林宗斌 朱靜文 朱崢 邵自強(qiáng) 劉景全 孫仁華

重癥監(jiān)護(hù)病房超過(guò)50%的急性腎損傷（acute kidney injury,AKI）與膿毒癥有關(guān)[1]。脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）引起的腎小管上皮細(xì)胞損傷是膿毒癥AKI發(fā)生的關(guān)鍵病理生理學(xué)環(huán)節(jié)，但其損傷機(jī)制不明[2]。干擾素調(diào)節(jié)因子1（interferon regulatory factor 1,IRF1）是一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子，近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，IRF1可以對(duì)細(xì)菌感染產(chǎn)生響應(yīng)，調(diào)控一系列與炎性反應(yīng)、細(xì)胞增殖、凋亡相關(guān)的基因表達(dá)[3]。有研究顯示，IRF1在LPS及缺血-再灌注等原因?qū)е碌钠鞴贀p傷過(guò)程中發(fā)揮著一定的作用[4]。右美托咪定（dexmedetomidine，DEX）是一種鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜藥物，廣泛應(yīng)用于手術(shù)麻醉。近期研究表明，DEX還具有減輕炎癥及調(diào)控免疫功能的作用。一些研究發(fā)現(xiàn)，DEX可以減輕包括膿毒癥引起的多種器官損傷[5]。但是DEX對(duì)膿毒癥患者臟器功能保護(hù)作用的機(jī)制尚不明確。本研究通過(guò)分析LPS及DEX處理后腎小管上皮細(xì)胞RNA測(cè)序的結(jié)果，探討DEX在減輕LPS誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞損傷中的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng) 人腎小管上皮細(xì)胞（human kidney-2,HK-2）購(gòu)自武漢普諾賽生命科技有限公司。細(xì)胞培養(yǎng)采用添加10%FBS及1%青-鏈霉素的最低必需培養(yǎng)基（minimum essential medium,MEM），培養(yǎng)基購(gòu)自武漢普諾賽生命科技有限公司（批號(hào)：PM150410P，規(guī)格：500 ml），培養(yǎng)環(huán)境為濕度恒定的37℃、5%CO2培養(yǎng)箱。2～3 d使用胰酶消化傳代1次，胰酶購(gòu)自美國(guó)Gibco公司（批號(hào)：25200-056，規(guī)格：250 ml），取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 高通量RNA測(cè)序 使用10 μmol DEX（揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號(hào)：H20183220，規(guī)格：0.1 mg）或10 μg/ml LPS（上海 MedChemExpress公司，批號(hào)：HYD1056，規(guī)格：5 mg）處理HK-2 24 h，以未經(jīng)任何處理的細(xì)胞作為對(duì)照細(xì)胞。使用Trizol試劑（美國(guó)Thermofisher公司，批號(hào)：15596018，規(guī)格：200 ml）提取細(xì)胞總RNA樣本，通過(guò)HiSeq 2500系統(tǒng)進(jìn)行RNA測(cè)序。

1.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 為上調(diào)細(xì)胞中的IRF1，以pcDNA3.0為骨架構(gòu)建IRF1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒，命名為pcDNA3.0-IRF1。使用pcDNA3.0空質(zhì)粒作為陰性轉(zhuǎn)染對(duì)照。轉(zhuǎn)染時(shí)質(zhì)粒濃度為2 μg/ml。為下調(diào)細(xì)胞中的IRF1，設(shè)計(jì)合成針對(duì)IRF1的小干擾RNA（siRNA），命名為siRNAIRF1，使用不針對(duì)任何序列的siRNA作為陰性轉(zhuǎn)染對(duì)照。轉(zhuǎn)染試劑采用Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染試劑（美國(guó)ThermoFisher公司，批號(hào)：L3000015，規(guī)格：1.5 ml）。

1.2.3 細(xì)胞分組 為探討IRF1在DEX減輕LPS誘導(dǎo)的HK-2損傷過(guò)程中的作用，根據(jù)不同轉(zhuǎn)染或藥物處理方案將細(xì)胞分組：轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)陰性對(duì)照質(zhì)粒為pcDNA3.1組、轉(zhuǎn)染IRF1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒為pcDNA3.1-IRF1組、未經(jīng)任何處理的細(xì)胞為空白對(duì)照組、轉(zhuǎn)染siRNA對(duì)照同時(shí)LPS處理24 h為L(zhǎng)PS+siRNA組、轉(zhuǎn)染IRF1 siRNA同時(shí)LPS處理24 h為L(zhǎng)PS+siRNA-IRF1組、LPS處理同時(shí)PBS處理為L(zhǎng)PS+PBS組、轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)陰性對(duì)照質(zhì)粒同時(shí)接受LPS及DEX處理24 h為L(zhǎng)PS+DEX+pcDNA3.1組、轉(zhuǎn)染IRF1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒同時(shí)接受LPS及DEX處理24 h為L(zhǎng)PS+DEX+pcDNA3.1-IRF1組。

1.2.4 IRF-1 mRNA水平檢測(cè) 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）法，使用Trizol試劑提取各種處理后細(xì)胞的總RNA樣本，利用Hifair?Ⅱ1st Strand cDNA Synthesis Kit試劑盒（上海翌圣生物科技股份有限公司，批號(hào)：11119ES60，規(guī)格：100次）進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄以合成cDNA。將合成的cDNA使用Hieff UNICON?Power qPCR SYBR Green Master Mix試劑盒（上海翌圣生物科技股份有限公司，批號(hào)：11195ES03，規(guī)格：1 ml）進(jìn)行定量擴(kuò)增。所有PCR反應(yīng)體系及反應(yīng)條件參照試劑盒說(shuō)明書。IRF1的正向引物序列為5'-ATGCCCATCACTCGGATGC-3'，反向引物序列為5'-CCCTGCTTTGTATCGGCCTG-3'。以GAPDH為內(nèi)參，其正向引物為5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3'，反向引物為5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'。使用 2-ΔΔCT法計(jì)算靶基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.2.5 IRF-1蛋白水平檢測(cè) 采用蛋白質(zhì)印跡法，使用含有蛋白酶抑制劑的RIPA裂解液（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：P0013B，規(guī)格：100 ml）提取細(xì)胞的總蛋白樣本。使用BCA蛋白定量試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：P0012S，規(guī)格：200次）定量后，與上樣緩沖液混合，98℃變性10 min。將樣品等量上樣于SDS-PAGE膠，100 V恒壓電泳1 h。將蛋白轉(zhuǎn)膜至PVDF膜，轉(zhuǎn)膜條件為90 V恒壓45 min。轉(zhuǎn)膜后，使用5%脫脂牛奶室溫封閉1 h，然后與1∶1 000稀釋的兔抗人IRF1多克隆抗體（美國(guó)Cell Signaling Technology公司，批號(hào)：8478S，規(guī)格：20 μl）室溫孵育4 h。使用1∶5 000的GAPDH一抗作為內(nèi)參一抗（美國(guó)Cell Signaling Technology公司，批號(hào)：5174S，規(guī)格：20 μl）。PBST洗去一抗后，與1∶2 000辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗兔lgG二抗（美國(guó)Cell Signaling Technology公司，批號(hào)：7074S，規(guī)格：1 ml）室溫孵育2 h，ECL超敏顯色液（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：P0018FS，規(guī)格：100 ml）顯影、拍照。

1.2.6 細(xì)胞活性檢測(cè) 將各組細(xì)胞種植于96孔板，密度為5 000個(gè)/孔。貼壁24 h后，進(jìn)行對(duì)應(yīng)的各種轉(zhuǎn)染或藥物處理，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8（cell counting Kit-8,CCK-8）細(xì)胞活性試劑（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：C0037，規(guī)格：100次）檢測(cè)細(xì)胞活性，檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)為0、24、48、72 h。0 h為細(xì)胞貼壁后未處理時(shí)。檢測(cè)時(shí)棄去原有培養(yǎng)基，加入100 μl 1∶10稀釋的CCK-8試劑，孵育1 h后使用酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTech公司，型號(hào)：ELX808）檢測(cè)450 nm處吸光度。相對(duì)細(xì)胞活性=其他時(shí)間點(diǎn)吸光度/0 h吸光度，計(jì)算各組細(xì)胞活性。

1.2.7 細(xì)胞增殖檢測(cè) 將各組細(xì)胞種植于96孔板，密度為5 000個(gè)/孔。貼壁24 h后使用BeyoClick EdU-488試劑盒（上海碧云天生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：C0071s，規(guī)格：100次）進(jìn)行EdU染色并拍照，EdU染色陽(yáng)性細(xì)胞為增殖細(xì)胞。

1.2.8 細(xì)胞凋亡檢測(cè) 將各組細(xì)胞種植于96孔板，密度為5 000個(gè)/孔。貼壁24 h后使用RealTime-Glo Apoptosis試劑盒（北京普洛麥格生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：JA1000，規(guī)格：100次）檢測(cè)凋亡情況。反應(yīng)體系和方案按照試劑盒說(shuō)明書，使用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀（瑞士Tecan公司，型號(hào)：SPARK 10M）以凋亡信號(hào)值記錄各組讀數(shù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以表示，多組比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LPS及DEX處理后HK-2細(xì)胞的RNA測(cè)序結(jié)果LPS處理后共測(cè)出1 934個(gè)顯著上調(diào)的基因（表達(dá)倍數(shù)＞1.5，P＜0.05），463個(gè)顯著下調(diào)的基因（表達(dá)倍數(shù)＜-1.5，P＜0.05），見(jiàn)圖1a；按照顯著性排名前10位的mRNA見(jiàn)圖1b。DEX處理后的HK-2細(xì)胞共測(cè)出3 712個(gè)顯著上調(diào)的基因（表達(dá)倍數(shù)＞1.5，P＜0.05），1 179個(gè)顯著下調(diào)的基因（表達(dá)倍數(shù)＜-1.5，P＜0.05），見(jiàn)圖1c；按照顯著性排名前10位的mRNA見(jiàn)圖1d。其中IRF1在LPS處理后的細(xì)胞中上調(diào)（表達(dá)倍數(shù)=6.65，P＜0.05），在DEX處理后的細(xì)胞中下調(diào)（表達(dá)倍數(shù)=-4.18，P＜0.05），見(jiàn)圖1e。

圖1 LPS及DEX處理后HK-2的RNA測(cè)序結(jié)果（a：LPS處理后HK-2的mRNA表達(dá)譜；b：LPS處理后變化顯著性排名前10位的mRNA；c：DEX處理后HK-2的mRNA表達(dá)譜；d：DEX處理后變化顯著性排名前10位的mRNA；e：LPS及DEX處理后的共同差異表達(dá)基因?yàn)镮RF1）

2.2 LPS及DEX處理后HK-2細(xì)胞IRF1 mRNA表達(dá)水平比較 LPS處理后的IRF1 mRNA水平為2.69±0.33，高于對(duì)照組的1.00±0.12（P＜0.05），而DEX處理后的IRF1 mRNA水平為0.51±0.09，低于對(duì)照組的1.00±0.11（P＜0.05）。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示，LPS促進(jìn)IRF1的蛋白表達(dá)，而DEX抑制IRF1的蛋白表達(dá)，見(jiàn)圖2。

圖2 LPS及DEX處理后HK-2的IRF1 mRNA表達(dá)水平比較（a：LPS處理后IRF1 mRNA水平與對(duì)照組比較；b：DEX處理后IRF1 mRNA水平與對(duì)照組比較；c：LPS及DEX處理后IRF1蛋白表達(dá)電泳圖）

2.3 HK-2轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)質(zhì)粒及siRNA后IRF1 mRNA水平及蛋白水平比較 轉(zhuǎn)染IRF1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后，HK-2細(xì)胞IRF1 mRNA水平由1.00±0.12升高至22.00±3.61（P＜0.05）。轉(zhuǎn)染IRF1的siRNA后，細(xì)胞內(nèi)IRF1 mRNA水平由1.00±0.14降低至0.12±0.02（P＜0.05）。轉(zhuǎn)染IRF1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后，IRF1的蛋白水平升高，轉(zhuǎn)染IRF1的siRNA后，IRF1的蛋白水平降低，見(jiàn)圖3。

圖3 HK-2轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)質(zhì)粒及siRNA后IRF1 mRNA水平及蛋白水平比較（a：HK-2轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)質(zhì)粒后IRF1 mRNA水平；b：HK-2轉(zhuǎn)染siRNA后IRF1 mRNA水平；c：轉(zhuǎn)染后IRF1蛋白表達(dá)電泳圖；與陰性轉(zhuǎn)染對(duì)照組比較，*P＜0.05）

2.4 改變IRF1水平后HK-2細(xì)胞活性、增殖及凋亡指標(biāo)的比較 與pcDNA3.1組比較，pcDNA3.1-IRF1組72 h細(xì)胞活性降低（2.10±0.02比 1.56±0.16，P＜0.05），見(jiàn)圖4a。EdU染色顯示，pcDNA3.1-IRF1組24 h細(xì)胞增殖減少，見(jiàn)圖4b。pcDNA3.1-IRF1組24 h的凋亡信號(hào)值為62 183.26±7 585.39，高于pcDNA3.1組的20 523±2 051（P＜0.05），見(jiàn)圖4c。LPS+siRNA組72 h細(xì)胞活性為0.65±0.08，低于空白對(duì)照組的1.91±0.21（P＜0.05），LPS+siRNA-IRF1組 72 h細(xì)胞活性為1.23±0.13，高于LPS+siRNA組（P＜0.05），見(jiàn)圖4d。Edu染色顯示，LPS+siRNA組24 h的細(xì)胞增殖減少，LPS+siRNA-IRF1細(xì)胞增殖高于LPS+siRNA組，見(jiàn)圖4e。LPS+siRNA組24 h的細(xì)胞凋亡信號(hào)值為85 233.59±7 952.23，高于空白對(duì)照組的32 100.02±4 253.63（P＜0.05），LPS+siRNA-IRF1組的24 h細(xì)胞凋亡信號(hào)值（62 187.24±8 742.68）低于LPS+siRNA組（P＜0.05），見(jiàn)圖4f。

圖4 改變IRF1水平后HK-2細(xì)胞增殖及凋亡指標(biāo)的比較（a：IRF1過(guò)表達(dá)后不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞活性比較；b：IRF1過(guò)表達(dá)后細(xì)胞增殖比較的EdU染色熒光圖；c：IRF1過(guò)表達(dá)后細(xì)胞凋亡比較；d：LPS及IRF1敲減后的細(xì)胞活性比較；e：LPS及IRF1敲減后細(xì)胞增殖比較的EdU染色熒光圖；f：LPS及IRF1敲減后細(xì)胞凋亡的比較；與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與陰性轉(zhuǎn)染對(duì)照組比較，△P＜0.05）

2.5 DEX及LPS處理后HK-2細(xì)胞活性、增殖及凋亡指標(biāo)的比較 空白對(duì)照組72 h細(xì)胞活性為2.53±0.23，LPS+PBS組為0.87±0.12；LPS+DEX+pcDNA3.1組72 h細(xì)胞活性為1.78±0.20，高于LPS+PBS組（P＜0.05）；LPS+DEX+pcDNA3.1-IRF1組72 h細(xì)胞活性為1.22±0.12，低于LPS+DEX+pcDNA3.1組（P＜0.05），見(jiàn)圖5a。EdU染色結(jié)果顯示，LPS+PBS組細(xì)胞增殖受到抑制，而LPS+DEX+pcDNA3.1組增殖得以部分恢復(fù)，LPS+DEX+pcDNA3.1-IRF1組增殖再次被抑制，見(jiàn)圖5b?？瞻讓?duì)照組24 h細(xì)胞凋亡信號(hào)值為29 000.68±3 212.55，LPS+PBS組24h細(xì)胞凋亡信號(hào)值為98 521.00±456.8.73；LPS+DEX+pcDNA3.1組24h細(xì)胞凋亡信號(hào)值為55254.64±6 211.53，低于LPS+PBS組（P＜0.05）；LPS+DEX+pcDNA3.1-IRF1組24 h細(xì)胞凋亡信號(hào)值為74 524.63±8 563.66，高于LPS+DEX+pcDNA3.1組（P＜0.05），見(jiàn)圖5c。

圖5 DEX及LPS處理后HK-2細(xì)胞增殖及凋亡指標(biāo)的比較（a：LPS處理?xiàng)l件下，DEX及IRF1過(guò)表達(dá)后不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞活性比較；b：LPS處理?xiàng)l件下，DEX及IRF1過(guò)表達(dá)后細(xì)胞增殖的EdU染色熒光圖；c：LPS處理?xiàng)l件下，DEX及IRF1過(guò)表達(dá)后細(xì)胞凋亡比較；與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與PBS對(duì)照組比較，△P＜0.05；與pcDNA3.1空質(zhì)粒相比較，▲P＜0.05）

3 討論

目前對(duì)于膿毒癥AKI的防治提倡“提高預(yù)防意識(shí)”“提高整體觀念”“動(dòng)態(tài)評(píng)估”及“早期干預(yù)”[6]。腎小管上皮細(xì)胞是腎臟結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)，探討膿毒癥過(guò)程中腎小管上皮細(xì)胞損傷的分子機(jī)制對(duì)膿毒癥AKI的防治具有較大的臨床應(yīng)用價(jià)值[7]。越來(lái)越多的證據(jù)表明，DEX具有應(yīng)用于膿毒癥器官保護(hù)的潛力[8]，但在實(shí)現(xiàn)其在膿毒癥AKI治療的臨床應(yīng)用之前，需要揭示DEX減輕膿毒癥引起的腎小管上皮細(xì)胞損傷的機(jī)制。本研究圍繞上述科學(xué)問(wèn)題進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DEX通過(guò)介導(dǎo)IRF1的表達(dá)變化減輕膿毒癥過(guò)程中LPS對(duì)腎小管上皮細(xì)胞的損傷。

IRF1編碼的蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，參與先天性和獲得性免疫應(yīng)答的基因激活；同時(shí)參與機(jī)體對(duì)病毒和細(xì)菌反應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞增殖、凋亡、免疫反應(yīng)和DNA損傷反應(yīng)中發(fā)揮作用[9]。近期的證據(jù)提示過(guò)高的IRF1參與LPS引起的細(xì)胞損傷。比如Yan等[10]發(fā)現(xiàn)IRF1調(diào)控LPS誘導(dǎo)的血管細(xì)胞粘附分子-1表達(dá)，引起內(nèi)皮細(xì)胞的損傷；Yokota等[11]的研究發(fā)現(xiàn)IRF1通過(guò)產(chǎn)生IL-15/IL-15Rα促進(jìn)肝移植后肝細(xì)胞的缺血/再灌注損傷。Deng等[12]的研究提出IRF1的過(guò)度激活參與LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞線粒體損傷和氧化應(yīng)激反應(yīng)。還有研究發(fā)現(xiàn)，胡椒堿可以降低巨噬細(xì)胞中的IRF1水平，從而降低LPS造成的損傷[13]；本研究發(fā)現(xiàn)IRF1的過(guò)表達(dá)可以抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)凋亡，提示過(guò)高的IRF1可以引起細(xì)胞損傷。敲減IRF1后，LPS引起的腎小管上皮細(xì)胞損傷得以減輕。因此，本研究認(rèn)為L(zhǎng)PS可能通過(guò)上調(diào)IRF1來(lái)發(fā)揮腎小管上皮細(xì)胞損傷功能。

DEX對(duì)呼吸功能無(wú)抑制作用，并能保持患者的易喚醒狀態(tài)，除鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜外，還能抗焦慮、穩(wěn)定循環(huán)等作用。如能將該藥用于膿毒癥器官保護(hù)，勢(shì)必能擴(kuò)大其臨床價(jià)值。DEX對(duì)膿毒癥器官保護(hù)的作用已經(jīng)在心臟、肝臟等器官中得到了證實(shí)[14-15]。DEX對(duì)膿毒癥條件下腎臟的保護(hù)作用機(jī)制主要包括DEX能夠減輕炎癥反應(yīng)，減輕氧化應(yīng)激、抑制細(xì)胞凋亡以及促進(jìn)細(xì)胞自噬。如Zhao等[16]發(fā)現(xiàn)DEX通過(guò)抑制PI3K/AKT/mTOR通路增強(qiáng)自噬抑制LPS介導(dǎo)的AKI。Feng等[5]的團(tuán)隊(duì)指出DEX通過(guò)GSK-3β/Nrf2信號(hào)通路抑制炎癥和氧化應(yīng)激，改善LPS誘導(dǎo)的大鼠AKI。Yang等[17]基于患者的研究發(fā)現(xiàn)DEX灌注保護(hù)了膿毒癥休克患者的腎功能。這些研究多關(guān)注腎功能整體水平，較少有研究基于腎小管上皮細(xì)胞這個(gè)層面。本研究利用體外細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)DEX抑制IRF1水平，而過(guò)表達(dá)IRF1抵消了DEX的保護(hù)功能。所以DEX可以通過(guò)抑制IRF1的水平發(fā)揮對(duì)腎小管上皮細(xì)胞的保護(hù)作用。盡管本研究發(fā)現(xiàn)IRF1在DEX及LPS處理后腎小管上皮細(xì)胞中存在表達(dá)變化，并初步分析了IRF1扮演的功能角色，證實(shí)了IRF1介導(dǎo)了DEX的腎小管上皮細(xì)胞保護(hù)作用，但是本研究未能揭示IRF1發(fā)揮作用的分子機(jī)制，有待未來(lái)進(jìn)一步研究。

綜上所述，LPS誘導(dǎo)的腎臟上皮細(xì)胞損傷過(guò)程中存在IRF1的表達(dá)上調(diào)，IRF1對(duì)腎小管上皮細(xì)胞增殖和凋亡具有調(diào)控作用。DEX處理可以降低小管上皮細(xì)胞中的IRF1表達(dá)，其可通過(guò)抑制IRF1減輕膿毒癥誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞損傷的作用。本研究對(duì)DEX的器官保護(hù)作用做出了分子機(jī)制上的解釋，對(duì)DEX應(yīng)用于膿毒癥導(dǎo)致的器官損傷的防治提供了依據(jù)。