李 伶，唐文迪，陳壽渙，寧裕龍，覃江克*

(1.廣西師范大學(xué) 化學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，廣西 桂林 541004；2.省部共建藥用資源化學(xué)與藥物分子工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(廣西師范大學(xué))，廣西 桂林 541004)

巖黃連CorydalissaxicolaBunting(簡(jiǎn)稱CSB)是罌粟科Papaveraceae紫堇屬Cordalis植物石生黃堇的全草，因生于巖石旁，功效類似黃連而得名[1]。巖黃連長(zhǎng)于高山峭壁上或石縫中，在我國西南地區(qū)分布最多，是典型的喀斯特地帶藥用植物，其性涼、味苦，具有清熱解毒、利濕、止血、止痛等功效[2-3]。研究表明，巖黃連具有保肝、抗肝纖維化、抗菌、抗炎、抗腫瘤等多種藥理作用，臨床用于治療病毒性肝炎等疾病，具有良好療效[4-9]。一般認(rèn)為巖黃連中的生物堿類化合物是其藥效物質(zhì)[10]，目前對(duì)巖黃連的研究主要集中在巖黃連總生物堿的組織分布，單體化合物的分離、鑒定與藥理活性研究上[11-17]。巖黃連總生物堿的提取是其后續(xù)分離純化、活性評(píng)價(jià)和產(chǎn)品開發(fā)的基礎(chǔ)，因此優(yōu)化巖黃連總生物堿的提取工藝具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

目前，總生物堿的提取方法有酸水提取法、醇類溶劑提取法、親脂性有機(jī)溶劑提取法、超聲或微波輔助提取法等[18]。酸水提取法具有腐蝕性和成鹽損耗大等缺陷，而其他親脂性有機(jī)溶劑毒性高，超聲或微波輔助提取法需要特殊設(shè)備不太適合大規(guī)模生產(chǎn)。相對(duì)其他方法，乙醇提取法具有工藝簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)便捷、效率高、溶劑易回收、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，易為廣大生產(chǎn)廠家所接受。目前，對(duì)于巖黃連總生物堿的提取工藝鮮有報(bào)道[19]，且因提取方式、考察指標(biāo)、參數(shù)設(shè)定等的差異，常造成研究結(jié)果差異性較大，為了滿足生產(chǎn)需求尚需系統(tǒng)考察和進(jìn)一步完善。

自由基是人體內(nèi)氧化反應(yīng)過程中產(chǎn)生的中間代謝產(chǎn)物，對(duì)機(jī)體具有雙重作用，適量的自由基可以在生物體內(nèi)作為信息和調(diào)控分子，是一種具有廣泛作用的多功能介質(zhì)。然而，在特定條件下自由基會(huì)異常累積，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生氧化損傷，進(jìn)而引發(fā)氧化應(yīng)激性相關(guān)疾病，如肝癌、肝損傷、病毒性肝炎、肝纖維化等疾病[20-25]。研究表明，巖黃連總生物堿對(duì)以上肝類疾病具有良好的療效，其良好療效除了與其細(xì)胞毒性、抗炎等藥理活性有直接關(guān)系外，亦可能與其抗氧化活性密切相關(guān)[4-9]，故有必要對(duì)巖黃連的抗氧化活性進(jìn)行考察，以便更好地闡明其作用機(jī)理。

鑒于以脫氫卡維丁為代表的總生物堿是巖黃連的主要藥效組分[26]，本實(shí)驗(yàn)采用乙醇提取法，以脫氫卡維丁的得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)考察提取溫度、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比和提取次數(shù)等因素對(duì)得率的影響，并通過L9(34)正交試驗(yàn)確定從巖黃連中提取總生物堿的最優(yōu)提取工藝條件，結(jié)合體外抗氧化實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)巖黃連總生物堿粗提物的自由基清除能力，旨在為其后續(xù)的分離純化、藥理活性及應(yīng)用開發(fā)提供一定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

巖黃連CorydalissaxicolaBunting于2018年6月購于廣西東蘭縣，由廣西師范大學(xué)唐紹清教授鑒定為罌粟科紫堇屬巖黃連。

脫氫卡維丁對(duì)照品(純度大于98%，批號(hào)111667-200401，中國藥品生物制品檢定所)；脫氫甲卡維丁、巴馬汀(實(shí)驗(yàn)室自制)；乙醇(分析純，上海泰坦科技股份有限公司)；甲醇(色譜純，美國TEDIA公司)；三氟乙酸(TFA)(色譜純，上海泰坦科技股份有限公司)；碘化鉍鉀(浙江海川化學(xué)品有限公司)；去離子水(實(shí)驗(yàn)室自制)；其他試劑均為分析純。

FW177 粉碎機(jī)(上海書培實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；單列數(shù)顯恒溫水浴鍋(江蘇金怡儀器科技有限公司)；AL104電子天平(梅特勒-托利多國際貿(mào)易(上海)有限公司)；TU-1820紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；LC-20A分析型高效液相色譜儀(日本島津科技公司)；Inertil ODS-3(4.6 mm×250 mm)分析柱(日本島津科技公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 巖黃連總生物堿含量的測(cè)定

1.2.1.1 對(duì)照品溶液的配制

精密稱取脫氫卡維丁對(duì)照品10 mg，加入1%鹽酸乙醇溶液溶解，定容至100 mL，作為儲(chǔ)備液(0.1 g/L)備用。

1.2.1.2 最大吸收波長(zhǎng)的確定

將提取的樣品溶液和對(duì)照品溶液分別在200～800 nm波長(zhǎng)范圍掃描，結(jié)果在346 nm處有最大吸收。

1.2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液，用1%鹽酸乙醇溶液稀釋，分別配制成2、4、6、8、10、12 mg/L溶液，以1%鹽酸乙醇溶液為空白，在346 nm處測(cè)量吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程和相關(guān)系數(shù)分別為y=0.066 62x-0.002 78，R2=0.999 45。

1.2.1.4 提取樣品溶液濃度測(cè)定方法

量取樣品溶液，根據(jù)1.2.1.3方法測(cè)定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算提取樣品溶液中巖黃連總生物堿的濃度，按式(1)計(jì)算得率：

(1)

1.2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

1.2.2.1 提取溫度對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

稱取5份巖黃連粉末，每份4 g，按料液比1∶10(質(zhì)量(g)∶體積(mL)，全文同)加入體積分?jǐn)?shù)80%乙醇，分別于50、60、70、80、90 ℃提取2 h，各提取3次，趁熱過濾，合并提取液，用移液槍精密吸取50 μL提取液，稀釋200倍后測(cè)定提取液中巖黃連總生物堿的含量，計(jì)算巖黃連總生物堿得率。

1.2.2.2 提取時(shí)間對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

稱取5份巖黃連粉末，每份4 g，按料液比1∶10加入體積分?jǐn)?shù)80%乙醇，于70 ℃分別提取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h，各提取3次，趁熱過濾，合并提取液，用移液槍精密吸取50 μL提取液，稀釋200倍后測(cè)定提取液中巖黃連總生物堿的含量，計(jì)算巖黃連總生物堿得率。

1.2.2.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

稱取5份巖黃連粉末，每份4 g，按料液比1∶10分別加入體積分?jǐn)?shù)60%、70%、80%、90%、95%乙醇，70 ℃提取2 h，各提取3次，趁熱過濾，合并提取液，用移液槍精密吸取50 μL提取液，稀釋200倍后測(cè)定提取液中巖黃連總生物堿的含量，計(jì)算巖黃連總生物堿得率。

1.2.2.4 料液比對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

稱取5份巖黃連粉末，每份4 g，按料液比1∶6、1∶8、1∶10、1∶12、1∶14加入體積分?jǐn)?shù)80%乙醇，70 ℃提取2 h，各提取3次，趁熱過濾，合并提取液，用移液槍精密吸取50 μL提取液，稀釋200倍后測(cè)定提取液中巖黃連總生物堿的含量，計(jì)算巖黃連總生物堿得率。

1.2.2.5 提取次數(shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

稱取5份巖黃連粉末，每份4 g，按料液比1∶10加入體積分?jǐn)?shù)80%乙醇，70 ℃提取2 h，各提取1、2、3、4、5次，趁熱過濾，合并提取液，用移液槍精密吸取50 μL提取液，稀釋200倍后測(cè)定提取液中巖黃連總生物堿的含量，計(jì)算巖黃連總生物堿得率。

1.2.3 正交試驗(yàn)

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用L9(34)正交試驗(yàn)進(jìn)一步分析提取溫度、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)及料液比對(duì)巖黃連總生物堿提取的影響，優(yōu)化其乙醇提取工藝條件，所設(shè)計(jì)的因素水平見表1。

表1 巖黃連總生物堿提取L9(34)正交試驗(yàn)因素水平Tab. 1 L9(34) factors and levels of orthogonal test of extracting of total alkaloids from CSB

1.2.4 提取物的鑒別與分析

取最優(yōu)工藝下獲得的提取物，采用碘化鉍鉀顯色法[27]檢驗(yàn)是否含生物堿；以脫氫甲卡維丁、脫氫卡維丁、巴馬汀為對(duì)照品，采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)提取物進(jìn)行分析。

HPLC色譜條件：檢測(cè)波長(zhǎng)346 nm，流速1 mL/min，柱溫35 ℃，進(jìn)樣量10 μL，甲醇-0.1% TFA溶液為流動(dòng)相梯度洗脫(甲醇0～30 min，體積分?jǐn)?shù)10%～100%；30～40 min，體積分?jǐn)?shù)100%)。

1.2.5 抗氧化活性測(cè)定

1.2.5.1 待測(cè)樣品液的制備

將巖黃連總生物堿提取液冷凍干燥，準(zhǔn)確稱量500 mg，加入1%鹽酸溶液溶解，定容至100 mL，作為儲(chǔ)備液(5 g/L)備用。用1%鹽酸溶液稀釋待測(cè)樣品儲(chǔ)備液，分別配制成1、2、3、4、5 g/L的待測(cè)樣品。

1.2.5.2 DPPH自由基清除率的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[28]方法，分別移取2 mL不同濃度(1～5 g/L)的樣品液與2 mL的DPPH(2×10-4mol/L)溶液于試管中，混勻，30 ℃恒溫反應(yīng)30 min，在517 nm處測(cè)定其吸光度，同時(shí)以Vc為對(duì)照品。每個(gè)樣品重復(fù)3次并取其平均值，按式(2)計(jì)算清除率：

清除率=[1-(Ai-Aj)/Ac]。

(2)

式中:Ai為加入樣品后的吸光度；Aj為樣品自身的吸光度；Ac為空白對(duì)照液吸光度。

1.2.5.3 ABTS自由基清除率的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[29]方法，準(zhǔn)確配制7.6 mmol/L ABTS儲(chǔ)備液和2.6 mmol/L高硫酸鉀儲(chǔ)備液，并將兩者等體積混合避光反應(yīng)12 h，得到ABTS溶液，測(cè)定時(shí)用無水乙醇將配制好的ABTS溶液稀釋至在734 nm處的吸光度值為0.70±0.02。分別移取0.1 mL不同濃度(1～5 g/L)的待測(cè)樣品液于試管中，加入4.9 mL稀釋后的ABTS溶液，混勻，30 ℃恒溫反應(yīng)10 min，在734 nm處測(cè)定其吸光度，同時(shí)以Vc為對(duì)照品。每個(gè)樣品重復(fù)3次并取其平均值，按式(2)計(jì)算清除率。

1.2.5.4 羥基自由基清除率的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[30]方法，分別移取1 mL不同濃度(1～5 g/L)的樣品溶液于試管中，加入1 mL濃度為9 mmol/L的硫酸亞鐵溶液，1 mL濃度為9 mmol/L的水楊酸-乙醇溶液，蒸餾水定容至5 mL，再加入 1 mL 6 mmol/L的H2O2溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng)，37 ℃恒溫反應(yīng)10 min，于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，同時(shí)以Vc為對(duì)照品。每個(gè)樣品重復(fù)3次并取其平均值，按式(2)計(jì)算清除率。

1.2.5.5 超氧陰離子自由基清除率的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[31]方法，在10 mL具塞試管中依次加入4.5 mL濃度為50 mmol/L的Tris-HCl緩沖液(pH=8.2)，4.2 mL蒸餾水，混勻，25 ℃恒溫反應(yīng)20 min后，立即加入25 ℃預(yù)熱的3 mmol/L鄰苯三酚溶液0.3 mL，迅速混勻，在325 nm處測(cè)定吸光度，每隔30 s測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定5 min，計(jì)算線性范圍內(nèi)每分鐘的吸光度增加值ΔA0。按上述步驟，在試管中加入1 mL不同濃度(1～5 g/L)待測(cè)樣品溶液，同時(shí)減少等體積的蒸餾水，其余操作同上，計(jì)算線性范圍內(nèi)每分鐘的吸光度增加值ΔAi。以Vc為對(duì)照品。每個(gè)樣品重復(fù)3次并取其平均值，按式(3)計(jì)算清除率：

清除率=(1-ΔAi/ΔA0)。

(3)

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 提取溫度對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

由圖1可知，巖黃連總生物堿得率與提取溫度呈正相關(guān)，當(dāng)提取溫度為60～80 ℃時(shí)，巖黃連總生物堿得率隨著溫度升高呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，當(dāng)提取溫度達(dá)到80 ℃后，巖黃連總生物堿得率趨于平穩(wěn)，考慮到生物堿高溫下會(huì)分解，選擇提取溫度60、70、80 ℃為考察水平。

圖1 提取溫度對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響Fig. 1 Effect of extracting temperature on the yield of total alkaloids from CSB

2.1.2 提取時(shí)間對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

由圖2可知，當(dāng)提取時(shí)間為1.0～1.5 h時(shí)，巖黃連總生物堿得率隨提取時(shí)間增加呈直線上升趨勢(shì)，提取時(shí)間達(dá)到1.5 h后，巖黃連總生物堿得率呈現(xiàn)平緩上升趨勢(shì)，變化不明顯?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)效益，選擇提取時(shí)間2.0、2.5、3.0 h為考察水平。

圖2 提取時(shí)間對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響Fig. 2 Effect of extracting time on the yield of total alkaloids from CSB

2.1.3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

由圖3可知，乙醇的體積分?jǐn)?shù)在60%～70%時(shí)，巖黃連總生物堿得率隨乙醇濃度增加呈上升趨勢(shì)；在乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%時(shí)，得率達(dá)到最高值，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)超過70%后，巖黃連總生物堿得率呈下降趨勢(shì)。原因是巖黃連總生物堿具有一定的極性，在一定的極性條件才最適合將其浸出，過高或過低的乙醇體積分?jǐn)?shù)均不利于巖黃連總生物堿的浸出，結(jié)合圖3我們選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、70%和80%進(jìn)行考察。

圖3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響Fig. 3 Effect of ethanol concentration on the yield of total alkaloids from CSB

2.1.4 料液比對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

由圖4可知，巖黃連總生物堿得率隨料液比的增加整體呈上升趨勢(shì)，這是因?yàn)榱弦罕仍酱螅崛∫褐猩飰A的濃度越低，越有利于生物堿轉(zhuǎn)移到提取液中；但當(dāng)料液比超過1∶12后，得率開始變化不大，表明生物堿浸出趨于平衡。綜合考慮，選擇料液比1∶10、1∶12、1∶14為考察水平。

圖4 料液比對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響Fig. 4 Effect of feed liquid ratio on the yield of total alkaloids from CSB

2.1.5 提取次數(shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響

由圖5可知，隨著提取次數(shù)的增加，巖黃連總生物堿的得率增大，當(dāng)提取3次后再增加提取次數(shù)，得率基本不變，為5.36%。原因是達(dá)到一定提取次數(shù)后，巖黃連總生物堿已完全浸出，再增加提取次數(shù)對(duì)得率影響不大，且不利于后期的蒸發(fā)濃縮。綜合考慮，選擇提取3次為最佳提取次數(shù)。

圖5 提取次數(shù)對(duì)巖黃連總生物堿得率的影響Fig. 5 Effect of extraction times on the yield of total alkaloids from CSB

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2、表3可知，巖黃連總生物堿提取正交試驗(yàn)中，各影響因素均不顯著，可直接根據(jù)極差分析選擇最優(yōu)水平組合。由表2極差分析可知，各因素對(duì)巖黃連總生物堿得率影響由大到小依次為料液比、提取溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間；乙醇法提取巖黃連總生物堿的最佳工藝條件為A3B2C1D3，即巖黃連總生物堿的最優(yōu)提取工藝為：提取溫度80 ℃、提取時(shí)間2.5 h，乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶14，提取3次，在此條件下，巖黃連總生物堿的得率為7.34%。

表2 巖黃連總生物堿提取正交試驗(yàn)結(jié)果Tab. 2 Results of orthogonal experiment on extraction of total alkaloids from CSB

表3 巖黃連總生物堿提取正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果Tab. 3 Variance analysis of orthogonal experimental on total alkaloids from CSB

2.3 提取工藝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

精確稱取3份巖黃連粉末，每份4.00 g，按照最優(yōu)工藝進(jìn)行提取，測(cè)定其巖黃連總生物堿的得率，結(jié)果見表4。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Tab. 4 Results of verification test

2.4 提取物的鑒別與分析

最優(yōu)工藝條件下的提取物對(duì)碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性，表明其含有生物堿類化合物。以巖黃連中含量高的代表性化合物：脫氫甲卡維丁、脫氫卡維丁、巴馬汀為對(duì)照品，采用HPLC法對(duì)該提取物進(jìn)行分析(表5)，發(fā)現(xiàn)這3種生物堿的峰面積占比之和大于75%，表明該提取物的主要成分為生物堿，而且以這3種化合物為主。

表5 HPLC分析結(jié)果Tab. 5 Results of HPLC

2.5 抗氧化活性

2.5.1 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基的清除作用

以Vc為對(duì)照，分析巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基的清除作用，測(cè)定結(jié)果如圖6所示。由圖6可知，在1～5 g/L，巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基有較好的清除作用，且清除能力具有濃度依賴性。當(dāng)濃度達(dá)到3 g/L時(shí)，對(duì)DPPH自由基的清除率為95%，再繼續(xù)增加濃度，其對(duì)DPPH自由基的清除能力增長(zhǎng)趨于平緩且略優(yōu)于Vc，IC50為0.675 g/L，說明巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基有很好的清除能力。

圖6 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基的清除作用Fig. 6 DPPH· free radical scavenging abilities of crude extract of total alkaloids from CSB

2.5.2 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)ABTS自由基的清除作用

以Vc為對(duì)照，分析巖黃連總生物堿粗提物對(duì)ABTS自由基的清除作用，結(jié)果如圖7。由圖7可知，巖黃連總生物堿粗提物對(duì)ABTS自由基具有中等程度的清除作用，隨著濃度的增加清除能力增強(qiáng)，但是在1～5 g/L，巖黃連總生物堿粗提物整體的清除率在60%左右，IC50為0.78 g/L，清除能力低于Vc。

圖7 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)ABTS自由基的清除作用Fig. 7 ABTS+·free radical scavenging abilities of crude extract of total alkaloids from CSB

2.5.3 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)羥基自由基的清除作用

以Vc為對(duì)照，分析巖黃連總生物堿粗提物對(duì)羥基自由基的清除作用，測(cè)定結(jié)果如圖8所示。由圖8可知，羥基自由基清除率隨著巖黃連總生物堿粗提物質(zhì)量濃度的增加緩慢上升，表明巖黃連總生物堿粗提物對(duì)羥基自由基具有一定的清除能力。

圖8 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)羥基自由基的清除作用Fig. 8 Hydroxyl free radical scavenging abilities of crude extract of total alkaloids from CSB

2.5.4 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用

圖9 巖黃連總生物堿粗提物對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用Fig. 9 Superoxide anion free radical scavenging abilities of crude extract of total alkaloids from CSB

3 結(jié)論

本文采用乙醇提取法提取巖黃連中的總生物堿，在探討單因素對(duì)提取效率影響的基礎(chǔ)上，通過正交試驗(yàn)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并研究其體外抗氧化活性。結(jié)果顯示，各因素對(duì)巖黃連總生物堿的得率影響由大到小依次為料液比、提取溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間；其最佳提取工藝為：提取溫度80 ℃，提取時(shí)間2.5 h，乙醇體積分?jǐn)?shù)60%，料液比1∶14，提取3次，得率為7.34%。巖黃連總生物堿粗提物對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子自由基有較好的清除作用，對(duì)ABTS自由基和羥基自由基有一定程度的清除作用，其中，巖黃連總生物堿對(duì)DPPH自由基的清除率最好，IC50值為0.675 g/L。下一步，我們將在巖黃連總生物堿進(jìn)一步分離純化的基礎(chǔ)上，深入研究其在細(xì)胞和動(dòng)物水平上的抗氧化效應(yīng)和其他藥理活性，以更好闡明其作用機(jī)制。

利用乙醇提取巖黃連總生物堿具有工藝簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)便捷、效率高、速度快等優(yōu)點(diǎn)，獲得的巖黃連總生物堿粗提物具有良好的抗氧化活性。該研究為其后續(xù)的進(jìn)一步分離純化、工藝放大和拓寬其利用途徑提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。