韓冬梅，黃義春，李宜文，陳曉玲，汪 沁，唐宗生

(皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院 輸血科，安徽 蕪湖 241001)

臨床醫(yī)生在對(duì)患者施行輸血治療之前需要進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查以及交叉配合實(shí)驗(yàn)以保障輸血安全。若發(fā)現(xiàn)患者不規(guī)則抗體陽(yáng)性，需鑒定此抗體特異性，選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞制品經(jīng)交叉配血相合后才能輸注[1-2]。輸血或妊娠使得個(gè)體接受到其本身缺乏的血型抗原的免疫刺激產(chǎn)生抗體，隨著時(shí)間的推移，抗體含量會(huì)逐漸降低到無(wú)法被檢出。當(dāng)再次輸入含有相應(yīng)血型抗原的血液時(shí)，會(huì)因回憶反應(yīng)產(chǎn)生大量抗體。但回憶反應(yīng)早期時(shí)血清抗體含量依然較低，難以被檢出。本實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)1例輸血后回憶反應(yīng)導(dǎo)致的不規(guī)則抗體陽(yáng)性病例，通過(guò)適當(dāng)?shù)目贵w鑒定和交叉配血策略，使患者得以安全地接受輸血治療，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 患者方某，女，68歲，子女已成年。2021年10月30日診斷“大面積腦梗死、急性呼吸衰竭”收治弋磯山醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科。既往有高血壓病史3年，無(wú)傳染病史，無(wú)藥物過(guò)敏史，6年前因腦出血手術(shù)有過(guò)輸血史，輸血量不詳。該病例報(bào)道已獲得患者知情同意。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 ①血型鑒定方法：微柱法；②抗體篩查、抗體鑒定及抗體效價(jià)鑒定：用室溫鹽水試管立即離心(IS法)及微柱凝膠卡式法；③木瓜酶法：抗體鑒定譜細(xì)胞與等體積配制好的木瓜酶37℃孵育15 min，生理鹽水洗滌3次，離心取壓積紅細(xì)胞備用。所有實(shí)驗(yàn)均按照文獻(xiàn)[3]及試劑的說(shuō)明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

患者血型鑒定、抗體篩查、不規(guī)則抗體鑒定、交叉配血及血液輸注情況等如下。血型AB型，RhD+，2021年11月1日血紅蛋白(Hb)56 g/L，不規(guī)則抗體篩查IS法陰性，微柱凝膠卡式法陰性。輸注紅細(xì)胞懸液2 U。2021年11月2日復(fù)查Hb 60 g/L。2021年11月4日Hb 62 g/L，不規(guī)則抗體篩查IS法陰性，微柱凝膠卡式法陰性。再次輸注紅細(xì)胞懸液2 U。2021年11月5日復(fù)查Hb 77 g/L。2021年11月9日患者病情變化，Hb 57 g/L，不規(guī)則抗體篩查IS法陰性，微柱凝膠卡式法陽(yáng)性。直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性?；販y(cè)2021年11月1日患者首次送檢標(biāo)本Rh分型：D+,C+,E-,c-,e+，微柱凝膠卡式法抗體鑒定時(shí)10份譜細(xì)胞只有1、6號(hào)陽(yáng)性，無(wú)法確定不規(guī)則抗體特異性。結(jié)合抗篩格局與患者Rh抗原分型檢測(cè)結(jié)果，考慮患者有抗E、抗c可能，選擇Rh分型與患者相同的紅細(xì)胞懸液2 U，交叉相合后輸注。次日復(fù)查Hb 69 g/L。2021年11月18日因病情變化，Hb 48 g/L。不規(guī)則抗體篩查IS法陰性，微柱凝膠卡式法陽(yáng)性，直抗陽(yáng)性，微柱凝膠卡式法抗體鑒定，僅1、6號(hào)細(xì)胞陽(yáng)性。因懷疑此抗體為Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體，而酶處理鑒定譜細(xì)胞能增強(qiáng)Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的反應(yīng)強(qiáng)度，故選擇木瓜酶處理鑒定譜細(xì)胞后，行不規(guī)則抗體鑒定。結(jié)果：1、3、4、5、6號(hào)譜細(xì)胞均強(qiáng)陽(yáng)性，2、7、8、9、10號(hào)譜細(xì)胞均陰性，符合抗E格局。結(jié)論：檢出IgG抗E抗體。同時(shí)行患者紅細(xì)胞放散液與酶處理譜細(xì)胞的抗體鑒定試驗(yàn)，結(jié)果：1、3、4、5、6號(hào)譜細(xì)胞均強(qiáng)陽(yáng)性，2、7、8、9、10號(hào)譜細(xì)胞均陰性，符合抗E格局。結(jié)論：放散出IgG抗E抗體?；販y(cè)患者2021年11月1日輸注的供者紅細(xì)胞懸液2 U，均為E抗原陽(yáng)性。選擇E-,c-獻(xiàn)血者紅細(xì)胞懸液，交叉配血相合。次日復(fù)查Hb 61 g/L。因患者病情進(jìn)展，血液丟失明顯，輸血前后的血紅蛋白作為輸血的療效雖不理想，但患者4次輸血治療除第1次效果不明顯外，其余3次輸血后血紅蛋白均上升明顯。

通過(guò)該案例的回顧分析，患者因妊娠、6年前手術(shù)中輸血而引起E抗原免疫，2021年11月1日輸注E抗原陽(yáng)性紅細(xì)胞懸液2 U而發(fā)生回憶反應(yīng)，引發(fā)延遲性輸血反應(yīng)。這種延遲性輸血反應(yīng)，常規(guī)的檢測(cè)方法容易漏檢，需采用酶處理或其他增強(qiáng)技術(shù)才能明確診斷。

3 討論

不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者輸入表達(dá)相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞會(huì)引起遲發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)(delayed hemolytic transfusion reaction,DHTR)[4]，有些DHTR早期因患者血清中抗體滴度處于較低水平而癥狀不明顯，且容易被疾病癥狀掩蓋，需通過(guò)直抗和放散實(shí)驗(yàn)才能發(fā)現(xiàn)。常引起DHTR的抗體是Rh、Kidd、Duffy和KELL等血型系統(tǒng)的抗體[5]。

本例患者曾有多次輸血史，并發(fā)生輸血后的回憶反應(yīng)。因患者血清游離抗體較少，首次入院輸血時(shí)常規(guī)方法無(wú)法檢測(cè)出抗E，交叉配血亦漏檢，因此誤輸了E陽(yáng)性血液，導(dǎo)致其抗體再次產(chǎn)生。再次申請(qǐng)輸血時(shí)，患者新樣本抗體篩查提示陽(yáng)性結(jié)果，使用常規(guī)譜細(xì)胞不規(guī)則抗體鑒定無(wú)明顯格局，無(wú)法確定抗體特異性，但懷疑為Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體，選擇Rh分型與患者相同的血液交叉配血；第3次患者樣本用酶法處理后再次進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定，檢出IgG抗E抗體，且患者紅細(xì)胞放散液中亦檢出抗E，證明患者近期輸入了E陽(yáng)性血液。回溯調(diào)查患者近期4次輸血，發(fā)現(xiàn)2021年11月1日所輸入的兩袋血液均為E陽(yáng)性，這也與患者放散液實(shí)驗(yàn)結(jié)果相互印證。

綜上所述，當(dāng)抗體篩查陽(yáng)性，鑒定譜細(xì)胞格局不明顯，但懷疑是Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體時(shí)，用酶處理譜細(xì)胞可提高Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的檢出率。同時(shí)建議，在病人有近期輸血史、抗體篩查陽(yáng)性、直抗陽(yáng)性且輸血療效未達(dá)到預(yù)期時(shí)，可選擇酶處理等抗體反應(yīng)增強(qiáng)技術(shù)以明確是否有不相合的血液輸注。多次輸血導(dǎo)致患者血清不規(guī)則抗體呈陽(yáng)性的病例多不勝舉，如何精準(zhǔn)檢測(cè)出不規(guī)則抗體，是臨床輸血必須要解決的問(wèn)題。此例個(gè)案報(bào)道能為臨床輸血提供有益借鑒。