孔文潔 劉衛(wèi)東 惠文佳 馮 燕 王 曼 王秋玲 周紅潤 高 峰

幽門螺桿菌（Hp）是消化道常見致病菌，主要感染部位為胃及十二指腸球部，Hp感染與多種消化系統(tǒng)疾病如慢性淺表性胃炎伴糜爛、慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌有顯著相關(guān)性，而根除Hp后部分消化道疾病可以得到很好的控制[1-3]。中國的Hp感染發(fā)生率較高，Hp感染在消化性潰瘍、胃癌等疾病的發(fā)病中起著重要作用。一項(xiàng)大樣本隊(duì)列研究發(fā)現(xiàn)，Hp陽性的患者經(jīng)歷了慢性胃炎—萎縮性胃炎—腸上皮化生的過程，胃癌的發(fā)生風(fēng)險呈階梯式增高[4-5]。Hp可分為Ⅰ型Hp和Ⅱ型Hp。有研究發(fā)現(xiàn)不同類型的Hp感染在萎縮性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的進(jìn)展中起著不同的作用，其中Ⅰ型Hp感染在胃腸疾病的發(fā)病和進(jìn)展過程中扮演著重要角色[6-7]。Xiao等[8]的研究也發(fā)現(xiàn)，Ⅰ型Hp感染促進(jìn)了從慢性萎縮性胃炎進(jìn)展至腸上皮化生和上皮內(nèi)瘤變的過程。本研究檢測了Hp感染患者的抗Hp抗體并進(jìn)行了Hp免疫分型，分析了Hp分型與胃腸疾病類型、感染部位、病理分型及胃功能血清學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，為臨床醫(yī)生制定有效的Hp感染治療方案提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2018年1月至2020年12月在新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科就診，經(jīng)胃鏡及快速尿素酶檢測診斷為Hp感染的200例患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）入組患者均經(jīng)胃鏡及活體組織病理檢查，并且經(jīng)過14C呼氣試驗(yàn)檢測結(jié)合 H-E染色的組織病理學(xué)檢查，診斷為Hp感染；（2）未接受Hp根除治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患有胃癌、胃部淋巴瘤、胃息肉或既往有胃癌手術(shù)史的患者；（2）患有血液系統(tǒng)疾病、自身免疫病、嚴(yán)重肝腎功能障礙的患者；（3）14C呼氣試驗(yàn)結(jié)果為陰性的患者；（4）近1 個月內(nèi)使用過抗生素、抗血小板藥物、抗凝藥物、質(zhì)子泵抑制劑的患者；（5）胃鏡診斷與病理診斷不符的患者。

1.2 研究方法

1.2.114C呼氣試驗(yàn) 患者空腹或飯后2 h服用1粒14C-尿素膠囊并靜坐25 min，隨后向集氣瓶中吹氣約3 min，以液體指示劑顏色變?yōu)闊o色為止。向集氣瓶中添加4.5 mL閃爍液，顛倒混勻3次，放入HUBT-20A2型Hp測試儀（購自山東盈通信息科技有限公司）中，檢測時間設(shè)定為1 min。Hp檢測值≥100 dpm 判定為Hp感染陽性，檢測值＜100 dpm判定為陰性。

1.2.2Hp免疫分型測定 抽取患者空腹靜脈血2～3 mL，采用蛋白質(zhì)印跡法檢測抗Hp抗體，試劑盒購自深圳市伯勞特生物制品有限公司。通過印跡膜條與血清抗體的結(jié)合、酶聯(lián)反應(yīng)、顯色反應(yīng)、終止反應(yīng)過程，取出印跡膜條并與標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行對照，定性地判定結(jié)果?？耿裥虷p抗體陽性的判定：細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白（CagA）、空泡毒素（ VacA）區(qū)帶中任意1種或2種出現(xiàn)；抗Ⅱ型Hp抗體陽性的判定：尿素酶A（UreA）和UreB區(qū)帶中任意1種或2種出現(xiàn)，未見CagA、VacA區(qū)帶；抗Hp抗體陰性的判定：顯色區(qū)帶未見陽性區(qū)帶。根據(jù)Hp免疫分型結(jié)果將患者分為Ⅰ型Hp組和Ⅱ型Hp組。

1.2.3 胃功能血清學(xué)4項(xiàng)指標(biāo)檢測 抽取患者空腹靜脈血2～3 mL，采用ELISA法檢測血清胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、PGⅡ、胃泌素-17（G-17），并計算PGⅠ與PGⅡ的比值（PGR），試劑盒購自武漢明德生物科技股份有限公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用 SPSS 22.0 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。采用χ2檢驗(yàn)比較不同Hp分型患者的胃腸疾病類型、感染部位及病理分型情況，采用t檢驗(yàn)比較兩組的胃功能血清學(xué)指標(biāo)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

本研究共納入經(jīng)胃鏡及快速尿素酶檢測結(jié)果顯示Hp感染的200例患者，其中男性104例，女性96例，年齡21～70歲，平均年齡為（44.3±13.2）歲，其中慢性淺表性胃炎69 例，慢性淺表性胃炎伴糜爛37例，慢性萎縮性胃炎37例，胃潰瘍23例，十二指腸潰瘍34例。采用蛋白質(zhì)印跡法進(jìn)行抗Hp抗體檢測，并進(jìn)行Hp免疫分型，結(jié)果顯示Ⅰ型Hp感染145例，Ⅱ型Hp感染51例，抗Hp抗體陰性4例。4例抗Hp抗體陰性患者經(jīng)胃鏡和活體組織病理檢查證實(shí)均為十二指腸潰瘍患者。見圖1。

圖1 胃組織中抗Hp抗體陽性或陰性患者的病理圖像 H-E染色 ×40 A 胃體組織中抗Hp抗體陽性 B 胃角組織中抗Hp抗體陽性 C 胃竇組織中抗Hp抗體陽性 D 胃體組織中抗Hp抗體陰性 E 胃角組織中抗Hp抗體陰性 F 胃竇組織中抗Hp抗體陰性

2.2 不同Hp 分型與胃腸疾病類型的關(guān)系

蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果顯示，200 例Hp感染患者中，抗Hp抗體陽性196例，其中Ⅰ型Hp感染145例（Ⅰ型Hp組），Ⅱ型Hp感染51例（Ⅱ型Hp組）。Ⅰ型Hp組與Ⅱ型Hp組的年齡、性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。Ⅰ型Hp組中慢性淺表性胃炎伴糜爛、慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍患者占比（22.8%、22.8%、14.5%、18.6%）均顯著高于Ⅱ型Hp組（7.8%、7.8%、3.9%、5.9%）（P均＜0.05），而Ⅰ型Hp組中慢性淺表性胃炎患者占比（21.4%）顯著低于Ⅱ型Hp組（74.5%，P＜0.05）。見表1。

表1 不同Hp 分型與胃腸疾病類型的關(guān)系/例（%）

2.3 不同Hp分型與感染部位的關(guān)系

不同Hp分型患者中各部位感染情況相比較，結(jié)果顯示Ⅰ型Hp組中胃竇和胃體感染率（79.3%、77.9%）均顯著高于Ⅱ型Hp組（54.9%、19.6%），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）；而Ⅰ型Hp組與Ⅱ型Hp組的胃角和十二指腸球部感染率（23.4%比15.7%，34.5%比29.4%）差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。見表2。

表2 不同Hp 分型與感染部位的關(guān)系/例（%）

2.4 不同Hp分型與病理分型的關(guān)系

Ⅰ型Hp組中重度炎性反應(yīng)患者占比（55.2%）顯著高于Ⅱ型Hp組（19.6%），Ⅰ型Hp組中輕度炎性反應(yīng)患者占比（13.8%）顯著低于Ⅱ型Hp組（49.0%）, 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），Ⅰ型Hp組與Ⅱ型Hp組中中度炎性反應(yīng)患者占比（31.0%比31.4%）的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。Ⅰ型Hp組中腸上皮化生和上皮內(nèi)瘤變患者占比（28.3%、24.1%）均顯著高于Ⅱ型Hp組（9.8%、7.8%），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。見表3。

表3 不同Hp分型與病理分型的關(guān)系/例（%）

2.5 Ⅰ型Hp組與Ⅱ型Hp組的胃功能血清學(xué)指標(biāo)比較

Ⅰ型Hp組與Ⅱ型Hp組的胃功能血清學(xué)指標(biāo)相比較，結(jié)果顯示Ⅰ型Hp組的血清PGⅡ和G-17表達(dá)水平均顯著高于Ⅱ型Hp組，而Ⅰ型Hp組的PGR顯著低于Ⅱ型Hp組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。兩組的血清PGⅠ水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表4。

表4 不同Hp分型患者的胃功能血清學(xué)指標(biāo)比較

3 討論

目前，學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為Hp感染會造成患者胃黏膜損傷和活動性炎性反應(yīng)，Hp產(chǎn)生的各種毒力因子和炎性因子共同作用于胃黏膜，造成胃黏膜發(fā)生不同程度的損傷。Hp不易根除，Hp持續(xù)感染可導(dǎo)致胃黏膜發(fā)生萎縮、潰瘍、腸上皮化生及上皮內(nèi)瘤變。上皮內(nèi)瘤變是公認(rèn)的癌前病變，高級別上皮內(nèi)瘤變比低級別上皮內(nèi)瘤變更易發(fā)展為胃癌[9]。因此，Hp感染被認(rèn)為是胃癌的重要致病因素[10]。文獻(xiàn)報道Hp感染者中約有4%發(fā)生胃癌[11]，這表明Hp感染者的胃癌發(fā)生風(fēng)險較健康人群明顯增高。Hp包括兩種免疫分型，Ⅰ型Hp產(chǎn)生細(xì)胞毒素（CagA和VacA），Ⅱ型Hp不產(chǎn)生細(xì)胞毒素。本研究結(jié)果顯示，Ⅰ型Hp組中慢性淺表性胃炎伴糜爛、慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍患者占比均顯著高于Ⅱ型Hp組，而Ⅰ型Hp組中慢性淺表性胃炎患者占比顯著低于Ⅱ型Hp組（P均＜0.05）。慢性淺表性胃炎的病情相對較輕，慢性淺表性胃炎伴糜爛和慢性萎縮性胃炎可由慢性淺表性胃炎發(fā)展而來，由此推測Hp感染可以加重胃黏膜的炎性反應(yīng)程度，并有導(dǎo)致胃黏膜萎縮甚至癌變的可能，這一結(jié)果與既往研究結(jié)論相符[12]。此外，在本研究納入的抗Hp抗體陽性的196例患者中，有145例患者為Ⅰ型Hp感染，Ⅰ型Hp感染率為74.0%，較既往研究報道的Ⅰ型Hp感染率低，這可能與本文納入的疾病種類有關(guān)。由于腫瘤的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，故本研究排除了胃癌、胃部淋巴瘤、胃息肉等疾病，而這幾種疾病患者的Ⅰ型Hp感染率可能較高。

本研究對不同Hp分型感染患者的病理分型情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示Ⅰ型Hp組中重度炎性反應(yīng)患者占比顯著高于Ⅱ型Hp組，Ⅰ型Hp組中輕度炎性反應(yīng)患者占比顯著低于Ⅱ型Hp組（P均＜0.05），這表明隨著炎性反應(yīng)程度的加重，患者的Ⅰ型Hp感染率呈升高趨勢，而Ⅱ型Hp感染率呈降低趨勢。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，Ⅰ型Hp組中腸上皮化生和上皮內(nèi)瘤變患者占比均顯著高于Ⅱ型Hp組（P均＜0.05）。該結(jié)果與朱明飛等[13]的研究結(jié)果相符，推測其原因?yàn)椋孩裥虷p持續(xù)感染產(chǎn)生的CagA 蛋白能夠破壞胃黏膜，引起廣泛的組織炎性反應(yīng)，并可使炎性反應(yīng)加重，促使胃黏膜發(fā)生萎縮、潰瘍、腸上皮化生及上皮內(nèi)瘤變，導(dǎo)致患者病情進(jìn)展；VacA 主要通過改變質(zhì)膜通透性導(dǎo)致黏膜細(xì)胞空泡形成，使胃黏膜發(fā)生損傷。因此，相較于Ⅱ型Hp菌株，Ⅰ型Hp菌株的毒力更強(qiáng)，能明顯加重胃黏膜損傷和炎性反應(yīng)[14]。

此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，不同Hp分型感染患者的血清PGⅡ、G-17表達(dá)水平及PGR也存在差異，Ⅰ型Hp感染患者的血清PGⅡ和G-17表達(dá)水平均顯著高于Ⅱ型Hp感染患者，而PGR顯著低于Ⅱ型Hp感染患者（P均＜0.05）。該研究結(jié)果提示，Ⅰ型Hp感染能顯著升高血清PGⅡ和G-17表達(dá)水平，并使PGR顯著降低，推測可能的機(jī)制為：血清PGⅡ和G-17可以作為胃黏膜病變的可靠指標(biāo)，Ⅰ型Hp的定植、侵襲能力和毒力較強(qiáng)，其產(chǎn)生的CagA和VacA廣泛作用于胃竇和胃體部位，并通過特定的炎性反應(yīng)機(jī)制使PGⅡ和G-17的表達(dá)水平升高，加速胃黏膜病變的進(jìn)展；而Ⅱ型Hp主要分布于胃竇部位，其在胃體、胃角等部位分布較少，對上述胃功能相關(guān)因子分泌的影響較小[15-16]。

綜上所述，本研究結(jié)果表明，Ⅰ型Hp的定植、侵襲能力和毒力較強(qiáng)，其持續(xù)感染可明顯升高血清PGⅡ和G-17表達(dá)水平，使胃黏膜發(fā)生損傷和炎性反應(yīng)加重，加速胃黏膜病變的進(jìn)展，并導(dǎo)致胃黏膜萎縮，誘發(fā)潰瘍、腸上皮化生和上皮內(nèi)瘤變。本研究存在一定的局限性：僅對納入患者的患病結(jié)局與Hp分型的關(guān)系進(jìn)行了分析，未對納入患者的長期病情變化進(jìn)行隨訪，如患者由慢性淺表性胃炎進(jìn)展為慢性萎縮性胃炎，或由中度炎性反應(yīng)進(jìn)展至重度炎性反應(yīng)的時候，其Hp分型的情況如何？這將在今后的研究中進(jìn)行探討。