曾家興 田菁菁 盧偉 黃銳 陳俊豪張林 謝雪晴 張媛玲 丁杰

1貴州省人民醫(yī)院普外科（貴陽(yáng) 550000）；2貴州醫(yī)科大學(xué)（貴陽(yáng) 550000）；3貴州大學(xué)醫(yī)學(xué)院（貴陽(yáng) 550000）

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）在臨床上占消化系統(tǒng)惡性腫瘤之首，據(jù)2020年GLOBOCAN 統(tǒng)計(jì)報(bào)告表明，CRC 是全球第三大常見癌癥，也是癌癥死亡的第二大原因［1］。雖然90%的早期診斷患者總存活率超過(guò)5年，但在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中，這一數(shù)字不到10%［2］。然而，CRC 通常在早期階段沒有癥狀，并在人群中零星出現(xiàn)，對(duì)有效和及時(shí)的治療構(gòu)成了挑戰(zhàn)。因此，利用一種非侵入性方法對(duì)無(wú)癥狀個(gè)體進(jìn)行大規(guī)模篩查是一項(xiàng)公共衛(wèi)生高度的優(yōu)先事項(xiàng)。

1 結(jié)直腸癌的篩查方式

目前篩查CRC 的常見方法有糞便隱血試驗(yàn)（fecal occult blood test，F(xiàn)OBT）、糞便免疫化學(xué)檢測(cè)（fecal immunochemical test，F(xiàn)IT）以及腸鏡等。FOBT是最廣泛的CRC 篩查方法，成本低廉且無(wú)創(chuàng)，但易被飲食等其他因素干擾，易出現(xiàn)假陽(yáng)性。FIT 和FOBT 類似，是利用針對(duì)人類珠蛋白抗體檢測(cè)糞便中的血紅蛋白，不受進(jìn)食影響，與FOBT 相比，CRC篩查的參與度和CRC 的診斷率更高［3］，但抗體在轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存過(guò)程中易降解，且由于間歇性出血以及糞便中血紅蛋白的降解，導(dǎo)致約一半的CRC 和大多數(shù)息肉沒有被發(fā)現(xiàn)。腸鏡檢查是診斷CRC 最直接準(zhǔn)確的方法，且病理結(jié)果是診斷CRC 和評(píng)估TNM 分期的金標(biāo)準(zhǔn)，由于需要腸道準(zhǔn)備、飲食限制且存在侵入性、成本高和嚴(yán)重并發(fā)癥（如腸出血和腸穿孔等），導(dǎo)致患者的依從性低且難以作為CRC的常規(guī)篩查。另外如CT、MRI、鋇劑灌腸、腔內(nèi)超聲、腫瘤標(biāo)記物（CEA、CA199）和糞便DNA 等檢查，同樣具有侵入性、費(fèi)用昂貴、依從性低、敏感性和特異性低等問題。因此，目前迫切需要一種成本效益高的非侵入性CRC 篩查方法來(lái)最大限度地提高檢測(cè)準(zhǔn)確率。

2 糞便miRNA 與結(jié)直腸癌的相關(guān)性

微小核糖核酸（microRNA，miRNA）是一類單鏈內(nèi)源性非編碼小分子RNA，約由22 個(gè)核苷酸組成，來(lái)源于發(fā)卡結(jié)構(gòu)，廣泛存在于動(dòng)物、植物和一些病毒中，超過(guò)60%的蛋白編碼基因由miRNA 調(diào)控，它在轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)向調(diào)節(jié)基因表達(dá)［4］。成熟的miRNA 與AGO 蛋白（argonaute proteins）絡(luò)合成RNA 誘導(dǎo)沉默復(fù)合體（RNA?induced silencing com?plex，RISC），再通過(guò)引導(dǎo)AGO 蛋白和相關(guān)因子到mRNA 的3′端非翻譯區(qū)（untranslated region，3′UTR）的靶位點(diǎn)，活性miRNA 種子區(qū)與靶mRNA 的3′UTR完全堿基配對(duì)導(dǎo)致mRNA 斷裂降解；而部分堿基配對(duì)抑制了翻譯的起始或延伸階段［5］。單個(gè)miR?NA 可以調(diào)控多個(gè)靶基因，幾個(gè)miRNA 組合也可以精細(xì)調(diào)控某個(gè)基因的表達(dá)［4］。根據(jù)miRNA 在腫瘤中的功能和地位，一般將miRNA 分為促腫瘤miR?NA（oncomiR）和腫瘤抑制miRNA（tumor suppressor miRNA，tsmiR），oncomiR 抑制編碼腫瘤抑制蛋白的mRNA 來(lái)促進(jìn)腫瘤，通常在腫瘤中表達(dá)上調(diào)，相反，tsmiR 在腫瘤中表達(dá)降低，因此它們靶向的致瘤mRNA 過(guò)度表達(dá)，特定的miRNA 具有雙重作用，可以同時(shí)產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)的致瘤和抑瘤效應(yīng)［6］。

miRNA 的失調(diào)與CRC 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，它們通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)，誘導(dǎo)細(xì)胞增殖，產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞凋亡和化療的抵抗力，并促進(jìn)轉(zhuǎn)移［7］。miRNA 的異常表達(dá)可能涉及結(jié)腸癌變的各個(gè)環(huán)節(jié)，在癌組織［8］、血液［9-10］和糞便［11］中分離出這些miRNA 可認(rèn)為是CRC 早期診斷和預(yù)后評(píng)估的潛在生物標(biāo)志物，并且可以通過(guò)調(diào)控oncomiR 或tsmiR的功能等干預(yù)措施來(lái)抑制腫瘤。不同研究表明，在CRC 中可使用低表達(dá)的tsmiR 的模擬物進(jìn)行miRNA 的替代療法，如抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移、侵襲和增加化療及藥物的敏感性；另一種反義治療，在CRC 中利用干擾RNA 來(lái)阻斷高表達(dá)的oncomiR 也有同樣的效果［12］，這表明miRNA 靶向治療有望成為一種新的CRC 治療手段。

miRNA 在進(jìn)化上高度保守，不容易降解，能順利進(jìn)入糞便并長(zhǎng)期滯留，發(fā)揮調(diào)控作用，已經(jīng)證明miRNA 在72 h 的孵育期內(nèi)仍然可以在樣品中檢測(cè)到［13］。目前已在CRC 患者糞便中發(fā)現(xiàn)多種miRNA存在異常表達(dá)，異常的糞便miRNA 可能起源于脫落的惡性結(jié)直腸細(xì)胞，或由外泌體釋放進(jìn)入糞便［14］，更能直接地反映腸腔病變的生物學(xué)變化。糞便miRNA 的穩(wěn)定性取決于它們的來(lái)源，因?yàn)榻Y(jié)直腸細(xì)胞中的miRNA 和外泌體比游離miRNA 更能抵抗RNase 的降解［15］。而利用外周血液miRNA進(jìn)行CRC 篩查的主要缺點(diǎn)是檢測(cè)特異性不高［16］，因?yàn)檠褐衜iRNA 可能來(lái)自其他腫瘤［17］、精神分裂癥［18］和病毒感染［19］等。與外周血液檢測(cè)相比，糞便miRNA 可以更早地檢測(cè)到腫瘤細(xì)胞和大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物，具有更高的特異性、靈敏性和重復(fù)性［20］，且經(jīng)濟(jì)、無(wú)創(chuàng)。因此，糞便miRNA 可作為早期臨床診斷及預(yù)后的新型CRC 生物標(biāo)志物。

3 糞便來(lái)源的miRNA 檢測(cè)方法及優(yōu)缺點(diǎn)

糞便miRNA 生物標(biāo)志物檢測(cè)方法種類繁多，目前最主要的是RT?qPCR（reverse transcription quantitative?polymerase chain reaction，逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）、微陣列法及RNA 測(cè)序技術(shù)等。其中RT?qPCR 是最常用且最廣泛使用的檢測(cè)技術(shù)，被認(rèn)為是miRNA 檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，它可用于絕對(duì)和相對(duì)miRNA 定量，也可用于RNA 印跡法和微陣列進(jìn)一步驗(yàn)證，但miRNA 長(zhǎng)度短，反轉(zhuǎn)錄步驟的設(shè)計(jì)相對(duì)復(fù)雜，易受到引物或探針干擾等缺點(diǎn)。微陣列法是基于miRNA 與探針的雜交反應(yīng)，它可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本，并且能夠檢測(cè)單個(gè)樣本的數(shù)百個(gè)靶序列，適用于高通量篩選和檢測(cè)，但檢測(cè)的范圍受限于探針的信息，只能檢測(cè)已知序列，而且靈敏度較差，芯片昂貴。RNA 測(cè)序技術(shù)能夠鑒別miRNA 和發(fā)現(xiàn)未知miRNA，能夠?yàn)閙iRNA 的發(fā)生及功能機(jī)制提供大量信息，且可以邊合成邊測(cè)序，耗時(shí)短，但儀器昂貴且需要專業(yè)的數(shù)據(jù)分析。

總之，糞便miRNA 不同檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，研究者需要根據(jù)miRNA 數(shù)量及信息來(lái)選擇合適的檢測(cè)方法，達(dá)到快速、高靈敏性特異性及高通量等目的，從而效率最大化。

4 糞便miRNA標(biāo)志物在結(jié)直腸癌中的應(yīng)用

4.1 糞便中單基因oncomiR 檢測(cè) oncomiR 通過(guò)靶向編碼腫瘤抑制蛋白的mRNA 表現(xiàn)出促癌特性，這些miRNA 在CRC 患者糞便中上調(diào)。目前研究較為深入的是miR?21，它在CRC 中過(guò)度表達(dá)，能下調(diào)抑癌基因的表達(dá)，從而發(fā)揮促癌特性。BASTA?MINEJAD 等［21］采用RT?qPCR 檢測(cè)40 例CRC 患者及40 名健康對(duì)照者的糞便，發(fā)現(xiàn)CRC 患者糞便的miR?21 表達(dá)水平較對(duì)照組顯著上調(diào)10 倍，敏感性和特異性分別為86.05%、81.08%，AUC（area under the receiver operating characteristic curve，接受者操作特征曲線下面積）為0.829，能夠區(qū)分CRC 患者和健康者；且指出糞便miR?21 表達(dá)水平差異可顯著區(qū)分Ⅲ?Ⅳ期和Ⅰ?Ⅱ期（TNM 分期）CRC，其敏感性和特異性分別為88.1%和81.6%（AUC：0.872）。

LI 等［22］對(duì)77 例CRC 患者和29 例對(duì)照者的血清和糞便標(biāo)本檢測(cè)miRNA，結(jié)果表明在CRC 患者中血清和糞便miR?135b?5p 表達(dá)均顯著上調(diào)，在區(qū)分CRC 患者及健康者上，糞便miR?135b?5p 的特異性為74.1%，敏感性為96.5%；在區(qū)別Ⅰ?Ⅱ期和Ⅲ?Ⅳ期（TNM 分期），特異性和敏感性分別為89.4%和80.9%，AUC 為0.92；而在鑒別Ⅰ?Ⅲ期和Ⅳ期，AUC 為0.78，且表明糞便miR?135b?5p 在區(qū)分CRC不同TNM 分期的診斷價(jià)值優(yōu)于其血清水平，可作為非侵入性生物標(biāo)志物用于診斷Ⅲ?Ⅳ期CRC患者。

另一研究在79 例健康受試者和58 例CRC 患者的137 份糞便樣本進(jìn)行了小RNA 測(cè)序，與健康對(duì)照相比，CRC 患者的糞便中miR?486?5p 表達(dá)明顯上調(diào)，且證實(shí)了miR?486?5p 在早期患者與健康對(duì)照組，以及晚期與非轉(zhuǎn)移性腫瘤的差異表達(dá)［23］，這說(shuō)明了miR?486?5p 可作為CRC 診斷的特異性標(biāo)志物。

4.2 糞便中單基因tsmiR 檢測(cè) 除了oncomiR，一些miRNA 可作為抑癌基因被稱為tsmiR，具有抑制腫瘤活性和抑制轉(zhuǎn)移的特性，它們?cè)贑RC 患者糞便中經(jīng)常下調(diào)。例如，AHMED 等［24］使用miRNA基因芯片對(duì)15 名個(gè)體的糞便樣本進(jìn)行了全局微陣列表達(dá)研究，對(duì)其中20 個(gè)選定的miRNA 進(jìn)行后續(xù)的qPCR 分析研究，在60 例患者的糞便中，發(fā)現(xiàn)8 個(gè)miRNA 表達(dá)下調(diào)（miR?9、miR?29b、miR?127?5p、miR?138、miR?143、miR?146a、miR?222 和miR?938），且隨著TNM 分期從早期到晚期進(jìn)展，這種下調(diào)趨勢(shì)更加明顯。

ZHU 等［25］對(duì)80 例CRC 患者和51 例健康志愿者進(jìn)行回顧性分析，檢測(cè)參與者糞便樣本中4 個(gè)miRNA（miR?29a，miR?145，miR?223 和miR?224）的水平，結(jié)果顯示CRC 患者糞便的miR?29a、miR?223和miR?224 水平明顯低于正常對(duì)照的糞便，且直腸癌患者糞便中的miR?29a 水平明顯高于近端和遠(yuǎn)端結(jié)腸癌患者，而miR?223 和miR?224 與腫瘤位置無(wú)關(guān)，miR?29a，miR?223 和miR?224 的AUC 分別為0.777、0.649 和0.745，其敏感性和特異性分別為85%和61%、60%和71%、75%和63%。

與oncomiR 類似，CRC 患者糞便中tsmiR 表達(dá)降低，同樣具有相當(dāng)可觀的敏感性和特異性，從而達(dá)到CRC 篩查和早期診斷的目的。

4.3 糞便中miRNA 多基因及多樣本聯(lián)合檢測(cè) CHOI 等［26］報(bào)道CRC 糞便中miR?21、miR?92a、miR?144*和miR?17?3p 的表達(dá)水平顯著高于健康對(duì)照組，這4 種miRNA 檢測(cè)CRC 的敏感性均在70%以上，多變量分析顯示miR?92a和miR?144*與CRC顯著相關(guān)，miR?92a的敏感性為89.7%，特異性為51.7%，AUC 為0.76，而miR?144*分別為78.6%、66.7%、0.77，miR?92a 和miR?144*聯(lián)合檢測(cè)的敏感性為96.6%，比單獨(dú)運(yùn)用FIT（73.8%）檢測(cè)CRC 更好。

一項(xiàng)薈萃分析［13］對(duì)46 篇關(guān)于CRC 研究和10項(xiàng)關(guān)于腺瘤研究，對(duì)應(yīng)CRC、腺瘤患者和健康個(gè)體的6 475、783和5 569項(xiàng)糞便miRNA檢測(cè)，得出診斷CRC 最可靠的單個(gè)miRNA 是miR?21，AUC 為0.843，敏感性為59.3%，特異性為85.6%，miR?92a對(duì)應(yīng)的值分別為0.794、46.8%、90.5%；而miR?21與miR?92a聯(lián)合對(duì)應(yīng)的值分別為0.837、53.7%、87.8%。另外顯示晚期CRC 診斷準(zhǔn)確率更高，遠(yuǎn)端CRC 敏感性高于近端，因此糞便miR?21、miR?92a 及其聯(lián)合檢測(cè)可作為基于糞便CRC 篩查有前景的無(wú)創(chuàng)性標(biāo)志物。

大多數(shù)研究側(cè)重于對(duì)單個(gè)樣本類型（例如血清、血漿或糞便）發(fā)現(xiàn)新的標(biāo)志物，極少有研究系統(tǒng)性評(píng)估同一個(gè)體不同樣本類型的miRNA 在CRC 中的作用。CHANG等［27］選擇46個(gè)最常報(bào)告的CRC相關(guān)的miRNA 進(jìn)行檢測(cè)，在檢測(cè)互補(bǔ)效應(yīng)后，聯(lián)合分析糞便和血漿標(biāo)本中常見的miR?223 和miR?92a，對(duì)CRC 的靈敏度最高，為96.8%，優(yōu)于FOBT（70%～75%）或多靶點(diǎn)糞便DNA 檢測(cè)（92.3%），特異性為75%，AUC 為0.907。且它們發(fā)現(xiàn)早期疾病或腫瘤體積較小的CRC 患者的結(jié)果與晚期疾病或腫瘤體積較大的患者相當(dāng)。

因此，在兩種類型的CRC 臨床樣本中建立miRNA 生物印記，可以用于大腸癌的早期檢測(cè)，且多個(gè)miRNA 聯(lián)合的互補(bǔ)作用顯示出良好的敏感性和相當(dāng)?shù)奶禺愋?，能提高CRC 的檢出率。

4.4 糞便miRNA 聯(lián)合其他生物標(biāo)志物檢測(cè) LI?ANG 等［28］收集381 例CRC 患者糞便樣本，建立了一種結(jié)合miR?92a、miR?21、miR?135b、miR?145 和miR?133a 5 個(gè)miRNA 的評(píng)分算法（C?index）。通過(guò)分析CRC 全基因組miRNA 表達(dá)譜，得出在單個(gè)miRNA 中，糞便miR?92a 區(qū)分CRC 患者與健康者表現(xiàn)最好，AUC 為0.782，敏感度與特異度均為72%，而C?index 較單個(gè)miRNA 相比，CRC 診斷性能顯著提高，AUC 為0.849，在特異性為80%時(shí)，敏感性為81%，而結(jié)合FIT 敏感性可提高到90%。對(duì)于晚期腺瘤（AA，advanced adenomas），特異性為80%時(shí)，C?index 的敏感性（33%）明顯高于FIT（17%），結(jié)合FIT 后進(jìn)一步提高到43%。

DURAN?SANCHON 等［29］發(fā) 現(xiàn)miR?130b?3p、miR?21?5p、miR?221?5p、miR?25?3p、miR?27a?3p、miR?34a?5p 和miR421 這7 個(gè)miRNA 在CRC 患者糞便中顯著上調(diào)，miR?130b?3p、miR?21?5p、miR?27a?3p、miR?421 以及miR?335?3p 在AA 患者糞便中的表達(dá)顯著上調(diào)。在作者預(yù)測(cè)模型中miR?421、miR?27a?3p 和血紅蛋白組合識(shí)別CRC 患者的AUC 為0.93，而單獨(dú)檢測(cè)糞便血紅蛋白濃度的AUC 為0.67。聯(lián)合標(biāo)記物識(shí)別AA 患者的AUC 為0.64，而單獨(dú)檢測(cè)糞便血紅蛋白的AUC 值為0.59?？傊S便中miRNA 和血紅蛋白水平組合比單獨(dú)檢測(cè)糞便中的血紅蛋白濃度更能準(zhǔn)確地識(shí)別AA 或CRC患者。該作者的另一項(xiàng)研究［30］基于miR?421、miR?27a?3p 和糞便血紅蛋白濃度，以及年齡和性別的一種miRFec 的算法，該算法可以將CRC 患者與非晚期腺瘤或結(jié)腸鏡檢查正常的患者區(qū)分開來(lái)，AUC 為90%，避免了34%的結(jié)腸鏡檢查。該算法有助于FIT 陽(yáng)性的部分群體，基于出現(xiàn)CRC 的概率非常低，可以避免結(jié)腸鏡檢查，提高CRC 篩查的成本和效率。

總之，糞便的miRNA 對(duì)腺瘤和CRC 非侵入性檢測(cè)有著較高的準(zhǔn)確性，并且檢測(cè)一組miRNA 可能會(huì)使CRC 檢出率更高，而miRNA 與FOBT 或FIT的聯(lián)合可能會(huì)進(jìn)一步提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

4.5 糞便miRNA 與結(jié)直腸癌手術(shù)的相關(guān)性 研究表明，對(duì)CRC 患者在根治性手術(shù)前后的糞便樣本中的miRNA 進(jìn)行檢測(cè)，證實(shí)糞便miRNA 可以作為有用的動(dòng)態(tài)標(biāo)記物來(lái)監(jiān)測(cè)治療后的疾病研究。ROTELLI 等［31］通過(guò)RT?qPCR 篩查結(jié)腸鏡陰性CRC 患者及健康受試者的糞便，術(shù)前5 種miRNA（miR19b?3p，miR20a?5p，miR21?3p，miR 92a?3p，和miR141）的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，而在根治性手術(shù)后顯著降低，其中miR20a?5p，miR21?3p和miR141 水平降低到與正常對(duì)照組相當(dāng)?shù)闹怠?/p>

由上可見，一組特異性的糞便miRNA 在手術(shù)前過(guò)度表達(dá)，并在腫瘤切除后恢復(fù)到正常范圍，有望成為一種新的可靠的大腸癌二級(jí)預(yù)防工具。然而，此類試驗(yàn)需要在大型前瞻性研究中加以探索，并與現(xiàn)有的篩查工具進(jìn)行比較，評(píng)估少數(shù)糞便miRNAs 的可靠性。

4.6 糞便miRNA 與結(jié)直腸腺瘤等癌前病變的相關(guān)性 結(jié)直腸腺瘤是CRC 的主要癌前病變，尤其是晚期腺瘤，大部分CRC 都是由結(jié)直腸腺瘤演變而來(lái)。因此，通過(guò)檢測(cè)某些miRNA 來(lái)區(qū)分健康者與腺瘤、CRC 患者，可以為CRC 的早期篩查及診斷提供了新的思路。

ZHAO等［32］證實(shí)糞便中miR?194的表達(dá)從20例健康者、20 例腺瘤患者、28 例CRC 患者逐漸降低，提示miR?194 表達(dá)下調(diào)可能是大腸癌發(fā)生的早期事件，且糞便miR?194 的表達(dá)可以區(qū)分正常人和CRC 患者其AUC 為0.739，敏感性為60%，特異性為88.1%。因此糞便miR?194 有可能取代組織標(biāo)本成為腺瘤及CRC 患者一種重要的早期診斷標(biāo)志物。另外，LIU 等［33］檢測(cè)CRC、腺瘤和健康志愿者糞便標(biāo)本的miR?21 和miR?146a 表達(dá)，結(jié)果表明與健康對(duì)照組比，糞便miR?21 水平在CRC 和腺瘤患者均顯著上調(diào)，而糞便miR?146a 僅在CRC 患者中明顯降低，腺瘤患者與健康對(duì)照組的miR?146a 表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，糞便miR?21、miR?146a 及其聯(lián)合表達(dá)水平均能顯著將CRC 患者（AUC 分別為0.877、0.794、0.878）、腺瘤患者（AUC 分別為0.877、0.794、0.878）與正常對(duì)照組區(qū)分開來(lái)；在區(qū)分CRC和腺瘤患者時(shí)，其AUC 值分別為0.699、0.815 和0.729。證實(shí)糞便標(biāo)本中miRNA?21 和miRNA?146a對(duì)大腸癌的早期診斷具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。

5 展望

不少研究使用一組或多組糞便miRNA 作為生物標(biāo)志物已具有較高的CRC 及癌前病變的檢出率，然而，糞便miRNA 需要依賴于定量檢測(cè)，并不能消除腸道微生物蛋白、DNA 和RNA 的潛在污染，而糞便miRNA 結(jié)合FIT 是提高檢測(cè)準(zhǔn)確性的可靠方法。另外一個(gè)值得考慮的問題是如果樣本存在潛血，血細(xì)胞的miRNA 會(huì)干擾結(jié)果，使用FOBT/FIT 陽(yáng)性和陰性樣本比較的對(duì)照研究可以解決，更全面的方法是使用miRNA 分析和比較匹配的血液、糞便和腫瘤組織，它能提供miRNA 水平變化來(lái)源的信息。

總之，糞便是一種非常適合CRC 篩查的介質(zhì)，糞便miRNA 對(duì)CRC 的診斷、預(yù)后和個(gè)性化治療具有重要的臨床意義，目前其檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅速，具有廣闊的應(yīng)用前景，與CRC 進(jìn)展相關(guān)的糞便miR?NA 水平定量變化，比當(dāng)前臨床可用的檢測(cè)方法提供了更敏感更特異的非侵入性診斷標(biāo)記。但仍需要大型的、理想多中心、雙盲隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，來(lái)確定糞便miRNA 在普通人群中作為CRC 生物標(biāo)志物的價(jià)值。