劉 旭，譚丹妮，向 琴，蘇麗清，劉 秀，喻 嶸，

(1.湖南中醫(yī)藥大學中醫(yī)學院，2.中醫(yī)方證研究轉(zhuǎn)化醫(yī)學湖南省重點實驗室，湖南 長沙 410208)

隨著生活水平的提高，肥胖癥人群日益增加，肥胖癥是誘發(fā)多種疾病，如2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)、高血壓、心臟病、脂肪肝、中風與某些惡性腫瘤的基礎(chǔ)疾病[1]。肥胖癥與T2DM都容易導致心血管異常，二者同時出現(xiàn)使心血管并發(fā)癥、心力衰竭的風險進一步增加[2]，因此研究治療肥胖癥合并T2DM，對提高患者生存質(zhì)量、改善機體代謝功能、降低心血管事件帶來的死亡風險，具有臨床價值。肥胖癥與T2DM具有共同的病理基礎(chǔ)——胰島素抵抗(insulin resistance，IR)，研究發(fā)現(xiàn)，肥胖癥患者的脂肪組織，尤其是內(nèi)臟脂肪組織中發(fā)生的炎癥反應(yīng)，導致脂肪組織自身與肝臟等胰島素敏感器官對胰島素敏感性降低產(chǎn)生IR[3-5]，最終導致T2DM的發(fā)生。芒果苷(mangiferin，MGF)提取自百合科植物知母(AnemarrhenaasphodeloidesBge.)，是中藥知母中重要的有效成分。自1960年首次報道了對MGF的研究，目前MGF已被證實影響多個生物學過程，包括線粒體生物能學、糖酵解、脂肪生成等，還具有抗氧化、抗炎、抗高脂血癥、抗高血糖和抗癌作用[6]。骨骼肌特異性胰島素樣生長因子-1受體功能缺失(loss of skeletal muscle-specific insulin-like growth factor-1 receptor function，MKR)鼠是一種以FVB/N鼠為背景的轉(zhuǎn)基因糖尿病小鼠，是研究T2DM的成熟的模型動物[7-8]。本實驗采取高脂飲食(high fat diet，HFD)喂養(yǎng)結(jié)合鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)干預的方式作用于MKR小鼠，誘導形成肥胖癥合并T2DM的疾病模型，探討芒果苷對該復合型疾病模型的作用，為芒果苷的臨床研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物MKR小鼠由美國國立衛(wèi)生研究院糖尿病研究中心提供，飼養(yǎng)于湖南中醫(yī)藥大學SPF級實驗動物中心[SYXK(湘)2013-0005]。FVB/N小鼠購自北京斯貝福生物技術(shù)公司[SCXK(京)2019-0010]。小鼠被安置于控溫、通風、標準化的動物房，可自由獲取食物(嚙齒動物飼料)和水。所有小鼠均按照湖南中醫(yī)藥大學實驗動物中心《實驗動物飼養(yǎng)使用指南》的標準進行飼養(yǎng)。涉及活體動物的實驗方案于2020年12月29日獲得湖南中醫(yī)藥大學實驗動物中心許可，倫理審查批號[ZYFY20201229]。

1.2 藥品與試劑芒果苷(CAS號：4773-96-0，批號：2473，HPLC≥98%)購于上海詩丹德標準技術(shù)服務(wù)有限公司；鹽酸二甲雙胍片(深圳市中聯(lián)制藥有限公司，國藥準字：H44024853，批號2012008，0.25 g/片)，門冬胰島素(北京諾和諾德公司，批號21047)，購自湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院門診西藥房；STZ(批號20210316)購自北京索萊寶公司；小鼠胰島素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒(批號210415)購自上海碧云天公司；白介素-6(interleukin-6，IL-6)檢測試劑盒(批號F26031595)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)檢測試劑盒(批號F27031596)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)檢測試劑盒(批號G13031594)購自武漢華美生物公司；TNF-α抗體(批號17590-1-AP)、IL-6抗體(批號66146-1-Ig)、IL-1β抗體(批號26048-1-AP)、GAPDH抗體(批號10494-1-AP)、山羊抗小鼠IgG(批號SA00001-1)、山羊抗兔IgG(批號SA00001-2)購自美國ProteinTech公司；二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)購自美國Sigma Aldrich公司；脂肪固定液購自武漢賽維爾生物公司；高脂飼料XTHF60(含60%脂肪20%蛋白質(zhì))購自江蘇協(xié)同生物公司。

1.3 儀器GA-3型血糖儀(三諾生物公司)；高速冷凍離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司)；全自動酶標洗板機、多功能酶標分析儀(深圳市匯松科技發(fā)展有限公司)；電熱恒溫培養(yǎng)箱(北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司)；電泳及轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)(北京六一公司)；電子天平(美國雙杰)；顯微鏡(日本Olympus公司)。

1.4 方法

1.4.1分組、造模與給藥 如實驗流程示意圖(Fig 1)所示，40只4周齡MKR小鼠，雌雄對半，給予高脂飲食4周，腹腔注射STZ溶液(40 mg·kg-1，用pH 4.0檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液制備，現(xiàn)用現(xiàn)配)，連續(xù)5 d。尾靜脈采血測量空腹血糖(fasting blood glucose，F(xiàn)BG)，以空腹血糖≥11.1 mmol·L-1視為造模成功。40只MKR小鼠隨機分為5組，分別為模型組(Model)、二甲雙胍組(metformin，MET)、芒果苷低劑量組(mangiferin low-dose，MGF-L)、芒果苷中劑量組(mangiferin medium-dose，MGF-M)、芒果苷高劑量組(mangiferin high-dose，MGF-H)，每組8只。按小鼠與人體表面積等效劑量折算法，折算MET臨床等效劑量為0.11 g·kg-1。MGF低、中、高劑量組分別給予25、50、100 mg·kg-1。8只7周齡FVB/N小鼠購入后，以普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周，作為對照組(Control)。MGF溶于10% DMSO(PBS緩沖液稀釋)，配制成質(zhì)量濃度為2.5、5、10 g·L-1的溶液，對應(yīng)MGF低、中、高劑量組，臨用前在水浴超聲鍋內(nèi)超聲15 s以使其充分溶解，按照每只小鼠給藥體積200 μL取藥。實驗過程中，對照組采用普通飼料喂養(yǎng)，其余各組全程保持高脂飼料喂養(yǎng)；各治療組ig相應(yīng)劑量藥物，對照組和模型組ig 200 μL 10% DMSO，每天1次，連續(xù)5周。

Fig 1 Scheme of treatment of obesity and T2DM using MKR mice as models and FVB/N mice as controls

1.4.2芒果苷對MKR小鼠體質(zhì)量的影響 給藥過程中，每周使用小動物體質(zhì)量秤記錄空腹體質(zhì)量，直至給藥結(jié)束。

1.4.3芒果苷對MKR小鼠糖代謝的影響 給藥過程中，使用血糖儀，經(jīng)尾靜脈采血，每周測量一次空腹血糖；給藥d 30進行口服糖耐量試驗(oral glucose tolerance test，OGTT)，禁食不禁水12 h，測量空腹血糖水平后，ig葡萄糖溶液(2 g·kg-1)，在初始糖負荷后于15、30、60、120 min等時間點測量血糖，并計算120 min 曲線下面積 (area under the curve，AUC)。于給藥d 33，進行胰島素耐量試驗(insulin tolerance test，ITT)，小鼠禁食3 h，測量空腹血糖水平后，腹腔注射胰島素(0.5 U·kg-1)，然后在15、30、45、60 min等時間點測量血糖，并計算各組AUC。胰島素用生理鹽水稀釋，現(xiàn)用現(xiàn)配；末次給藥后，通過眼眶采血，獲得血清后按照試劑盒說明書操作測定小鼠血清胰島素水平。

1.4.4芒果苷對MKR小鼠脂代謝的影響 末次給藥結(jié)束后，通過眼眶采血獲得血清，進行血脂4項分析，包括總膽固醇(total cholesterol，CHOl)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)。以上生化分析均在湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院醫(yī)學檢驗中心完成。

1.4.5芒果苷對MKR小鼠全身性炎癥水平的影響 末次給藥結(jié)束后，通過眼眶采血獲得血清，按照試劑盒操作說明測定小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性因子的水平。

1.4.6芒果苷對MKR小鼠肝臟組織病理變化的影響 將獲得的新鮮肝臟組織置于4%多聚甲醛中固定，脫水、透明后，用石蠟包埋。切片和烘干后，用二甲苯與一系列梯度濃度的乙醇(100%、95%、75%)脫蠟，然后將組織切片進行HE染色、Masson染色。一部分經(jīng)4%多聚甲醛固定后的肝臟組織，置于15%蔗糖水中，4 ℃浸泡至沉底，轉(zhuǎn)移入30%蔗糖水浸泡至沉底，然后用櫻花冷凍切片包埋劑包埋。用冷凍切片機切成6～8 μm厚度切片后進行油紅O染色。最后在顯微鏡下觀察并拍照。

1.4.7芒果苷對MKR小鼠肝臟損傷水平的影響 由湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院醫(yī)學檢驗中心檢測分析小鼠血清中谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase，ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)的水平。

1.4.8芒果苷對MKR小鼠脂肪組織病理變化的影響 收集小鼠腹腔內(nèi)性腺組織附屬的脂肪組織，置于脂肪組織固定液中固定24 h以上，脫水、透明后，用石蠟包埋。切片和烘干后，用二甲苯與一系列梯度濃度的乙醇(100%、95%、75%)脫蠟，然后將脂肪組織切片進行HE染色。最后在顯微鏡下觀察并拍照。

1.4.9芒果苷對MKR小鼠脂肪組織TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表達的影響 剪取適量脂肪組織，用SDS裂解液在生物樣品均質(zhì)儀中碾磨裂解脂肪組織，提取總蛋白。蛋白上清與loading buffer混勻并煮沸，制備變性蛋白待用。電泳2.5 h，轉(zhuǎn)膜后用5%脫脂奶粉封閉，4 ℃過夜。加入一抗TNF-α(1 ∶1 000)、IL-1β(1 ∶1 000)、IL-6(1 ∶3 000)、GAPDH(1 ∶3 000)孵育90 min，用PBST洗滌3次，加入二抗HRP goat anti-mouse IgG(1 ∶5 000)、HRP goat anti-rabbit IgG(1 ∶6 000)孵育90 min。最后用ECL化學發(fā)光液顯色，在化學發(fā)光成像系統(tǒng)儀內(nèi)拍照。

2 結(jié)果

2.1 芒果苷對MKR小鼠體質(zhì)量的影響與對照組比較，模型組小鼠體質(zhì)量明顯增加(P<0.01)；與模型組比較，在給藥d 28,MET組小鼠體質(zhì)量出現(xiàn)明顯減輕(P<0.05)，給藥d 35,MET組與MGF高劑量組小鼠體質(zhì)量均明顯減輕(P<0.05)，MGF低、中劑量組小鼠體質(zhì)量變化無統(tǒng)計學差異；與MET組比較，MGF低、中、高劑量組小鼠體質(zhì)量變化均無統(tǒng)計學差異(Tab 1)。

2.2 芒果苷對MKR小鼠糖代謝的影響與對照組比較，模型組小鼠在實驗中全程處于高血糖狀態(tài)(P<0.01)；給藥d 28，與對照組比較，MGF低劑量組小鼠血糖呈明顯高水平(P<0.01)，MGF中劑量組小鼠血糖有所下降(P<0.05)，MET組與MGF高劑量組小鼠空腹血糖水平與對照組間無統(tǒng)計學差異；給藥d 35，與對照組比較，除MGF低劑量組小鼠呈明顯的高血糖狀態(tài)(P<0.05)，其余治療組小鼠空腹血糖與對照組間無統(tǒng)計學差異。與模型組比較，給藥d 7 MET組小鼠空腹血糖水平下降(P<0.05)，給藥d 14至實驗結(jié)束時，各治療組小鼠空腹血糖均顯著下降(P<0.01)。MGF各劑量治療組與MET組比較，無統(tǒng)計學差異(Tab 2)。

OGTT試驗中，于0 min檢測各組小鼠空腹血糖，與對照組比較，模型組與MGF低劑量組小鼠呈顯著高血糖水平(P<0.01或P<0.05)；與模型組比較，各治療組小鼠空腹血糖均明顯下降(P<0.01)；與MET組比較，MGF各劑量組小鼠血糖無統(tǒng)計學差異。糖負荷30 min，與對照組比較，模型組與各治療組小鼠血糖均明顯上升(P<0.01)；與模型組比較，各治療組小鼠血糖水平低于模型組(P<0.01)；與MET組比較，MGF低、中劑量組小鼠血糖升高明顯(P<0.01)，MGF高劑量組小鼠血糖與MET組無統(tǒng)計學差異。糖負荷60 min，與對照組比較，MET組小鼠血糖下降(P<0.05)，模型組與其余各治療組小鼠血糖呈較高水平(P<0.01)；與模型組比較，各治療組小鼠血糖均明顯下降(P<0.01)；與MET組比較，MGF低劑量組小鼠血糖水平較高(P<0.05)，MGF中、高劑量組小鼠血糖與MET組間無統(tǒng)計學差異。糖負荷120 min，與對照組比較，模型組與MGF低劑量組小鼠呈高血糖狀態(tài)(P<0.01)，MGF中劑量組小鼠血糖較高(P<0.05)，MET組與MGF高劑量組小鼠血糖回落與對照組間無統(tǒng)計學差異；與模型組比較，所有治療組小鼠血糖均明顯回落(P<0.01)；MGF低、中、高劑量組小鼠血糖水平與MET組比較無統(tǒng)計學差異(Fig 2A)。計算并比較各組AUC，與對照組比較，模型組AUC明顯增加(P<0.01)，各治療組AUC接近對照組，無統(tǒng)計學差異；與模型組比較，各治療組AUC均顯著降低(P<0.01)；與MET組比較，MGF低劑量組與中劑量組AUC較高(P<0.01或P<0.05)，MGF高劑量組AUC與MET組接近，無統(tǒng)計學差異(Fig 2B)。

ITT試驗中，對照組小鼠注射胰島素后血糖迅速下降，30 min處血糖約為0 min處血糖的52%，然后血糖逐漸回升至注射前的70%；模型組小鼠血糖雖有下降，但整體趨勢平緩，30 min處血糖降幅不足20%，并且快速回升至0 min處水平；MET組與MGF高劑量組在注射胰島素后血糖下降明顯，30 min處MET組與MGF高劑量組血糖水平較0 min處下降35%左右，MET組較MGF高劑量組下降更為明顯，然后緩慢上升，45 min處MGF高劑量組血糖回升幅度較MET組略低，60 min處MGF高劑量組血糖回升至0 min處的87%，MET組血糖回升低于MGF高劑量組；MGF低、中劑量組血糖在30 min處下降約25%，60 min時基本回升至0 min時的血糖水平(Fig 2C)。與對照組比較，模型組AUC顯著增加(P<0.01)；與模型組比較，各治療組AUC明顯減少(P<0.01)；與MET組比較，MGF低劑量組AUC較高(P<0.05)，MGF中、高劑量組AUC接近MET組無統(tǒng)計學差異(Fig 2D)。

Tab 1 Effects of MGF on body weight of MKR mice

給藥35 d后，檢測各組血清胰島素含量。與對照組比較，模型組小鼠血清胰島素含量明顯下降(P<0.01)；與模型組比較，MET組與MGF高劑量組小鼠血清胰島素含量明顯增加(P<0.01)，MGF中劑量組小鼠胰島素含量增加(P<0.05)，MGF低劑量組與模型組間無統(tǒng)計學差異；與MET組比較，MGF低、中劑量組小鼠血清胰島素含量低(P<0.01)，MGF高劑量組胰島素含量與MET組間無統(tǒng)計學差異(Tab 2)。

2.3 芒果苷對MKR小鼠脂代謝的影響給藥35 d后，與對照組比較，模型組小鼠血清TG含量明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，各治療組小鼠血清TG含量明顯降低(P<0.01)；與MET組比較，MGF各劑量組小鼠血清TG含量不具有統(tǒng)計學差異。此外，除模型組小鼠LDL-C含量較對照組顯著升高(P<0.01)，其余各組LDL-C含量無統(tǒng)計學差異。比較各組間小鼠血清CHOl、HDL-C含量差異，不具有統(tǒng)計學差異(Fig 3)。

Fig 2 Effect of MGF on OGTT and ITT in MKR

Tab 2 Effects of MGF on serum insulin and FBG in MKR mice

Fig 3 Effects of MGF on lipid metabolism

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2.4 芒果苷對MKR小鼠全身性炎癥水平的影響給藥35 d后，與對照組比較，模型組小鼠血清TNF-α、IL-6含量上升(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較，MET組與MGF高劑量組小鼠血清TNF-α、IL-6含量下降(P<0.05或P<0.01)，MGF中劑量組小鼠血清IL-6含量下降(P<0.05)；與MET組比較，MGF各劑量組小鼠血清TNF-α與IL-6含量不具有統(tǒng)計學差異(Fig 4)。

2.5 芒果苷對MKR小鼠肝臟組織病理變化的影響給藥35 d后，病理切片圖顯示，對照組小鼠肝臟組織質(zhì)地致密，肝小葉、肝索結(jié)構(gòu)清晰、排列規(guī)則，肝細胞形態(tài)正常，細胞核完整、均勻。模型組HE染色可見肝臟質(zhì)地疏松，肝小葉、肝索結(jié)構(gòu)不清晰、排列不規(guī)則，肝細胞發(fā)生細胞核漂移，并可見小皰性脂肪變性；肝臟油紅O染色顯示細胞質(zhì)中存在廣泛且過量的脂質(zhì)蓄積；Masson染色可見肝竇周圍出現(xiàn)纖維結(jié)締組織增生。與模型組比較，各治療組小鼠肝臟組織病理改變均得到一定程度的改善(Fig 5)。

2.6 芒果苷對MKR小鼠肝臟損傷水平的影響給藥35 d后，與對照組比較，模型組小鼠血清ALT、AST含量均明顯上升(P<0.01)；與模型組比較，各治療組小鼠血清ALT含量均明顯下降(P<0.01)，MET組與MGF高劑量組小鼠血清AST含量明顯下降(P<0.01或P<0.05)，MGF低、中劑量組AST含量較模型組無統(tǒng)計學差異；與MET組比較，MGF低劑量組小鼠血清ALT、AST含量高(P<0.01)，MGF中劑量組小鼠血清ALT含量較高(P<0.05)，MGF高劑量組與MET組間無統(tǒng)計學差異(Fig 6)。

Fig 4 Effects of MGF on inflammation in MKR

Fig 5 Effects of MGF on liver pathological changes in MKR mice(100×)

Fig 6 Effects of MGF on hepatic injury in MKR

2.7 芒果苷對MKR小鼠脂肪組織病理變化的影響給藥35 d后，HE染色顯示，對照組小鼠的脂肪組織中以脂肪細胞為主，脂肪細胞大小均等、排列整齊、質(zhì)地致密；模型組小鼠的脂肪細胞大小不一，排列紊亂、質(zhì)地稀松，并且可見大量簇集的促炎型巨噬細胞形成冠狀結(jié)構(gòu)(crown-like structures，CLS)包圍在凋亡的脂肪細胞周圍；與模型組比較，MGF低、中劑量組小鼠的脂肪組織中仍見較多凋亡的脂肪細胞與不同程度的炎性細胞浸潤，脂肪細胞大小不一、排列不齊、質(zhì)地較為疏松；與模型組比較，MET組與MGF高劑量組小鼠的脂肪細胞形態(tài)明顯改善，大小趨于均等、排列有序，凋亡的脂肪細胞明顯減少、炎性浸潤明顯緩解，但是相較于對照組，MET組與MGF高劑量組受高脂飲食導致的肥胖癥影響，單個脂肪細胞體積較大、脂肪組織質(zhì)地偏疏松(Fig 7)。

2.8 芒果苷對MKR小鼠脂肪組織TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表達的影響給藥35 d后，Western blot結(jié)果顯示，與對照組比較，模型組小鼠脂肪組織中TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表達均明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，MET組與MGF高劑量組小鼠脂肪組織的TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表達均明顯下降(P<0.01)(Fig 8)。

3 討論

肥胖增加了許多疾病的發(fā)生風險，雖然其根本機制尚未完全清晰，但是在過去的研究中，科研人員已認識到肥胖與其他各種組織的慢性低度炎癥密切相關(guān)，包括脂肪組織(adipose tissue，AT)、骨骼肌、肝臟、胰島、腸道甚至大腦[9]。巨噬細胞存在于AT中，巨噬細胞的數(shù)量與脂肪細胞大小和機體體質(zhì)量呈正相關(guān)，大量的巨噬細胞圍繞在凋亡或垂死的脂肪細胞周圍，形成CLS，并且分泌多種炎性因子，如TNF-α、IL-1β、IL-6，使其自身表型由抗炎M2型極化為促炎M1型[10]。眾多研究結(jié)論表明，炎癥在IR的發(fā)生發(fā)展中扮演關(guān)鍵角色，肥胖一旦發(fā)生，肥胖相關(guān)的炎癥與IR相互影響促使對方進一步惡化。AT中的炎癥一方面作用于脂肪細胞的胰島素信號與代謝；另一方面作用于其他胰島素敏感器官，例如肝臟與骨骼肌，從而誘發(fā)AT自身性與機體全身性的IR。同時，炎癥可加速脂肪從AT中溢出，最終導致肝臟等胰島素敏感器官發(fā)生脂肪異位沉積與IR，從而在加速全身性IR和誘發(fā)T2DM中發(fā)揮重要作用[3-5]。實驗表明減少小鼠AT中的炎性因子可有效改善IR[11]。

Fig 7 Effects of MGF on adipose pathological changes in MKR mice (200×)

Fig 8 Effects of MGF on expression of inflammatory factors in adipose tissues of MKR mice

由于炎癥在肥胖癥及T2DM中的重要作用，靶向作用于炎癥成為治療肥胖癥合并T2DM的一項新療法。在測試抗炎藥物對IR和T2DM治療效果的前期臨床實驗中已經(jīng)出現(xiàn)一些有希望的結(jié)果[12]，同時，抗炎藥物的新應(yīng)用仍然存在著巨大挑戰(zhàn)，在一些具有T2DM或代謝綜合征病史的患者中出現(xiàn)較多不良事件[13]，以及這些抗炎藥物的肝腎毒性進一步損害肝臟的胰島素敏感性與代謝功能。中醫(yī)藥治療糖尿病歷史悠久，療效顯著，在中藥中探索、尋找可從抗炎角度調(diào)節(jié)、改善肥胖癥與T2DM的中藥化合物具有重要意義。

MGF為雙苯吡酮類化合物，是中藥知母中的主要有效成分之一，在知母的根莖中含量約為0.7%[14]。眾多實驗研究表明，MGF具有抗炎、抗氧化、抗糖尿病，改善胰島素抵抗、降低血脂等作用[15-16]。實驗結(jié)果顯示，與FVB/N對照組相比，MKR模型組小鼠體質(zhì)量明顯升高、糖脂代謝異常、肝臟損傷明顯、全身性及脂肪組織中的炎性表達升高。與模型組比較，各治療組有不同程度的改善，MGF高劑量組的表現(xiàn)尤為突出。脂肪組織病理學觀察及Western blot結(jié)果顯示，高劑量的MGF明顯減輕脂肪細胞的凋亡與炎性浸潤，顯著抑制脂肪組織中的炎性因子表達，從而有效減少脂肪外溢、緩解機體的胰島素抵抗。因此，MGF高劑量組小鼠體質(zhì)量明顯減輕，空腹血糖顯著下降，糖耐量與胰島素耐量得到顯著改善。同時，MGF顯著下調(diào)小鼠血清甘油三酯含量，因脂質(zhì)過度沉積引發(fā)的肝損傷得到顯著緩解，血生化檢驗與肝臟組織病理學觀察結(jié)果支持這一結(jié)論。MGF高劑量組小鼠血清AST、ALT含量顯著下降，肝臟的脂肪變性、脂質(zhì)蓄積與纖維化變性得到明顯改善，這同樣有利于肝胰島素抵抗的緩解，促進糖耐量的改善。相較于其他已有研究報道的藥物[12-13]，MGF在肥胖癥合并T2DM的治療中，有效靶向脂肪組織中的炎癥，調(diào)節(jié)糖脂代謝、緩解胰島素抵抗，具有綜合治療的作用，尤其是MGF對肝損傷的修復與肝功能的保護，更是其有效性、安全性、優(yōu)越性的體現(xiàn)。但由于MGF的溶解度極低，微溶于乙醇、水，在水中的溶解度僅為0.111 g·L-1[17]，同時，MGF在腸道中的生物利用度非常低，僅為1.2%，據(jù)此推測這可能是MGF低、中劑量組的效果不穩(wěn)定不理想，而高劑量的MGF治療效果最為明顯的重要原因。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)芒果苷能夠通過減輕MKR小鼠脂肪組織中的炎癥反應(yīng)綜合治療肥胖癥合并T2DM，為芒果苷的應(yīng)用研究提供了證據(jù)，也為思考、探索如何提高芒果苷的生物利用率打下基礎(chǔ)。