韓宇杰 房 義 鐘榮珍* 向 海

(1.中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，吉林省草地畜牧重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長春130102；2.中國科學(xué)院大學(xué)，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)學(xué)院，北京100049)

苜蓿是一種具有較高營養(yǎng)價值的傳統(tǒng)豆科飼料作物，它耐旱、耐寒、耐鹽堿、耐貧瘠，粗蛋白質(zhì)含量高，莖葉柔嫩鮮美，各種營養(yǎng)成分齊全，含有豐富的氨基酸和維生素，而且是僅有的含有維生素B12的植物性飼料[1]，一直被用作反芻動物飼料。近年來，在反芻動物產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的背景下，苜蓿的種植面積在世界范圍內(nèi)不斷增加。青貯是一種以厭氧微生物為基礎(chǔ)的發(fā)酵過程，主要由乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)產(chǎn)生乳酸(lactic acid，LA)，以降低青貯過程中的pH并抑制有害微生物增殖。青貯作為一種保存濕潤牧草的有效方法，可以最大限度保持苜蓿青綠飼料的營養(yǎng)特性。長期以來，它一直是一種常用的飼料保存方法[4]，經(jīng)過青貯可減少苜蓿營養(yǎng)物質(zhì)的損失，使其變得容易消化，并提高適口性[5]。本文歸納和闡述了苜蓿青貯乳酸菌的篩選及其應(yīng)用情況，以期為發(fā)掘適合紫花苜蓿青貯的乳酸菌提供科學(xué)依據(jù)。

1 苜蓿青貯方法

由于苜蓿的季節(jié)性收獲，需要對其進(jìn)行加工然后保存，以應(yīng)對冬季牲畜飼料的短缺。苜蓿飼草加工方式多樣，如干草、青貯等[2]。苜蓿調(diào)制干草受不良?xì)夂蚧驒C(jī)械等因素的影響，造成可消化蛋白質(zhì)損失30%[3]。與其他粗飼料相比，苜蓿具有高緩沖能力(BC)和缺乏水溶性碳水化合物(WSCs)的特性，導(dǎo)致其青貯發(fā)酵進(jìn)程慢，穩(wěn)定性差，而較難獲得優(yōu)質(zhì)的苜蓿青貯[6]。已有研究表明，在一定的管理條件下，采用一些化學(xué)或生物添加劑對高水分苜蓿原料進(jìn)行處理，例如使用半干青貯和添加劑青貯等方法，是克服這些缺陷的一種實(shí)用方法[7]。

1.1 半干青貯

半干青貯也稱低水分青貯，是待原料水分含量降低后再進(jìn)行青貯，這種方法的關(guān)鍵在于控制青貯原料的含水量。如果苜蓿青貯時原料水分含量過高，經(jīng)過梭狀芽孢桿菌發(fā)酵的青貯原料伴隨著密集的丁酸產(chǎn)生和蛋白質(zhì)水解，極易發(fā)生丁酸發(fā)酵，導(dǎo)致青貯飼料發(fā)臭，品質(zhì)下降，利用效率大大減少[8]。目前關(guān)于低水分苜蓿原料含水量多少才可以保持苜蓿青貯最佳營養(yǎng)成分的研究沒有明確指標(biāo)，但含水量一般在40%～65%區(qū)間內(nèi)[9-11]，這樣不僅降低了植物細(xì)胞氧化作用，還避免了養(yǎng)分流失。

半干青貯是較為單一的苜蓿青貯方式，單純控制原料含水量提升青貯品質(zhì)的能力有限，現(xiàn)在苜蓿青貯技術(shù)已經(jīng)進(jìn)入一個新的時期，即添加劑青貯。

1.2 添加劑青貯

添加劑青貯是在青貯原料中添加1種或多種物質(zhì)，從而對發(fā)酵起促進(jìn)或抑制作用的青貯方式。青貯飼料發(fā)酵質(zhì)量在很大程度上取決于青貯原料中的微生物群落組成[12]。青貯添加劑使用歷史悠久，種類繁多，根據(jù)其作用效果可分為5種：第1種為發(fā)酵促進(jìn)劑[乳酸菌制劑、酶制劑、綠汁發(fā)酵液(PFJ)、糖類等]，作用為促進(jìn)乳酸產(chǎn)生，降低pH，有利于青貯飼料保鮮貯存；第2種為發(fā)酵抑制劑(酸類、甲醛等)，作用為抑制青貯過程中不良微生物的繁殖，防止飼料腐敗霉變，減少發(fā)酵過程中的營養(yǎng)成分流失；第3種為有氧腐敗抑制劑(乙酸、丙酸、山梨酸、苯甲酸等)，通過直接抑制酵母和霉菌的繁殖來提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性；第4種為營養(yǎng)性添加劑(尿素和氨)，用于提高青貯飼料的營養(yǎng)價值及適口性；第5種為吸收劑(麥麩、稻草等)，通過吸收青貯原料中水分，減少滲出液的產(chǎn)生和干物質(zhì)損失。其中，發(fā)酵促進(jìn)劑是近幾年來研究的熱點(diǎn)，而其中應(yīng)用于生產(chǎn)較多的是乳酸菌制劑[13]。

2 適合苜蓿青貯的乳酸菌的篩選

乳酸菌呈棒狀(桿菌)或球形(球菌)，它在厭氧條件下可以利用水溶性碳水化合物產(chǎn)生乳酸，其特點(diǎn)是對酸度的耐受性強(qiáng)，這有助于其在自然發(fā)酵中的增殖勝過其他細(xì)菌，目前已廣泛應(yīng)用于發(fā)酵食品、飲料以及飼料的生產(chǎn)過程中。在苜蓿青貯初期，明串珠菌屬(Leuconostoc)、腸球菌屬(Enterococcus)、鏈球菌屬(Streptococcus)、乳球菌屬(Lactococcus)等球菌生長旺盛，促進(jìn)乳酸發(fā)酵，后期則以乳桿菌屬(Lactobacillus)增殖為主[14]。

青貯所用乳酸菌按照其發(fā)酵途徑不同被分為同型發(fā)酵乳酸菌、兼性異型發(fā)酵乳酸菌和專性異型發(fā)酵乳酸菌。同型發(fā)酵乳酸菌應(yīng)用比較廣泛，其糖酵解產(chǎn)物只有乳酸；兼性異型發(fā)酵乳酸菌和專性異型發(fā)酵乳酸菌還會產(chǎn)生乳酸以外的產(chǎn)物。相對于其他發(fā)酵產(chǎn)品，接種同型發(fā)酵或兼性異型發(fā)酵乳酸菌可以迅速降低pH和增加乳酸產(chǎn)量，用于青貯的主要菌種有植物乳桿菌(Lactobacillusplantarum)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)、屎腸球菌(Enterococcusfaecium)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)和戊糖片球菌(Pediococcuspentosaceus)[18]。專性異型發(fā)酵乳酸菌包括布氏乳桿菌(Lactobacillusbuchneri)和短乳桿菌(Lactobacillusbrevis)等，它們可以同時產(chǎn)生乳酸和乙酸，雖然與同型發(fā)酵乳酸菌相比其產(chǎn)酸速度較慢，但可以在有氧階段抑制有害菌的生長，提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性，抑制二次發(fā)酵的產(chǎn)生[19]。

將乳酸菌應(yīng)用于苜蓿青貯，已成為快速降低苜蓿青貯過程中的pH、減少營養(yǎng)物質(zhì)和干物質(zhì)損失的一種常見做法。乳酸菌不僅具有“公認(rèn)的安全”的地位[15]，還具有許多其他優(yōu)點(diǎn)，如對健康有益、易于處理、成本低、能耗低、產(chǎn)量高。乳酸菌對青貯飼料加工技術(shù)和質(zhì)量做出了較大的貢獻(xiàn)，如改善風(fēng)味、感官結(jié)構(gòu)和最終產(chǎn)品的保存時間[16]。苜蓿自身附著的乳酸菌數(shù)量少，而要保證青貯過程中乳酸菌占主導(dǎo)地位，在青貯過程中引入外源乳酸菌便顯得十分重要[17]。

影響苜蓿青貯過程中乳酸菌發(fā)酵的因素通常包含內(nèi)在和外在2個方面。內(nèi)在因素即乳酸菌本身的因素，包括：1)乳酸菌的種類和數(shù)量；2)乳酸菌的活性及繁殖能力；3)乳酸菌的產(chǎn)酸和耐酸能力；4)乳酸菌的糖原利用能力。外在因素即苜蓿原料的特性如含水量、緩沖能和含糖量等[20]。要綜合內(nèi)外2個方面的因素來篩選適合苜蓿青貯的乳酸菌添加劑。

Fitzsimons等[21]在1992年發(fā)表了關(guān)于選擇菌株作為青貯飼料潛在接種劑的第1項研究。在這項研究中，研究人員從一些草料中分離出18株片球菌屬的菌株，并為這些草料選擇接種劑。最初通過實(shí)驗(yàn)室測試對菌株進(jìn)行評估，包括評估生長、產(chǎn)酸能力、蛋白質(zhì)或乳酸分解以及在不同pH和溫度下生長的能力，發(fā)現(xiàn)乳酸片球菌G24最適合作為青貯接種劑。該試驗(yàn)結(jié)果表明了篩選的重要性，因?yàn)閷儆谕晃锓N的菌株之間也存在差異。普通的乳酸菌有時并不能改善苜蓿青貯的品質(zhì)，這可能與苜蓿飼料作物本身的特性有關(guān)。例如，苜蓿缺乏足夠的水溶性碳水化合物，導(dǎo)致青貯過程中乳酸菌產(chǎn)酸較少[22]，這也導(dǎo)致在青貯過程中發(fā)酵程度較低。此外，成功地將乳酸菌應(yīng)用于苜蓿青貯的一個必要因素就是苜蓿與所使用微生物之間的相容性[23]，在大多數(shù)研究中，接種劑都是從苜蓿青貯自身中分離出來的。因?yàn)閺膶⒈唤臃N的棲息地分離出來的本地菌株可以提供競爭優(yōu)勢，青貯接種菌的功效是基于它們與牧草中附生微生物群的有效競爭能力。在苜蓿青貯條件下，適合的乳酸菌一般具有以下幾個特點(diǎn)：1)產(chǎn)酸能力和活性強(qiáng)；2)可以提高飼料的有氧穩(wěn)定性；3)耐脅迫能力強(qiáng)；4)抑菌能力較好[24]。迄今為止，很少有報道用于確定適合苜蓿青貯條件的乳酸菌菌株的篩選方法。Carvalho等[25]總結(jié)了一套青貯飼料潛在微生物菌劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)，其主要過程如圖1所示，可以用于苜蓿青貯乳酸菌的篩選。Zhao等[26]研究出一種針對苜蓿青貯條件所設(shè)計的乳酸菌篩選方法，以苜蓿粉作為培養(yǎng)基有效篩選了在苜蓿青貯中具有潛在應(yīng)用價值的乳酸菌植物乳桿菌ZZU203。李榮榮等[27]以抑菌活性、酸化苜蓿汁液能力及生理生化等為指標(biāo)，從苜蓿自身附生的乳酸菌中篩選出了植物乳桿菌LP31，其對產(chǎn)氣莢膜梭菌和酪丁酸梭菌的抑菌活性高并且酸化苜蓿汁液能力強(qiáng)。由此可以看出，植物乳桿菌是一類適合苜蓿青貯的乳酸菌。如果微生物接種劑不適合該發(fā)酵過程，它會降低青貯飼料的品質(zhì)。例如，在甘蔗青貯飼料中接種植物乳桿菌則導(dǎo)致干物質(zhì)損失增加和乙醇濃度增加[28-29]。

圖1 青貯飼料潛在微生物菌劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)

除了自然篩選和誘變篩選所獲得的乳酸菌菌株，也有研究者通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將真菌中具有特殊功能的基因轉(zhuǎn)移至乳酸菌中表達(dá)，從而得到具有特定功能的乳酸菌工程菌株。例如，Liu等[30]將里氏木霉(Trichodermareesei)的纖維素酶基因(bgl1、cbh2、egl3)轉(zhuǎn)移至乳酸乳球菌中，應(yīng)用后發(fā)現(xiàn)，與纖維素酶和野生乳酸乳球菌亞種組合處理的青貯相比，轉(zhuǎn)基因乳酸乳球菌菌株可以有效地發(fā)酵高水分的苜蓿青貯，苜蓿青貯表現(xiàn)為較低的pH和氨態(tài)氮含量，不含丁酸，品質(zhì)更高，且轉(zhuǎn)基因乳酸乳球菌菌株對提高木質(zhì)纖維素轉(zhuǎn)化為糖的效果優(yōu)于纖維素酶和野生型乳酸乳球菌亞種的組合。

3 乳酸菌在苜蓿青貯中的應(yīng)用

3.1 乳酸菌單獨(dú)添加和混合添加

早期研究者發(fā)現(xiàn)使用傳統(tǒng)的純?nèi)樗峋鷦┳鳛檐俎Ｇ噘A的起始劑，可以確保青貯早期快速發(fā)酵，并最大限度地減少營養(yǎng)物質(zhì)和干物質(zhì)的損失[31]。然而，使用這種類型的接種劑可能會導(dǎo)致苜蓿青貯的有氧穩(wěn)定性下降，因?yàn)閭鹘y(tǒng)乳酸菌劑所產(chǎn)生的短鏈脂肪酸不足，而短鏈脂肪酸能夠抑制酵母和霉菌的生長[32]。接種異型發(fā)酵乳酸菌布氏乳桿菌可以解決短鏈脂肪酸不足的問題，其能在厭氧環(huán)境下將適量的乳酸轉(zhuǎn)化為乙酸和1,2-丙二醇，已被證明可以改善苜蓿青貯的有氧穩(wěn)定性，并且可以通過抑制路德維希腸桿菌(Enterobacterludwigii)的豐度來提升苜蓿青貯的粗蛋白質(zhì)含量[33]。1,2-丙二醇也是一種重要的乳酸菌代謝物，Schmidt等[34]發(fā)現(xiàn)其在苜蓿青貯過程中對提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性有重要作用。除布氏乳桿菌外，希氏乳桿菌(Lactobacillushilgardii)也具有此種功能(產(chǎn)生乙酸和1,2-丙二醇)[35]，但目前將希氏乳桿菌用于苜蓿青貯的研究較少。

青貯飼料中經(jīng)常存在真菌毒素，真菌毒素是有害的，動物食用它們后可能致癌、致畸和致命，并造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。被多種真菌毒素污染的苜蓿青貯飼料可能對家畜產(chǎn)生交互影響，因此必須對其進(jìn)行降解或轉(zhuǎn)化。有些乳酸菌在發(fā)酵過程中可以通過與毒素結(jié)合來降低其在青貯飼料中的濃度，如戊糖片球菌[36]。Jiang等[36]以戊糖片球菌為菌種制作苜蓿青貯飼料，采用高通量測序方法檢測青貯過程和有氧惡化過程中的微生物群落的動態(tài)變化，以解釋戊糖片球菌對青貯過程的影響，結(jié)果顯示，接種戊糖片球菌的苜蓿青貯發(fā)酵品質(zhì)有所提高，戊糖片球菌在發(fā)酵前期可迅速產(chǎn)酸，降低pH，從而改善苜蓿青貯的發(fā)酵環(huán)境，并有效抑制紅曲霉的增殖，但其對有氧穩(wěn)定性的改善效果不顯著。因此，生產(chǎn)中常以戊糖片球菌作為青貯的啟動菌。Schmidt等[37]則發(fā)現(xiàn)苜蓿青貯中布氏乳桿菌種群無法主導(dǎo)青貯早期的發(fā)酵過程，因?yàn)槠渖L比較緩慢，并且布氏乳桿菌需要在厭氧條件下生長至少7周之后才可以改善青貯的有氧穩(wěn)定性；而同時添加戊糖片球菌和布氏乳桿菌會使苜蓿青貯的早期階段發(fā)酵速度更快，同時提高發(fā)酵質(zhì)量和有氧穩(wěn)定性。

在飼料青貯研究中，植物乳桿菌是最常用的細(xì)菌培養(yǎng)劑。苜蓿春夏收獲期多雨、青貯過程時溫度高的情況普遍存在于中國中東部和南方等氣候特征相似的地區(qū)。在苜蓿青貯條件如此惡劣的情況下，接種植物乳桿菌顯著促進(jìn)了pH下降、乳酸積累和乳酸桿菌的增殖；并且，接種植物乳桿菌后梭狀芽胞桿菌的生長受到抑制，進(jìn)一步延緩了青貯飼料的腐敗變質(zhì)[37]。王小芬等[38]通過連續(xù)限制性培養(yǎng)從苜蓿青貯飼料中篩選出包含4種乳桿菌(植物乳桿菌、韓國泡菜乳桿菌、香腸乳桿菌、戊糖乳桿菌)的乳酸菌復(fù)合系A(chǔ)l2，將其加入苜蓿青貯中，可使苜蓿青貯pH和氨態(tài)氮含量下降，乳酸含量升高，顯著提高青貯品質(zhì)，并且發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌起著主導(dǎo)作用。除了改善青貯品質(zhì)，植物乳桿菌還可以在瘤胃中存活并發(fā)揮益生菌的作用[39]。一些研究人員將益生菌效應(yīng)的機(jī)制歸因于乳酸菌接種劑改善了青貯發(fā)酵過程中真蛋白質(zhì)的保存，進(jìn)而改變了瘤胃發(fā)酵。然而，乳酸菌影響瘤胃中生化變化的機(jī)制尚不清楚。

在大多數(shù)苜蓿青貯的研究中，乳酸菌菌株組合的效果是積極的。然而，研究人員并沒有解釋這種協(xié)同效應(yīng)的原因。為了加強(qiáng)對乳酸菌的理解，今后有必要從遺傳學(xué)上分析哪些基因在2種乳酸菌共孵育期間是活躍的。

3.2 乳酸菌與纖維素酶混合添加

青貯時纖維素酶和半纖維素酶等纖維分解酶的應(yīng)用對苜蓿這類低碳水化合物牧草最為有利[40]。纖維分解酶通過將結(jié)構(gòu)性碳水化合物降解為可用于乳酸菌利用的水溶性碳水化合物，從而提高青貯過程中的乳酸產(chǎn)量，加速pH下降。另外，纖維分解酶還可以分解植物細(xì)胞壁，提高青貯飼料的消化率。Hristov等[41]報道，提高青貯飼料的品質(zhì)和消化率是降低甲烷(CH4)排放強(qiáng)度最有效的緩解策略之一。然而，也有研究表明，纖維分解酶的使用對苜蓿青貯飼料的消化率沒有影響或產(chǎn)生了負(fù)面影響，原因可能是高水分的苜蓿含有少量水溶性碳水化合物，一些纖維素酶不能降解苜蓿的木質(zhì)纖維素，或者纖維素酶的一些木質(zhì)纖維素降解產(chǎn)物不能被乳酸菌發(fā)酵[42-43]。Chen等[8]研究發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)使用纖維素分解酶會導(dǎo)致更多的異型發(fā)酵并降低高水分苜蓿青貯的營養(yǎng)價值，乳酸菌單獨(dú)使用或者與纖維素分解酶混合使用對高水分苜蓿青貯的營養(yǎng)價值有積極影響。使用乳酸菌可以改善高水分苜蓿青貯飼料瘤胃發(fā)酵與青貯期間真蛋白質(zhì)的保存，并刺激瘤胃功能微生物(普氏菌屬)的生長。Chen等[8]與魏曉斌等[44]的研究結(jié)果相同，兩者研究結(jié)果都表明纖維素分解酶與乳酸菌的聯(lián)合使用效果好于兩者單獨(dú)使用。

3.3 乳酸菌與其他菌種或化學(xué)物質(zhì)混合添加

有研究表明檸檬酸和蘋果酸可以加速乳酸菌的生長[45-46]。然而，與接種植物乳桿菌的苜蓿青貯相比，進(jìn)一步使用蘋果酸和檸檬酸并沒有促進(jìn)乳酸發(fā)酵，且蘋果酸+植物乳桿菌處理的苜蓿青貯的乳酸濃度甚至更低，但是蘋果酸或檸檬酸+植物乳桿菌處理對降低苜蓿青貯飼料中的非蛋白氮(nonprotein nitrogen)很有效[47]。

彭海蘭[48]研究發(fā)現(xiàn)，葡萄糖與乳酸菌混合添加對苜蓿青貯品質(zhì)的改善效果要比單獨(dú)添加乳酸菌好。楊玉璽等[49]發(fā)現(xiàn)，苜蓿青貯原料含水量不同，會導(dǎo)致乳酸菌混合添加劑處理的青貯效果不同，苜蓿原料含水量與乳酸菌混合添加劑有互作效應(yīng)。含水量為50%左右時，選擇植物乳桿菌與纖維素酶混合添加青貯效果最佳；含水量為60%左右時，選擇植物乳桿菌與蔗糖混合添加青貯效果最佳；含水量在70%左右時，選擇植物乳桿菌與蔗糖混合添加青貯效果最佳。

芽孢桿菌是一種新型青貯接種劑。Lara等[50]發(fā)現(xiàn)該菌屬的一些菌種可以通過產(chǎn)生抑制酵母和霉菌的細(xì)菌素來提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性，這些菌種在動物飼糧中的應(yīng)用也對飼料利用率和動物生長性能產(chǎn)生了積極影響。還有研究發(fā)現(xiàn)許多芽孢桿菌(如蠟狀芽孢桿菌、彎曲芽孢桿菌和短小芽孢桿菌)是青貯發(fā)酵過程中植物結(jié)構(gòu)性碳水化合物降解過程中微生物酶的主要來源[51]，然而關(guān)于芽孢桿菌接種劑對苜蓿青貯發(fā)酵特性影響的研究目前較少。Li等[52]用產(chǎn)纖維素酶芽孢桿菌單獨(dú)處理苜蓿青貯，發(fā)現(xiàn)其并沒有明顯改善青貯品質(zhì)，原因可能是其在青貯環(huán)境下生存能力低?？莶菅挎邨U菌(Bacillussubtilis)可以產(chǎn)生淀粉酶、復(fù)合纖維素酶等物質(zhì)，可以將多糖分解為單糖為乳酸菌的生長提供碳源。Bai等[53]發(fā)現(xiàn)接種枯草芽孢桿菌可以促進(jìn)苜蓿青貯發(fā)酵，改善有氧穩(wěn)定性，并降低蛋白質(zhì)水解和干物質(zhì)損失。而枯草芽孢桿菌與布氏乳桿菌的組合則限制了彼此的作用，但也通過增加乳酸和乙酸的濃度而有利于發(fā)酵。劉歡歡[13]對比了單獨(dú)添加植物乳桿菌和混合添加植物乳桿菌與枯草芽孢桿菌對苜蓿青貯的影響，發(fā)現(xiàn)前者使霉菌數(shù)量極顯著升高，后者使霉菌數(shù)量極顯著降低，丙酸含量顯著升高，說明植物乳桿菌與枯草芽孢桿菌混合添加有效抑制了有氧腐敗，比單獨(dú)添加植物乳桿菌效果好。

單寧酸是天然植物多酚類化合物，有研究表明單寧酸能夠抑制青貯過程中蛋白質(zhì)的降解和雜菌生長，調(diào)控青貯發(fā)酵品質(zhì)[54]。在苜蓿青貯過程中，單寧酸與植物乳桿菌配合使用可以減弱單寧酸單獨(dú)使用時對青貯飼料干物質(zhì)降解的抑制作用[55]。

4 小結(jié)與展望

目前關(guān)于青貯過程中乳酸菌的發(fā)酵原理、作用特點(diǎn)以及影響因素已十分明確，但對于乳酸菌在青貯中的開發(fā)和利用還處于起步階段，可運(yùn)用于苜蓿青貯的乳酸菌更是少之又少。

針對存在的問題，可以從“量和質(zhì)”2個方面加強(qiáng)對苜蓿青貯乳酸菌的研究與利用?！傲俊钡姆矫?，可以通過對我國不同生態(tài)環(huán)境中的乳酸菌資源進(jìn)行充分發(fā)掘，并對其進(jìn)行篩選，保存適宜苜蓿青貯的優(yōu)良乳酸菌菌株，豐富乳酸菌種質(zhì)資源庫；“質(zhì)”的方面，提高苜蓿青貯乳酸菌篩選技術(shù)，找到一種短時間內(nèi)能夠快速有效提高苜蓿青貯飼料有氧穩(wěn)定性的異型發(fā)酵菌株或者既能以乳酸發(fā)酵為主又能抗青貯有氧腐敗的同型發(fā)酵菌株，這將會有十分重要的意義。篩選出的乳酸菌菌株還必須具有適合工業(yè)栽培的特性，并在貯藏期間保持穩(wěn)定。單一品系乳酸菌很少具有提高青貯品質(zhì)所需的所有理想特性，因此需加強(qiáng)對乳酸菌混合添加劑的研究，找尋更多菌株組合的可能，利用其互相之間的優(yōu)勢來彌補(bǔ)存在的短板，使苜蓿青貯飼料的品質(zhì)更上一層樓。