劉涵，袁煥青，趙俊芳，張偉偉，康夢(mèng)雅，王悅

(河北象大合眾生物科技有限公司，河北石家莊 050000)

近幾年來，養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展勢(shì)頭迅猛，是從傳統(tǒng)畜牧業(yè)向現(xiàn)代畜牧業(yè)轉(zhuǎn)變的重要時(shí)期，但我國飼料資源卻面臨著“三缺乏一不足”。 精飼料、蛋白質(zhì)飼料、綠色飼料缺乏和飼料總量不足。 現(xiàn)代藥理研究表明桑葉含有18 種氨基酸和豐富的微量元素。桑葉中的多糖類及黃酮類等功能性成分對(duì)畜禽具有免疫保健作用， 能夠防止禽流感的發(fā)生，提高畜禽的抗病能力，有利于畜禽保持健康快速的生長。目前正定縣種植桑葉的面積已經(jīng)達(dá)到數(shù)萬畝，有豐富的桑葉資源。 大量的桑葉作為桑樹的附屬物沒有得到有效的利用，造成資源浪費(fèi)及環(huán)境污染。目前對(duì)桑葉進(jìn)行深加工領(lǐng)域研究比較匱乏， 我們利用自身中獸藥深加工的優(yōu)勢(shì)，結(jié)合現(xiàn)代化加工提取工藝， 進(jìn)行了研發(fā)的創(chuàng)新。同時(shí)，也與一些科研機(jī)構(gòu)和院校加強(qiáng)合作，共同探索桑葉提取工藝、桑葉提取物制劑工藝、桑葉提取物噴粉工藝的推廣應(yīng)用和桑葉提取物-桑葉多糖檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的研究。共同探索解決現(xiàn)代規(guī)模化養(yǎng)殖中的抗生素亂用、 疾病難控等重大難題，減少抗生素在食品動(dòng)物中的使用，提升行業(yè)食品安全，減少環(huán)境的污染。

河北象大合眾生物科技有限公司根據(jù)國家政策及行業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)提出了“無抗養(yǎng)殖”和“大保健”理念；研發(fā)治療疾病替代產(chǎn)品和新型植物提取物類飼料添加劑產(chǎn)品的發(fā)展規(guī)劃。 近年來，一些國內(nèi)學(xué)者曾研究過不同水平的桑葉粉飼喂畜禽對(duì)其生產(chǎn)性能及肉品質(zhì)的影響，但因?yàn)檠芯克蒙Ｈ~品種、來源、營養(yǎng)成分和添加比例各不相同，造成所得的結(jié)果存在差異。 而桑葉經(jīng)過提取濃縮噴粉干燥后的桑葉粗提物在國內(nèi)的使用鮮有報(bào)道，并且桑葉粗提物國家沒有生產(chǎn)、檢測(cè)等方面的標(biāo)準(zhǔn)。

目前， 通過對(duì)桑葉多糖產(chǎn)品生產(chǎn)工藝的優(yōu)化，由國家權(quán)威檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行了檢測(cè)驗(yàn)證，并且在河北象大合眾生物科技有限公司的應(yīng)用示范基地進(jìn)行了應(yīng)用推廣。 檢測(cè)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法針對(duì)桑葉多糖產(chǎn)品的分析結(jié)果可靠，檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確度均達(dá)到測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。

1 范圍

規(guī)定了桑葉提取物產(chǎn)品要求、 試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)原則、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期。

2 主要技術(shù)內(nèi)容

2.1 技術(shù)指標(biāo)

2.2 試劑和材料

項(xiàng)目 指標(biāo)鑒別 符合規(guī)定水分 ≤4.0%灰分 ≤2.0%含量 ≥20%

2.2.1 試劑

本法所用試劑均為分析純， 水為去離子水，符合GB/T6682-2008 二級(jí)水的規(guī)定。

2.2.1.1 甲醇

2.2.1.2 乙酸乙酯

2.2.1.3 甲酸

2.2.1.4 氯仿

2.2.1.5 10%硫酸乙醇溶液2.2.1.6 5%苯酚溶液

2.2.1.7 硫酸

2.2.2 儀器和設(shè)備

2.2.2.1 紫外可見—分光光度計(jì)2.2.2.2 電子分析天平

2.2.2.3 電熱恒溫水浴鍋

2.3 檢測(cè)方法

2.3.1 性狀：本品為淺褐色至棕褐色粉末。

2.3.2 鑒別

取本品加甲醇制成37.0%溶液作供試液。取桑葉標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照藥材1.0 克加甲醇30 毫升， 超聲提取30 分鐘，濾液濃縮至1 毫升作對(duì)照液。取上述二液各10 微升， 分別點(diǎn)于同一硅膠G 板，一次點(diǎn)二板。

2.3.2.1 以甲苯-乙酸乙酯-甲酸 （5:2:1）展開，紫外燈365 納米檢視。

2.3.2.2 以氯仿-甲醇-水（75:35:4）展開，噴10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹顯。

以上二板，熒光斑點(diǎn)和可見光斑點(diǎn)對(duì)應(yīng)率≥80%。

2.3.3 水分

按照GB/T6435-2014 中固體樣品檢測(cè)方法檢測(cè)

2.3.4 灰分

按照GB/T6438-2007 檢測(cè)方法檢測(cè)

2.3.5 含量測(cè)定

2.3.5.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品適量，加水制成0.1 毫克/毫升的溶液，即得。

2.3.5.2 試樣處理

精密稱取試樣20 毫克至250 毫升量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.3.5.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

精密量取對(duì)照品溶液0.2 毫升、0.4 毫升、0.6 毫升、0.8 毫升、1.0 毫升分別置于具塞試管中，分別加水至2.0 毫升，各精密加入5%苯酚溶液1 毫升，搖勻，迅速精密加入硫酸5 毫升，搖勻，放置10 分鐘，置40℃水浴中保溫30 分鐘，取出后迅速冷卻置室溫，以相應(yīng)的試劑為空白。按紫外-可見分光光度法，在490 納米處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并求得回歸方程。

2.3.5.4 樣品測(cè)定

精密量取1 毫升， 置于具塞試管中， 加水1.0 毫升，精密加入5%苯酚溶液1 毫升，搖勻，迅速精密加入硫酸5 毫升，搖勻，放置10 分鐘，置40℃水浴中保溫30 分鐘，取出后迅速冷卻置室溫，以相應(yīng)的試劑為空白，在490 納米處測(cè)定吸光度， 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含葡萄糖的量（毫克），計(jì)算，即得。

分析結(jié)果表述

X——樣品中桑葉多糖含量，克/100 克（毫升）

C——標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取的濃度，毫克/毫升

V——樣品定容體積，毫升

M——試樣取樣量，克（毫升）

3 標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期

3.1 標(biāo)簽

應(yīng)符合GB10648 規(guī)定。

3.2 包裝

本品裝入鋁箔聚乙烯袋等適當(dāng)材料的包裝袋中。

3.3 運(yùn)輸

運(yùn)輸過程中，不得與有毒、有害、有污染和有放射性的物質(zhì)混放混載，防止日曬雨淋。

3.4 貯存

本品應(yīng)貯存在避光、通風(fēng)、干燥處。

3.5 保質(zhì)期

本品在規(guī)定的包裝、貯存條件下，保質(zhì)期為24 個(gè)月。