張 玲， 張衛(wèi)東， 趙德福， 張遠(yuǎn)方， 陳小有

（河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院，河南鄭州 450044）

水產(chǎn)品是人們獲得優(yōu)質(zhì)蛋白和脂肪的重要食物來(lái)源，人工配合飼料的出現(xiàn)，使得集約化養(yǎng)殖成為可能，水產(chǎn)品產(chǎn)量得以快速提升。草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）因其具有生長(zhǎng)速度快、肉厚刺少、味道鮮美等特性，成為我國(guó)主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，其產(chǎn)量長(zhǎng)期處于淡水魚(yú)之首。又因草魚(yú)為典型的草食性魚(yú)類(lèi)，其配方對(duì)蛋白、脂肪的要求較低，因此飼料成本也相應(yīng)較低。

目前，關(guān)于草魚(yú)營(yíng)養(yǎng)需求方面的研究，大多集中在蛋白質(zhì)（李彬，2014；羅莉等，2003）及氨基酸（黃愛(ài)霞等，2018；孫麗慧等，2016；羅莉等，2010）需求、不同脂肪源使用效果（邢君霞等，2021；劉瑋等，1995）、糖利用能力（陳團(tuán)等，2019；張建等，2010；尹曉靜等，2010；田麗霞等，2002）等方面。在脂肪需求量方面也有一些報(bào)道，但其最適需求量跨度較大，在1%～9%，并且很多是在純化飼料基礎(chǔ)上得出的結(jié)果，與養(yǎng)殖用配方差距懸殊。本文以實(shí)用配方為背景，研究草魚(yú)幼魚(yú)對(duì)脂肪的最適需求量，以期為草魚(yú)實(shí)用配方的制定提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料 根據(jù)草魚(yú)實(shí)用配方配制基礎(chǔ)飼料，基礎(chǔ)飼料中以魚(yú)粉、豆粕、菜餅和玉米干酒糟及其可溶物（DDGS）為主要蛋白源。在基礎(chǔ)飼料中添加豆油，設(shè)計(jì)6個(gè)添加劑量，即0%、1%、2%、3%、4%和5%，制成6種試驗(yàn)飼料，各試驗(yàn)組飼料的組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）%

試驗(yàn)飼料的制作是先將飼料原料經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，微量元素采用逐級(jí)放大的方法混勻，之后所有原料經(jīng)40目篩網(wǎng)過(guò)濾，篩上物團(tuán)經(jīng)手工搓碾后全部過(guò)篩、混合。采用上海申德SDPM型顆粒機(jī)制粒，通蒸汽添加水分并熟化物料，制成硬顆粒飼料直徑為2 mm，放陰涼處自然風(fēng)干后裝袋，于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)魚(yú)及養(yǎng)殖管理 試驗(yàn)用魚(yú)為草魚(yú)，由河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院試驗(yàn)中心提供。魚(yú)種統(tǒng)一用聚維酮碘消毒。用基礎(chǔ)飼料馴化約15 d，待魚(yú)主動(dòng)攝食后，采取隨機(jī)的方法，挑選體格健壯、大小均勻的魚(yú)種進(jìn)行分組，初始體重（104.0±7.7）g。試驗(yàn)共分6個(gè)處理組，每個(gè)處理組設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾魚(yú)，共720尾。

養(yǎng)殖試驗(yàn)于河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院試驗(yàn)中心黃河基地進(jìn)行。采用池塘網(wǎng)箱（150 cm×150 cm×150 cm）養(yǎng)殖。日投喂3次（8：00、12：00、16：00），日投餌量為魚(yú)體重的1.0%～2.0%，根據(jù)攝食情況每周調(diào)整投餌量，每天記錄各個(gè)網(wǎng)箱試驗(yàn)魚(yú)吃食重量及死魚(yú)重量，飼養(yǎng)周期為60 d。試驗(yàn)期間水溫（24.0±3.0）℃，養(yǎng)殖期間持續(xù)充氧。

1.3 樣品采集 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，禁食24 h，稱(chēng)量每個(gè)網(wǎng)箱試驗(yàn)魚(yú)的總重量并記錄條數(shù)，用于計(jì)算生長(zhǎng)性能指標(biāo)。每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)取3尾魚(yú)，用丁香酚（1：10000）麻醉后，解剖取其內(nèi)臟，于相同部位剪取肝胰臟組織塊，用波恩氏液固定，用于制作組織切片。

1.4 計(jì)算公式

成活率/%=nt/n0×100；

增重率/%=（mt－m0）/m0×100；

特定生長(zhǎng)率/（%/d）=（lnmt－lnm0）/t×100；飼料系數(shù)=mf/（mt－m0）；

蛋白質(zhì)效率=（mt－m0）/（mf×P）；

單 位 體 重 所 耗 蛋 白 質(zhì)/‰=mf×P/（mt－m0）×1000‰；

單 位 體 重 所 耗 脂 肪/‰=mf×L/（mt－m0）×1000‰；

式中：nt為終末尾數(shù)；n0為初始尾數(shù)；mt為終末均重；m0為初始均重；mf為飼料攝入重量；P為飼料蛋白質(zhì)含量；L為飼料脂肪含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理 應(yīng)用SPSS 11.0 for Windows進(jìn)行One-Way ANOVA分析，Duncan氏多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響 養(yǎng)殖試驗(yàn)為期60 d，在整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程中草魚(yú)沒(méi)有出現(xiàn)病害，成活率均為100%；從表2中數(shù)據(jù)可以看出，隨著飼料中脂肪含量的增加，飼料系數(shù)呈先下降后上升趨勢(shì)，最低值出現(xiàn)在D3組，即飼料脂肪含量為6.48%的組，該組較脂肪含量最低的D1組飼料系數(shù)降低了12.6%，較脂肪含量最高的D6組飼料系數(shù)降低了10.0%，并且D3組與其余5組均具有顯著性差異（P<0.05）；增重率隨飼料脂肪含量的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)，最大值為D3組，并與D1、D5、D6組均具有顯著性差異（P<0.05），分別較D1、D5和D6組提高了18.4%、11.2%和18.8%；特定生長(zhǎng)率的最高值出現(xiàn)在D3組，并與D1、D5、D6組具有顯著性差異（P<0.05），分別較D1、D5和D6組提高了10.9%、6.8%和10.9%；蛋白質(zhì)效率隨飼料脂肪水平的變化趨勢(shì)與增重率及特定生長(zhǎng)率相同，最高值出現(xiàn)在D3組，并且與其余5組均具有顯著性差異（P<0.05）。

表2 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)增加單位體重所消耗營(yíng)養(yǎng)素的影響 從表3的數(shù)據(jù)可以看出，隨著飼料脂肪水平的提高，草魚(yú)每增加1 kg體重所消耗的蛋白質(zhì)質(zhì)量（g）快速減少，在D3組時(shí)達(dá)到了蛋白質(zhì)消耗量的最低點(diǎn)，并與其他各組都形成顯著性差異（P<0.05），隨著飼料脂肪水平的進(jìn)一步提高，草魚(yú)增加單位體重所消耗的蛋白質(zhì)又逐漸提高，到D5組時(shí)蛋白質(zhì)消耗質(zhì)量趨于穩(wěn)定，D3組草魚(yú)增加單位體重所消耗的蛋白質(zhì)質(zhì)量較D1和D5組分別降低了14.1%和10.0%；在脂肪消耗方面，隨著飼料脂肪水平提高，草魚(yú)增加單位體重所消耗脂肪的質(zhì)量持續(xù)增加，D1～D3組增加較緩慢，組間沒(méi)有顯著性差異（P>0.05），當(dāng)飼料脂肪水平進(jìn)一步提高時(shí)，脂肪消耗量增速加快，并且D4～D6組與前3組都形成顯著性差異（P<0.05），其中脂肪含量最高的D6組較脂肪含量較最低的D1組草魚(yú)增加單位體重所消耗脂肪提高了91.9%。

表3 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)增加單位體重所消耗營(yíng)養(yǎng)素的影響g/kg

2.3 飼料脂肪水平與草魚(yú)生長(zhǎng)性能的回歸關(guān)系從表2的數(shù)據(jù)可以看出，草魚(yú)的生長(zhǎng)性能指標(biāo)與飼料中脂肪水平存在相關(guān)性，因此分別以草魚(yú)飼料系數(shù)、增重率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率為因變量（y），以飼料脂肪水平為自變量（x）進(jìn)行回歸分析，得到如下回歸方程：

飼料系數(shù)（y）與飼料脂肪水平（x）進(jìn)行相關(guān)回歸分析，得到圖1的結(jié)果，擬合后的方程為：

圖1 草魚(yú)飼料系數(shù)與飼料脂肪水平的關(guān)系

求出當(dāng)x=6.414時(shí)，飼料系數(shù)的值最低。

增重率（y）與飼料脂肪水平（x）進(jìn)行相關(guān)回歸分析，得到圖2的結(jié)果，擬合后的方程為：

圖2 草魚(yú)增重率與飼料脂肪水平的關(guān)系

求出當(dāng)x=6.471時(shí)，增重率的值最高。

特定生長(zhǎng)率（y）與飼料脂肪水平（x）進(jìn)行相關(guān)回歸分析，得到圖3的結(jié)果，擬合后的方程為：

圖3 草魚(yú)特定生長(zhǎng)率與飼料脂肪水平的關(guān)系

求出當(dāng)x=6.392時(shí)，特定生長(zhǎng)率的值最高。

蛋白質(zhì)效率（y）與飼料脂肪水平（x）進(jìn)行相關(guān)回歸分析，得到圖4的結(jié)果，擬合后的方程為：

圖4 草魚(yú)蛋白質(zhì)效率與飼料脂肪水平的關(guān)系

求出當(dāng)x=6.368時(shí)，蛋白質(zhì)效率的值最高。

2.4 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)肝胰臟組織形態(tài)的影響 從圖5中不同脂肪水平草魚(yú)肝胰臟組織切片的顯微觀察可以看出，D1～D6組草魚(yú)肝胰臟細(xì)胞排列整齊、大小均一、細(xì)胞膜分界明顯，總體來(lái)說(shuō)肝胰臟細(xì)胞都比較健康。D1、D2和D3組的草魚(yú)肝胰臟細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)顏色較深，隨著脂肪添加水平的進(jìn)一步提高，D4、D5和D6組肝胰臟細(xì)胞體積有增大趨勢(shì)，并且細(xì)胞中脂肪滴面積逐漸擴(kuò)大，細(xì)胞質(zhì)中白色部分增多，使得切片整體顏色變淺。

圖5 不同脂肪水平下草魚(yú)肝胰臟組織結(jié)構(gòu)

3 討論

3.1 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響 魚(yú)類(lèi)利用糖的能力低，是因?yàn)轸~(yú)傾向于使用氨基酸，而不是葡萄糖作為碳源來(lái)合成新的脂肪酸。一些肉食性魚(yú)類(lèi)因其天然餌料中富含脂肪，所以魚(yú)體內(nèi)新的脂肪酸合成很少發(fā)生，基本由攝入的脂肪分解產(chǎn)生，因此養(yǎng)殖用飼料中添加脂肪可以起到節(jié)約蛋白的作用。這也從另一個(gè)角度說(shuō)明，魚(yú)體直接蓄積食源中的脂肪，將會(huì)降低代謝能中將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成脂肪的能量需求，在生產(chǎn)性能方面就會(huì)表現(xiàn)出蛋白質(zhì)效率及增重率提高、飼料系數(shù)下降。

從本試驗(yàn)中飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響可以看出，在飼料脂肪水平為5.72%～7.65%時(shí)，草魚(yú)的增重率、特定生長(zhǎng)率及蛋白質(zhì)效率均顯著高于未添加脂肪組，飼料系數(shù)呈現(xiàn)與之相反的趨勢(shì)，說(shuō)明飼料脂肪對(duì)草魚(yú)有顯著的促生長(zhǎng)效果。之所以會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象，是因?yàn)樵陲暳现舅竭^(guò)低時(shí)，魚(yú)類(lèi)需動(dòng)用除脂肪之外的其他營(yíng)養(yǎng)素供能，其中蛋白質(zhì)起主要作用。隨著飼料脂肪水平的增加，蛋白質(zhì)作為能量消耗也隨之減少，轉(zhuǎn)而更多用于體蛋白的增加，從而表現(xiàn)出生長(zhǎng)性能的快速提升。但隨著飼料脂肪水平的進(jìn)一步提高，生長(zhǎng)性能指標(biāo)逐漸降低并趨于平穩(wěn)。這一現(xiàn)象也同樣出現(xiàn)在團(tuán)頭魴（蔣陽(yáng)陽(yáng)等，2012）、拉氏鱥（蔣湘輝等，2016）、大西洋白姑魚(yú)（Chatzifotis等，2010）、吉富羅非魚(yú)（王愛(ài)民等，2011）、齊口裂腹魚(yú)（段彪等，2007）、鱖魚(yú)（王貴英等，2003）等。

本研究采用曲線回歸分析得出，當(dāng)飼料脂肪水平分別為6.471%、6.392%、6.368%和6.414%時(shí)，草魚(yú)幼魚(yú)可以獲得最大增重率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率以及最低飼料系數(shù)，因此綜合考慮生長(zhǎng)速度和飼料利用情況，草魚(yú)幼魚(yú)飼料適宜脂肪水平為6.3%～6.5%。本結(jié)果與田娟（2009）在草魚(yú)脂肪需求上的結(jié)果接近，但與雍文岳等（1985）、高文（2009）和軒子群等（2012）確定的草魚(yú)飼料脂肪含量1%～4%的水平有較大差距。究其原因，飼料配方不同可能是導(dǎo)致結(jié)果不同的關(guān)鍵因素，本試驗(yàn)與田娟（2009）試驗(yàn)的飼料配方均為實(shí)用配方，而雍文岳等（1985）、高文（2009）和軒子群等（2012）的試驗(yàn)飼料均為純化飼料，實(shí)用飼料與純化飼料在蛋白源、糖源、脂肪源上均存在較大差異，而營(yíng)養(yǎng)素來(lái)源的不同會(huì)對(duì)魚(yú)類(lèi)在脂肪利用方面產(chǎn)生極大影響。除此之外養(yǎng)殖條件、水溫、生長(zhǎng)階段等都會(huì)引起魚(yú)類(lèi)對(duì)脂肪需求量的差異（Bogevik等，2010）。

3.2 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)增加單位體重所消耗營(yíng)養(yǎng)素的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料蛋白質(zhì)含量基本相同前提下，草魚(yú)增加單位體重所消耗的飼料蛋白質(zhì)質(zhì)量，隨飼料脂肪含量的增加，呈先下降后上升的趨勢(shì)。在飼料脂肪含量為6.48%時(shí)（D3組），增加單位體重所需的蛋白質(zhì)為267.99 g、所需的脂肪為58.26 g。在飼料脂肪含量為4.79%時(shí)（D1組），增加單位體重所需的蛋白質(zhì)為311.91 g、所需的脂肪為49.10 g，D3組較D1組蛋白質(zhì)消耗量下降了12.13%、脂肪消耗量上升了18.59%，即每消耗1 g脂肪可以節(jié)約蛋白4.79 g。而當(dāng)飼料脂肪含量達(dá)到9.45%時(shí)（D6組），相較于D1組，每消耗1 g脂肪可以節(jié)約蛋白質(zhì)質(zhì)量為0.42 g。因此，從以上數(shù)據(jù)可以直觀的看出，飼料中適宜的脂肪含量可以起到顯著節(jié)約蛋白的作用。同樣，在一些魚(yú)類(lèi)的研究中發(fā)現(xiàn)，魚(yú)體營(yíng)養(yǎng)組成似乎對(duì)飼料中脂肪水平更加敏感，而飼料中蛋白質(zhì)卻不如脂肪那么顯著。正如桑永明（2018）在方正銀鯽上的研究發(fā)現(xiàn)，不管是飼料脂肪梯度試驗(yàn)還是蛋白質(zhì)梯度試驗(yàn)，都不會(huì)對(duì)方正銀鯽幼魚(yú)肌肉蛋白質(zhì)含量產(chǎn)生顯著影響，而肌肉脂肪含量卻隨飼料脂肪水平的提高而顯著增加。而在軍曹魚(yú)（Chou等，2001）、紅鰭東方鲀（Kim等，2009）、細(xì)鱗鮭（Lee等，2001）、圓 斑 星 鰈 （Lv等，2015）、波 斯 鱘（Mohseni等，2013）、烏蘇里擬鲿 （馬國(guó)軍等，2012）上的研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼料蛋白含量的增加，魚(yú)體脂肪含量呈下降趨勢(shì)。以上結(jié)果均說(shuō)明通過(guò)提高飼料脂肪含量較提高蛋白含量在魚(yú)體增重方面的作用更大。

3.3 飼料脂肪水平對(duì)草魚(yú)肝胰臟組織的影響草魚(yú)具有蓄積脂肪的能力，其蓄積部位主要位于肌肉、肝胰臟、腹腔和腸系膜，各部位蓄積脂肪的多少也因種類(lèi)不同而存在較大差異（陳擁軍等，2016）。郭小澤（2013）研究發(fā)現(xiàn)，草魚(yú)蓄積脂肪的主要部位是腸系膜，占魚(yú)體脂肪含量的22.93%～28.61%，其次是肌肉組織占11.46%～14.54%，最后是肝胰臟組織占2.35%～4.85%，雖然肝胰臟組織儲(chǔ)存脂肪占比較小，但因其質(zhì)量小，致使其脂肪的絕對(duì)含量很高。這從本試驗(yàn)草魚(yú)肝胰臟組織切片就能看出，隨著飼料中脂肪含量的增加，肝胰臟細(xì)胞中白色部分逐漸增大，說(shuō)明本試驗(yàn)中草魚(yú)肝胰臟脂肪蓄積量與食物中脂肪含量呈正相關(guān)，雖然草魚(yú)肝胰臟細(xì)胞脂肪量逐漸增多，但即使是飼料脂肪含量最高的D6組，草魚(yú)肝胰臟細(xì)胞仍舊排列緊密，細(xì)胞膜界限清晰、完整，未有細(xì)胞破損、溶脹等的器質(zhì)性改變。這從本試驗(yàn)養(yǎng)殖過(guò)程中草魚(yú)健康狀況也可以看出，6個(gè)試驗(yàn)組草魚(yú)在整個(gè)養(yǎng)殖階段都體色正常、搶食活躍，未有死魚(yú)現(xiàn)象出現(xiàn)，飼料即使在脂肪含量達(dá)9.45%的情況下也未嚴(yán)重影響草魚(yú)健康，說(shuō)明草魚(yú)肝胰臟有比較強(qiáng)的脂肪蓄積能力。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)中，草魚(yú)對(duì)脂肪有一定的耐受能力，即使飼料脂肪含量達(dá)9.45%，也未對(duì)草魚(yú)健康產(chǎn)生顯著影響；當(dāng)飼料脂肪在5.72%～7.65%時(shí)均對(duì)草魚(yú)有顯著的促生長(zhǎng)效果，綜合比較生長(zhǎng)和飼料利用率，草魚(yú)幼魚(yú)飼料脂肪最適含量為6.3%～6.5%。