周慧敏，馬秀梅，曾海生，黃俞盛，譚 方

（1.桂林市中醫(yī)醫(yī)院，廣西 桂林 541002；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200）

金銀花是臨床常用中草藥，《中華本草》記載其是忍冬干燥花蕾或帶初開的花，屬于忍冬科忍冬屬植物[1-2]。金銀花主要的功效是清熱解毒、抗炎等，臨床上常用于治療溫病發(fā)熱和熱毒癰瘍等病癥[3-5]。金銀花主要含有黃酮類、有機(jī)酸類、三萜皂苷等化學(xué)成分[6-9]?，F(xiàn)代藥理研究表明，金銀花作為常用中藥既能宣散風(fēng)熱，還具有清熱解毒，抗炎、降脂和利膽保肝等作用，用于治療各種感染、炎癥、高脂血癥等[7,10]。金銀花抗炎、降血脂作用及機(jī)制通路的相關(guān)研究報(bào)道較少，因此本研究通過研究金銀花醇提物的抗炎、降血脂作用，為該藥材的進(jìn)一步研究和開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材 料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物6周齡健康SPF級(jí)雄性昆明種小鼠360只，體質(zhì)量18～22 g；7周齡SPF級(jí)雄性SD大鼠60只，體質(zhì)量180～220 g，均購(gòu)買于廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（桂）2019-0002。實(shí)驗(yàn)前在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)4 d，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（桂）2018-0014。實(shí)驗(yàn)鼠分籠飼養(yǎng)于空調(diào)室內(nèi)，濕度（68±5）%，室溫（23±2）℃，照明時(shí)間隨同自然晝夜變化，常規(guī)飼養(yǎng)，自由進(jìn)食和飲水。實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)所有動(dòng)物的處置符合國(guó)家科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》的要求。

1.2 藥物與試劑角叉菜膠（批號(hào)：YY19754）購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司；醋酸地塞米松（批號(hào)：190119，規(guī)格：0.75 mg）購(gòu)自浙江仙琚制藥股份有限公司；伊文思藍(lán)（批號(hào)：20190725）購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；辛伐他汀片（批號(hào)：20190405）購(gòu)自涿州東樂制藥有限公司，臨用前使用純水配置成0.4 mg/mL溶液用于灌胃；丙二醛（MDA）試劑盒（批號(hào)：201901）、超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒（批號(hào)：201905）、一氧化氮（NO）試劑盒（批號(hào)：201903）、甘油三酯（TG）試劑盒（批號(hào)：1904101）、總膽固醇（TC）試劑盒（批號(hào)：1904101）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒（批號(hào)：1904062）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑盒（批號(hào)：1904091）均購(gòu)自南京建成生物工程技術(shù)研究所。

1.3 主要儀器酶標(biāo)儀（Tecan Austria GmbH）；UV-1780型紫外可見分光光度計(jì)[島津儀器（蘇州）有限公司]；LRH-300-S型恒溫恒濕培養(yǎng)箱（韶關(guān)市泰宏醫(yī)療器械有限公司）；BS-280型全自動(dòng)生化分析儀（邁瑞醫(yī)療）；BSA224S型電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；YXQ-50A型立式壓力蒸汽滅菌器（上海迅博實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 金銀花醇提物的制備及高脂飼料的配方及配制取金銀花粗粉6 kg，加80%乙醇回流提取2次，第一次提取時(shí)間為1.5 h，溶劑倍量為10倍，第二次提取時(shí)間為1 h，溶劑倍量為8倍，過濾，合并濾液，減壓濃縮，再置水浴鍋上揮干溶劑，稱質(zhì)量，計(jì)算得膏率。

高脂飼料購(gòu)于廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，由10%豬油、1.0%膽固醇、0.2%膽酸鈉、3.0%蔗糖和5.0%蛋黃粉組成，在80℃烘箱內(nèi)烘干。

2.2 金銀花醇提物對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響隨機(jī)取雄性昆明種小鼠72只，按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（地塞米松5 mg/kg）、金銀花醇提物高劑量組（40 g/kg）、金銀花醇提物中劑量組（25 g/kg）、金銀花醇提物低劑量組（15 g/kg），每組12只。按照藥理實(shí)驗(yàn)規(guī)程，給藥體積是1 mL/50 g，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組小鼠灌胃給予等體積純凈水，1次/d，連續(xù)給藥7 d。最后一次給藥1 h后，除空白對(duì)照組外，其他各組在小鼠右耳正反兩面涂上10 μL二甲苯致炎，15 min后處死小鼠，剪下小鼠兩耳，在兩耳相同部位用6 mm打孔器等面積打下圓耳片，精密稱質(zhì)量，計(jì)算腫脹度和腫脹抑制率。計(jì)算公式：腫脹度（mg）=右耳質(zhì)量（mg）-左耳質(zhì)量（mg）。腫脹抑制率=[（模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度）/模型組平均腫脹度]×100%。

2.3 金銀花醇提物對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響隨機(jī)選取雄性昆明種小鼠72只，分組、給藥方法同“2.2”項(xiàng)。最后一次灌胃給藥1 h后，除空白對(duì)照組外，其他各組小鼠給予0.3%伊文思藍(lán)溶液（1 mL/100 g）尾靜脈注射，同時(shí)給予0.6%冰醋酸溶液（0.2 mL/20 g）腹腔注射；空白對(duì)照組小鼠給予生理鹽水（1 mL/100 g）尾靜脈注射，同時(shí)給予生理鹽水（0.2 mL/20 g）腹腔注射。15 min后處死小鼠，注射6 mL生理鹽水沖洗腹腔，輕揉腹部1 min，剪開小鼠腹腔吸取腹腔液，2 500 r/min離心12 min，吸取上清液至比色皿中，在590 nm處，使用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度[11]。

2.4 金銀花醇提物對(duì)角叉菜膠致小鼠足趾腫脹及踝關(guān)節(jié)的影響隨機(jī)選取雄性昆明種小鼠72只，分組、給藥方法同“2.2”項(xiàng)。最后一次灌胃給藥1 h后，除空白對(duì)照組外，其他各組小鼠右后足趾部皮下注射1%角叉菜膠溶液0.02 mL致炎，空白對(duì)照組小鼠右后足趾部皮下注射生理鹽水0.02 mL，致炎16 min后處死小鼠，剪取后雙足相同部位，稱質(zhì)量。計(jì)算公式：腫脹度（mg）=右后足趾質(zhì)量（mg）-左后足趾質(zhì)量（mg），并計(jì)算腫脹抑制率。腫脹抑制率=[（模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度）/模型組平均腫脹度]×100%。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，剖取組織，經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定脫鈣、脫水、包埋、切片、HE染片后封片，觀察踝關(guān)節(jié)病理改變情況并拍照。

2.5 金銀花醇提物對(duì)二甲苯致摘除雙側(cè)腎上腺小鼠耳腫脹的影響隨機(jī)選取雄性昆明種小鼠72只，手術(shù)前1 d用頭孢克肟（60 mg/kg）灌胃給藥。術(shù)前用120℃的壓力蒸汽對(duì)手術(shù)器械進(jìn)行滅菌15 min，用75%酒精對(duì)手術(shù)臺(tái)及手套消毒，用5%水合氯醛（10 mL/kg）對(duì)小鼠進(jìn)行麻醉，減去背上鼠毛，75%酒精對(duì)皮膚局部消毒。沿背部正中線開約0.5 cm長(zhǎng)的肌肉切口。用鑷子小心撥開切口，小心分開小鼠腹腔組織與臟器，用鑷子夾住腎臟與腎上腺之間的組織，摘除小鼠腺體。同法摘除小鼠另一側(cè)腎上腺。用棉球稍止血后縫合，涂以適量的碘伏，術(shù)后第2天以頭孢克肟灌胃給藥，術(shù)后第3天以5%葡萄糖生理鹽水溶液代替純凈水飼養(yǎng)術(shù)后小鼠[11]。之后按“2.2”項(xiàng)方法進(jìn)行小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)。

2.6 金銀花醇提物對(duì)角叉菜膠致摘除雙側(cè)腎上腺小鼠足趾腫脹，足趾MDA、NO含量和SOD活性，以及踝關(guān)節(jié)的影響取剩余雄性昆明種小鼠72只，摘除小鼠雙側(cè)腎上腺方法同“2.5”項(xiàng)。分組、給藥方法同“2.2”項(xiàng)。隨后剪碎右足，取4 mL生理鹽水浸泡[11-12]。手動(dòng)研磨勻漿后，3 000 r/min離心12 min，取離心后的上清液凍存于-20℃。使用ELISA法測(cè)定MDA、NO含量和SOD活性，實(shí)驗(yàn)操作參照試劑盒說明書。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，剖取組織，經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定脫鈣、脫水、包埋、切片、HE染片后封片，觀察踝關(guān)節(jié)病理改變情況并拍照。

2.7 金銀花醇提物對(duì)SD雄性大鼠高脂血癥的影響取SD雄性大鼠60只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、金銀花醇提物高劑量組、金銀花醇提物中劑量組、金銀花醇提物低劑量組，每組10只。除空白組對(duì)照外，其余各組大鼠以高脂飼料飼養(yǎng)并飲用自來水；空白對(duì)照組大鼠以基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)并飲用自來水。28 d后，禁食不禁水12 h，腹主動(dòng)脈取血，3 000 r/min離心10 min分離血清，按照試劑盒說明書，使用全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清中指標(biāo)TC、TG和HDL-C的含量水平。與空白對(duì)照組比較，造模大鼠體質(zhì)量、TC、TG明顯升高，HDL-C明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明大鼠高脂血癥模型造模成功。判斷模型復(fù)制成功后開始給藥，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠根據(jù)體質(zhì)量每天以10 mL/kg的量給予辛伐他汀溶液（0.4mg/mL）；金銀花醇提物高、中、低劑量組大鼠以每天10 mL/kg的量分別給予金銀花醇提物的CMC-Na溶液，40、25、15 g/kg；模型對(duì)照組和空白對(duì)照組大鼠按體質(zhì)量給予10 mL/kg的CMC-Na溶液[13-14]。每3天稱1次體質(zhì)量，28 d后，禁食不禁水12 h，腹主動(dòng)脈取血，3 000 r/min離心10 min分離血清，按照試劑盒說明書測(cè)定血清中指標(biāo)TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”（±s）表示，經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，多組比較用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié) 果

3.1 各組小鼠耳腫脹度及腫脹抑制率比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠耳腫脹度明顯升高（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物低、中、高劑量組小鼠耳腫脹度均明顯降低（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠耳腫脹度明顯升高（P＜0.05）；金銀花醇提物高、中劑量組小鼠耳腫脹度與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組、金銀花醇提物高劑量組、金銀花醇提物中劑量組、金銀花醇提物低劑量組小鼠耳腫脹抑制率分別為55.10%、53.88%、50.61%、37.55%。（見表1）

表1 各組小鼠耳腫脹度比較

3.2 各組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性明顯增加（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物低、中、高劑量組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性均明顯減輕（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性明顯增加（P＜0.05）；金銀花醇提物高、中劑量組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表2）

表2 各組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性比較（±s）

表2 各組小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型對(duì)照組比較，bP＜0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，cP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只） 給藥劑量（g/kg） 腹腔液OD值空白對(duì)照組 12 - 0.101 5±0.086 2模型對(duì)照組 12 - 0.302 8±0.129 7a陽(yáng)性對(duì)照組 12 0.005 0.130 9±0.084 8b金銀花醇提物高劑量組12 40.000 0.164 1±0.067 2b金銀花醇提物中劑量組12 25.000 0.177 8±0.095 8b金銀花醇提物低劑量組12 15.000 0.206 7±0.082 6b c

3.3 各組小鼠踝關(guān)節(jié)病理情況比較空白對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，關(guān)節(jié)腔無滲出物，滑膜細(xì)胞排列整齊；模型對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)滑膜組織結(jié)構(gòu)異常，膠原纖維排列紊亂（紅色箭頭所示），少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)（黑色箭頭所示）；陽(yáng)性對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨光滑，關(guān)節(jié)腔內(nèi)見少量滲出物，滑膜細(xì)胞整齊，見少許炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；金銀花醇提物中、低劑量組小鼠踝關(guān)節(jié)膠原纖維排列整齊（黑色箭頭所示），可見少量脂肪細(xì)胞；金銀花醇提物高劑量組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨較光滑，關(guān)節(jié)腔見少許滲出物，滑膜細(xì)胞大體整齊排列，見少許炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。（見圖1）

圖1 各組小鼠踝關(guān)節(jié)病理切片圖（HE，×200）

3.4 各組小鼠足趾腫脹度及腫脹度抑制率比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠足趾腫脹度明顯增加（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物低、中、高劑量組小鼠足趾腫脹度均明顯減輕（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠足趾腫脹度明顯增加（P＜0.05）；金銀花醇提物高、中劑量組小鼠足趾腫脹度與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組、金銀花醇提物高劑量組、金銀花醇提物中劑量組、金銀花醇提物低劑量組小鼠足趾腫脹抑制率分別為58.48%、54.08%、46.30%、20.61%。（見表3）

表3 各組小鼠足趾腫脹度比較

3.5 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠耳腫脹度及耳腫脹抑制率比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠耳腫脹度明顯升高（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物中、高劑量組小鼠耳腫脹度明顯降低（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠耳腫脹明顯升高（P＜0.05），而金銀花醇提物高、中劑量組小鼠耳腫脹度與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組、金銀花醇提物高劑量組、金銀花醇提物中劑量組、金銀花醇提物低劑量組小鼠耳腫脹度抑制率分別為56.45%、39.17%、33.79%、11.39%。（見表4）

表4 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠耳腫脹度比較

3.6 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠足趾腫脹度及腫脹度抑制率比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠足趾腫脹度明顯升高（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物中、高劑量組小鼠足趾腫脹度明顯降低（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠足趾腫脹度明顯升高（P＜0.05），而金銀花醇提物高、中劑量組小鼠足趾腫脹度與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。陽(yáng)性對(duì)照組、金銀花醇提物高劑量組、金銀花醇提物中劑量組、金銀花醇提物低劑量組小鼠足趾腫脹抑制率分別為50.42%、42.88%、36.34%、18.24%。（見表5）

表5 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠足趾腫脹度比較

3.7 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠足趾炎性部位中MDA、NO含量及SOD活性比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠足趾部位MDA、NO含量及SOD活性明顯升高（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物中、高劑量組小鼠足趾炎性部位MDA、NO含量及SOD活性均明顯降低（P＜0.05）；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，金銀花醇提物低劑量組小鼠足趾炎性部位MDA、NO含量及SOD活性均明顯升高（P＜0.05）；而金銀花醇提物高、中劑量組小鼠足趾炎性部位MDA、NO含量及SOD活性與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表6）

表6 各組摘除雙側(cè)腎上腺的小鼠足趾炎性部位MDA、NO含量及SOD活性比較（±s）

表6 各組摘除雙側(cè)腎上腺的小鼠足趾炎性部位MDA、NO含量及SOD活性比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型對(duì)照組比較，bP＜0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，cP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）MDA（nmol/L）SOD（pg/mL）NO（μmol/L）空白對(duì)照組 12 - 1.20±0.15 10.12±1.32 9.92±1.20模型對(duì)照組 12 - 2.71±0.22a 21.45±1.27b 21.67±1.25a陽(yáng)性對(duì)照組 12 0.005 1.85±0.14b 12.21±2.01a 13.91±0.82b金銀花醇提物高劑量組12 40.000 2.15±0.11b 15.99±1.20b 14.27±1.02b金銀花醇提物中劑量組12 25.000 2.26±0.13b 15.13±1.18b 16.24±1.01b金銀花醇提物低劑量組12 15.000 2.37±0.21c 14.40±1.15c 17.01±1.13c

3.8 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠踝關(guān)節(jié)病理情況比較空白對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，關(guān)節(jié)腔無滲出，滑膜細(xì)胞排列整齊；模型對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)滑膜組織結(jié)構(gòu)異常，膠原纖維排列有些紊亂，有少許炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；陽(yáng)性對(duì)照組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨光滑，關(guān)節(jié)腔內(nèi)見少量滲出物，滑膜細(xì)胞整齊，可見少許炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；金銀花醇提物高劑量組小鼠踝關(guān)節(jié)軟骨略光滑，關(guān)節(jié)腔見少許滲出物，滑膜細(xì)胞大體整齊排列，可見少許炎癥細(xì)胞；金銀花醇提物中、低劑量組小鼠踝關(guān)節(jié)膠原纖維排列整齊，可見少量脂肪細(xì)胞。高、中、低劑量金銀花醇提物對(duì)炎癥的影響，隨著金銀花醇提取物劑量的增加，癥狀有一定緩解。（見圖2）

圖2 各組摘除雙側(cè)腎上腺小鼠踝關(guān)節(jié)病理切片圖（HE，×200）

3.9 大鼠高脂血癥模型建立大鼠高脂飼料飼養(yǎng)28 d后，模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及金銀花醇提物高、中、低劑量組大鼠體質(zhì)量、TC、TG明顯高于空白對(duì)照組（P＜0.05或P＜0.01），而HDL-C明顯低于空白對(duì)照組（P＜0.05），表明大鼠高脂血癥模型造模成功。（見表7）

表7 各組大鼠體質(zhì)量增值及TC、TG、HDL-C含量比較（±s）

表7 各組大鼠體質(zhì)量增值及TC、TG、HDL-C含量比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，aP＜0.05，bP＜0.01

組別 動(dòng)物數(shù)（只）體質(zhì)量增值（g）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）空白對(duì)照組 10 102.36±11.58 1.50±0.36 0.53±0.32 0.29±0.12模型對(duì)照組 10 128.75±13.02a 5.26±1.04b 0.88±0.20a 0.24±0.10a陽(yáng)性對(duì)照組 10 126.91±10.15a 5.02±0.41b 0.82±0.11a 0.26±0.06a金銀花醇提物高劑量組 10 127.70±9.72a 5.34±0.37b 0.76±0.12a 0.27±0.08a金銀花醇提物中劑量組 10 125.98±8.63a 4.85±0.58b 0.80±0.09a 0.25±0.06a金銀花醇提物低劑量組 10 129.01±11.30a 5.41±0.42b 0.73±0.10a 0.28±0.05a

3.10 各組大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量比較與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量明顯升高（P＜0.05）；與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組和金銀花醇提物高、中、低劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量均明顯降低（P＜0.05）；金銀花醇提物高、中、低劑量組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量與陽(yáng)性對(duì)照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。6組大鼠血清HDL-C含量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表8）

表8 各組大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量比較（±s）

表8 各組大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型對(duì)照組比較，bP＜0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，cP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）空白對(duì)照組 10 - 1.48±0.12 0.46±0.15 0.38±0.09 1.98±0.12模型對(duì)照組 10 - 5.16±0.45a 0.79±0.12a 0.28±0.07 4.57±0.43a陽(yáng)性對(duì)照組 10 0.004 4.15±0.61b 0.48±0.10b 0.32±0.05 3.45±0.28b金銀花醇提物高劑量組10 40.000 4.20±0.30b 0.47±0.13b 0.32±0.09 3.43±0.41b金銀花醇提物中劑量組10 25.000 4.32±0.46b 0.43±0.11b 0.31±0.08 3.65±0.32b金銀花醇提物低劑量組10 15.000 4.41±0.32b 0.45±0.09b 0.31±0.10 3.83±0.40b

4 討 論

一氧化氮（NO）是一種重要的炎癥介質(zhì)，能夠誘導(dǎo)機(jī)體促炎因子的產(chǎn)生，如白介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等[15]。超氧化物歧化酶（SOD）具有特殊的生理活性，是生物體內(nèi)的抗氧化酶，能清除自由基。本研究通過檢測(cè)去腎上腺小鼠足趾腫脹部位炎癥因子水平發(fā)現(xiàn)，金銀花醇提物通過降低MDA、NO含量，提高SOD含量發(fā)揮抗炎作用，且抗炎作用可能依賴下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPAA）系統(tǒng)。金銀花醇提物具有明顯的抗炎作用。與空白對(duì)照組比較，高、中劑量金銀花醇提物對(duì)小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用（P＜0.05）；高、中、低劑量金銀花醇提物對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性及對(duì)角叉菜膠致小鼠足跖腫脹均有明顯抑制作用（P＜0.05）；與空白對(duì)照組比較，在摘除雙側(cè)腎上腺小鼠模型中，高、中劑量金銀花醇提物可顯著抑制二甲苯致該模型小鼠耳腫脹和角叉菜膠致該模型小鼠足跖腫脹（P＜0.05）；高、中、低劑量金銀花醇提物均能夠顯著降低足趾中MDA、NO水平和SOD活性（P＜0.05）；高、中、低劑量金銀花醇提物能夠明顯降低高血脂癥模型大鼠血清中TC、TG和LDC-C水平。提示金銀花醇提物對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥有一定的防治作用。

炎癥的發(fā)生發(fā)展過程一般分為3期，早期以毛細(xì)血管擴(kuò)張、通透性亢進(jìn)為主，中期為血小板吸附及白細(xì)胞游走，晚期為肉芽組織增生[16]。炎性反應(yīng)是由機(jī)體中多種炎癥介質(zhì)參與，炎癥因子與機(jī)體不斷斗爭(zhēng)直至達(dá)到一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的過程，而中藥是通過多途徑，多環(huán)節(jié)發(fā)揮抗炎作用的[17-19]。目前國(guó)內(nèi)外在中藥抗炎、降血脂方面而進(jìn)行的研究也越來越廣泛和深入，對(duì)于開發(fā)具有新作用靶點(diǎn)和高效低毒的新型抗炎、降血脂中藥，闡明抗炎、降血脂中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制有著重大意義。目前金銀花藥材的應(yīng)用廣泛，為了在臨床上安全有效地利用該藥材，我們對(duì)金銀花藥材提取物抗炎、降血脂作用進(jìn)行了相關(guān)研究。在前期研究工作中，我們發(fā)現(xiàn)金銀花提取物有明顯的抗炎、降血脂調(diào)節(jié)作用。金銀花醇提物能明顯降低大鼠血清中的TC、TG和LDL-C含量水平。課題組結(jié)合前期研究基礎(chǔ)推測(cè)金銀花可能含有某種或者某一類活性成分能刺激免疫系統(tǒng)、促進(jìn)血液的凈化能力，加快清除血液垃圾，對(duì)生物組織產(chǎn)生的降血脂作用起著很好的機(jī)體調(diào)節(jié)功能。

下丘腦-垂體-腎上腺（HPAA）系統(tǒng)是人體重要的神經(jīng)內(nèi)分泌軸，其對(duì)機(jī)體的炎癥具有重要的調(diào)節(jié)作用[20-22]，本研究發(fā)現(xiàn)，金銀花醇提取物具有明顯的抑制小鼠足趾腫脹、改善機(jī)體炎癥作用。本實(shí)驗(yàn)通過建立去雙側(cè)腎上腺小鼠模型，在切除機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響下，考察金銀花醇提取物對(duì)小鼠耳腫脹度、小鼠足趾腫脹度的影響以及SOD、MDA、NO水平的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金銀花醇提取物對(duì)小鼠耳腫脹度、足趾腫脹度有一定的抑制作用，且小鼠足趾部位MDA、SOD、NO水平發(fā)生明顯的變化。金銀花醇提物具有抗炎活性，其抗炎作用的發(fā)揮可能依賴下丘腦-垂體-腎上腺（HPAA）系統(tǒng)，同時(shí)金銀花醇提物的抗炎作用機(jī)制與降低MDA、NO含量和SOD活性有關(guān)。