馬世鵬，岳家琪，吳仙花，馬寧，趙莉，李博寧，楊春，許遲

（寧夏大北農(nóng)科技實(shí)業(yè)有限公司，寧夏 銀川 750200）

犢牛一般分為哺乳期和斷奶期犢牛，其生理功能處于急劇變化的階段，身體各個(gè)系統(tǒng)發(fā)育不完全，尤其是消化和免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫力低下，易受到外界病菌、病毒、環(huán) 境等因素的影響，引發(fā)腹瀉、感冒等疾病[1]。而犢牛的生長 發(fā)育情況直接影響其后期的生產(chǎn)性能。

益生菌（probiotics）是一種有益于動(dòng)物機(jī)體生理作用的活菌微生物，能夠促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體對(duì)營養(yǎng)的消化吸收以及動(dòng)物機(jī)體發(fā)育，具有調(diào)節(jié)胃腸道內(nèi)菌群平衡、抑制致病菌、提高免疫能力、維持腸道健康等多種功效[2]。由于不同菌屬益生菌間存在一定協(xié)同作用，研究熱點(diǎn)現(xiàn)已從單一益生菌向復(fù)合型益生菌方向發(fā)展。益生菌在動(dòng)物生產(chǎn)中具有積極作用，日糧中添加益生菌有助于增加肉雞體重，降低料重比，提高產(chǎn)蛋性能[3]。陳國福等[4]研究表明，日糧中添加益生菌制劑能夠降低育肥豬料重比，降低血清尿素氮含量，提高總蛋白含量。杜瑞[5]研究表明，益生菌能夠提高肉羊的增重和腸道菌群α的多樣性，增大眼肌面積。趙飛燕[6]研究表明，添加益生菌制劑能夠改善奶牛產(chǎn)奶的奶品質(zhì)、提高產(chǎn)奶量等積極作用。目前，益生菌應(yīng)用于犢牛的相關(guān)研究較少，本試驗(yàn)探究復(fù)合益生菌對(duì)奶犢牛生長性能和血液生化指標(biāo)的影響，為其在動(dòng)物生產(chǎn)養(yǎng)殖中的合理利用提供參考，以提高犢牛健康水平，提高牛場(chǎng)養(yǎng)殖效益。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)合益生菌由浙江大學(xué)葉均安老師提供。復(fù)合益生菌中含有地衣芽孢桿菌（活菌數(shù)≥1.0×109CFU/g）、枯草芽孢桿菌（活菌數(shù)≥2.0×109CFU/g）和米曲霉（活菌數(shù)≥2.0×104CFU/g）。

試驗(yàn)動(dòng)物為平均出生30日齡的荷斯坦母犢牛。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)在2020年11月于賀蘭縣寧夏合牧農(nóng)業(yè)科技有限公司奶牛場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)選取品種一致、健康良好且出生日齡相近的荷斯坦母犢牛20頭，隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組（添加復(fù)合益生菌），每組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭牛。

哺乳期對(duì)照組飼喂代乳粉+犢牛精料補(bǔ)充料，試驗(yàn)組則在犢牛精料補(bǔ)充料中添加1.5%的復(fù)合益生菌，代乳粉定量飼喂。試驗(yàn)期間自由采食精料補(bǔ)充料、自由飲水。哺乳期階段犢牛全部轉(zhuǎn)移至犢牛島單欄飼喂，轉(zhuǎn)移前對(duì)犢牛島進(jìn)行徹底殺菌消毒處理。試驗(yàn)期78 d，其中預(yù)試期10 d，哺乳期40 d，斷奶期28 d。精料補(bǔ)充料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 哺乳期犢牛精料補(bǔ)充料組成及營養(yǎng)水平Tab.1 Composition and nutritional level of lactating calf concentrate supplements

斷奶期試驗(yàn)所用日糧由燕麥草和精料補(bǔ)充料組成，精粗比為75∶25，精料補(bǔ)充料配方不變，其日糧組成及營養(yǎng)水平見表2，以全混合日糧（TMR）形式飼喂。試驗(yàn)犢牛由犢牛島轉(zhuǎn)移至犢牛舍飼喂，轉(zhuǎn)移前對(duì)犢牛舍進(jìn)行徹底消毒清糞，自由采食飲水。

表2 斷奶后日糧組成及營養(yǎng)水平Tab.2 Diet composition and nutritional levels after weaning

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長性能

在試驗(yàn)各階段正式開始晨飼前對(duì)犢牛進(jìn)行空腹稱重，記為初重；試驗(yàn)最后1 d清晨空腹稱重，記為末重。試驗(yàn)期間每日記錄犢牛日糧添加量及剩余料，并計(jì)算平均日采食量、平均日增重等指標(biāo)。

1.3.2 血清免疫指標(biāo)

在試驗(yàn)最后1 d晨飼前，在頸靜脈處采集血樣樣品約10 mL，并置于含有肝素鈉抗凝劑的采血管。靜置10 min后，于4℃條件下，4 000×g離心20 min，取上清液-20℃保存。白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、總蛋白（TP）及白球比（A/G）通過日立7180全自動(dòng)生化分析儀用光電比色原理測(cè)定；白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）、γ干擾素（IFN-γ）采用ELISA試劑盒測(cè)定。

1.3.3 血清抗氧化指標(biāo)

血清抗氧化指標(biāo)包括總抗氧化能力（T-AOC）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）及丙二醛（MDA）。操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行（試劑盒購自南京建成生物工程研究所）。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010軟件進(jìn)行初步整理，SPSS 21.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA）。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)奶犢牛生長性能的影響（見表3）

由表3可知，與對(duì)照組相比，在荷斯坦母犢牛哺乳期日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)其末重、日增重均無顯著影響（P＞0.05）。但在犢牛斷奶期日糧中添加復(fù)合益生菌顯著提高了斷奶期的末重和平均日增重（P＜0.05）。整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)（0～68 d），與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組犢牛的增重和平均日增重顯著提高（P＜0.05）。結(jié)果表明，日糧中添加復(fù)合益生菌有助于犢牛對(duì)飼料中各種營養(yǎng)成分的吸收，提升飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)犢牛健康生長。

表3 添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛生長性能的影響Tab.3 Effects of dietary compound probiotics in diet on growth performance of calves

2.2 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛血清免疫指標(biāo)的影響（見表4）

由表4可知，與對(duì)照組相比，犢牛日糧中添加復(fù)合益生菌可顯著提高血清IFN-γ含量（P＜0.05），促進(jìn)免疫器官發(fā)育，增強(qiáng)犢牛的免疫功能。與對(duì)照組相比，添加復(fù)合益生菌顯著降低了血清IL-2含量（P＜0.05），對(duì)IL-4含量無顯著影響（P＞0.05）。添加復(fù)合益生菌對(duì)血清TP、ALB、GLB的含量和A/G均無顯著影響（P＞0.05）。結(jié)果表明，日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛的免疫力具有一定的改善作用。

表4 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛血清免疫指標(biāo)的影響Tab.4 Effects of addition of compound probiotics in diet on serum immune indices of calves

2.3 日糧中添加利牧菌對(duì)犢牛血清抗氧化指標(biāo)含量的影響（見表5）

表5 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛血清抗氧化指標(biāo)的影響Tab.5 Effects of addition of compound probiotics in diet on antioxidant indexes of calf serum

由表5可知，在奶犢牛日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛血清MDA含量、GSH-Px活性及T-AOC均無顯著影響（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，添加復(fù)合益生菌的試驗(yàn)組CAT活性顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果表明，日糧中復(fù)合益生菌能夠改善犢?？寡趸阅?。

3 討論

3.1 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)奶犢牛生長性能的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，添加益生菌能夠幫助幼齡動(dòng)物促進(jìn)有益消化道菌群繁殖、維持菌群穩(wěn)定、調(diào)節(jié)消化道pH值，還有助于機(jī)體對(duì)飼料中各種營養(yǎng)成分的消化吸收、產(chǎn)生大量的菌體蛋白和多肽活性物質(zhì)，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體的生長發(fā)育的消化吸收、產(chǎn)生大量的菌體蛋白和多肽活性物質(zhì)，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體的生長發(fā)育[7-9]。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，在犢牛日糧中添加復(fù)合益生菌顯著提高了斷奶期犢牛末重和平均日增重，且顯著提高了整個(gè)試驗(yàn)期犢牛的增重和平均日增重。結(jié)果表明，在犢牛日糧中添加復(fù)合益生菌能夠提升犢牛對(duì)飼料的消化吸收，降低料重比，促進(jìn)犢牛的生長性能。

孟競(jìng)堯等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在4～6月齡犢牛日糧中添加不同劑量的復(fù)合益生菌（主要成分為地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和米曲霉）顯著提高了犢牛的平均日增重、顆粒料采食量，降低了料重比。烏日勒格[11]研究發(fā)現(xiàn)，在育肥羊日糧中添加枯草芽孢桿菌能夠顯著提升肉羊的增重效益及生產(chǎn)性能。季彬等[12]在荷斯坦?fàn)倥Ｈ占Z中添加不同劑量的復(fù)合益生菌（主要成分枯草芽孢桿菌、乳酸菌、曲霉發(fā)酵物和復(fù)合酶制劑，活菌總數(shù)≥1.6×109CFU/g），結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，日糧中添加復(fù)合益生菌顯著提高了中劑量和高劑量組的末重和平均日增重，降低了料重比。上述研究結(jié)果均與本試驗(yàn)結(jié)論相似。

3.2 日糧中添加復(fù)合益生菌對(duì)犢牛血清免疫指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)能夠反映機(jī)體組織、器官的功能以及機(jī)體的營養(yǎng)代謝和生產(chǎn)性能等情況。血清TP含量高時(shí)，蛋白質(zhì)代謝旺盛，利于提高動(dòng)物新陳代謝和免疫力，促進(jìn)動(dòng)物健康和快速生長提高飼料轉(zhuǎn)化率[13]。IL-2、IL-4和IFN-γ是反映加強(qiáng)機(jī)體免疫功能的指標(biāo)。其中IL-2是淋巴細(xì)胞活化過程中由細(xì)胞膜分泌的一種糖蛋白，是重要的免疫增強(qiáng)因子[12]；IFN-γ能夠促進(jìn)抗體的生成，提高機(jī)體免疫能力[14]。本研究顯示，日糧中添加復(fù)合益生菌顯著提高了犢牛血清IFN-γ的含量，顯著降低了IL-2的含量，表明日糧中添加復(fù)合益生菌能夠改善犢牛血清免疫指標(biāo)。

3.3 日糧中添加利牧菌對(duì)犢牛血清抗氧化指標(biāo)含量的影響

動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力對(duì)自身健康至關(guān)重要。氧化應(yīng)激指機(jī)體遭受各種應(yīng)激刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基大量產(chǎn)生，其氧化程度超出氧化物的清除能力范圍，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，導(dǎo)致細(xì)胞死亡和組織損傷[15]。梁金逢等[16]研究表明，日糧中添加復(fù)合益生菌劑可以提高育成牛的抗氧化能力。本研究表明，日糧中添加復(fù)合益生菌可一定程度上改善犢牛機(jī)體的抗氧化能力。

4 結(jié)論

綜上所述，在本試驗(yàn)條件下，日糧中添加復(fù)合型益生菌可以提高犢牛的生長性能，提升犢牛的免疫力，減少犢牛腹瀉發(fā)生，改善機(jī)體抗氧化性能。