張明亮，樊天喜，李紅連，楊 梅

(甘肅省張家川回族自治縣動物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 張家川 741500)

0 引言

張家川回族自治縣位于甘肅省東南部、天水市東北部，現(xiàn)轄10鎮(zhèn)5鄉(xiāng)，橫亙陜甘交界，屬六盤地槽與隴西陸臺兩大地質(zhì)構(gòu)造單位的過渡地帶[1]，地勢由東北向西南傾斜，海拔在1 486～2 659.4 m，地形復(fù)雜多樣，氣候差異頗大。東部地區(qū)為土石山地，海拔高，氣溫低，降水多，屬溫寒半濕潤區(qū)；中部地區(qū)為紅土與紅砂巖粘土相間山地，屬溫涼、溫寒半干旱地區(qū)，有較多的草山、林地；西部地區(qū)為黃土梁峁溝壑山地，海拔低，氣溫高，降水少，屬溫涼半干旱地區(qū)，只有少量的草地、林地[2]。目前該地區(qū)依托當(dāng)?shù)刭Y源稟賦，建立了以養(yǎng)殖肉牛、綿羊?yàn)橹鞯拿撠氈赂荒Ｊ?，大力發(fā)展肉牛、綿羊養(yǎng)殖特色產(chǎn)業(yè)，截止2021年底，全縣肉牛、綿羊的飼養(yǎng)量分別達(dá)到15.18萬頭、20.94萬只。近年來，由支原體引起的肉牛、綿羊支原體肺炎的傳入給該地區(qū)個體養(yǎng)殖戶和養(yǎng)殖場造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

肉牛、綿羊支原體肺炎都是由感染支原體引起的高度接觸性傳染性疾病。該病主要以飛沫經(jīng)呼吸道傳播，也可通過直接接觸傳播。其典型臨床癥狀為患病肉牛、綿羊食欲突然明顯減退，發(fā)熱、咳嗽、鼻孔流出膿性鼻涕[3-4]。

在血清學(xué)診斷方法中，ELISA方法具有特異性強(qiáng)，靈敏度高，高效省時等優(yōu)點(diǎn)[5-6]。因此，本研究采用ELISA方法隨機(jī)抽樣檢測張家川回族自治縣東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的肉牛和綿羊支原體肺炎的感染情況，較全面地反映張家川回族自治縣肉牛和綿羊支原體肺炎的流行特點(diǎn)，為保障該地區(qū)肉牛和綿羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料和試劑

用于檢測的肉牛和綿羊血清，隨機(jī)抽取于2019—2021年張家川回族自治縣東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)殖場戶，其中：肉牛血清共735份，綿羊血清共736份。對4個有明顯群體發(fā)病癥狀的肉牛、綿羊群體進(jìn)行全群全血采樣，肉牛群體1、2血清分別是18、12份，綿羊群體1、2血清采樣分別是15、17份。

肉牛、綿羊支原體(Mycoplasma)酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒為江萊生物產(chǎn)品。

1.2 儀器與設(shè)備

酶標(biāo)儀來源于美國BioTeK公司。

手動移液器及槍頭(0.5～10 μL、2～20 μL、20～200 μL、200～1 000 μL)來源于德國艾本德古風(fēng)有限公司。

FYL-YS-100L型恒溫箱來源于北京福意電器有限公司。

TDZ4-WS低速自動平衡離心機(jī)來源于湖南賽特湘儀離心機(jī)儀器有限公司。

超純水儀來源于上?？道追治鰞x器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血清提取

將收集于血清分離管的全血標(biāo)本4℃過夜，然后1 000 r/min離心20 min，取上清液-20℃保存，備用。

1.3.2 支原體肺炎的陽性感染率檢測

按照肉牛、羊支原體(Mycoplasma)酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒內(nèi)說明書上的操作步驟進(jìn)行陽性感染率檢測。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)結(jié)果

分別對張家川東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)肉牛、綿羊支原體肺炎的陽性感染情況和有明顯群體發(fā)病癥狀的群體陽性感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 肉牛、綿羊支原肺炎感染情況

張家川東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)肉牛和綿羊的支原體肺炎感染情況，如表1所示。

表1 張家川回族自治縣15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)肉牛和綿羊的支原體肺炎感染情況

肉牛支原體肺炎的感染率：東部鄉(xiāng)鎮(zhèn)，除恭門鎮(zhèn)(12.20%)外，馬鹿鎮(zhèn)、閆家鄉(xiāng)、平安鄉(xiāng)、張棉鄉(xiāng)均低于6%；中部鄉(xiāng)鎮(zhèn)，除張川鎮(zhèn)(15.58%)外，劉堡鎮(zhèn)、胡川鎮(zhèn)、木河鄉(xiāng)均在8%左右；西部鄉(xiāng)鎮(zhèn)，除龍山鎮(zhèn)(14.71%)外，連五鄉(xiāng)、川王鎮(zhèn)、馬關(guān)鎮(zhèn)、梁山鎮(zhèn)、大陽鎮(zhèn)均在9%～10%。

綿羊支原體肺炎的感染率：東部、中部鄉(xiāng)鎮(zhèn)，除恭門鎮(zhèn)(15.15%)、張川鎮(zhèn)(14.46%)外，其余各鄉(xiāng)鎮(zhèn)均在10%左右；西部鄉(xiāng)鎮(zhèn)，除龍山鎮(zhèn)(12.68%)外，其余各鄉(xiāng)鎮(zhèn)均在6%～8%。

總體來看，肉牛、綿羊支原體肺炎在張家川東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有發(fā)?。蝗馀５目偢腥韭?8.98%)略低于綿羊的總感染率(10.46%)；肉牛、綿羊支原體肺炎感染率最高的3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均是張川鎮(zhèn)、龍山鎮(zhèn)和恭門鎮(zhèn)，這3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均設(shè)有肉牛和綿羊集中販運(yùn)交易場所。

2.2 有明顯群體發(fā)病癥狀的陽性感染率

由表2可見，有明顯群體發(fā)病癥狀的陽性感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于該地區(qū)的平均陽性感染率，群體之間易感。肉牛群體感染率高于綿羊群體感染率，肉牛群之間更易感。群體之間陽性感染率的差異與畜主能否早日發(fā)現(xiàn)并及時采取隔離措施和環(huán)境消毒等原因有關(guān)。

表2 有明顯群體發(fā)病癥狀的陽性感染情況

3 討論

近年來，張家川回族自治縣大力發(fā)展以肉牛、綿羊?yàn)橹鞯奶厣B(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)，而肉牛、綿羊支原體肺炎已經(jīng)在該縣的各個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有發(fā)病，且呈現(xiàn)小范圍的常態(tài)化頻發(fā)，這給個體養(yǎng)殖戶和養(yǎng)殖場造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。

患該病的肉牛、綿羊癥狀表現(xiàn)為：體溫通常可達(dá)40℃～42℃(肉牛的正常體溫是38℃～39.5℃，綿羊的正常體溫是38.3℃～39.9℃)；呼吸困難、心跳加快；氣喘咳嗽，特別是干咳，咳嗽急、快并發(fā)出破裂聲；鼻孔流出膿性鼻涕。病死動物通常舌下垂，有的口中多沫，經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)肺腐爛、胸腔紅色積液多[7-11]，后期繼發(fā)關(guān)節(jié)炎，腹瀉，結(jié)膜炎發(fā)病率為50%～100%，局部融合性支氣管肺炎至化膿性肺炎均可見到。犢牛的發(fā)病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于成年牛，通常出生10～45 d的犢牛發(fā)病率最高，且治療見效不佳，病死率可達(dá)10%～50%。而成年牛的發(fā)病率較低，通常經(jīng)過及時診療都能痊愈，病死率很低。

張家川縣東部地區(qū)較寒冷，而肉牛的耐寒能力較強(qiáng)，肉牛飼養(yǎng)量占該縣總飼養(yǎng)量的45%以上，綿羊的飼養(yǎng)量僅占25%；中部地區(qū)肉牛飼養(yǎng)量約占25%，綿羊的飼養(yǎng)量約占30%；西部地區(qū)氣溫較高，肉牛飼養(yǎng)量約占30%，綿羊的飼養(yǎng)量約占45%。在該地區(qū)，由支原體引起的肉牛支原體肺炎平均感染率約為8.98%，其中西部地區(qū)的感染率高于中部地區(qū)和東部地區(qū)。綿羊支原體肺炎平均感染率約為10.46%，其中東部地區(qū)、中部地區(qū)明顯高于西部地區(qū)。綿羊支原體肺炎的發(fā)病率普遍高于肉牛，但在有明顯群體發(fā)病癥狀的群體內(nèi)，肉牛群體感染率卻比綿羊群體感染率高。結(jié)合當(dāng)?shù)厝馀?、綿羊的飼養(yǎng)狀況和臨床發(fā)病調(diào)查發(fā)現(xiàn)，肉牛感染該病可能跟其養(yǎng)殖密度更相關(guān)，養(yǎng)殖密度越高，該病傳播流行的概率越高，而綿羊感染該病可能跟環(huán)境氣候更相關(guān)，通常多發(fā)于冬春、秋冬換季時。

綜上所述，該地區(qū)出現(xiàn)支原體肺炎高發(fā)病的原因主要有4點(diǎn)：①肉牛、綿羊在長期運(yùn)輸過程中，受饑餓、干渴、疲勞、擁擠、空氣質(zhì)量變化、溫濕度、運(yùn)動、噪聲、恐懼等外部因素影響，會出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，免疫力下降，從而易誘發(fā)本病[13-15]，一般會在運(yùn)輸?shù)侥康牡睾?0 d左右發(fā)病。②在肉牛、綿羊販運(yùn)場所的落地監(jiān)管和消毒滅源工作落實(shí)不到位，致使交易場所附近地區(qū)該病的感染率最高。③有些養(yǎng)殖場由于飼養(yǎng)管理不善，圈舍環(huán)境衛(wèi)生差、通風(fēng)效果不佳、未能定期清掃消毒，故而易造成群體發(fā)病[12-13]。④對犢牛的護(hù)理欠缺，導(dǎo)致犢牛病死率很高。

根據(jù)藥敏試驗(yàn)分析，支原體對內(nèi)酰胺酶類抗菌藥物，如青霉素和頭孢類不敏感。可選擇的抗菌藥物有：喹諾酮類藥物(環(huán)丙沙星，氧氟沙星)、泰樂菌素類(泰樂菌素，替米考星)、四環(huán)素類(四環(huán)素，多西環(huán)素)、泰妙菌素類(支原凈，沃尼妙林)，輔助于維生素VC、VB1、VE，達(dá)到退熱，平喘，止咳，止血等治療效果。據(jù)調(diào)查，目前市場上沒有用于預(yù)防肉牛支原體肺炎的疫苗，用于預(yù)防綿羊支原體肺炎的疫苗只有肺必應(yīng)山羊支原體肺炎滅活疫苗(C87-1株)，但因?yàn)槭褂靡呙绾螽a(chǎn)生的抗體合格率比較低，所以通過接種疫苗進(jìn)行預(yù)防支原體肺炎的方法不可行。

4 結(jié)論

肉牛、綿羊支原體肺炎在張家川東部、中部、西部15個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均有發(fā)病，肉牛感染率略低于綿羊感染率。對于肉牛、綿羊支原體肺炎，畜主應(yīng)做好落地檢管，加強(qiáng)日常科學(xué)飼養(yǎng)管理，定期強(qiáng)化環(huán)境消毒，提高犢牛護(hù)理技能。對疑似有感染癥狀的牲畜，采取早發(fā)現(xiàn)、早防護(hù)、早隔離、早治療措施，并對病死尸體進(jìn)行無害化處理。通過綜合的防控措施減少肉牛、綿羊支原體肺炎的發(fā)病率。