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茶多酚對(duì)固定矯治牙齦炎的臨床效果研究

2022-10-11 10:17周星辰吳盼盼沈秉新
福建茶葉 2022年9期
關(guān)鍵詞:黃素單胞菌生物膜

周星辰,曾 婕,李 偉,吳盼盼,沈秉新

(1.井岡山大學(xué),江西 吉安 343000;2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué),內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110)

在吉安市青少年正畸患者中,多數(shù)為固定矯治。固定矯治期間,牙齦炎在青少年固定矯治患者中發(fā)病率高達(dá)50%以上,所以患者的口腔衛(wèi)生是正畸醫(yī)生重點(diǎn)關(guān)注的復(fù)診內(nèi)容之一??谇恍l(wèi)生嚴(yán)重者可能會(huì)導(dǎo)致牙周問題,比如牙槽骨吸收及牙齦退縮,同時(shí)食物殘?jiān)じ皆谕胁郾砻鏁?huì)增大摩擦力,導(dǎo)致托槽與鋼絲之間的滑動(dòng)阻力增大,從而影響牙齒移動(dòng)。使用含漱液是臨床上治療牙齦炎常用的輔助方法。在這類含漱液中復(fù)方茶多酚含漱液和西帕依固齦液臨床效果顯著。本文選取青少年固定正畸開始4周后,經(jīng)臨床確診為牙齦炎的患者,觀察其分別使用復(fù)方茶多酚含漱液與西帕依固齦液對(duì)牙齦炎的治療效果,為臨床推廣提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

選取2021年1月至2021年10月在井岡山大學(xué)附屬醫(yī)院口腔科進(jìn)行固定矯治的青少年20例為研究對(duì)象?;颊呒捌浼覍倬炇鹆酥橥鈺⒘私獗緦?shí)驗(yàn)的全過程。納入標(biāo)準(zhǔn):1)無全身系統(tǒng)性疾病及精神疾患;2)使用新亞8316-23b直絲弓托槽,并用金屬結(jié)扎絲綁扎;3)固定矯治一個(gè)月后診斷為單純性牙齦炎;4)無藥物過敏史;5)近四個(gè)月沒有使用抗菌藥物及任何影響牙周組織健康的藥物,例如非甾體抗炎藥或糖皮質(zhì)激素、鈣拮抗劑、環(huán)孢素A或苯妥英;6)近兩個(gè)月沒有進(jìn)行牙周基礎(chǔ)治療;7)年齡在11—16歲之間;8)居住于吉安市吉州區(qū);9)無張口呼吸習(xí)慣。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組:將20例青少年隨機(jī)分為對(duì)照組10例及實(shí)驗(yàn)組10例。實(shí)驗(yàn)組男性3人,女性7人。對(duì)照組男性4人,女性6人。對(duì)照組使用復(fù)方茶多酚含漱液,實(shí)驗(yàn)組使用西帕依固齦液。兩組含漱液外包裝以及液體顏色基本一致,僅用編號(hào)區(qū)別。

1.2.2 觀察指標(biāo):

1.2.2.1 檢測(cè)牙位:上頜兩顆第一磨牙頰腭側(cè)、下頜切牙唇舌側(cè),共12個(gè)檢測(cè)位點(diǎn)。檢測(cè)醫(yī)生均為井岡山大學(xué)附屬醫(yī)院口腔科主治醫(yī)生,按照統(tǒng)一培訓(xùn)內(nèi)容,使用口鏡及探針進(jìn)行視診及探診。

1.2.2.2 觀察指標(biāo):SBI:采用 Mazza改良的出血指數(shù),探診20秒以后,以0至5級(jí)評(píng)估并記分。GI:采用LoeH和Silness提出的方式,分為0~3級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。PLI:采用Quigley—Hein改良的Turesky菌斑指數(shù)檢測(cè)法,以0至5級(jí)記分。用菌斑染色劑對(duì)齦上菌斑染色并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)記分,染色在檢查過GI及SBI后進(jìn)行。

1.2.3 用藥方案 與患者家長(zhǎng)溝通實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,盡量避免青少年對(duì)口腔清潔過于重視而影響結(jié)果。囑每位受試者不改變平時(shí)的口腔清潔習(xí)慣,每天三餐飯后及睡前含漱3分鐘,每次10ml,含漱后半小時(shí)內(nèi)不飲水不飲食,一周后觀察每位受試者SBI、GI及PLI的情況。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,使用t檢驗(yàn)比較用藥前后兩組各指標(biāo)的變化。

2 結(jié)果

如表,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的SBI,GI和PLI差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.5)。

表 兩組組間用藥前后比較

3 討論

3.1 青少年固定矯治的牙周情況

固定矯治器妨礙口腔清潔,且利于牙菌斑的形成,繼而可能會(huì)導(dǎo)致釉質(zhì)脫礦和牙周炎癥。王曉宇等研究指出固定矯治中的青少年口內(nèi)伴放線聚集桿菌的檢出率顯著高于未進(jìn)行矯治的青少年患者,固定正畸開始3個(gè)月后,固定矯正青少年口內(nèi)牙齦卟啉單胞菌及具核梭桿菌檢出率明顯增加,隨后檢查菌斑指數(shù)(PI)、牙齦指數(shù)(GI)及探診出血指數(shù)(BOP)這三個(gè)指標(biāo),百分比顯著高于未進(jìn)行矯治患者。部分固定矯治青少年在醫(yī)生嚴(yán)格控制其口腔衛(wèi)生的情況下,在矯治器開始6個(gè)月后,檢測(cè)的三個(gè)指標(biāo)均明顯好轉(zhuǎn),但牙齦卟啉單胞菌、產(chǎn)黑普氏菌、中間普氏菌等)的檢出量及檢出率均仍然升高。所以青少年在進(jìn)行固定矯治的過程中更要加強(qiáng)口腔衛(wèi)生保健。Papageorgiou SN等人認(rèn)為,正畸治療對(duì)牙周組織有一定的危害,但大都是暫時(shí)的,這些包括菌斑增加、出血指數(shù)增加、牙周袋增大、邊緣骨質(zhì)丟失和口腔微生物的數(shù)量或質(zhì)量變化。正畸固定矯治器的特性為牙周致病菌提供有利的生存環(huán)境。加之由于青少年無法配合飯后既刷牙的頻次,所以青少年牙齦炎發(fā)生幾率較其他年齡段較高,故本實(shí)驗(yàn)對(duì)象年齡段為11-16歲。

3.2 青少年固定矯治患者預(yù)防牙周疾病的方式方法

機(jī)械去除牙科生物膜仍然被認(rèn)為是主要的方法,但無法抑制菌斑生成。采用基礎(chǔ)常規(guī)定期齦上潔治術(shù)、刮治、根面平整、刷牙和牙線、口服化學(xué)藥物、局部上藥進(jìn)行牙齦炎的治療??谇恍l(wèi)生的高質(zhì)量管理是正畸治療期間的是臨床正畸中最值得正畸醫(yī)生關(guān)注的方面之一。詹育香等人研究發(fā)現(xiàn)青少年在固定矯治中進(jìn)行牙周基礎(chǔ)治療是有必要的,單純的口腔健康宣教,效果甚微。但是在作者所在城市患者家長(zhǎng)無法接受定期做牙周基礎(chǔ)治療。使用含漱液是臨床上牙齦炎常用的輔助治療方法,消費(fèi)者接受程度高,操作簡(jiǎn)單。

3.3 茶多酚在固定矯治中輔助牙齦炎的相關(guān)研究

治療和預(yù)防牙齦炎的金標(biāo)準(zhǔn)是氯己定(CHX),因?yàn)樗哂锌咕头栏阅?。然而CHX 的副作用包括牙齒呈褐色、味覺改變、腐蝕和苦味。復(fù)方茶多酚含漱液,其主要成份為——茶多酚,茶多酚是茶葉提取物。茶多酚由沒食子兒茶素-3沒食子酸酯(ECGG)、表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素(EGC)等構(gòu)成,其中ECGG的占比最高,約占茶多酚含量的50%。茶多酚主要作用有清除有害自由基、抗菌、殺菌等,它能抑制和殺滅口腔中的致病菌,殺滅口腔變形鏈球菌和病毒抑制真菌的生長(zhǎng)。有研究表明,該藥含漱治療牙齦炎取得了良好的效果。

茶多酚在降低炎癥GI(牙齦指數(shù))、GBI牙齦出血指數(shù)和BOP探診出血方面表現(xiàn)積極的作用,且對(duì)宿主免疫系統(tǒng)的直接影響為主對(duì)口腔病原體有一定的影響。有研究者對(duì)慢性牙周炎患者的牙周病原菌(AA半放線聚集桿菌和PI中間普氏菌)進(jìn)行了研究,其中茶多酚條局部給藥+齦上潔治+根面平整(SRP),與單獨(dú)齦上潔治+根面平整相比,牙周病原菌數(shù)量和PPD(牙周袋探診深度)顯著減小。這與研究一致。綠茶制劑或EGCG的人類干預(yù)研究中最常見的不良事件(AEs)是在胃腸道系統(tǒng),而且報(bào)告的肝毒性也很低。綠茶兒茶素沒有遺傳毒性或致癌作用。Marta Mazur等人對(duì)常見輔助治療牙周病的制劑進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)價(jià)和薈萃分析指出。同時(shí)有研究證實(shí)了洗必泰對(duì)成纖維細(xì)胞的毒性,也顯示出細(xì)胞毒性和遺傳毒性。對(duì)比安慰劑、三氯生相,綠茶沒有副作用,并顯示出有效的抗炎和抗氧化特性。得出結(jié)論:綠茶通過降低氧化應(yīng)激來控制牙周炎的療效。EGCG還可減少成骨細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá),并避免破骨細(xì)胞的形成。也可抑制自身MT-1金屬基質(zhì)蛋白酶的活性,因此綠茶可用于預(yù)防牙周病患者的牙槽骨吸收。

3.4 茶多酚對(duì)牙齦卟啉單胞菌的作用機(jī)制

牙齦卟啉單胞菌可產(chǎn)生多種毒力因子,這些因子有助于定植組織和抑制宿主防御并破壞組織。牙齦卟啉單胞菌通過各種方式來侵入牙齦上皮并破壞其保護(hù)功能。牙齦假單胞菌可以破壞上皮屏障的功能,表現(xiàn)為TER的減少,F(xiàn)ITC結(jié)合的4-kDa葡聚糖轉(zhuǎn)運(yùn)的增加,以及細(xì)菌在雙腔系統(tǒng)中通過角質(zhì)形成細(xì)胞單層的滲透。為了粘附和侵入上皮細(xì)胞,牙齦卟啉單胞菌靶向特定的宿主受體,調(diào)節(jié)宿主信號(hào),并解除對(duì)宿主細(xì)胞因子的調(diào)節(jié),破壞組織穩(wěn)態(tài)從而使細(xì)菌持續(xù)存在使得牙周軟組織發(fā)生牙齦炎發(fā)展為牙周炎。

茶多酚和其主要成分EGCG可抑制牙齦卟啉單胞菌的生長(zhǎng)和粘附,降低宿主定植和組織破壞有關(guān)的牙齦卟啉單胞菌毒力基因的表達(dá),增強(qiáng)牙齦角質(zhì)形成細(xì)胞的屏障功能并發(fā)揮保護(hù)作用的能力,增強(qiáng)了牙齦角質(zhì)形成細(xì)胞單層的完整性,防止細(xì)菌通過角質(zhì)形成細(xì)胞單層滲透。如TER 的增加和FITC結(jié)合的4-kDa葡聚糖轉(zhuǎn)運(yùn)的減少所示。EGCG誘導(dǎo)人β-防御素的分泌來提高口腔上皮細(xì)胞的天然免疫。此外,全身應(yīng)用EGCG可以通過減少參與骨丟失和組織破壞的細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子-α和IL-6的表達(dá)而對(duì)牙周組織損傷起到治療作用。綠茶提取物和EGCG也可通過阻斷NF-κB信號(hào)通路來減弱牙周病原體刺激的巨噬細(xì)胞分泌TNF-α,從而減少牙周組織炎癥的發(fā)生。

3.5 茶多酚對(duì)具核梭桿菌的作用機(jī)制

具核梭桿菌是一種革蘭氏陰性絲狀紡錘形桿狀細(xì)菌,是口腔菌群中常見的寄主。具核梭桿菌是一種梭形細(xì)菌,在受慢性牙周炎影響的齦下部位數(shù)量增加。

具核梭桿菌通過連接早期的定殖者(鏈球菌和放線菌)和晚期的定殖者(牙齦卟啉單胞菌、連翹、齒密螺旋體)在齦下生物膜的形成中發(fā)揮關(guān)鍵作用。這些復(fù)合體最初是由Scriansky等人描述的,而且與活動(dòng)性牙周病變密切相關(guān)。鑒于其在生物膜形成中的核心作用,核桿菌可能是控制生物膜形成的關(guān)鍵靶標(biāo)。核桿菌外膜含有許多粘附素,與唾液蛋白、細(xì)菌和宿主細(xì)胞的黏附有關(guān)。與核桿菌相關(guān)的其他毒力特性包括溶血活性和產(chǎn)生硫化氫的能力。核桿菌以其侵襲性而聞名,這可能允許它進(jìn)入血液遷移,并在身體其他地方引起感染。

3.6 茶多酚對(duì)正畸牙齦炎的治療效果相關(guān)研究

牙周病原體中抗生素耐藥性的發(fā)展是一個(gè)主要問題,因?yàn)檫@些細(xì)菌可能從口腔遷移到其他器官,在那里它們可能導(dǎo)致感染或?qū)⑵淇股啬退幮赞D(zhuǎn)移到其他細(xì)菌物種。對(duì)阿莫西林、克林霉素和甲硝唑耐藥的核桿菌菌株已經(jīng)分離到16-18株。鑒于抗生素耐藥細(xì)菌的出現(xiàn),必須開發(fā)新的、最好是廉價(jià)的傳統(tǒng)抗生素的替代品。茶是世界上消費(fèi)最多的飲料,僅次于水,是用茶樹的葉子釀造的。綠茶(未發(fā)酵的,兒茶素含量高)主要在中國和日本消費(fèi),而紅茶(發(fā)酵的茶黃素含量高)在西方國家更受歡迎。

大量的人體、動(dòng)物和體外研究茶多酚可能有助于降低心血管疾病和某些癌癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn),還可能通過降低血壓、增加骨密度和控制體重來改善生理功能。茶多酚也顯示出作為抗菌劑的巨大前景,它對(duì)革蘭氏陽性和革蘭氏陰性病原體都有活性。在之前的研究中,我們發(fā)現(xiàn)綠茶和紅茶提取物、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)和茶黃素降低了核纖毛蟲誘導(dǎo)的單核細(xì)胞中的核因子-κB的激活。此外,在與核假單胞菌孵育巨噬細(xì)胞之前,用茶多酚對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理,可顯著抑制促炎細(xì)胞因子和基質(zhì)金屬蛋白的分泌。鑒于這些發(fā)現(xiàn)表明茶多酚可以減輕核盤藻誘導(dǎo)的宿主炎癥反應(yīng)。

核假單胞菌在形成致病的齦下生物膜中起著核心作用,這種生物膜會(huì)引起慢性炎癥,進(jìn)而導(dǎo)致破壞性牙周炎。F.nucleatum也可以從口腔外感染中分離出來,并且與炎癥性腸病和結(jié)直腸癌有關(guān)。在之前的一項(xiàng)研究中,我們使用巨噬細(xì)胞模型表明茶多酚(包括EGCG和茶黃素)可以減弱由具核梭菌誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。為了進(jìn)一步研究茶多酚治療具核梭菌相關(guān)疾病的潛力,EGCG和茶黃素對(duì)生長(zhǎng)和毒力的影響F.nucleatum的特性。我們首先表明,茶多酚抑制具核梭菌的生長(zhǎng),EGCG和茶黃素更有效,MIC為500μg/ml。有趣的是,我們最近報(bào)道了EGCG和茶黃素可能通過誘導(dǎo)口腔角質(zhì)形成細(xì)胞分泌人β-防御素(-1,-2,-3)間接發(fā)揮抗菌活性26,27。這些抗菌肽對(duì)牙周病原菌有活性,包括F.nucleatum茶多酚可能以兩種方式對(duì)F.nucleatum發(fā)揮抗菌作用。首先,我們使用負(fù)載calcein-AM的具核梭菌細(xì)胞來證明茶多酚似乎會(huì)破壞細(xì)菌細(xì)胞膜的完整性并導(dǎo)致細(xì)胞裂解。其次,我們發(fā)現(xiàn)茶多酚具有螯合鐵(一種必需營養(yǎng)素)的能力,這可能有助于保持它們的抗菌活性。不能排除其他機(jī)制也可能有助于保持茶多酚的抗菌活性。例如,Navarro-Martinez 等人提供的證據(jù)表明,EGCG的抗菌作用可能與其抑制細(xì)胞質(zhì)二氫葉酸還原酶(一種參與核酸前體合成的酶)的能力有關(guān)。所有這些結(jié)果表明茶多酚的抗菌特性可能是多因素的。據(jù)報(bào)道,EGCG和茶黃素可以抑制其他牙周病原體的生長(zhǎng),包括P.gingivalis、Prevotella intermedia和Aggregatibacteractinomycetemcomitans。有趣的是,我們最近發(fā)現(xiàn)EGCG和茶黃素可以增強(qiáng)牙周治療中使用的常規(guī)抗生素(甲硝唑、四環(huán)素)的作用。F.nucleatum共聚集和形成生物膜的能力在與牙周炎相關(guān)的齦下菌斑的發(fā)展中起關(guān)鍵作用。此外,當(dāng)具核梭菌嵌入生物膜時(shí),它比浮游細(xì)胞更能抵抗機(jī)械去除和抗菌劑。鑒于F.nucleatum形成的生物膜是牙周病發(fā)展的關(guān)鍵步驟,因此可以使用防止生物膜形成或殺死生物膜包埋細(xì)菌的化合物來預(yù)防牙周炎。本研究的結(jié)果表明,在低于其MIC值的濃度下,綠茶提取物、EGCG、茶黃素以及在較小程度上紅茶提取物抑制F.nucleatum的生物膜形成。此外,暴露預(yù)先形成的F.nucleatum。

綠茶和紅茶提取物、EGCG和茶黃素對(duì)F.nucleatum具有抗菌和抗粘附活性。更具體地說,它們減少了對(duì)牙齦上皮細(xì)胞的粘附和生物膜的形成,并殺死了生物膜包埋的有核梭菌細(xì)胞。茶多酚還減弱了具核梭菌的溶血活性和H2S 的產(chǎn)生。我們的研究結(jié)果表明,綠茶和紅茶多酚可能是治療牙周炎的有希望的輔助劑。

3.7 西帕依含漱液與牙齦炎

中醫(yī)認(rèn)為,牙齦炎產(chǎn)生的病因?yàn)樘摶鹕涎?、腎陰虧虛而導(dǎo)致牙齦消灼,同時(shí)牙齒因氣血不足而失去潤養(yǎng),以致于牙齦出現(xiàn)萎縮,故治療常采用清熱瀉火之法。西帕依固齦液的有效成分為沒食子,具有止血、固氣的功能,可使牙齒堅(jiān)固牙齦健康。

4 結(jié)論

綜上所述,兩者相比,復(fù)方茶多酚的優(yōu)勢(shì)在于使機(jī)體提升抗炎能力,同時(shí)能抑制牙齦炎致病菌的生長(zhǎng)。

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