雷麗莉 張淑芳 章岳軍 盧麗枝 李 春 廖 瑩 劉 巍 李悅伊 沈水寶

(廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧530004)

食葉草(Rumexdapibusherbaby.)為多年生宿根草本植物，蓼科(Polygonaceae)，酸模屬(Rumex)，屬于藥食兩用植物。因其蛋白質(zhì)含量高又名“蛋白草”，除此之外，食葉草的氨基酸含量及組成相對比較豐富均衡，尤其鉀含量較高，因此也有“氨基酸草”“高鉀菜”等別稱。酸模屬植物生物活性成分豐富[1]，具有廣泛的治療作用，如抗微生物、抗氧化、抗炎和抗腫瘤作用等[2]。有研究表明，食葉草中含維生素C、維生素E、黃酮、胡蘿卜素、綠原酸、超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化生物活性成分[3-4]。此外，食葉草莖、葉中含有一定量的酒石酸、草酸等有機酸，這些成分可有效緩解機體衰老。廖科酸模屬的植物在民間有土大黃的俗稱，其蒽醌類衍生物(大黃素)抗菌作用較強[5]。食葉草屬于我國引進的雜交改良品種，因此其適應(yīng)能力特別強。在我國的南方一年四季均可收割，北方春、夏、秋一年三季收割，平均1個月為1個生長周期，可收割1次。

目前我國國內(nèi)飼料資源，尤其是蛋白質(zhì)資源的緊缺與高需求導(dǎo)致其價格在市場中的波動越來越大，成為行業(yè)發(fā)展的一大限制性因素。除此之外，傳統(tǒng)高蛋白質(zhì)飼料在生產(chǎn)中的消化利用率普遍較低，這也導(dǎo)致了養(yǎng)殖成本的增加。因此，新型蛋白質(zhì)資源食葉草的開發(fā)以及新型低蛋白質(zhì)飼料應(yīng)用研究也變得尤為重要。岳玉勝等[6]研究指出，以46.3%蛋白質(zhì)水平的豆粕為例，蛋白質(zhì)水平每降低1%相當(dāng)于飼料中減少23 kg/t的豆粕用量。段格艷等[7]在育肥豬低蛋白質(zhì)飼糧中添加全株構(gòu)樹發(fā)酵飼料，發(fā)現(xiàn)添加全株構(gòu)樹發(fā)酵飼料可抑制背脂合成，降低體脂重量，并通過改善腸道微生物菌群組成促進動物的生長性能。因此，本試驗旨在研究全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬生長性能、血液指標及胴體性狀的影響，為新型蛋白質(zhì)資源食葉草在育肥豬低蛋白質(zhì)飼糧中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用食葉草購自云南文山食葉草種植基地，其營養(yǎng)水平及氨基酸組成見表1。

表1 食葉草營養(yǎng)水平及氨基酸組成(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 試驗設(shè)計

選取育肥期平均體重大約為80 kg的商品豬(杜洛克×長白×大白)80頭，隨機分為4組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)5只。

1.3 試驗飼糧

試驗飼糧以粗蛋白質(zhì)水平為梯度進行設(shè)計。對照組飼喂玉米-豆粕型全混合發(fā)酵飼糧，試驗組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組)分別飼喂不同蛋白質(zhì)水平的全混合食葉草發(fā)酵飼糧(粗蛋白質(zhì)水平分別為14.13%、12.17%、10.30%)，各試驗組飼糧中食葉草含量分別占飼糧總量的30.00%、40.00%和46.06%(以鮮樣計)。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

發(fā)酵飼糧采用固態(tài)發(fā)酵工藝在廣西壯族自治區(qū)靖西市祿峒鎮(zhèn)進行制作。發(fā)酵菌劑購自南寧諾惠生物科技有限公司，為復(fù)合發(fā)酵菌劑，主要菌種有乳酸菌、枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母等。將食葉草用割草機切割成寬度約為1 cm長條，然后將各飼料原料、預(yù)混料及食葉草按照不同的配比依次加入攪拌機中。根據(jù)各原料初始含水量，適量加水將含水量控制在50%左右，發(fā)酵菌劑按照0.1%的接種量進行接種，攪拌至均勻，最后裝入發(fā)酵袋(裝有單向排氣閥)中25～35 ℃靜止發(fā)酵72 h。

1.4 飼養(yǎng)管理

每天08:00、14:00、21:00進行飼喂。試驗采用液體飼喂的模式，水料比為1∶3，試驗期間豬自由飲水。每天清掃圈舍，飼養(yǎng)期間按照豬場常規(guī)管理進行免疫，豬舍定期消毒并保持舍內(nèi)自然通風(fēng)。試驗期42 d。

1.5 樣品采集和指標檢測

1.5.1 生長性能的測定

試驗開始前1天，用磅秤稱取每只豬的體重，并打耳標進行標記。試驗期間以重復(fù)為單位每日準確記錄豬群的采食量，試驗結(jié)束的前1天供水禁食12 h后稱重。最后計算平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.5.2 血液指標的測定

正試期的第43天早晨，每個重復(fù)選2頭體重接近于每欄平均體重的豬，空腹前腔靜脈采血，每頭豬大約采集血液10 mL，分別收集于含抗凝劑及普通采血管中用于制備血漿和血清。

血液生理指標的測定：采血結(jié)束后4 h內(nèi)于廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院利用全自動血細胞分析儀(PE-6800VET)測定血液生理指標，測定前需將血樣搖勻，讀取數(shù)據(jù)并記錄。

血清生化指標的測定：普通采血管3 000 r/min離心10 min，取上層血清裝入1.5 mL的EP管中，-4 ℃冰箱中保存，后于廣西大學(xué)動物醫(yī)院使用全自動血液生化分析儀(URIT-8021)進行血清生化指標的測定。

1.5.3 胴體性狀的測定

試驗結(jié)束后，選擇對照組及試驗組中生長表現(xiàn)最優(yōu)組(參照豬群試驗期間日常表現(xiàn)及生長性能結(jié)果)進行屠宰試驗。具體屠宰操作步驟《畜禽屠宰操作規(guī)程 生豬》(GB/T 17236—2019)，胴體指標的測定參照《瘦肉型豬胴體性狀測定技術(shù)規(guī)范》(NY/T 825—2004)。測定指標包括屠宰率、平均背膘厚、皮厚、體直長、體斜長、眼肌面積、瘦肉率、皮脂率、骨骼率。相關(guān)指標的測定或計算方法如下。

胴體重：屠宰放血后的豬，去頭、尾、四肢、內(nèi)臟(保留板油和腎臟)后剩下的軀體重量。

屠宰率(%)=100×胴體重/宰前活重。

平均背膘厚：用游標卡尺測量胴體背中線肩部最厚處、腰薦錐結(jié)合處以及最后肋3處的背膘厚，取平均值。

皮厚：用游標卡尺測量胴體背中線第6肋至第7肋處的皮膚厚度，取平均值。

體直長：測量胴體恥骨聯(lián)合前緣至第1頸椎凹窩部的長度。

體斜長：測量胴體恥骨聯(lián)合前緣至第1肋骨與胸骨聯(lián)合處中點的長度。

眼肌面積：用硫酸紙描繪出背最長肌最后肋處的眼肌輪廓，測量其高度和寬度，高度與寬度的乘積即為眼肌面積。

瘦肉率、皮脂率、骨骼率：將胴體的肉、皮脂、骨分別剝離再求和，按實際剝離結(jié)果計算各組織的百分比；其中，瘦肉率=100×(瘦肉重量/剝離組織總重)，皮脂率=100×(皮脂重量/剝離組織總重)，骨骼率=100×(皮脂重量/ 剝離組織總重)。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Excel 2010將數(shù)據(jù)進行初步整理后，生長性能及血液指標使用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析，并用Duncan氏法進行多重比較，胴體性狀進行獨立樣本t檢驗，數(shù)據(jù)以“平均值±標準誤”表示。結(jié)果根據(jù)P值大小進行顯著性判定，其中P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬生長性能的影響

由表3可知，各組之間初始均重和結(jié)束均重均無顯著差異(P>0.05)。試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組平均日增重均極顯著高于對照組(P<0.01)。試驗Ⅱ組平均日采食量極顯著高于對照組和試驗Ⅲ組(P<0.01)，顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.05)。試驗Ⅲ組料重比極顯著低于其他各組(P<0.01)，試驗Ⅰ組料重比極顯著低于對照組(P<0.01)，試驗Ⅱ組料重比與對照組差異不顯著(P>0.05)。

表3 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬生長性能的影響

2.2 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血液指標的影響

2.2.1 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血液生理指標的影響

由表4可知，試驗Ⅰ組中間細胞比率顯著低于其他各組(P<0.05)。對照組中性粒細胞比率顯著低于其他各組(P<0.05)。試驗Ⅱ組紅細胞計數(shù)和血紅蛋白含量顯著低于其他各組(P<0.05)。試驗Ⅰ組紅細胞壓積顯著高于試驗Ⅱ組(P<0.05)。試驗Ⅱ組平均紅細胞血紅蛋白濃度極顯著低于對照組(P<0.01)，顯著低于試驗Ⅰ、Ⅲ組(P<0.05)。試驗Ⅲ組血小板計數(shù)顯著高于試驗Ⅱ組(P<0.05)。試驗Ⅱ組血小板平均體積顯著低于試驗Ⅰ組(P<0.05)。試驗Ⅱ組血小板壓積顯著低于試驗Ⅲ組(P<0.05)。

表4 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血液生理指標的影響

2.2.2 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血清生化指標的影響

由表5可知，各組之間血清免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、白蛋白和球蛋白含量無顯著差異(P>0.05)。試驗Ⅲ組血清IgA含量顯著低于其他各組(P<0.05)。試驗Ⅰ組血清總蛋白含量顯著低于其他各組(P<0.05)。試驗Ⅰ、Ⅲ組血清尿素氮含量顯著低于對照組(P<0.05)。

表5 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血清生化指標的影響

續(xù)表5項目Items對照組Control group試驗Ⅰ組Test group Ⅰ試驗Ⅱ組Test group Ⅱ試驗Ⅲ組Test group Ⅲ總蛋白 TP69.95±0.91a68.35±40.37b68.45±2.68a69.05±2.09a白蛋白 ALB39.97±0.6239.08±1.3139.20±1.1838.73±0.59球蛋白 GLB29.98±0.9429.73±1.4931.77±2.1229.85±1.59尿素氮 UN5.44±0.61a3.60±0.91b4.06±0.20ab3.57±0.28b

2.3 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬胴體性狀的影響

由表6可知，對照組與生長表現(xiàn)最優(yōu)組——試驗Ⅲ組之間的屠宰率、體直長、體斜長、平均背膘厚、皮厚、眼肌面積、骨骼率和皮脂率均無顯著差異(P>0.05)。試驗Ⅲ組瘦肉率顯著高于對照組(P<0.05)。

表6 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬胴體性狀的影響

3 討 論

3.1 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬生長性能的影響

微生物發(fā)酵飼料不僅可以改善飼料營養(yǎng)價值并提高飼料適口性[8-9]，還可在一定程度上通過改善動物腸道消化酶活性[10]，優(yōu)化腸道菌群的組成，通過增加腸道有益菌豐度以改善動物的腸道健康[11-13]。宋博等[14]在育肥豬低蛋白質(zhì)飼糧中添加10%構(gòu)樹全株干粉或構(gòu)樹全株發(fā)酵飼料，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低蛋白質(zhì)飼糧對育肥豬生長性能并無負面影響，與本研究結(jié)果一致。飼糧蛋白質(zhì)水平與腸道微生物的組成以及代謝活性有關(guān)[15-16]。研究表明，八眉豬飼糧中14%蛋白質(zhì)水平組的微生物多樣性和豐度高于12%和16%蛋白質(zhì)水平組[17]，這說明適當(dāng)降低蛋白質(zhì)水平可以改善動物腸道微生物組成。有趣的是，在本研究中，3個飼喂低蛋白質(zhì)全混合食葉草發(fā)酵飼糧組的平均日采食量均不同程度高于對照組，平均日增重均極顯著高于對照組。推測原因這可能由于全混合食葉草發(fā)酵飼糧適口性要優(yōu)于玉米-豆粕型全混合發(fā)酵飼糧。此外，盡管試驗組蛋白質(zhì)水平較對照組低，但動物對蛋白質(zhì)的需求通過采食量的增加得到了滿足，故低蛋白質(zhì)飼糧對育肥豬并無負面影響。本研究條件下，最低蛋白質(zhì)水平組的生長性能最優(yōu)，推測一方面可能與最低蛋白質(zhì)水平組添加食葉草數(shù)量最多，因此飼糧中所含的生物活性成分比較豐富有關(guān)；另一方面可能是由于除飼糧中額外添加幾種氨基酸外，試驗組其他種類的氨基酸組成較對照組更加均衡。由此可見，在適當(dāng)滿足動物所需氨基酸的情況下，蛋白質(zhì)水平的降低并不會對育肥豬生長性能產(chǎn)生負面影響。

3.2 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血液指標的影響

血液中各組分是機體新陳代謝的物質(zhì)基礎(chǔ)，其含量可反映動物機體新陳代謝機能和生理活動的大致情況[18]。當(dāng)動物發(fā)生生理變化或產(chǎn)生疾病都會導(dǎo)致血液參數(shù)發(fā)生變化，血液生理及免疫相關(guān)指標在一定程度上能夠反映豬只的健康狀況，血液參數(shù)也可間接預(yù)測動物的飼料利用效率[19]。紅細胞計數(shù)、血紅蛋白、紅細胞分布寬度、紅細胞平均體積和平均紅細胞血紅蛋白濃度等指標反映了血液運載氧氣的能力，也可用于檢測機體缺鐵性貧血的發(fā)生[20]。本研究中，3個試驗組平均紅細胞血紅蛋白濃度均低于對照組，且試驗Ⅱ組紅細胞計數(shù)、血紅蛋白含量均低于其他各組，總體來看，發(fā)生顯著性變化的指標中試驗Ⅱ組表現(xiàn)較差，其他2個試驗組較對照組并無較大差異。故推測試驗Ⅱ組雖飼糧蛋白質(zhì)水平大于試驗Ⅲ組，但生長性能較試驗Ⅲ組差的原因可能在此。

免疫球蛋白G是血清免疫球蛋白的主要成分，也是初級免疫應(yīng)答中最重要的抗體，其含量占總免疫球蛋白的75%左右。免疫球蛋白M是體液免疫最先產(chǎn)生的球蛋白。免疫球蛋白A雖有免疫球蛋白G及免疫球蛋白M的部分功能，但在血清中并不發(fā)揮重要免疫功能。本研究中，各組之間血清免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量均無顯著差異，但試驗Ⅱ組血清免疫球蛋白A含量顯著低于其他各組?？偟膩碇v，飼喂低蛋白質(zhì)水平的全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬血清免疫指標并無太大影響。周力等[21]研究發(fā)現(xiàn)，18%蛋白質(zhì)水平組仔豬的血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量顯著高于其他3個蛋白質(zhì)水平組(16%、20%、22%)，說明適當(dāng)降低飼糧蛋白質(zhì)水平有益于提高藏香豬斷奶仔豬的免疫機能?？偟鞍?、白蛋白、球蛋白以及尿素氮是動物機體氮代謝相關(guān)指標，可以反映機體蛋白質(zhì)吸收代謝情況。血清尿素氮含量較低，表明氨基酸平衡，機體蛋白質(zhì)合成率高[22]。研究發(fā)現(xiàn)，飼喂豬低蛋白質(zhì)水平飼糧可以顯著降低血清尿素氮的生成[23-24]。Talukdar等[25]研究發(fā)現(xiàn)，最低蛋白質(zhì)水平組(14.4%)豬血清中的尿素氮和總蛋白含量顯著降低，球蛋白含量和白蛋白/球蛋白比值不因蛋白質(zhì)水平不同而發(fā)生變化。本研究中，最低蛋白質(zhì)水平組的血清尿素氮含量顯著降低，各試驗組血清總蛋白含量不同程度降低，與上述研究基本一致。

3.3 全混合食葉草發(fā)酵飼糧對育肥豬胴體性狀的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，給予低蛋白質(zhì)飲食的空腸和盲腸樣本中的主要細菌是厚壁菌門和擬桿菌門的成員[17]。而擬桿菌門的主要代謝產(chǎn)物是乙酸和丙酸，研究表明這2種短鏈脂肪酸含量與脂肪沉積呈負相關(guān)[26]。本研究發(fā)現(xiàn)，飼喂低蛋白質(zhì)全混合食葉草發(fā)酵飼糧的育肥豬瘦肉率顯著高于對照組，同時皮脂率有下降的趨勢，故推測這可能與腸道菌群的代謝相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，在低蛋白質(zhì)飼糧中添加10%構(gòu)樹全株干粉和構(gòu)樹全株發(fā)酵飼料組均可顯著降低育肥豬脂肪率[14]。Coma等[27]研究表明，瘦肉組織增長與血清尿素氮含量呈負相關(guān)，這與本研究變化規(guī)律基本一致。研究發(fā)現(xiàn)，隨著育肥豬體重的上升，當(dāng)瘦肉組織的生長達到平臺期后，育肥豬采食的多余飼糧就會成為剩余能量而變成脂肪沉積，從而使胴體瘦肉率降低，故可通過限制飼喂達到提高胴體瘦肉率的目的[28-29]。綜上所述，飼喂低蛋白質(zhì)全混合食葉草發(fā)酵飼糧組瘦肉率提高的原因可能由于低蛋白質(zhì)全混合食葉草發(fā)酵飼糧營養(yǎng)濃度偏低，從而減少了育肥豬攝入多余能量轉(zhuǎn)化為脂肪的量，故導(dǎo)致瘦肉率相應(yīng)地提高。但也有研究表明育肥豬飼糧降低蛋白質(zhì)水平時，機體用于蛋白質(zhì)降解代謝的能量減少會增加脂肪沉積，因此減少產(chǎn)熱造成體內(nèi)凈能和脂肪的沉積[28]。其具體作用機制有待進一步研究。

4 結(jié) 論

本試驗條件下，飼喂低蛋白質(zhì)全混合食葉草發(fā)酵飼糧可以不同程度改善育肥豬的生長性能，其中試驗Ⅲ組生長性能表現(xiàn)最優(yōu)，同時提高了育肥豬的瘦肉率。