGF-β和IgG的血清質(zhì)量濃度趨于正常組水平。

圖2 小鼠血清中的IL-2（A）、IL-12（B）、IFN-γ（C）、TGF-β（D）和IgG（E）細(xì)胞因子水平Fig.2 Levels of IL-2 (A), IL-12 (B), IFN-γ (C), TGF-β (D) and IgG (E)in serum of the mice

2.3 小鼠血清中SCr、BUN、TC、TG、TP和ALB水平分析結(jié)果

如圖3所示，正常組小鼠血清中TP和ALB的水平與其他各組相比均呈現(xiàn)出顯著差異（P＜0.05）。模型組小鼠的TP和ALB水平顯著低于其他各組（P＜0.05），而SCr、BUN、TC和TG水平則顯著高于其他各組（P＜0.05）。LLSLHFY14-H組小鼠血清中的TP和ALB水平低于正常組和潑尼松組，高于模型組和LLSLHFY14-L組；而LLSLHFY14-H組的SCr、BUN、TC和TG水平高于正常組和潑尼松組，低于模型組和LLSLHFY14-L組。

圖3 小鼠血清中的SCr（A）、BUN（B）、TC（C）、TG（D）、TP（E）和ALB（F）水平Fig.3 Levels of SCr (A), BUN (B), TC (C), TG (D), TP (E) and ALB (F)in serum of mice

2.4 小鼠血清中dsDNA抗體的陽性率分析結(jié)果

在LLSLHFY14作用小鼠開始后的第2、4、6、8、10、12周對小鼠血清的dsDNA抗體進(jìn)行檢測。正常組小鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期中血清dsDNA抗體均呈現(xiàn)陰性，第4周開始，模型組所有小鼠dsDNA抗體均呈陽性（表2），提示狼瘡性腎炎動(dòng)物模型誘導(dǎo)成功。LLSLHFY14和潑尼松抑制了小鼠狼瘡性腎炎的陽性率，其中LLSLHFY14-H在4～6 周中呈現(xiàn)50%的陽性率，進(jìn)入第10周后降低到40%，潑尼松在第6周呈現(xiàn)出50%的陽性率，隨之降低，進(jìn)入第12周降為30%，LLSLHFY14-H和潑尼松均能使陽性率降低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明LLSLHFY14和潑尼松抑制了小鼠狼瘡性腎炎的發(fā)病，高濃度LLSLHFY14的效果接近潑尼松。

表2 狼瘡性腎炎小鼠血清的dsDNA抗體陽性率Table 2 Positive rates of anti-dsDNA antibody in serum of mice with lupus nephritis

2.5 腎組織的病理觀察

顯微鏡下觀察到正常組小鼠腎組織中細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整且腎小球形態(tài)正常，但是模型組小鼠腎組織中的腎小球出現(xiàn)包括破裂等形態(tài)的變化，同時(shí)腎臟細(xì)胞間還出現(xiàn)炎性浸潤，總體呈現(xiàn)出嚴(yán)重的腎組織病變（圖4）。潑尼松可以明顯地減輕腎臟組織的病變，高濃度的LLSLHFY14（LLSLHFY14-H組）也一定程度地減輕了腎組織的病變，能夠起到與潑尼松接近的效果。

圖4 小鼠腎臟組織的H&E染色病理觀察Fig.4 Pathological observation of mouse kidney tissues by H&E staining

2.6 小鼠腎組織的mRNA相對表達(dá)量和蛋白相對表達(dá)量分析結(jié)果

如圖5所示，通過qPCR和Western blot實(shí)驗(yàn)對小鼠腎組織的mRNA相對表達(dá)量和蛋白相對表達(dá)量進(jìn)行了檢測，結(jié)果顯示模型組小鼠腎組織中的IL-1β和TGF-β mRNA和蛋白相對表達(dá)量均顯著高于其他組（P＜0.05），但I(xiàn)L-4 mRNA和蛋白相對表達(dá)量均顯著低于其他組（P＜0.05），正常組小鼠腎組織的IL-4 mRNA和蛋白相對表達(dá)量則均顯著高于其他組（P＜0.05），TGF-β和IL-1β mRNA和蛋白相對表達(dá)量均顯著低于其他組（P＜0.05）。相比模型組，LLSLHFY14-L、LLSLHFY14-H和潑尼松均能夠顯著上調(diào)狼瘡性腎炎小鼠腎臟組織的IL-4表達(dá)和下調(diào)IL-1β、TGF-β表達(dá)（P＜0.05），LLSLHFY14-H組和潑尼松組調(diào)控IL-4、TGF-β和IL-1β蛋白表達(dá)的能力無顯著差異（P＞0.05），但強(qiáng)于LLSLHFY14-L組。

圖5 小鼠腎組織中的IL-4、TGF-β和IL-1β mRNA相對表達(dá)量和蛋白相對表達(dá)量Fig.5 mRNA and protein expression of IL-4, TGF-β and IL-1β in mouse kidney tissues

3 討 論

狼瘡性腎炎是一種與機(jī)體免疫異常直接相關(guān)的疾病，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)免疫復(fù)合物、免疫細(xì)胞、免疫細(xì)胞因子等異常。免疫器官指數(shù)能夠直接反映小鼠內(nèi)臟狀況，免疫器官指數(shù)的提升是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病癥減輕、機(jī)體得到恢復(fù)的表現(xiàn)[19]。胸腺和脾臟是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要器官，免疫性疾病小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)都會(huì)出現(xiàn)顯著下降[20]。在本研究中狼瘡性腎炎也造成模型組小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)下降，LLSLHFY14和潑尼松干預(yù)狼瘡性腎炎小鼠后免疫失調(diào)得到抑制，胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)得到改善，特別是LLSLHFY14-H的效果接近藥物潑尼松的作用，使器官指數(shù)趨于正常狀態(tài)。

T細(xì)胞、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞和B細(xì)胞廣泛分布在體內(nèi)各個(gè)免疫器官和組織中，它們在機(jī)體內(nèi)發(fā)揮重要的免疫調(diào)節(jié)作用。IL-2和IL-12可以增強(qiáng)T細(xì)胞活性，IL-12能夠協(xié)同IL-2增強(qiáng)機(jī)體免疫力[21-22]；同時(shí)IL-2還可以刺激NK細(xì)胞的分化和激活，還能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化以及免疫球蛋白的產(chǎn)生[21]。研究顯示，腎小球損傷后免疫系統(tǒng)應(yīng)激反應(yīng)下，NK細(xì)胞和Th1急性反應(yīng)下會(huì)產(chǎn)生大量的IFN-γ[23]。TGF-β在免疫調(diào)節(jié)中抑制免疫細(xì)胞活性和B淋巴細(xì)胞分化，對免疫系統(tǒng)的正常工作起到不利的影響[24]。IgG是機(jī)體內(nèi)含量最高的一類免疫球蛋白，機(jī)體出現(xiàn)免疫性疾病的情況下血液中的IgG水平會(huì)異常上升，狼瘡性腎炎臨床患者的血清IgG水平也會(huì)表現(xiàn)出異常的升高[25]。IL-2、IL-12、IFN-γ、TGF-β和IgG的水平變化在本研究中顯著體現(xiàn)在狼瘡性腎炎小鼠血清中，LLSLHFY14的干預(yù)能夠抑制這些變化，改善小鼠的免疫失調(diào)，從而改善狼瘡性腎炎。

SCr與尿素氮都是含氮的有機(jī)化合物，作為蛋白質(zhì)代謝在機(jī)體內(nèi)的最終產(chǎn)物，通過腎小球正常過濾。但狼瘡性腎炎發(fā)病時(shí)，腎小球過濾的能力下降，SCr與尿素氮在血清中水平異常提高，所以SCr與尿素氮水平也被作為臨床診斷腎病的重要指標(biāo)[26]。腎臟出現(xiàn)嚴(yán)重病變時(shí)會(huì)發(fā)生高鉀血癥，由此也會(huì)導(dǎo)致膽固醇與TG過度積累，這兩個(gè)指標(biāo)也被認(rèn)為是腎功能異常的重要臨床指標(biāo)[27]。腎功能異常時(shí)會(huì)出現(xiàn)蛋白尿，造成血清中TP含量下降，同時(shí)還造成具有腎病治療作用的ALB的含量也降低，保持機(jī)體內(nèi)的TP和ALB水平正常也是維持腎功能的重要干預(yù)途徑[28]。本研究中LLSLHFY14能夠調(diào)節(jié)腎功能異常后的異常血清水平，從而起到改善狼瘡性腎炎及其引起的腎功能異常的作用。狼瘡性腎炎中的另一個(gè)關(guān)鍵生理變化是發(fā)病后會(huì)特異性的表現(xiàn)出dsDNA抗體[29]，LLSLHFY14能夠降低dsDNA抗體的陽性率，起到干預(yù)狼瘡性腎炎發(fā)病的作用。

IL-4是重要的免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)，對B細(xì)胞和T細(xì)胞等免疫細(xì)胞都有調(diào)節(jié)作用，還可以對IFN-γ的mRNA轉(zhuǎn)錄起到抑制作用，從而起到緩解腎功能異常對機(jī)體造成的影響，改善免疫失調(diào)和腎功能異常[30]。IL-1β是免疫系統(tǒng)中的一個(gè)重要促炎因子，IL-1β過度產(chǎn)生是機(jī)體免疫應(yīng)激反應(yīng)和炎癥的重要表現(xiàn)，現(xiàn)已有研究顯示通過IL-1β受體拮抗劑調(diào)控IL-1β能夠減輕狼瘡炎癥[31]。TGF-β在機(jī)體內(nèi)的過度表達(dá)將加劇腎臟病變，增加腎纖維化的可能性[32]。本研究也證實(shí)狼瘡性腎炎發(fā)病小鼠腎臟組織中的IL-4、TGF-β和IL-1β表達(dá)均出現(xiàn)異常，LLSLHFY14能夠顯著控制表達(dá)異常，從而起到改善腎功能的作用。

通過有益微生物干預(yù)狼瘡性腎炎的研究還較少，有研究通過Lactobacillus oris、Lactobacillus rhamnosus、Lactobacillus reuteri、Lactobacillus johnsonii和Lactobacillus gasseri5 種有益菌灌胃小鼠干預(yù)狼瘡性腎炎，發(fā)現(xiàn)L.reuteri能夠改善小鼠腸道菌群，從而調(diào)節(jié)小鼠的免疫機(jī)能來起到干預(yù)狼瘡性腎炎的作用[33]，特別是這些有益微生物能夠調(diào)節(jié)小鼠機(jī)體的IL水平來調(diào)控IgG2a和免疫機(jī)能，本研究中LLSLHFY14也能夠?qū)π∈蟮亩喾NIL（IL-1β、IL-2、IL-4和IL-12）水平起到改善作用，從而調(diào)節(jié)IgG水平和增強(qiáng)免疫機(jī)能。但是本實(shí)驗(yàn)未對小鼠的腸道菌群變化進(jìn)行深入研究，為了更深入闡明LLSLHFY14的作用機(jī)制，未來研究應(yīng)進(jìn)一步分析腸道菌群變化。

4 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)對一株來源于發(fā)酵牦牛酸乳的乳酸菌進(jìn)行研究，對其在狼瘡性腎炎中的作用和機(jī)制進(jìn)行了初步探討。研究結(jié)果顯示，LLSLHFY14對狼瘡性腎炎小鼠的免疫功能起到明顯的調(diào)節(jié)作用，可進(jìn)一步改善狼瘡性腎炎引起的腎功能異常，其具備對狼瘡性腎炎進(jìn)行長期干預(yù)改善腎功能的應(yīng)用潛質(zhì)，效果接近于藥物潑尼松。食品來源的微生物具有良好的安全性，LLSLHFY14具有作為益生菌發(fā)揮改善腎功能的應(yīng)用價(jià)值，但仍需要人體臨床試驗(yàn)來進(jìn)一步深入驗(yàn)證。