秦益民朱長(zhǎng)俊耿志剛

(1.嘉興學(xué)院，浙江 嘉興 314001；2.海藻活性物質(zhì)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266400；3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部海藻類肥料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266400；4.青島明月藍(lán)海生物科技有限公司，山東 青島 266400)

用于制備海藻肥的大型海藻是海洋中的速生植物，除了組成植物結(jié)構(gòu)的各種海藻多糖、蛋白質(zhì),以及氮、磷、鉀、氯、銅、鐵、鉬、錳、硫、鎂、硼、鎳、鋅、鈣等植物生長(zhǎng)所需的各種元素，還含有酚類多聚化合物、甘露醇、甜菜堿、細(xì)胞分裂素、赤霉素、生長(zhǎng)素、脫落酸等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。通過(guò)化學(xué)、物理、生物技術(shù)使海藻細(xì)胞壁破碎、內(nèi)含物釋放后可以制備具有抗逆、提高植物免疫力等功效的海藻類肥料，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域顯示出優(yōu)良的促生長(zhǎng)功效。

1 海藻源植物營(yíng)養(yǎng)和生物刺激素

作為一種簡(jiǎn)單植物，海藻生物體主要由細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞壁、細(xì)胞漿液等結(jié)構(gòu)成分組成。多糖是細(xì)胞壁的主要組分，其中纖維素、甘露聚糖、木聚糖等是纖維狀的，而海藻酸、巖藻多糖、半乳聚糖等是無(wú)定型的。

褐藻是制備海藻肥的主要原料。在褐藻細(xì)胞壁中，海藻酸主要以海藻酸鈣、鎂、鉀等形式存在，其在藻體表層主要以鈣鹽形式存在，而在藻體內(nèi)部肉質(zhì)部分主要以鉀、鈉、鎂鹽等形式存在。由于褐藻等海藻生長(zhǎng)在海水這種富含金屬離子的環(huán)境中，其在生長(zhǎng)過(guò)程中富集了海水中的各種元素。表1顯示了巨藻中各種組分的含量[1]。

海洋中的褐藻主要生長(zhǎng)在潮間帶，在漲潮與退潮過(guò)程造成的劇烈環(huán)境變化中進(jìn)化出大量高活性的生物質(zhì)成分，使其成為制備海藻肥的主要原料，其中泡葉藻是國(guó)際海藻肥領(lǐng)域公認(rèn)的最佳原料。泡葉藻主要生長(zhǎng)在北大西洋海域的各國(guó)海岸，其生長(zhǎng)環(huán)境復(fù)雜，藻體中的生長(zhǎng)素、赤霉素等天然植物激素的含量遠(yuǎn)高于其他海洋藻類[2]。表2為5種常見(jiàn)海藻中的吲哚乙酸、赤霉素和玉米素核苷的含量對(duì)比。

海藻是海洋源蛋白質(zhì)的一個(gè)重要來(lái)源[3,4]。不同種類的海藻中的蛋白質(zhì)含量有很大變化，一般在褐藻中比較低(3%～15%干基)、綠藻中偏中等(9%～26%干基)，紅藻的蛋白質(zhì)含量較高，可以達(dá)到47%[5]。海藻中蛋白質(zhì)的含量隨季節(jié)和生長(zhǎng)環(huán)境也有很大的變化[6,7]。Kumar等[8]的研究顯示，海藻中的蛋白質(zhì)含量在夏末的9月最低，而在春天的3月最高。在對(duì)海藻的各個(gè)部位進(jìn)行單獨(dú)分析測(cè)試后的結(jié)果顯示其蛋白質(zhì)含量的變化是與整個(gè)植物中的變化一致的。從蛋白質(zhì)含量來(lái)看，葉片中的含量與整個(gè)海藻基本一致，而軀干中的含量明顯低于其他部位。此外，新生葉片中的蛋白質(zhì)含量明顯高于其他部位。表3總結(jié)了文獻(xiàn)中報(bào)道的各種褐藻中的蛋白質(zhì)含量[9]。

2 海藻活性物質(zhì)對(duì)作物生長(zhǎng)的促進(jìn)作用

以泡葉藻、海帶、馬尾藻等褐藻為原料制備的海藻肥濃縮了海藻的精華，是一種集營(yíng)養(yǎng)成分、抗生物質(zhì)、純天然生物刺激劑于一體的特種生物肥料，在促進(jìn)作物生長(zhǎng)過(guò)程中顯示出優(yōu)良的應(yīng)用功效[10]。Shekhar Sharma等[11]總結(jié)了海藻肥的應(yīng)用功效：促進(jìn)根際細(xì)菌增長(zhǎng)；抑制土壤傳播疾病和線蟲(chóng)??；促進(jìn)根系健康生長(zhǎng)；提高萌發(fā)率；改善生節(jié)；降低熱和霜凍的影響；加強(qiáng)細(xì)胞壁抗蟲(chóng)、抗真菌；促進(jìn)發(fā)芽和開(kāi)花；提高塊根作物品質(zhì)；提高品質(zhì)、大小、口味和產(chǎn)量。

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，以海藻為原料制備的海藻類肥料包括海藻有機(jī)肥、海藻葉面肥、海藻有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)混肥、海藻沖施肥、海藻摻混肥和海藻微生物菌肥等很多種類，其共同特點(diǎn)是產(chǎn)品中含有豐富的海藻活性物質(zhì)，具有優(yōu)良的生物刺激作用。圖1以草莓為例表示出海藻源生物刺激劑促進(jìn)作物生長(zhǎng)的應(yīng)用功效。

表1 巨藻(Macrocystis pyrifera)中各種組分的含量

表2 5種常見(jiàn)海藻中的吲哚乙酸、赤霉素和玉米素核苷的含量

表3 海藻中蛋白質(zhì)的含量

2.1 促進(jìn)種子引發(fā)

種子引發(fā)是控制種子緩慢吸收水分，并使種子萌發(fā)狀態(tài)停留在吸脹第2階段的播前種子處理技術(shù)。世界各地的干旱區(qū)一般在播種前把種子浸泡18～24h以使禾谷類作物的發(fā)芽有個(gè)良好的開(kāi)端，這種種子引發(fā)技術(shù)可以采用低濃度的海藻源生物刺激劑實(shí)施。研究顯示，用ppm濃度的海藻提取液浸泡種子可以增強(qiáng)幼苗活力、提高葉綠素含量、減少有害的種子微生物、提高植物防御酶的水平，同時(shí)使花椒、大麥、牛豌豆、玉米、胡椒、高粱、草、小麥等種子更快發(fā)芽[12]。王強(qiáng)等[13]將番茄種子經(jīng)液體海藻肥(稀釋500倍液)浸種12h后，發(fā)芽比對(duì)照加快2～3d，并且發(fā)芽率高、出芽整齊。

圖1 海藻源生物刺激劑促進(jìn)作物生長(zhǎng)的應(yīng)用功效

植物的初始發(fā)育在生物刺激劑的積極影響下可以提高種子發(fā)芽率和幼苗活力，為其后續(xù)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。有研究報(bào)道，泡葉藻的有機(jī)成分通過(guò)誘導(dǎo)赤霉素非依賴性淀粉酶活性促進(jìn)大麥種子萌發(fā)，與赤霉素依賴性淀粉酶產(chǎn)生協(xié)同作用[14]。赤霉素通過(guò)誘導(dǎo)淀粉酶等酶的合成促進(jìn)單子葉植物種子的萌發(fā)，其中淀粉酶將淀粉轉(zhuǎn)化為糖，為胚乳向胚軸的發(fā)育提供能量[15]。把豆種子浸泡在濃度為0.8mL·L-1的泡葉藻提取液中5min、10min、15min、20min后，種植6d后與對(duì)照組相比其出芽率更高[16]。用腸滸苔為原料制備的海藻提取液可以使大豆的出芽率提高80%，并且與對(duì)照組相比還可以改善根與芽的碳水化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸以及葉綠素、類胡蘿卜素等色素的含量[17]。海藻提取物處理提高了大豆幼苗的枝條和根系生物量，根系長(zhǎng)度也有所增加。大量證據(jù)表明，多糖或其組分是增加種子萌發(fā)的主要參與者[18,19]。如，硫酸酯化的石莼聚糖與普通蠶豆種子出苗率的提高有關(guān)。在另一種豆科植物(Cyamopsis tetragonoloba)中，施用綠藻提取物(0.5%～5%)可使種子萌發(fā)率提高30%[20]。Ghaderiardakani等的研究顯示，石莼提取物在擬南芥(Arabidopsis thaliana)種子處理中可能通過(guò)作用于脫落酸、乙烯和細(xì)胞分裂素代謝改變萌發(fā)。海藻提取液也提高了豇豆種子的發(fā)芽率。一般來(lái)說(shuō)，在0.3%～0.5%最有效濃度范圍內(nèi)，用海藻提取液處理的種子萌發(fā)率可以達(dá)到80%～100%，而對(duì)照組一般為70%。

Hu等研究顯示，酶降解得到的分子量為1445Da的海藻酸寡糖在濃度為0.75‰時(shí)可以通過(guò)促進(jìn)淀粉酶活性、加速代謝活動(dòng)而強(qiáng)化植物種子的萌發(fā)。濃度為10～50mg·L-1的海藻酸寡糖可以增加大白菜的根長(zhǎng)、根尖數(shù)、根體積和鮮重以及根系吸收面積。海藻酸寡糖對(duì)根系的引發(fā)和促進(jìn)作用可能是其改善作物生長(zhǎng)、提高產(chǎn)量的主要作用機(jī)理。

2.2 促進(jìn)根系強(qiáng)大，增強(qiáng)水分和養(yǎng)分的吸收

海藻肥可以促進(jìn)植物根系增長(zhǎng)和發(fā)展，其對(duì)根系增長(zhǎng)的刺激作用在植物生長(zhǎng)的早期尤為明顯。在用海藻肥處理麥子后發(fā)現(xiàn)，根與芽的干重質(zhì)量比有所上升，顯示海藻肥中的活性成分對(duì)根系發(fā)育有重要影響，而在灰化后海藻肥失去了其對(duì)根系生長(zhǎng)的刺激作用，說(shuō)明其活性成分是有機(jī)物。海藻肥對(duì)根系生長(zhǎng)的促進(jìn)作用在基肥和葉面施肥中都可以觀察到。在實(shí)際應(yīng)用中，海藻提取物的濃度是一個(gè)關(guān)鍵因素，F(xiàn)innie等的研究顯示，按照海藻提取物∶水=1∶100的高濃度處理西紅柿植物時(shí)，其對(duì)根系生長(zhǎng)有抑制作用，濃度降低到1∶600時(shí)產(chǎn)生刺激作用。

一般來(lái)說(shuō)，生物刺激劑可以通過(guò)改善側(cè)根生成促進(jìn)根系發(fā)展，其中主要的活性成分是海藻提取物中的內(nèi)源生長(zhǎng)素。海藻肥可以改善根系的營(yíng)養(yǎng)吸收，使根系有更好的水分和營(yíng)養(yǎng)吸收效率，從而強(qiáng)化植物的增長(zhǎng)和活力。研究表明，海藻提取物在玉米、甘藍(lán)、番茄、萬(wàn)壽菊等作物上均表現(xiàn)出良好的促根系生長(zhǎng)、增加幼苗根系數(shù)量、增強(qiáng)根系活力、減少機(jī)械損傷等效果。圖2為海藻肥促進(jìn)生根的效果圖。

旺盛的幼苗能更好抵抗環(huán)境挑戰(zhàn)，帶來(lái)更高的產(chǎn)量。海藻提取物中的多糖與幼苗生長(zhǎng)密切相關(guān)，富含多糖的海藻提取物在體外環(huán)境中有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。Balakrishnan等[20]的研究顯示，海藻提取物對(duì)幼苗發(fā)育有積極作用，處理后幼苗的主根和地上部分的長(zhǎng)度分別增加了105%和106%，側(cè)根數(shù)量增加了123%，幼苗的鮮重和干重分別增加了93%和85%。胡蘿卜幼苗在含海藻提取物的溶液中浸泡12h后，根長(zhǎng)明顯增加。0.1%以下的石莼提取物可促進(jìn)擬南芥幼苗的根生長(zhǎng)，抑制側(cè)根的形成，這個(gè)結(jié)果與應(yīng)用生長(zhǎng)素產(chǎn)生的效果相似。

2.3 促進(jìn)作物生長(zhǎng)

2.3.1 促進(jìn)莖葉生長(zhǎng)，控制過(guò)度營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)

在甘薯根尖扦插中，與未處理的植物相比，海藻提取物能增加根和葉的鮮重，使用海藻提取液可增加莖粗、葉數(shù)、莖高和根干重。在2種不同基質(zhì)上培養(yǎng)的微繁殖桉樹(shù)扦插苗，移栽前后分別用海藻提取液(0.5mL·L-1、1.0mL·L-1、1.5mL·L-1或2.0mL·L-1)進(jìn)行灌溉。根據(jù)溶液濃度、施用頻率、基質(zhì)組成和同種植物基因型的不同，海藻依賴型產(chǎn)品的使用對(duì)根系生長(zhǎng)和生物量有正面或負(fù)面影響。在另一項(xiàng)研究中，Szabo等評(píng)估了山楂(Crataegus pinnatifida)砧木扦插的產(chǎn)量，結(jié)果顯示葉面噴施海藻提取液使產(chǎn)量顯著提高。在松幼苗中，葉面噴施海藻提取物可促進(jìn)枝條生長(zhǎng)(長(zhǎng)度和生物量)，土壤灌溉可促進(jìn)根系生長(zhǎng)。

2.3.2 促進(jìn)葉綠素形成，提高光合作用效率

海藻提取物可以強(qiáng)化植物中葉綠素的含量。用低濃度的泡葉藻提取物在西紅柿土壤或葉面施肥即可提高葉子中葉綠素含量，其含量的提高是由于甜菜堿降低了葉綠素的降解。盡管海藻肥中含有不同的礦物質(zhì)成分，但其不能提供植物生長(zhǎng)需要的所有營(yíng)養(yǎng)成分，因此其主要功效在于改善植物根系及葉子吸收營(yíng)養(yǎng)成分的能力。

泡葉藻提取物含有甜菜堿及其各種衍生物。為了驗(yàn)證植物中葉綠素含量的增加與施用甜菜堿相關(guān)，有研究用已知的甜菜堿混合物處理作物，結(jié)果顯示，用海藻肥處理及用甜菜堿處理的農(nóng)作物中葉綠素含量相似，63d和69d后，用海藻肥的植物中葉綠素含量分別為27.70和26.48 SPAD(葉綠素儀，soil and plant analyzer development)，而用甜菜堿的分別為27.30和23.60，2組與對(duì)照組相比均有較大的提升。該結(jié)果說(shuō)明使用海藻肥可以增加葉綠素含量的原因可能是其中的甜菜堿活性成分。

3 小結(jié)

進(jìn)入21世紀(jì)，海洋已經(jīng)成為世界關(guān)注的焦點(diǎn)。海藻是海洋資源的重要組成部分，隨著科技的發(fā)展和人們對(duì)海洋生物資源研究的不斷深入，海藻活性物質(zhì)的生物活性和應(yīng)用功效已被廣泛研究、開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。作為一類生長(zhǎng)于海洋獨(dú)特生態(tài)環(huán)境中的生物種群，海藻獨(dú)特的化學(xué)生態(tài)使其生物質(zhì)成分具有獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性能，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域有很高的應(yīng)用價(jià)值。大量應(yīng)用研究表明，海藻源生物刺激劑濃縮了海藻的精華，是一種集營(yíng)養(yǎng)成分、抗生物質(zhì)、純天然生物刺激劑于一體的特種生物肥料，在種子引發(fā)、土壤施肥、葉面施肥、促進(jìn)作物生長(zhǎng)發(fā)育等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)有優(yōu)良的應(yīng)用功效。