孫孟瑤,方 宇,楊 丁,楊雅琪,侯 杰,梁晚楓★(延邊市延邊大學農(nóng)學院 136200)
多殺性巴氏桿菌是引起該病的病原菌,菌體整體呈現(xiàn)為橢圓型或短桿型,長度約在1~1.5μm之間[1],是一種無鞭毛不運動、不形成芽孢的革蘭陰性桿菌,根據(jù)外部莢膜的不同,不同的分離株具有的毒力有所不同;該病菌在自然界中分布廣泛,屬于條件型致病菌,病菌對常見消毒藥抵抗力較弱,易被普通消毒藥、陽光、干燥或加熱破壞,但可常溫存在于腐敗尸體或超市的土壤中中3~5個月。該菌在人類和其他動物之間均具有極強的感染力,在人體中易引發(fā)肺部的感染,在動物中,引起牛羊這類牲畜敗血癥,禽類引起霍亂。
盡管巴氏桿菌的感染性是不分物種的,但實際上禽類的感染性是最高的,在禽類中又屬雞的感染性最強。病菌通過侵襲雞的眼部、鼻腔和口腔分泌物感染雞群,同時污染周邊環(huán)境、工具等。有研究發(fā)現(xiàn),在空氣潮濕悶熱、氣候巨變的環(huán)境中,該病的發(fā)病率較高[2],同時飼養(yǎng)管理不良也是誘因之一。通常而言,一月齡以下的幼雞最易感。該病會廣泛的傳播的原因是其潛伏期較長且潛伏期內具有很強的傳染性。處于潛伏期的雞無明顯臨床表現(xiàn),很難進行鑒別和早期預防,導致病雞長期混在雞群中,引起其他雞感染,同時,潛伏在病雞體內的多殺性巴氏桿菌很容易發(fā)生變異,毒力急劇升高。一旦病情暴發(fā),會導致雞群滅亡、蛋雞的產(chǎn)蛋質量變差、產(chǎn)蛋率降低,損害養(yǎng)殖場等地的經(jīng)濟。
雞巴氏桿菌病依據(jù)疾病不同的類型和嚴重程度具有較大差異。按病程可劃分為急性、慢性。但多數(shù)情況下很難據(jù)此分類,臨床癥狀也可介于急性型和慢性型之中。每個時期的發(fā)病特點各不相同。
1.3.1 最急性型
常見于產(chǎn)蛋量非常高、體型相對肥碩的雞。發(fā)病雞通常在1~2d內死亡,在潛伏期內一直均處于正常狀態(tài),不易被察覺,發(fā)病時突發(fā)性地急速拍打翅膀,進而癥狀變?yōu)槊土页榇ぃ罱K角弓反張死亡,病雞死前精神無異常,食欲旺盛。
1.3.2 急性型
是臨床上發(fā)病最多的一種。潛伏期以后,病雞體溫開始急速升高,高達44℃~45℃、對外界刺激反應微弱離群呆立、被毛凌亂、雙翅下垂,頻繁且大量地飲水,食欲不振或完全廢絕,口鼻流出斑駁混有泡沫粘液、腹瀉、排黃綠色或白色稀便,甚至呈血色[3],情況嚴重者,出現(xiàn)脫水、抽搐。呼吸變急促的同時伴隨有“咯咯”聲,一般在72 h內急速死亡。病雞的雞冠、肉髯腫大、呈現(xiàn)暗紅色。該時期病情兇險,死亡率極高。
1.3.3 慢性型
慢性型病雞身體的各個部位開始出現(xiàn)不同程度的炎癥和腫脹,并且隨著時間的推移會逐漸加劇,存在自行康復的可能,然而藥物治療效果并不理想。除此之外,病雞表現(xiàn)出日漸消瘦、貧血相關癥狀病程持續(xù)時間可長達一個月,周身伴有多種慢性疾病如慢性肺炎、慢性呼吸道炎、慢性胃腸炎等,病情反復頑固,若為產(chǎn)蛋雞群,產(chǎn)蛋量同時減少,畸形蛋、血斑蛋等比例急劇增高,病情嚴重時完全停止產(chǎn)蛋。不同于急性型病雞、慢性型病雞雞冠和肉髯為蒼白色。
主要病變是與血管障礙有關的變化,通常為敗血癥。最急性病例通常無特征性病變,剖檢偶爾可見輕微出血點。急性型病例的剖解變化較為經(jīng)典,可觀察到病雞的十二指腸腸系膜上小血管、心外膜、冠狀脂肪和肌胃等部位明顯出血,其中十二指腸出血尤其嚴重,呈現(xiàn)卡他性腸炎,腸內容物時?;祀s血液、黏膜紅腫潰瘍、肺部充血,有出血點,嚴重會導致為肺炎;鼻腔和呼吸道內充斥大量黏液;心包內積有不透明淡黃液體;肝臟呈病態(tài)棕灰色、土黃色,質脆,表面有針尖大小、灰白色的多個病灶型凝固壞死區(qū)[4];脾略腫大,存在散在的壞死灶,胰腺腫大甚至出血,少數(shù)病雞氣管環(huán)狀出血。慢性病由于病菌的侵入部位不同,故臨床癥狀也有所不同[5],但大多為呼吸道、關節(jié)部位炎癥反應,呼吸道有卡他性滲出、黏液堆集于鼻腔和上呼吸道,切開腫大關節(jié)腔有淡黃色干酪樣壞死物。若病程持續(xù)時間長,可能表現(xiàn)為卵黃性腹膜炎。
1.5.1 染色鏡檢
在無菌條件下,取病雞的心、肝、脾、淋巴結等部位進行組織涂片,革蘭氏染色,油鏡觀察[6]。呈革蘭氏陰性菌特征、兩級明顯著色;通過瑞氏染色觀察,可以觀察到一定數(shù)量的球桿菌,菌體的兩端著色淺、中間著色深。
1.5.2 分離培養(yǎng)
在無菌條件下,將肝臟和脾臟組織分別接種在肉湯培養(yǎng)基、新鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂平板中,并在37℃下培養(yǎng)24~48 h。肉湯培養(yǎng)基管底有沉積物,表面形成一圈灰白色的細菌;新鮮血瓊脂培養(yǎng)基可見灰白色露珠狀小菌落生長,表面半透明,光滑,無溶血;麥康基中心無細菌[7]。選取典型菌落進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢,可見呈橢圓形禿頭微球菌,兩極均呈強色。
1.5.3 生化試驗
該菌不能分解乳糖、木糖、鼠李糖、山梨糖醇;VP試驗、MR試驗均為陰性,靛藍基質試驗為陽性。
1.5.4 動物試驗
取該病菌相關的病料,以1∶5比例向其中加入滅菌生理鹽水,與研缽中充分研磨后制成懸液備用[8]。取小鼠、家兔等實驗動物,經(jīng)皮注射含有病菌的懸液,等待實驗動物病發(fā)。一般情況下,實驗動物會在24h左右出現(xiàn)明顯病理變化,取其心臟、肝臟、血液等制成病理涂片進行顯微鏡的觀察、對比。通常需要注意的是,健康動物的體內也含有一定量的菌群,動物實驗鑒定時,應與禽生前的剖檢變化、臨床癥狀進行比較,得出合理的推論[9]。
2.1.1 西醫(yī)方法
禽巴氏桿菌的治療,應盡早采取措施,采取措施越早,治療效果越好。經(jīng)過藥敏試驗篩選后,可選定有效的治療藥物。對巴氏桿菌敏感的抗生素類藥物應用最廣,病雞癥狀輕微時,可將金霉素、土霉素等隨飼料拌入喂食持續(xù)3~5日;患病雞群癥狀嚴重時,可使用鏈霉素進行肌肉注射等?;前奉愃幬锸褂眠^程中要注意用量,避免大劑量,大劑量的該類藥物可產(chǎn)生腎毒性,影響采食,導致雞的中毒死亡;磺胺喹惡啉在該類藥物中具有優(yōu)秀的效果,故而應用甚廣,使用時需注意不能用于產(chǎn)蛋雞的雞群,該藥物會導致產(chǎn)蛋量降低甚至完全停止產(chǎn)蛋[10]??Z酮類藥物可以配合其他藥物交替使用,避免一類藥物長期使用而產(chǎn)生的抗藥性。
2.1.2 中獸醫(yī)方法
中藥是我國獨特的醫(yī)療體系,可將其運用到動物疾病的治療當中。相較于西藥,中藥用藥更加安全、符合綠色的食品要求,能更好的克服耐藥菌增多、藥物殘留等現(xiàn)象。中醫(yī)認為,禽霍亂是外邪侵入機體,然后入營血,導致血熱妄行。治療本病中醫(yī)用藥以清熱解毒、涼血保肝、清泄里熱、透邪外出為主。當疾病在某地區(qū)蔓延時,養(yǎng)殖場可考慮中藥方劑防治:以金銀花、黃聯(lián)為主柴胡、雄黃為輔。[11]有研究發(fā)現(xiàn)白頭翁、黃柏、秦皮等組成的方劑對抑制巴氏桿菌對動物體的侵染有顯著效果,經(jīng)該方劑治療的存活率和體重增加指數(shù)均比較明顯變化。另有研究指出,復方黃芪多糖散(含黃芪多糖、人身皂苷、青蒿素、魚腥草、板藍根、大青葉等)對該病的治療明確的效果。當今市面上,復方雙黃清熱解毒液是最常見的治療禽霍亂的中藥,應用范圍廣、治療效果良好。面對數(shù)量較多的雞群,可采用如下方劑:加水煎煮板藍根、穿心蓮、黃蓮、葛根、貫眾、紫草、甲紫適量熬制成2000mL的藥液,再加入適量紅糖和大蒜汁,晾至室溫給病雞飲用。
2.2.1 疫苗免疫
預防禽霍亂的主要措施是疫苗免疫。禽霍亂疫苗分滅活疫苗、弱毒苗和亞單位疫苗三種。滅活苗常用于易感雞群的首次免疫或后期免疫的加強。一般情況下,8~10周齡雞群注射滅活疫苗完成首免,一個月后再次注射進行加強。弱毒疫苗由于存在反毒風險,故不適用于易感雞群的前期預防,適合雞群二次免疫。亞單位疫苗是目前的研究熱點,對雞安全無毒、保護力良好。使用時應注意,未使用的疫苗應在2℃~8℃保存,開放疫苗應在8h內使用完畢。免疫期間避免使用鎮(zhèn)痛消炎類藥物、糖皮質激素類藥物。
當今社會分子生物學的蓬勃發(fā)展揭露了多殺性巴氏桿菌更多的發(fā)病機制,這顯著推動了新型疫苗的研發(fā)[12],如新型減毒疫苗、重組亞單位疫苗和DNA疫苗等正是當今科學研究的熱點。相較之前的疫苗,新型減毒疫苗可同時激發(fā)細胞免疫和體液免疫交叉保護力強,具有很高的安全性;亞單位疫苗和DNA疫苗制備方便、基因靶向明確、安全穩(wěn)定。然而,上述三種疫苗的研發(fā)還存在著有待解決的科學問題,目前未應用于市場。
2.2.2 環(huán)境預防措施
要確保養(yǎng)殖和管理安全,必須重在預防。加強家禽抵抗力,增加營養(yǎng),保持雞舍干燥,避免家禽過度擁擠。平時要加強雞群管理,嚴格執(zhí)行衛(wèi)生防疫措施,合理調控飼養(yǎng)密度。在疫病高發(fā)地區(qū),應加強環(huán)境衛(wèi)生,正常時間保持禽舍通風干燥。盡量減少引進外來雞種,做到自繁自養(yǎng)。當引進新的雞群時,應該對老雞實行單獨的飼養(yǎng)制度,并對引進雞群進行嚴格檢疫,確保疾病不被引入雞舍。病群被徹底消滅后,籠子要徹底消毒,新雞群才能進入。水和食物是感染的主要來源,養(yǎng)殖過程中,用水要保持清潔,食物要保持衛(wèi)生且營養(yǎng)均衡,不定時補充維生素,有助于提高雞群免疫力[13]。發(fā)病時應盡快隔離治療,徹底消毒,對群內所有雞群給予預防性用藥。當發(fā)現(xiàn)病雞或死雞時,應隔離其他雞群,及時處理病死雞,防止感染擴散。病雞和死雞主要通過焚燒和掩埋來治療。有病死雞的場所要及時消毒,其他畜群要及時轉移,防止疾病傳播。飼養(yǎng)過程中,相關工作人員進入雞舍需嚴格消毒;一般情況下,養(yǎng)殖場應謝絕外來人員參觀,嚴禁外來動物闖入。
雞巴氏桿菌病的感染病雞主要以出血性敗血癥為主要表現(xiàn),不同時期的臨床癥狀有所不同。該病的病原主要通過呼吸道、消化道傳播;慢性感染病雞是最主要的傳染源。禽霍亂不僅可以感染正常家禽,還可以感染人類和其他動物。因此,加強對多殺巴氏桿菌的研究,控制禽霍亂的發(fā)病幾率,促進養(yǎng)雞場的自我繁殖和自給自足,盡量減少外地雞的引進,如需要引進,將禁止從疫點采購雞只[14]。養(yǎng)殖場應當制定相應管理制度和衛(wèi)生制度,合理預防流行病,加強消毒,減少疾病發(fā)生。這些對于保護和促進家禽產(chǎn)業(yè)和生態(tài)鏈的健康發(fā)展具有重要意義。若周邊出現(xiàn)疾病流行狀況,養(yǎng)殖場應有防患意識,早日接種疫苗,積極用藥;抗生素對巴氏桿菌敏感是治療本病的最佳藥物,中藥則采用以清熱解毒為主的多種方劑。早預防,早治療是戰(zhàn)勝本病的重要指南。