李靜

(商丘市第一人民醫(yī)院 輸血科，河南 商丘 476100)

輸血是住院患者常用的治療手段，可有效挽救患者生命，改善其預后[1]。但若患者血液中存在不規(guī)則抗體，可能會引發(fā)血型鑒定困難、交叉配血困難、遲發(fā)性溶血性輸血反應等，增加患者用血難度，降低治療效果，甚至直接導致患者病死，威脅其生命安全[2]。輸血前準確篩查患者不規(guī)則抗體存在情況，詳細分析不規(guī)則抗體分布及影響因素，有利于臨床采取有效措施進行干預，增加臨床輸血安全性，促進疾病轉(zhuǎn)歸[3]?；诖?，本研究主要分析商丘市第一人民醫(yī)院住院患者不規(guī)則抗體分布狀況及相關(guān)因素。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2018年1月至2021年12月于商丘市第一人民醫(yī)院輸血的4 210例住院患者，患者或家屬均了解本研究相關(guān)內(nèi)容并簽署同意書。其中女2 083例，男2 127例；年齡31～65(48.23±3.36)歲。本研究符合醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核要求。

1.2 入選標準(1)納入標準：①擬接受輸血治療，符合臨床輸血要求，生命體征穩(wěn)定；②接受不規(guī)則抗體篩查；③神志清晰，可配合醫(yī)護人員完成本研究調(diào)查。(2)排除標準：①合并影響自身免疫功能的原發(fā)性疾病；②入院前近3個月有輸注異體紅細胞史；③妊娠、哺乳期女性。

1.3 研究方法

1.3.1不規(guī)則抗體篩查方法 采集患者空腹外周肘靜脈血5 mL于真空采血管中，加入抗凝劑，將采血管上下顛倒5～10次后，采用醫(yī)用離心機離心10 min，取血漿備用。選用抗人球蛋白卡檢測卡(上海潤普生物技術(shù)有限公司，國械注準20193401888，規(guī)格：5×12卡)，標記好檢測卡的微管，將Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號不規(guī)則抗體檢測紅細胞試劑(江蘇力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份有限公司，國械注準20163400856，規(guī)格5 mL×3支)使用低離子強度鹽溶液稀釋成體積分數(shù)0.8%的紅細胞懸濁液，分別加入標記好的微管中，每管50 μL，于每個微管中分別加入50 μL血漿，混勻后放于37 ℃恒溫孵育器[長沙英泰儀器有限公司，湘長食藥監(jiān)械(準)字2011第1410086號，型號：FYQ-200]中，孵育15 min左右；最后使用離心機離心5 min，觀察不規(guī)則抗體陽性結(jié)果。不規(guī)則抗體陽性判定標準：當3個微管中有1管及以上出現(xiàn)紅細胞凝集塊于凝膠中端或表面聚集現(xiàn)象時，表明患者血液中存在不規(guī)則抗體。對于不規(guī)則抗體結(jié)果呈陽性的患者，取其備用血漿，將1～16號譜細胞配制成體積分數(shù)0.8%的紅細胞懸濁液并分別加入微柱凝膠卡的微管中，每管50 μL，再分別于微管中加入血漿25 μL，輕輕混勻后放置于恒溫37 ℃的孵育器中孵育15 min，用離心機離心后根據(jù)譜細胞反應格局判定抗體類型。

1.3.2基線資料采集方法 設(shè)計基線資料調(diào)查表，統(tǒng)計患者性別、年齡(<60歲、≥60歲)、輸血史、妊娠史、不良孕產(chǎn)史、吸煙史、飲酒史、是否合并高血壓、是否合并糖尿病、民族(漢族、少數(shù)民族)、慢性腎病史、既往免疫抑制劑治療史。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體檢出情況4 210例住院患者中0.90%(38/4 210)不規(guī)則抗體陽性。

2.2 不規(guī)則抗體類型分布38例不規(guī)則抗體陽性住院患者不規(guī)則抗體中抗E占比最高，為26.32%。見表1。

2.3 住院患者不規(guī)則抗體陽性分布情況女性、年齡≥60歲、有輸血及妊娠史患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率較男性、年齡<60歲、無輸血及妊娠史患者高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其他不同資料特征患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率對比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 38例不規(guī)則抗體陽性住院患者不規(guī)則抗體類型分布情況

表2 住院患者不規(guī)則抗體陽性分布情況[n(%)]

表2(續(xù))

2.4 住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生影響因素的logistic回歸分析將住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生情況作為因變量(發(fā)生=1，未發(fā)生=0)，將表1中差異有統(tǒng)計學意義的變量作為自變量并賦值(見表3)，logistic回歸分析顯示，年齡≥60歲、有輸血史及慢性腎病史均是住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生的影響因素(OR>1，P<0.05)。見表4。

表3 賦值說明表

表4 住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生影響因素的logistic回歸分析結(jié)果

3 討論

住院患者輸血前若未及時、準確篩查出血液中的不規(guī)則抗體，輸血治療時非但無法達到治病的效果，還會引起輸血不良反應，錯過最佳治療時間，增加患者病死風險[4-5]。王麗等[6]報道，8 775例擬輸血患者中80例出現(xiàn)不規(guī)則抗體陽性，檢出率約為0.91%。本研究4 210例住院患者中不規(guī)則抗體陽性38例，陽性檢出率為0.90%?？梢?，積極采取有效措施篩查住院患者輸血前不規(guī)則抗體存在及分布情況，并分析導致不規(guī)則存在的相關(guān)因素對臨床及時采取有效措施進行干預，對改善患者預后有重要意義。

本研究顯示，38例不規(guī)則抗體陽性患者不規(guī)則抗體中抗E占比最高，為26.32%。不規(guī)則抗體屬于非天然抗體，包括ABO血型系統(tǒng)以外的Rh、kell、MN等血型系統(tǒng)抗體，其中Rh血型系統(tǒng)最具臨床意義，而Rh血型系統(tǒng)抗體中較為常見的抗體類型為抗E、抗D，也是導致遲發(fā)性溶血性輸血反應發(fā)生的重要原因[7]。我國人群中RhE陰性群體數(shù)量遠多于RhD陰性群體，而RhE陰性群體受到RhE陽性血型抗原、妊娠等刺激后容易生成抗E[8]。因此，38例不規(guī)則抗體陽性住院患者中抗E占比較高。

本研究logistic回歸分析顯示，年齡≥60歲、有輸血史及慢性腎病史是住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生的影響因素。相較于60歲以下患者，老年患者過敏史、用藥史、外傷史等較多，接觸到外來抗原的種類更多，頻率更高，上述因素均可能對機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生刺激，促使患者體內(nèi)產(chǎn)生不規(guī)則抗體，從而提高不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率[9]。此外，年齡較大的患者自然免疫功能低下，在受到外來抗原或致敏刺激后更易產(chǎn)生免疫性抗體，從而增加機體不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率[10]。對此，建議臨床需加強對≥60歲的住院患者既往史的了解及不規(guī)則抗體的篩查，在輸血治療的同時通過調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、營養(yǎng)支持等方式改善機體免疫狀況，從而增強機體免疫力，降低機體免疫系統(tǒng)受到的外來抗原及致敏源等刺激，進而降低患者不規(guī)則抗體陽性率，提高輸血安全性。既往存在輸血史的患者輸血時體質(zhì)較弱，異體血液的輸注容易使機體暴露于異體紅細胞中，導致免疫系統(tǒng)因受到強烈的外界刺激而產(chǎn)生自身抗體，從而增加不規(guī)則抗體的發(fā)生風險[11-12]。此外，既往存在輸血史的患者若輸血時未能做到抗原同型輸注，可能會使機體受到異型抗原刺激，導致不規(guī)則抗體的形成，從而增加患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率[13-14]。有慢性腎病史的患者因其疾病的特殊性，可能需要多次接受輸血治療，不規(guī)則抗體形成風險高。對此，建議臨床需加強對接受慢性腎病及反復輸血治療患者不規(guī)則抗體篩查，并嚴格進行規(guī)范化輸血治療，減輕機體免疫系統(tǒng)受到的異體紅細胞的刺激，從而減少免疫性抗體的形成，降低不規(guī)則抗體陽性發(fā)生風險。

此外，本研究比較住院患者不規(guī)則抗體陽性分布情況，結(jié)果顯示，與男性、無妊娠史的患者相比，女性、有妊娠史的患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率較高，提示女性、有妊娠史也可能是住院患者不規(guī)則抗體陽性的影響因素。原因可能為，與男性、無妊娠史的患者相比，女性、有妊娠史的患者在妊娠、流產(chǎn)等因素的刺激下，可能會導致機體產(chǎn)生較強的免疫反應，且還會出現(xiàn)妊娠與輸血的雙重免疫刺激，從而促進免疫性抗體的形成，增加不規(guī)則抗體陽性發(fā)生率[15-16]。但經(jīng)logistic回歸分析，結(jié)果顯示，女性、有妊娠史不是住院患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生的影響因素，可能與現(xiàn)代女性由于受教育程度不斷提高，思想觀念發(fā)生較大轉(zhuǎn)變，妊娠與分娩次數(shù)較少，機體免疫系統(tǒng)因妊娠或分娩受到的刺激較小，不規(guī)則抗體形成風險較低有關(guān)。

綜上所述，住院患者不規(guī)則抗體檢出率較高，不規(guī)則抗體主要類型為抗E；且年齡≥60歲、有輸血史及慢性腎病史是患者不規(guī)則抗體陽性發(fā)生的影響因素。建議臨床加強對上述類型患者不規(guī)則抗體檢測情況，并及時采取有效措施進行干預，以便提高住院患者輸血安全性，促進疾病轉(zhuǎn)歸。