王 巖
黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院,黑龍江齊齊哈爾 161005
羊敗血性鏈球菌病是由C群馬鏈球菌獸疫亞種引起的一種急性熱性傳染病,綿羊最易感。羊感染后通常表現(xiàn)特征為頜下淋巴結(jié)和咽背淋巴結(jié)腫大、壞死,纖維素性胸膜肺炎和全身性出血性敗血癥及漿液性肺炎。本病的發(fā)病率為15%~24%,病死率可達(dá)80%以上。
羊敗血性鏈球菌病的病原是C群獸疫鏈球菌,該菌革蘭氏染色呈陽(yáng)性,但培養(yǎng)較久或在膿汁中被吞噬細(xì)胞吞噬后可呈革蘭氏陰性。大多數(shù)鏈球菌在幼齡培養(yǎng)物中可見(jiàn)到莢膜,不形成芽孢,無(wú)鞭毛。
菌體呈圓形或卵圓形,直徑為0.5~1.0 μm,呈鏈狀排列,鏈條長(zhǎng)短不一,短的由4~8個(gè)細(xì)菌組成,長(zhǎng)的可達(dá)20~30個(gè)細(xì)菌。在液體培養(yǎng)基中易形成長(zhǎng)鏈,在固體培養(yǎng)基及膿汁標(biāo)本中多為短鏈、成雙或單個(gè)散在。本菌經(jīng)日光直射2 h后可殺死,對(duì)熱的抵抗力不強(qiáng),60 ℃加熱30 min可被殺死,煮沸可立即死亡,常用的消毒劑如2%石碳酸、1%來(lái)蘇爾均可在3~5 min內(nèi)殺死。
鏈球菌分布廣泛,常以共棲菌和致病菌的方式存在于人和哺乳動(dòng)物體內(nèi),其致病作用一般要在多種誘因作用下才能產(chǎn)生,比如夏季炎熱干燥,冬季寒冷潮濕,飼養(yǎng)管理不當(dāng),環(huán)境衛(wèi)生差等都能引起動(dòng)物發(fā)病。羊敗血性鏈球菌病主要發(fā)生于綿羊,山羊次之,患羊和帶菌羊?yàn)橹饕獋魅驹矗⊙蛏爸饕珊粑琅啪?,死后通過(guò)肉、骨、皮、毛等散播病原。傳播途徑主要是呼吸道,其次是傷口及消化道。該病的發(fā)生與氣侯變化有關(guān),在新發(fā)病區(qū)多呈流行性發(fā)生,而老疫區(qū)則往往呈散發(fā)性流行或地方性流行,且具有明顯的季節(jié)性,多發(fā)生于冬春季節(jié)[1]。
通過(guò)對(duì)羊敗血性鏈球菌病流行病學(xué)調(diào)查可以發(fā)現(xiàn),本病的潛伏期為2~7 d,少數(shù)可長(zhǎng)達(dá)10 d。根據(jù)羊患病的臨床表現(xiàn)主要分為最急性型、急性型、亞急性型和慢性型四種類型。最急性型病羊最初臨床癥狀不明顯,常于24 h內(nèi)死亡,或清晨檢查發(fā)現(xiàn)死于圈舍內(nèi);急性型病程2~3 d,病羊常弓背、呆立不動(dòng),食欲減退,停止反芻,體溫升到41 ℃以上。鼻腔有漿液性膿性分泌物流出,眼結(jié)膜充血,流淚,頜下淋巴結(jié)腫大,流涎、咳嗽,呼吸困難。妊娠母羊多發(fā)生流產(chǎn),多數(shù)病羊都因窒息死亡;亞急性型患病羊的臨床癥狀為逐漸出現(xiàn)體溫升高、食欲不振、張口呼吸、流膿性鼻液等,最后表現(xiàn)為嗜臥,不愿走動(dòng),其病程可持續(xù)至 1~2周的時(shí)間[2];慢性型一般輕度發(fā)熱、消瘦、食欲不振、腹圍縮小、步態(tài)僵硬。有的病羊咳嗽,有的出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎。病程1個(gè)月左右,轉(zhuǎn)歸死亡。
主要病變?yōu)槌鲅詳⊙Y,常見(jiàn)血凝不良。實(shí)質(zhì)器官?gòu)V泛出血、炎性腫脹,全身淋巴結(jié)腫大、出血、壞死。鼻、喉、氣管黏膜出血,尤其咽喉部腫脹,存有大量黏性滲出物。肺水腫或氣腫、出血,出現(xiàn)肝變區(qū)。胸、腹腔液及心包液增量,心冠溝及心內(nèi)外包膜有小點(diǎn)狀出血。膽囊顯著增大2~4倍,腎質(zhì)地脆軟,有貧血性梗死區(qū)及點(diǎn)狀出血。各器官漿膜面附著大量粘稠纖維素性滲出物。
本病一般可根據(jù)流行病學(xué),臨床癥狀及病理剖檢的情況做出診斷,如果羊群中出現(xiàn)頜下淋巴結(jié)和咽背淋巴結(jié)腫大、壞死,纖維素性胸膜肺炎和全身性出血性敗血癥,可做出初步診斷,進(jìn)一步確診可行以下綜合診斷。
本病與炭疽、巴氏桿菌病、羊快疫極相似,必須注意鑒別。羊敗血性鏈球菌病的病原為C群獸疫鏈球菌,羊炭疽病的病原為炭疽桿菌,病原形態(tài)有分別,羊患炭疽后唇、面頰等位置沒(méi)有腫大,沒(méi)有咽喉炎癥狀、眼鼻沒(méi)有膿性分泌物流出,沉淀試驗(yàn)炭疽為陽(yáng)性,羊敗血性鏈球菌病則為陰性;羊敗血性鏈球菌病和巴氏桿菌病的臨床表現(xiàn)與病理變化都基本相似,可通過(guò)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)得出診斷結(jié)果,巴氏桿菌為革蘭氏陰性兩極濃染的細(xì)小球桿菌;羊快疫是由腐敗梭菌引起的一種急性傳染病,特點(diǎn)是突然發(fā)病和急性死亡,主要病變?yōu)榘櫸赋鲅匝装Y,肝被膜觸片染色鏡檢,除有兩端鈍圓,單在和呈短鏈的桿菌外,常見(jiàn)關(guān)節(jié)可檢出長(zhǎng)絲狀菌體,這個(gè)特征具有診斷價(jià)值。
5.3.1 涂片鏡檢。取新死亡病羊的肝臟、脾臟做觸片,或者是滲出液、炎性分泌物制成涂片,革蘭氏染色鏡檢,在顯微鏡下觀察可見(jiàn)革蘭氏陽(yáng)性,菌體卵圓形,直徑0.5~1.0 μm,呈鏈條狀排列的球菌,可做出初步診斷。
5.3.2 分離培養(yǎng)。疑似為敗血癥病羊,可先采血液用硫乙醇鹽肉湯增菌培養(yǎng)后,再轉(zhuǎn)接種于血液瓊脂平板上培養(yǎng);若為膿汁、炎性分泌物可直接劃線接種于血液瓊脂平板上進(jìn)行分離培養(yǎng),在培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)24 h后形成圓形、灰白色、閃光中央隆起、表面光滑的露珠狀小菌落。在菌落的周圍有寬3 mm透明的溶血環(huán),低倍鏡觀察溶血環(huán)內(nèi)已無(wú)完整的紅細(xì)胞。
5.3.3 溶血試驗(yàn)。試驗(yàn)采用試管法,用生理鹽水洗滌綿羊紅細(xì)胞三次后,配制成2%綿羊紅細(xì)胞懸液,取疑似敗血性鏈球菌18 h肉湯培養(yǎng)物加入滅菌試管,再加入等量的2%綿羊紅細(xì)胞懸液混合,置37 ℃水浴30 min后觀察,試管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象可判定為陽(yáng)性。
5.3.4 生化鑒定。在分離培養(yǎng)的血瓊脂平板上挑取單個(gè)可疑菌落,于血清肉湯培養(yǎng)基中純培養(yǎng)后接種于生化反應(yīng)管,37 ℃培養(yǎng)72 h后觀察試驗(yàn)結(jié)果。該菌可發(fā)酵葡萄糖、乳糖、蔗糖、蕈糖,不能發(fā)酵甘露醇、山梨醇、菊糖、伯膠糖??伤馑畻钴?、七葉苷,不能水解馬脲酸,V-P反應(yīng)陽(yáng)性,MR試驗(yàn)和硝酸鹽還原試驗(yàn)均呈陽(yáng)性。
5.3.5 血清學(xué)鑒定。將分離培養(yǎng)出的菌株用熱酸提取方法提取特異性抗原,再與C群特異性抗血清做玻板凝集試驗(yàn),如有凝集產(chǎn)生則視為陽(yáng)性。
5.3.6 動(dòng)物試驗(yàn)。取健康小白鼠分為試驗(yàn)組與對(duì)照組兩組。將鏈球菌純培養(yǎng)物,腹腔接種試驗(yàn)組小鼠,0.2 mL/只(活菌含量≥6.0×108CFU/ML),對(duì)照組小鼠腹腔注射無(wú)菌肉湯0.2 mL/只,隔離飼養(yǎng)。試驗(yàn)組小鼠在接種12 h后,可出現(xiàn)精神沉郁、呼吸急促、食欲廢絕、肌肉震顫等癥狀,在接種24 h后有部分小鼠死亡,也有小鼠能在48 h后恢復(fù)正常狀態(tài);對(duì)照組小鼠中未有異常。剖檢死亡小鼠可見(jiàn)咽喉部腫脹,有黏性滲出物,肺水腫、出血,膽囊腫大,腎臟有出血點(diǎn)。組織涂片及細(xì)菌培養(yǎng)均呈陽(yáng)性。
要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,作好抓膘及防寒保溫工作。不能由疫區(qū)調(diào)進(jìn)羊只或運(yùn)入畜產(chǎn)品,并做好衛(wèi)生消毒工作。我國(guó)已研制出用于預(yù)防羊鏈球菌病的滅活苗和弱毒苗,羊敗血性鏈球菌病活疫苗含馬鏈球菌獸疫亞種羊源F60株(CVCC 553),羊尾根皮下注射,按瓶簽注明的頭份用生理鹽水稀釋,6月齡以上羊,每只注射1.0 mL,注射用苗每頭份活菌數(shù)不少于2.0×106CFU,免疫期為12個(gè)月。羊敗血性鏈球菌病滅活疫苗含有滅活的馬腺疫鏈球菌獸疫亞種羊源株菌,皮下注射,不論年齡大小,每只羊均接種5.0 mL,即20頭份/瓶,注射用苗每頭份活菌數(shù)不少于2.0×106CFU,免疫期為12個(gè)月。羊敗血性鏈球菌病發(fā)現(xiàn)疫情后,應(yīng)做好封鎖、隔離、消毒、檢疫及尸體處理。消毒藥可用5%漂白粉、10%生石灰水、3%來(lái)蘇爾,皮毛可用15%鹽水(內(nèi)含2.5%鹽酸)浸泡2 d。
病羊患病初期可用青霉素或10%磺胺噻唑鈉10 mL肌肉注射,每天1~2次,或磺胺嘧啶6 g,氨苯磺胺5~6 g,混合加適量水口服,效果都很好。此外也可以聯(lián)合使用清肺散進(jìn)行對(duì)癥治療,取板藍(lán)根90 g、葶藶子 60 g、貝母30 g、桔梗 30 g、甘草25 g,研磨成粉末,用開(kāi)水溶解后每天服用1次,連用15 d,按照上述配方進(jìn)行為期5~6 d的治療,養(yǎng)殖場(chǎng)的病情能夠得到有效的控制。
綜上所述,要減少羊敗血性鏈球菌病的發(fā)生應(yīng)在養(yǎng)殖場(chǎng)建立和健全消毒、隔離制度。保持圈舍清潔、干燥及通風(fēng),經(jīng)常清除糞便,定期更換墊草,保持地面清潔。引進(jìn)羊只時(shí)必須經(jīng)檢疫和隔離觀察,確定健康時(shí)才能混群飼養(yǎng)。發(fā)病區(qū)在最后一只病羊痊愈或死亡后一個(gè)月,再無(wú)新病例發(fā)生,并經(jīng)過(guò)徹底清理消毒后,才能解除疫區(qū)的封鎖。本病應(yīng)用抗菌藥物治療有效,當(dāng)在病料中分離出致病性C群獸疫鏈球菌后,應(yīng)立即進(jìn)行藥敏試驗(yàn),根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果篩選出特效藥物進(jìn)行全身治療。