張?bào)w敏，高 霞，田瑞新，崔 慧，趙 靜，趙宇涵，楊金香，王宜磊，李 敏*

(1.菏澤學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 菏澤 274015；2.濟(jì)南市歷城區(qū)工業(yè)北路200 號(hào)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，山東 濟(jì)南 250000；3.山東省菏澤市定陶區(qū)旺天下生態(tài)園，山東 菏澤 274015）

番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）引起的病害，屬半知菌亞門葡萄孢屬真菌，危害蔬菜、果樹及花卉等多種植物，對(duì)保護(hù)地番茄危害尤為突出[1]，從生長到開花、結(jié)果，均能感染，一般導(dǎo)致番茄減產(chǎn)20%～30%，嚴(yán)重高達(dá)50%，甚至絕產(chǎn)[2]。目前主要是化學(xué)防治[3]，2015年1月7日，農(nóng)業(yè)部公布了“一控兩減三基本”的環(huán)境治理方案，直至2020年，農(nóng)藥的使用率實(shí)現(xiàn)零增長計(jì)劃。隨著“減肥、減藥”戰(zhàn)略的實(shí)施和人們對(duì)食品安全的認(rèn)知和需求不斷提高，多種防治途徑逐步被研究和試用，為了最快地找到最有效防治措施，該文對(duì)番茄灰霉病的生物學(xué)特性及其發(fā)生發(fā)展規(guī)律、拮抗菌分離、拮抗菌選育、植物提取物等防治措施進(jìn)行概述，旨在為找到有效、快速防治番茄灰霉病措施提供參考。

1 番茄灰霉病

1.1 病原菌特征

番茄灰霉病病菌絲有隔，菌絲分枝頂端膨大呈棒頭狀或局部膨大呈梨形，其上密生小柄并著生分生孢子。分生孢子圓形至橢圓形，單孢子大小約6.25～13.75 μm。田間條件惡化致使番茄灰霉病產(chǎn)生黑色片狀菌核，大小約（3.0～4.5）mm×（1.8～3.0）mm[4]。

1.2 發(fā)病條件

番茄灰霉病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的溫度為5℃～30℃，最適生長溫度為20℃～25℃，30℃以上菌絲生長受抑制，致死溫度為50℃1 h；pH 為4～7，最適pH 為5[5]；要求較高的空氣相對(duì)濕度，若相對(duì)濕度小于80%，孢子不能萌發(fā)[6]。番茄灰霉病菌主要以菌核（寒冷地區(qū)）或菌絲體及分孢梗（溫暖地區(qū)）在土中越冬，菌絲和孢子借氣流、雨水和人們生產(chǎn)活動(dòng)進(jìn)行傳播[7]。

2 拮抗菌的篩選和育種

2.1 拮抗真菌

目前，用番茄灰霉木霉、康氏木霉等對(duì)番茄灰霉進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，均具有不同的拮抗作用，抑菌率在61.8%～77.6%之間[8]。此外，王傲雪等發(fā)現(xiàn)粉紅粘帚菌WY-1 對(duì)番茄灰霉病具有明顯抑制作用，而尤佳琪等從土壤中分離的擬康寧木霉菌株T-51，菌株和發(fā)酵液均能抑制灰霉菌絲生長和孢子萌發(fā)，其抑制率分別達(dá)到61.0%和74.1%，同時(shí)T-51明顯促進(jìn)番茄生長[9]。Elad 已將哈茨木霉菌T39 做成生物藥劑，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)灰霉病具有較好的防治效果[10]。此外TUSAL、Myco1、Topshield、Trichodry 等50 多種木霉制劑已開發(fā)成生物農(nóng)藥，為番茄灰霉病的防治提供更多的生物藥劑[11-13]。研究發(fā)現(xiàn)漢遜德巴利酵母及其揮發(fā)物對(duì)番茄灰霉病具有明顯抑制作用[14]，而季也蒙假絲酵母[15]、膜醭畢赤酵母[16]、卡利比克畢赤酵母[17]等對(duì)灰霉病具有明顯抑制作用。

2.2 拮抗細(xì)菌

細(xì)菌是生物的一大類，細(xì)菌及其代謝物對(duì)某些霉菌產(chǎn)生顯著的抑制作用。童蘊(yùn)慧等發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌Y2-11-1 懸浮液對(duì)番茄灰霉病的抑制率為78.2%[18]，而熒光假單胞菌FD6懸浮液可顯著抑制其孢子萌發(fā)，抑制率達(dá)99%，對(duì)菌絲抑制效果達(dá)59.7%[19]，Bacillus-1 對(duì)其抑制率略高于Y2-11-1懸浮液，抑制率達(dá)到83%[20]。謝晨昭等發(fā)現(xiàn)放線菌株B1 對(duì)其生長抑制率達(dá)到86.25%[21]。研究發(fā)現(xiàn)某些細(xì)菌不僅對(duì)番茄灰霉病具有較強(qiáng)的抑制作用，其發(fā)酵液也具有顯著的抑制作用，如淀粉芽孢桿菌XF136 發(fā)酵濾液對(duì)番茄灰霉病防治效果可以和農(nóng)藥媲美[22]，而菌株FD6 產(chǎn)生的硝吡咯菌素顯著抑制番茄灰霉病菌孢子萌發(fā)和菌絲的生長[19]。趙新貝等發(fā)現(xiàn)芽孢桿菌TD-7 發(fā)酵濾液對(duì)其孢子的萌發(fā)和菌絲生長抑制率在95%以上[23]。

植物內(nèi)生細(xì)菌與植物在長期進(jìn)化的過程中形成和諧共生群落環(huán)境，定殖在植物體內(nèi)抑制病原菌的生長，有些內(nèi)生細(xì)菌的分泌物不僅抑制病原菌，還能促進(jìn)植物生長。已從其他植物多個(gè)部位分離出防治灰葡萄孢菌的內(nèi)生細(xì)菌，如：甲基桿菌屬、芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、泛菌屬等十余種[24-26]，其中芽孢桿菌殺菌制劑QST 713 和Cepa QST2808 已被巴西農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)為農(nóng)藥[27]，我國武漢天惠生物有限公司研制防治灰霉病菌的枯草芽孢桿菌BS-208 已投入生產(chǎn)[28]。

拮抗細(xì)菌研究主要集中在篩選和鑒定，部分進(jìn)行抑菌物質(zhì)測定，為開發(fā)出高效、低毒、無污染的生物農(nóng)藥，這些物質(zhì)分離純化、穩(wěn)定性及其作用機(jī)理有待于進(jìn)一步深入探討。

3 利用植物提取物

植物是否發(fā)病與植物抗性、外界環(huán)境和病原菌生長三者密切相關(guān)，即植物自身也具有防御或抑制病原菌物質(zhì)。賈小云等在番茄植株導(dǎo)入擬南芥植物miR828 基因提高番茄植株中花青素的含量，灰霉病感染的敏感性降低[29]。此外，從其他植物中提取精油或揮發(fā)型物質(zhì)對(duì)番茄灰霉病抑制效果也較好，王宏年[30]、董紅平[31]等用肉桂精油能較好抑制其菌絲生長，陳倩茹采用體外涂抹、熏蒸方式和體內(nèi)注入香茅精油抑制效果明顯，抑菌率分別為84.56%、80.39%和50.33%[32]。郝彩琴用小花假澤蘭精油抑制番茄灰霉病菌，治療的效果低于防治效果[33]。陳一比從云南100 種藥用植物中篩選出白鉤藤，其提取物在低濃度下（20 μg/μL）表現(xiàn)出較高抗菌活性[34]。

4 防治

為了更好地防治番茄灰霉病，應(yīng)將農(nóng)業(yè)預(yù)防和生物防治有機(jī)結(jié)合，從而達(dá)到良好的效果。在農(nóng)業(yè)預(yù)防方面，首先選擇抗番茄灰霉病效果較佳[35]的春桃、黃圣女等抗性品種；其次田間管理上，番茄植株的株行距確保植株的通風(fēng)、透光、降濕等；番茄不同生長階段，對(duì)溫度、水分、肥量的需求各不相同，比如溫度，番茄種子萌發(fā)溫度25℃～30℃，28℃時(shí)發(fā)芽速度最快；幼苗期適宜生長溫度為20℃～25℃，溫度過高（＞35℃）幼苗徒長，溫度過低（＜8℃）生長遲緩，甚至造成植株死亡；幼苗期進(jìn)行低溫鍛煉，可增強(qiáng)幼苗的抗逆能力，培育壯苗。番茄植株的開花期對(duì)溫度變化比較敏感，白天20℃～25℃，夜間15℃～20℃最為適宜[36]。在發(fā)病初期及時(shí)用生物農(nóng)藥進(jìn)行治療，不僅降低環(huán)境污染，而且食品安全也得到保障。

5 展望

為了有效控制番茄灰霉病，實(shí)現(xiàn)周年、連作生產(chǎn)，還應(yīng)大力篩選抗番茄灰霉病的生防菌及其代謝提取物，及其施入的最佳條件（如：溫度、濕度等），提高生物防治的效果。將篩選的生防菌利用生物學(xué)技術(shù)如誘變、基因轉(zhuǎn)導(dǎo)或基因重組等提高預(yù)防效果。