曹知勇 陳秋霞 方剛，3

(1天津中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院，天津 301617；廣西中醫(yī)藥大學(xué) 2廣西壯醫(yī)應(yīng)用基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實驗室；3廣西高校壯醫(yī)毒病研究重點(diǎn)實驗室)

莪術(shù)是姜科姜黃屬植物蓬莪術(shù)、廣西莪術(shù)、浙江溫郁金的干燥根莖〔1〕。中醫(yī)藥理論認(rèn)為莪術(shù)性溫，味辛、苦，歸肝、脾經(jīng)，具有行氣破血、消積止痛之功效。常被用于癥瘕痞塊，瘀血經(jīng)閉，食積脹痛等癥?，F(xiàn)代藥學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)含有的主要化學(xué)成分包括莪術(shù)揮發(fā)油和姜黃素類、甾醇類、酚酸類、生物堿類、多糖類等〔2〕。其中效果最明顯、研究最多的就是莪術(shù)揮發(fā)油，而莪術(shù)揮發(fā)油中的最主要成分是莪術(shù)醇和莪術(shù)酮?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)具有抗腫瘤、抗血栓、調(diào)血脂、抗動脈粥樣硬化、抗血小板聚集等多種藥理學(xué)作用。其中又以抗腫瘤的效果最為突出。卵巢癌具有難發(fā)現(xiàn)、難治愈、生存率低的特點(diǎn)〔3〕，嚴(yán)重威脅女性生命健康。近年來，研究者關(guān)于莪術(shù)治療卵巢腫瘤的探索越發(fā)深入。本文就莪術(shù)治療卵巢癌的情況進(jìn)行總結(jié)。

1 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)從分子角度探討莪術(shù)治療卵巢癌的可能性

1.1活性化合物篩選 登錄中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(TCMSP)http：//tcmspw.com/tcmsp.php，根據(jù)生物利用度(OB)值及類藥性(DL)值進(jìn)行活性化合物篩選。選擇OB≥30%，DL≥0.11為莪術(shù)活性組分的篩選條件，將莪術(shù)中活性較高的成分篩選出來。見表1。

表1 OB≥30%，DL≥0.11莪術(shù)活性成分

1.2查找靶蛋白對應(yīng)基因 篩選去除重復(fù)靶蛋白后，登錄(uniprot)https：//www.uniprot.org查找靶蛋白對應(yīng)基因。借助Cytoscape3.7.1處理得到圖1。

1.3查找卵巢癌相關(guān)基因 登錄https：//www.genecards.org/，查找卵巢癌相關(guān)基因。共發(fā)現(xiàn)6 423個基因與卵巢癌相關(guān)。與莪術(shù)化合物作用的35個作用基因進(jìn)行對比，共擁有23個共同基因。借助Cytoscape3.7.1繪制圖2。其中，PTGS2、NR3C1、NR3C2、AR、PGR關(guān)聯(lián)度較高，可能是治療過程中的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.4莪術(shù)的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究進(jìn)展 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是近些年較為火熱的一門新型藥理研究技術(shù)，基于藥物-化合物-靶點(diǎn)-基因-疾病網(wǎng)絡(luò)，從分子角度探討藥物發(fā)揮作用的可能性，為基礎(chǔ)研究提供預(yù)測性依據(jù)。本研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)有7個化合物35個靶點(diǎn)蛋白與卵巢癌23個疾病基因相關(guān)，這23個共同基因可能就是莪術(shù)能夠干預(yù)卵巢癌的機(jī)制原因。其中，莪術(shù)醇是莪術(shù)所有化合物中OB最高的化合物，異莪術(shù)醇排第二位。而常春藤苷是DL最高的化合物，DL高達(dá)0.75；也是化合物中基因靶點(diǎn)最多的化合物，其次是(-)-石竹烯氧化物、桂莪術(shù)內(nèi)酯和異莪術(shù)醇，這與其他的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究一致〔4～8〕。鄭洋等〔4〕選擇OB≥20%，DL≥0.14作為莪術(shù)活性的篩選條件探討莪術(shù)的作用機(jī)制，構(gòu)建的化合物-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)，共與乳腺癌、肺癌、腦卒中、阿爾茨海默病、前列腺癌等102個疾病相關(guān)。其次，有12個基因富集在神經(jīng)活性配體-受體相互作用信號通路上，有6個基因富集在煙癮信號通路上，有7個基因富集在逆行內(nèi)源性大麻素信號通路上。黃志瓊等〔5〕基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討莪術(shù)治療陰道炎的作用機(jī)制，運(yùn)用KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)活性成分相關(guān)靶點(diǎn)PGR、CTSD、ESR1、RXRA、NCOA2能夠參與雌激素信號通路、甲狀腺激素信號通路，從而誘導(dǎo)雌激素的分泌，治療婦科疾病。賴艷妮等〔8〕基于系統(tǒng)藥理學(xué)探究莪術(shù)有效成分的藥理作用機(jī)制時，發(fā)現(xiàn)莪術(shù)與腫瘤關(guān)系最為密切，其中乳腺腫瘤、前列腺腫瘤、癌、肝臟腫瘤等均為Degree排名在前15位。且莪術(shù)靶蛋白主要與癌癥途徑過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)信號通路、癌癥中的蛋白多糖、非小細(xì)胞癌和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信號通路等通路功能有關(guān)。

2 基于知網(wǎng)文獻(xiàn)探討莪術(shù)治療卵巢腫瘤

2.1文獻(xiàn)調(diào)查 登錄知網(wǎng)https：//www.cnki.net/，關(guān)鍵詞搜索莪術(shù)-卵巢腫瘤、莪術(shù)醇-卵巢癌、莪術(shù)油-卵巢癌、莪術(shù)二酮-卵巢癌、莪術(shù)酮-卵巢癌。利用https：//sati-online.cn得到文獻(xiàn)總數(shù)(去重后)：43篇。文獻(xiàn)中卵巢癌出現(xiàn)23次，莪術(shù)油出現(xiàn)9次，是頻率最高的關(guān)鍵詞。從文獻(xiàn)來源發(fā)表年份可以看出，文獻(xiàn)大多發(fā)表年份較新，2019年發(fā)表的占據(jù)51%。

2.2莪術(shù)治療卵巢癌 莪術(shù)具有行氣破血、消積止痛之功效，基于藥效，莪術(shù)與莪術(shù)藥對組成的方劑常用于治療癥瘕痞塊。李有杰等〔9〕基于中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)的治療卵巢癌方劑組方規(guī)律分析了治療卵巢癌的185個處方，莪術(shù)使用頻率高達(dá)44次，居第3位。莪術(shù)-三棱、莪術(shù)-桃仁、莪術(shù)-當(dāng)歸分別為卵巢癌常用藥對的第2、第6、第8位。辛宇等〔10〕研究發(fā)現(xiàn)中藥莪術(shù)、人參、苦參、雷公藤對卵巢癌的擴(kuò)散和惡化表現(xiàn)出明顯的抑制作用；而且莪術(shù)的主要成分莪術(shù)醇及人參皂苷Rg1、Rh2均具有抑制卵巢癌SKOV3細(xì)胞的作用。唐德才等〔11〕對蓬莪術(shù)、廣莪術(shù)和溫莪術(shù)含藥血清進(jìn)行藥效對比研究。發(fā)現(xiàn)三種莪術(shù)均能抑制卵巢癌細(xì)胞HO-8910增殖及凋亡，其中又以溫莪術(shù)作用最為顯著。時曉霞等〔12〕、趙凡等〔13〕、尹剛等〔14〕幾次實驗利用藥對莪術(shù)-黃芪對人卵巢癌細(xì)胞HO-8910原位移植瘤組織進(jìn)行干預(yù)研究，發(fā)現(xiàn)莪術(shù)-黃芪對人卵巢癌HO-8910具有明顯抑制作用，且伴隨著基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、FGF-2、BCL-2及VEGF 4種基因表達(dá)下降。另外，蔡冬燕等〔15〕研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)還能有效增強(qiáng)卵巢癌化療作用，降低化療風(fēng)險，抑制卵巢癌的進(jìn)一步惡化。

2.2.1莪術(shù)油對卵巢癌的干預(yù) 莪術(shù)油是從莪術(shù)提取的混合物，其化學(xué)成分包含莪術(shù)醇、莪術(shù)二酮、欖香烯、莪術(shù)烯醇、異莪術(shù)烯醇等〔16〕。目前研究發(fā)現(xiàn)，β-欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)二酮、異莪術(shù)醇和莪術(shù)酮等是莪術(shù)油的主要抗腫瘤活性成分〔17〕。莪術(shù)油注射液是中國藥典2005年版第二部收載的抗病毒藥，在卵巢癌的臨床治療上已經(jīng)得到證實，效果顯著。梁丹等〔18，19〕使用莪術(shù)油注射液配合常規(guī)化療干預(yù)卵巢癌時發(fā)現(xiàn)治療組總有效率可以達(dá)到74.19%，超過紫杉醇類與鉑類藥物聯(lián)合治療的總有效率58.06%，提示莪術(shù)油注射液能夠提高化療療效；同時還能減輕化療不良反應(yīng)，有更好的利用空間治療卵巢癌。阮瓊芳等〔20〕臨床觀察發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者給予莪術(shù)油聯(lián)合常規(guī)化療能有效緩解患者疼痛，降低卵巢癌患者化療引起的頭暈、耳鳴、白細(xì)胞減少等不良反應(yīng)的發(fā)生率，提高患者生存、生活質(zhì)量。另有細(xì)胞實驗證明，莪術(shù)油能有效抑制卵巢癌細(xì)胞。隆康健等〔21〕運(yùn)用莪術(shù)油960、480、240、120 μg/ml 4個劑量組對體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV3進(jìn)行實驗干預(yù)。發(fā)現(xiàn)在120～960 μg/ml劑量范圍內(nèi)，藥物濃度越高，用藥時間越長，則SKOV3細(xì)胞的形態(tài)破壞越嚴(yán)重，細(xì)胞抑制作用越強(qiáng)，細(xì)胞更接近于死亡。李艷芳等〔22〕研究發(fā)現(xiàn)莪術(shù)油不僅能夠?qū)KOV3細(xì)胞產(chǎn)生抑制甚至凋亡癌細(xì)胞的作用。還能增加人卵巢癌SKOV3細(xì)胞對順鉑的敏感性，這為臨床使用聯(lián)合治療提供了新思路；有研究〔23〕進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)莪術(shù)油聯(lián)合順鉑用藥對卵巢癌腫瘤的抑制具有潛在的協(xié)同作用。另外，李榮霞等〔24〕研究證實了莪術(shù)油對人卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞有抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡的作用，但是相關(guān)機(jī)制尚未研究清楚，可能與STAT3的表達(dá)有關(guān)。

2.2.2莪術(shù)醇對卵巢癌的干預(yù) 癌癥的發(fā)生與信號通路的關(guān)系密不可分，PI3K/Akt信號通路是卵巢癌發(fā)病機(jī)制研究及治療藥物篩選的關(guān)鍵靶點(diǎn)之一〔25〕，因此，通過抑制PI3K/Akt信號通路可以達(dá)到治療卵巢癌的可能〔26〕。戴凌虹等〔27〕研究發(fā)現(xiàn)莪術(shù)醇能抑制PI3K/Akt通路來抑制SKOV3細(xì)胞增殖、遷移及侵襲，并誘導(dǎo)其凋亡；而且莪術(shù)醇與LY294002聯(lián)用后表現(xiàn)出良好的協(xié)同作用，比獨(dú)用莪術(shù)醇時下調(diào)p-PI3K、p-AKT蛋白更為顯著。此外，莪術(shù)醇還能干預(yù)到JAK2/STAT3信號通路，STAT3作為公認(rèn)的癌基因〔28〕，在卵巢癌中呈現(xiàn)高表達(dá)。湯欣等〔29〕利用莪術(shù)醇人卵巢癌SKOV3細(xì)胞株進(jìn)行干預(yù)實驗發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)醇能誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，抑制癌細(xì)胞的增殖。給藥后，SKOV3細(xì)胞中JAK2和STAT3 mRNA的表達(dá)均下調(diào)，且和莪術(shù)醇濃度呈負(fù)相關(guān)。并且莪術(shù)醇能特異性地抑制酪氨酸激酶的活性，從基因水平抑制STAT3的表達(dá)，抑制STAT3的磷酸化，起到抗腫瘤的作用。

綜上，近年來，卵巢癌的發(fā)病日益呈現(xiàn)高發(fā)狀態(tài)，化療是目前卵巢癌最有效的治療方法〔30〕，但其預(yù)后差，不良反應(yīng)大，尋找治療卵巢癌的新方法及新策略意義重大。中國傳統(tǒng)中藥莪術(shù)屬活血化瘀藥下屬的破血消癥藥，具有行氣破血、消積止痛的功效〔1〕，莪術(shù)、莪術(shù)藥對都廣泛存在于治療卵巢癌的方劑中〔9〕。在莪術(shù)的所有化合物中，莪術(shù)醇的研究最多，而莪術(shù)醇又是莪術(shù)油的主要成分〔14〕。二者具有高度相似性的同時又具有區(qū)別，但二者都能很好地抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖，治療效果也經(jīng)得住臨床驗證〔15，16〕。就網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析情況可知，莪術(shù)的靶點(diǎn)蛋白與卵巢癌疾病基因密切相關(guān)。但目前的實驗研究證實度不高，這也是后期實驗研究的一個方向。