耿順菊，張家圖，趙麗紅，張建云，黃世猛，馬秋剛

(中國農業(yè)大學 動物科學技術學院，動物營養(yǎng)學國家重點實驗室，北京 100193)

0 引言

大午金鳳是由國家自主培育的世界首個羽色自別雌雄粉殼蛋雞新品種，其紅羽粉殼蛋的獨特優(yōu)勢和優(yōu)秀的生產性能在養(yǎng)殖戶中形成了良好的口碑。家禽養(yǎng)殖過程中飼糧蛋白質水平的把控至關重要，其不僅會影響育雛期和育成期的生長發(fā)育，還會對后續(xù)生產性能造成相應的影響。育雛期對粗蛋白質需要量在整個生長周期內最高[1]，但目前由于季節(jié)、氣候、收割和加工方式等原因造成我國蛋白質飼料資源的極度短缺，在一段時間內仍需依賴進口維持基本需求，進而造成飼養(yǎng)成本大幅度上漲。在此背景下低粗蛋白質日糧和氨基酸平衡技術的開發(fā)顯得尤為重要，鑒于其是近年來培育的新品種，且大午金鳳商品代育雛期蛋白質需要量的研究報道較少。因此，本試驗通過研究不同蛋白質水平對大午金鳳商品代蛋雞育雛期血清中常規(guī)生理生化和免疫機能的影響，研究粗蛋白質在日糧中的適宜添加量，旨在為大午金鳳蛋雞飼養(yǎng)標準的制訂提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗選取1日齡體況健康、體重和脛長均勻度一致的大午金鳳商品代蛋雞384只，采用單因素試驗設計，隨機分為4個處理組，每個處理6個重復，每個重復16只雞，各處理組飼糧CP水平(實測值)分別為17.36%、18.44%、19.39%和20.02%。試驗期采用玉米-豆粕型顆粒飼料，不同處理組的飼糧組成及營養(yǎng)成分含量見表1，其他營養(yǎng)指標均滿足NY/T 33-2004[2]的要求。本試驗采用封閉式雞舍籠養(yǎng)，雞舍溫濕度滿足雛雞飼養(yǎng)要求，自由采食和飲水，每天飼喂4次，飼養(yǎng)試驗場所由中國農業(yè)大學涿州試驗基地提供，試驗期42 d。

1.2 測定指標及方法

1.2.1 血清中常規(guī)生理生化指標檢測。在蛋雛雞的14日齡和42日齡時，每個重復隨機挑選2只雞，利用翅靜脈采血的方法進行血液采集，3 500 r·min-1離心15 min，吸取上清液轉移至1.5 mL離心管內，保存于-80 ℃待后續(xù)檢測分析[3]。采用日立7600全自動血清生化分析儀(HITACHI7600，日本)，對血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量以及堿性磷酸酶(ALP)活性進行檢測。

1.2.2 血清中免疫球蛋白含量檢測。血清樣本采集方法同上。根據北京利德曼提供的通用型ELISA試劑盒，采用免疫比濁法分別對血清中免疫球蛋白IgA(貨號：IG7435)、IgM(貨號：IG7437)、IgG(貨號：IG7436)的含量進行檢測(北京利德曼生化股份有限公司，中國)。

1.3 數據統(tǒng)計分析。

使用SAS 9.0統(tǒng)計軟件對數據進行GLM分析和Duncan氏法多重比較，血液各項指標數據以重復作為試驗單位，對差異顯著數據進行進行二次曲線或者折線擬合，進而比較分析出不同CP水平對大午金鳳育雛期商品代蛋雞血液相關指標的影響。結果用平均值(mean)和標準誤(SE)表示，以P<0.05表示差異顯著，并具有統(tǒng)計學意義。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

2 結果與分析

2.1 飼糧中不同粗蛋白質水平對蛋雛雞血清與蛋白消化代謝相關指標的影響

由表2可知，育雛期飼糧CP水平對14和42日齡大午金鳳蛋雞TP、ALB和GLB無顯著影響，然而，由表可知其中對照組(17.36% CP)以上指標的數值均高于其他處理組；與對照組和18.44%蛋白組相比，20.02%蛋白組中堿性磷酸酶含量呈現(xiàn)顯著增加趨勢(P<0.05)。除此之外，在第14日齡時，20.02%蛋白組中ALP含量顯著高于19.39%蛋白組(P<0.05)，但至42日齡時19.39%蛋白組中ALP含量卻顯著高于其余三個處理組(P<0.05)。本試驗結果表明育雛期(0～42日齡)飼糧添加不同水平的CP對14和42日齡大午金鳳蛋雞蛋白質消化代謝相關的部分血液生理生化指標(TP、ALB和GLB)無顯著影響(P>0.05)，同時，育雛期CP水平顯著影響大午金鳳14和42日齡血清中堿性磷酸酶(ALP)含量(P<0.05)。

表2 飼糧蛋白質水平對14日齡和42日齡蛋雛雞血液免疫指標的影響

2.2 飼糧中不同粗蛋白質水平對蛋雛雞免疫機能的影響

由表3可知，在第14日齡時，隨著飼糧CP水平的增加各處理組數值雖無明顯差異(P>0.05)，但相比之下對照組的IgA、IgM和IgG在數值上高于其他各組；在第42日齡，隨著飼糧中添加CP水平增加，大午金鳳蛋雞血清中IgM和IgG有顯著差異性變化(P<0.05)；與對照組(17.36% CP)相比，19.39%、20.02% CP組IgM顯著降低(P<0.05)；除此之外，在第42日齡，對照組和19.39%蛋白組血清IgG含量顯著高于18.44%蛋白組(P<0.05)，其中19.39%蛋白組含量最高。結果表明，育雛期(0～42日齡)飼糧添加不同水平的CP對第14日齡大午金鳳蛋雞的血清免疫指標無顯著影響(P>0.05)，但對第42日齡大午金鳳蛋雞的IgM和IgG兩項指標有顯著性影響(P<0.05)。

3 討論

3.1 飼糧中不同粗蛋白質水平對蛋雛雞血清中蛋白消化代謝相關指標的影響

血液生化指標不僅能夠反映動物機體內某些營養(yǎng)素的吸收分布及含量情況，還可以反映動物體內代謝和生理狀況，同時和動物機體的健康與疾病也有著緊密的聯(lián)系[4]。血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)通常作為反應機體肝臟蛋白質合成能力的關鍵指標[5]，同時也可反映出機體蛋白代謝狀況。TP的含量可作為反映機體感染、炎癥反應及免疫疾病等的重要信息，同時也與動物合成CP呈正相關[6]，其在機體內的含量可以間接對日糧中蛋白質的添加量以及蛋白質在動物體內的消化情況進行有效反饋。張思軒等[7]研究發(fā)現(xiàn)，在氨基酸平衡的條件下日糧蛋白質水平降低1%～3%未對血清TP含量產生顯著影響，與本文結果類似。

堿性磷酸酶(ALP)作為機體反映肝臟能否正常發(fā)揮功能的重要指標，其本質屬于酶蛋白，由成骨細胞所分泌，主要存在于肝臟、骨骼、腸道粘膜細胞中[8]。當機體肝細胞發(fā)生受損或代謝障礙時，ALP等肝功能指標數值會明顯上升[5]。陳冬梅等[9]研究認為當血清磷濃度低時，骨組織的堿性磷酸酶釋放量增加。而19.39%蛋白組血清磷濃度低于其他處理組，可能是該起骨組織的堿性磷酸酶釋放量增加至血液中而使該組血清ALP含量升高的原因。李琴等[10]研究指出，隨著飼糧粗蛋白質水平的升高，血清ALP水平顯著增加。依據本試驗結果，隨著飼糧中CP水平的增加，在14日齡和42日齡，蛋雞血清中ALP含量呈現(xiàn)線性增加，例如，在14日齡，飼糧中20.02%蛋白組血清堿性磷酸酶含量顯著高于17.36%、18.44%和19.39%蛋白組。同時，在42日齡，與17.36%蛋白組相比，飼糧中19.39%蛋白組血清堿性磷酸酶含量顯著增加。與陳國宏等[11]關于新?lián)P州雞血漿中堿性磷酸酶含量隨日齡的增長而呈下降趨勢的研究結果存在差異。這可能是由于堿性磷酸酶的活性受動物品種、性別、年齡、同工酶類型和采食前后等諸多因素影響[12]。本試驗結果表明，飼糧中添加高水平的蛋白質，可能會導致蛋雞肝臟中蛋白質代謝負擔加重，造成肝臟功能損傷，從而引起血清中堿性磷酸酶含量增加。

表3 飼糧蛋白質水平對14日齡和42日齡蛋雛雞免疫機能的影響

3.2 飼糧中不同粗蛋白質水平對蛋雛雞免疫機能的影響

免疫球蛋白作為血清中的主要抗體，即在體液免疫中發(fā)揮重要作用，又在免疫反應過程中擔任重要組成部分[13]。家禽體內的免疫球蛋白主要包括IgG、IgM和IgA三類[14]，其主要有參與機體免疫、中和毒素、清除衰老和凋亡細胞、調節(jié)機體代謝等方面功能[15]。血清中IgA、IgM和IgG含量高低可反映動物機體內體液免疫的強弱[16]，其中IgA在局部粘膜免疫應答過程中發(fā)揮重要作用；IgM主要出現(xiàn)于初次免疫應答，產生最早且抗體效價高；而IgG主要集中于血液，是再次免疫應答的主要抗體。Klemperer研究發(fā)現(xiàn)，家禽體內的免疫機能可通過免疫球蛋白自血清轉移至蛋黃內的方式傳遞給后代。本研究發(fā)現(xiàn)育雛初期不同處理組的免疫球蛋白含量無顯著差異，可能是由于前期對母體所傳遞的免疫機能進行消耗，因此14日齡時不同水平蛋白質組間并無差異性。而育雛后期由于機體發(fā)育，不同蛋白水平下血清免疫球蛋白含量也逐漸出現(xiàn)差異性變化，但仍存在個體差異，可能不同個體對蛋白吸收情況的不同，導致飼糧CP含量與IgG未呈現(xiàn)出線性關系。本文試驗結果顯示，飼糧CP水平對42日齡大午金鳳蛋雞血清中IgM和IgG有顯著影響；17.36%和18.44%蛋白組IgM顯著高于其余兩個高蛋白組；同時，在本試驗中，18.44%蛋白組接近飼養(yǎng)標準推薦量，與該處理組相比，飼糧中17.36%和19.39%蛋白組血清中IgG含量顯著增加，其中19.39%蛋白組的IgG含量達到10.84 g/L。由于IgG在機體抵抗感染和機體損傷中扮演十分重要的角色，當機體蛋白水平過高，誘導機體蛋白質代謝負擔加重，誘發(fā)代謝失調和炎癥損傷，從而引起機體免疫機能過度激活，該過程需要大量IgG發(fā)揮相應功能。同時，以上結果也表明飼糧蛋白水平較低的情況下，機體可以通過不同途徑獲取較高水平的免疫球蛋白含量，從而幫助機體構建牢固的免疫屏障。由此可見，粗蛋白質水平在17.36%情況下，大午金鳳蛋雛雞的機體代謝和免疫機能有所提高，這也為其發(fā)揮最佳生長性能提供扎實基礎。

4 結論

(1) 在日糧氨基酸平衡條件下，降低粗蛋白水平有利于防止家禽血液中堿性磷酸酶含量的增加，降低機體蛋白質代謝負擔，結合數據可知17.36%蛋白組較其他處理組更有利于后期產蛋性能的發(fā)揮。

(2) 在日糧氨基酸平衡條件下，降低粗蛋白水平也可以保證機體免疫機能處于較高水平，有利于提高蛋雞免疫屏障的構建，由此，推測飼糧中粗蛋白水平為17.36%時，大午金鳳商品代蛋雛雞具有較好的免疫潛能，從而為發(fā)揮最佳生長性能提供扎實基礎。