代宛蓉 張 宇 馬 莉

1.貴州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550004；2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心，貴州貴陽(yáng) 550004

自身免疫性疾?。╝utoimmune disease，AID）是由于自身抗原免疫耐受紊亂，機(jī)體對(duì)自身抗原發(fā)生異常免疫反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致組織和器官損傷及功能障礙的一類疾病，AID 的病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前認(rèn)為細(xì)胞因子在各種AID 的發(fā)病機(jī)制中扮演不可替代的角色。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-38 是一種新型抗炎細(xì)胞因子，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）、銀屑病、炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）等疾病中異常表達(dá)，并且疾病活動(dòng)度和炎癥指標(biāo)相關(guān)性提示IL-38 可能參與AID 的發(fā)生發(fā)展。本文將對(duì)IL-38 的生物學(xué)特性及其在AID 中的作用進(jìn)行綜述，探討未來(lái)IL-38 的研究方向，旨在為AID 的治療提供新思路。

1 IL-38

1.1 IL-38 的結(jié)構(gòu)和來(lái)源

IL-38 是新近發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子，屬于IL-1 家族成員，可廣泛表達(dá)于多種細(xì)胞和組織中，如外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）、滑膜成纖維細(xì)胞、B 細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞（keratinocyte，KC）等。IL-38 的基因位于人類染色體2q13-14.1，緊鄰編碼白細(xì)胞介素1 受體拮抗劑（IL-1 receptor antagonist，IL-1Ra）和白細(xì)胞介素36 受體拮抗劑（IL-36 receptor antagonist，IL-36Ra）的基因，并與兩者具有高度同源性。同時(shí)IL-38 的分子結(jié)構(gòu)具有IL-1 家族細(xì)胞因子的代表性特征，包括與IL-1Ra 相似的典型β-三葉草結(jié)構(gòu)，缺乏信號(hào)肽和caspase-1 切割位點(diǎn)，以及需要N 端裂解才能獲得完整的生物學(xué)活性等[1]。

1.2 IL-38 的功能和受體

白細(xì)胞介素1 受體1（IL-1 receptor 1，IL-1R1）和白細(xì)胞介素36 受體（IL-36 receptor，IL-36R）在體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞中均可表達(dá)，可分別與配體IL-1（α、β）和IL-36（α、β、γ）結(jié)合而被激活，招募IL-1R 輔助蛋白，三者形成復(fù)合物，通過(guò)將髓系分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）募集至細(xì)胞內(nèi)Toll 樣受體結(jié)構(gòu)域來(lái)啟動(dòng)信號(hào)，激活核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）和絲裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase，MAPK）信號(hào)通路，從而促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子的分泌，誘導(dǎo)一系列炎癥反應(yīng)[2]。而IL-1Ra 和IL-36Ra 分別作為IL-1 和IL-36 的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑，可以與IL-1R1 和IL-36R 結(jié)合而抑制上述炎癥反應(yīng)過(guò)程。

目前IL-38 被認(rèn)為是一種抑炎細(xì)胞因子，因其與IL-1Ra 和IL-36Ra 高度同源，被推測(cè)是一種受體拮抗劑。研究發(fā)現(xiàn)，IL-38 可與IL-36R 結(jié)合，其結(jié)合能力與IL-36Ra 相似，且具有類似的生物學(xué)效應(yīng)；使用IL-36γ 刺激PBMC 產(chǎn)生IL-8，在IL-38 存在的情況下，IL-8 產(chǎn)生量減少了42%（IL-36Ra 存在時(shí)IL-8 下降73%）；IL-38 可抑制念珠菌誘導(dǎo)的輔助性T 細(xì)胞17（T helper 17，Th17）反應(yīng)并降低IL-17 和IL-22 水平，與IL-36Ra 引起的結(jié)果相似，這些發(fā)現(xiàn)提出了IL-38/IL-36R 通路的理論[3]。與IL-36Ra 相似，IL-38作為拮抗因子可能通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合至IL-36R 的胞外區(qū)域，阻止其與IL-36 結(jié)合，阻礙受體輔助蛋白的募集和復(fù)合體形成，同時(shí)招募抑制性共受體，阻斷下游的NF-κB 和MAPK 信號(hào)通路抑制炎癥反應(yīng)，發(fā)揮抗炎作用[4]。其中NF-κB 通路抑制會(huì)影響哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）激活，mTOR 是一種細(xì)胞能量感應(yīng)分子，通過(guò)調(diào)控其下游信號(hào)通路可調(diào)節(jié)細(xì)胞新陳代謝、周期進(jìn)程及生長(zhǎng)，已知活化的mTOR 可通過(guò)磷酸化作用激活調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞分化的重要環(huán)節(jié)——信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白3 信號(hào)通路，由此推測(cè)IL-38 可能通過(guò)IL-38-mTORTh17 這一途徑來(lái)影響Th17 的分化和相關(guān)細(xì)胞因子的分泌[5-6]。Li 等[7]發(fā)現(xiàn)IL-38 可降低Th17 細(xì)胞/調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞（regulatory T cells，Treg）比例，這可能是通過(guò)下調(diào)Th17 細(xì)胞表面IL-23 受體表達(dá)來(lái)降低IL-23介導(dǎo)的Th17 細(xì)胞反應(yīng)。此外，研究發(fā)現(xiàn)IL-38 的第3 個(gè)潛在受體是IL-1R 輔助蛋白樣1，凋亡細(xì)胞產(chǎn)生的IL-38 可結(jié)合至該受體，阻斷下游的c-Jun 氨基末端激酶/激活子蛋白1（c-Jun N-terminal kinase/activator protein-1，JNK/AP-1）信號(hào)通路[8]。IL-6 是啟動(dòng)Th17 細(xì)胞分化的關(guān)鍵細(xì)胞因子，而巨噬細(xì)胞中IL-6和IL-8 的產(chǎn)生依賴于JNK 磷酸化和AP-1 激活，IL-38 可能通過(guò)阻斷這一信號(hào)通路，抑制巨噬細(xì)胞相關(guān)炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生，間接調(diào)控Th17 細(xì)胞的分化及其功能[9]。

2 IL-38 與AID

2.1 IL-38 與RA

RA 是一種慢性炎癥性關(guān)節(jié)疾病，以對(duì)稱性、多關(guān)節(jié)和侵襲性小關(guān)節(jié)炎為主要表現(xiàn)，遺傳、免疫及環(huán)境等因素在RA 的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮了一定作用。研究發(fā)現(xiàn)，與健康對(duì)照組或其他非RA 患者比較，RA 患者的血清、滑膜或滑膜液中的IL-38 表達(dá)水平顯著增高[10-12]，并且IL-38 升高與疾病活動(dòng)程度指標(biāo)相關(guān)，提示IL-38 可能是判斷RA 疾病活動(dòng)度的潛在生物標(biāo)志物。在RA 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（collagen induced arthritis，CIA）小鼠關(guān)節(jié)中IL-38 mRNA 表達(dá)水平顯著增高，并且誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)局部過(guò)表達(dá)IL-38后，發(fā)現(xiàn)CIA小鼠的臨床炎癥評(píng)分顯著降低，巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)減少，IL-17、IL-22、IL-23、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、CXC 趨化因子配體1 及NF-κB 受體活化因子配體（一種促破骨細(xì)胞因子，可以激活破骨細(xì)胞，在RA 患者的滑膜組織中表達(dá)升高，并且對(duì)關(guān)節(jié)炎性骨質(zhì)破壞有重要作用）表達(dá)水平下調(diào)[13]。研究發(fā)現(xiàn)，注射IL-38 可改善CIA 小鼠的關(guān)節(jié)腫脹程度，IL-38 處理組小鼠脾單個(gè)核細(xì)胞中Treg 細(xì)胞百分?jǐn)?shù)及Treg/Th17 細(xì)胞比例較對(duì)照組升高，Th17 細(xì)胞百分比及其相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)水平下降，沉默信息調(diào)節(jié)因子2 相關(guān)酶1（Silencing information regulator 2 related enzyme 1，SIRT1）表達(dá)上調(diào)，缺氧誘導(dǎo)因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）、MyD88、NF-κB 表達(dá)下調(diào)，而SIRT1 抑制劑可逆轉(zhuǎn)上述結(jié)果。已知，SIRT1可以通過(guò)調(diào)控HIF-1 影響細(xì)胞凋亡，SIRT1 可通過(guò)去乙?；蛘咂茐腘F-κB 穩(wěn)定性，降低其轉(zhuǎn)錄活性，抑制下游炎癥反應(yīng)，過(guò)表達(dá)SIRT1 能延緩RA 的發(fā)生[14]。提示IL-38 可能通過(guò)SIRT1/HIF-1α 信號(hào)通路調(diào)節(jié)Th17/Treg 平衡對(duì)CIA 小鼠起到保護(hù)作用。體外用重組人IL-38 刺激RA 患者PBMC，可降低Th17 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤兒受體C，抑制Th17 細(xì)胞的活化[15]。提示IL-38 在RA 中具有保護(hù)作用，在RA 的臨床治療中有潛在價(jià)值，其具體的作用機(jī)制及信號(hào)通路尚需要進(jìn)一步研究。

2.2 IL-38 與銀屑病

銀屑病是一種常見(jiàn)的慢性炎癥性皮膚病，其病理特征為角質(zhì)細(xì)胞增生、T 淋巴細(xì)胞及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，臨床表現(xiàn)以皮膚紅斑和鱗屑為主，目前該病的病因尚不清楚?，F(xiàn)有研究關(guān)于IL-38 在銀屑病中表達(dá)情況的結(jié)果不完全一致。Kim 等[16]研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病患者外周血PBMC 中IL-38 mRNA 水平高于健康人群，且與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)。而有研究報(bào)道，IL-38 在正常皮膚中高表達(dá)，在銀屑病患者外周血和皮膚中表達(dá)下降或不變，且血清IL-36γ/IL-38 與銀屑病面積與嚴(yán)重性指數(shù)呈正相關(guān)[17]。結(jié)果不一致的原因可能是由于IL-38 在細(xì)胞中的差異性表達(dá)，以及研究樣本較小的影響，因此需要更大樣本量的研究來(lái)進(jìn)一步證實(shí)。咪喹莫特（imiquimod，IMQ）誘導(dǎo)的銀屑病小鼠模型中，IL-36 及IL-36Ra 表達(dá)升高，IL-38 表達(dá)明顯下調(diào)[13]。Han 等[18]報(bào)道，敲除銀屑病小鼠模型IL-38 基因會(huì)加劇IL-17 介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，延緩疾病的進(jìn)展，注射重組IL-38 后可以逆轉(zhuǎn)這種現(xiàn)象。另一項(xiàng)研究也觀察到在IMQ 誘導(dǎo)小鼠模型皮下注射重組IL-38，促進(jìn)KC的增殖和分化，減少血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 表達(dá)，改善銀屑病的嚴(yán)重程度[19]，IL-17 和IL-36 反饋回路參與了銀屑病的發(fā)病[20]，IL-38 可能是通過(guò)阻斷該反饋回路來(lái)發(fā)揮作用的。這些研究表明IL-38 表達(dá)異常與銀屑病密切相關(guān)，IL-38 很可能通過(guò)抑制Th17 細(xì)胞反應(yīng)在銀屑病中發(fā)揮抗炎作用。

2.3 IL-38 與SLE

SLE 是一種累及多器官、多系統(tǒng)的AID，以產(chǎn)生多種自身抗體、形成免疫復(fù)合物導(dǎo)致包括腎臟在內(nèi)的多器官損傷為特征，典型癥狀為面頰部出現(xiàn)蝶形或盤(pán)狀紅斑，目前認(rèn)為免疫系統(tǒng)失調(diào)和紊亂參與了SLE的發(fā)病。研究發(fā)現(xiàn)，與健康對(duì)照組比較，SLE 患者外周血PBMC 中IL-38 mRNA 水平升高并與疾病活動(dòng)度指數(shù)評(píng)分相關(guān)，此外，SLE 患者血漿中IL-38 濃度與TNF-α、IL-1β、IL-6 和IL-23 升高相關(guān)[21]。但自發(fā)性SLE 小鼠模型中IL-38 表達(dá)水平與在SLE 患者中得到的結(jié)果并不一致，Chu 等[22]發(fā)現(xiàn)SLE 小鼠脾臟和胸腺中IL-38 表達(dá)水平低于對(duì)照小鼠，注射rIL-38 后小鼠皮膚損傷、腎炎等癥狀減輕，同時(shí)觀察到小鼠血清中促炎細(xì)胞因子IL-17、IL-22 濃度降低，這與在體外觀察到的IL-38 可以抑制Th17 反應(yīng)一致。Xu 等[21]發(fā)現(xiàn)注射IL-38 可能通過(guò)下調(diào)TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-23 等促炎細(xì)胞因子表達(dá)，對(duì)誘導(dǎo)SLE 小鼠模型具有類似的保護(hù)作用。盡管IL-38 在SLE 中的表達(dá)情況仍有爭(zhēng)議，但可以推測(cè)IL-38 的表達(dá)異常參與了SLE 的發(fā)生發(fā)展，IL-38 可能通過(guò)抑制促炎細(xì)胞因子的生成而在SLE 中發(fā)揮抗炎作用。

2.4 IL-38 與IBD

IBD 是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病，已知腸道黏膜異常免疫應(yīng)答所致的炎癥反應(yīng)在IBD 的發(fā)病中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，IBD 患者和葡聚糖硫酸鈉（dextran sulphate sodium，DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠腸道中IL-38 水平顯著升高，免疫熒光分析表明IL-38 來(lái)源于腸道B 細(xì)胞[23]。經(jīng)過(guò)rIL-38 治療后，DSS 誘導(dǎo)小鼠的結(jié)腸炎癥狀緩解，促炎細(xì)胞因子IL-1β 和TNF-α 表達(dá)水平降低，這與在體外觀察到的rIL-38 可以下調(diào)巨噬細(xì)胞中IL-1β 和TNF-α 表達(dá)而發(fā)揮抗炎作用一致[24]。另一項(xiàng)研究也觀察到在DSS 誘導(dǎo)的結(jié)腸炎小鼠中，結(jié)腸發(fā)炎部位的IL-38 和IL-36α 表達(dá)水平高于結(jié)腸健康部位[13]。IL-38 表達(dá)上調(diào)可能是一種降低炎癥反應(yīng)的防御機(jī)制，對(duì)IBD 具有保護(hù)作用，IL-38 可能成為治療IBD 的潛在靶點(diǎn)。

2.5 IL-38 與其他AID

甲狀腺相關(guān)眼病（thyroid-associated ophthalmopathy，TAO）患者血清IL-38 水平高于健康人群，在體外，IL-38 可抑制TAO 患者PBMC 中IL-17A、IL-23R 的表達(dá)和IL-1β 誘導(dǎo)的眼眶成纖維細(xì)胞中IL-6、IL-8的表達(dá)，并且與IL-38 濃度呈負(fù)性依賴[25-26]。新診斷的多發(fā)性硬化癥（multiple sclerosis，MS）患者血清IL-38表達(dá)水平顯著高于健康人群和激素治療后的MS 患者[27]，IL-38 缺陷的MS 模型小鼠的疾病臨床評(píng)分和標(biāo)志物明顯降低[28]。白塞?。˙ehcet disease，BD）患者血清IL-38 表達(dá)水平較健康人群明顯降低，其中病理實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性患者IL-38 水平高于病理陰性患者，此外IL-38 水平還與BD 患者的眼部受累程度呈正相關(guān)[29]。Luo 等[30]發(fā)現(xiàn)與健康人群比較，原發(fā)性干燥綜合征（primary Sj?gren’s syndrome，pSS）患者血清和唾液腺中IL-38 mRNA 和蛋白水平顯著降低，并與IL-17 和IL-23 表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。體外試驗(yàn)表明，IL-38 可抑制pSS 患者唾液腺單核細(xì)胞和PBMC 中IL-17 和IL-23的表達(dá)，進(jìn)一步研究則發(fā)現(xiàn)IL-17 可反過(guò)來(lái)誘導(dǎo)IL-38的表達(dá)。

3 小結(jié)

IL-38 作為近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子，屬于IL-1 家族，與家族其他成員具有相似的特征，廣泛表達(dá)于人體多種器官和組織，可以作用于多種細(xì)胞，調(diào)節(jié)炎癥細(xì)胞因子分泌，與多種AID 的發(fā)病密切相關(guān)，已成為免疫學(xué)領(lǐng)域研究的焦點(diǎn)。對(duì)IL-38 的研究豐富了人們對(duì)IL-1 家族細(xì)胞因子的了解，然而，目前關(guān)于IL-38 的成熟、轉(zhuǎn)運(yùn)、受體、信號(hào)傳導(dǎo)通路及在不同疾病發(fā)展進(jìn)程中的具體調(diào)節(jié)機(jī)制尚未完全闡明，雖然已經(jīng)提出了幾種可能的信號(hào)通路，但目前對(duì)這個(gè)問(wèn)題的研究仍未達(dá)成共識(shí)。AID 的病因是多方面的，且不同疾病中可能涉及的細(xì)胞和分子不同，涉及途徑也可能不同，還需要更深入的研究來(lái)明確在不同的疾病中IL-38 發(fā)揮何種生物學(xué)作用及確切的機(jī)制，為未來(lái)AID的治療提供新靶點(diǎn)。