張譽(yù)方，段博芳，關(guān)少君，楊建發(fā)，鄒豐才，董國(guó)棟，翟國(guó)蓮

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，云南昆明 650201；2.云南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南昆明 650201；3.臨滄市永德縣畜牧獸醫(yī)局，云南臨滄 677600)

云南地區(qū)以文山馬、烏蒙馬、云南矮馬、大理馬等6種馬為固有品種[1]，2009年云南驢被列為云南省畜禽遺傳資源保護(hù)名錄[2]。云南省馬屬動(dòng)物存欄60萬(wàn)匹，其中馬存欄23萬(wàn)匹，騾存欄17萬(wàn)匹，驢存欄19萬(wàn)匹，弓形蟲(chóng)對(duì)馬屬動(dòng)物發(fā)育、繁衍造成危害[3],對(duì)云南地區(qū)馬屬動(dòng)物養(yǎng)殖造成一定的經(jīng)濟(jì)損失，并威脅著人類健康。 剛地弓形蟲(chóng)(Toxoplasmagondii)屬于頂復(fù)門原蟲(chóng)，可感染人類，其終末宿主是貓和貓科動(dòng)物，主要通過(guò)貓的糞便等排泄物進(jìn)行傳播[4]。人和動(dòng)物主要通過(guò)食入含有弓形蟲(chóng)包囊的食物或被弓形蟲(chóng)卵囊污染的水源、食物而感染[5]。感染后可出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎等癥狀。由于弓形蟲(chóng)可穿過(guò)血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)[6]，癥狀嚴(yán)重時(shí)常表現(xiàn)出腦積水、腦炎和不同程度的神經(jīng)癥狀[7]。

弓形蟲(chóng)感染馬屬動(dòng)物多為隱性感染，許多國(guó)家和地區(qū)已有報(bào)道[8-11]。國(guó)內(nèi)對(duì)于弓形蟲(chóng)病的相關(guān)報(bào)道多以貓和豬，云南地區(qū)已有豬和鳥(niǎo)類感染弓形蟲(chóng)病的報(bào)道，但以馬屬動(dòng)物為宿主的弓形蟲(chóng)病尚無(wú)報(bào)道。本調(diào)查通過(guò)對(duì)云南省部分地區(qū)馬屬動(dòng)物感染弓形蟲(chóng)進(jìn)行血清流行病學(xué)分析，以期為云南省馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品的采集 2020年5月～11月，采集血液樣品，經(jīng)分離血清處理后分裝，獲得云南省969份馬屬動(dòng)物血清樣品，帶回實(shí)驗(yàn)室后置于4℃冰箱保存待檢(表1)。

表1 血清樣品信息表

1.1.2 試劑 弓形蟲(chóng)抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒(批號(hào)m 1203346)，上海酶聯(lián)生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 夾心ELISA檢測(cè)抗體及結(jié)果判定 按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值>1.00，陰性對(duì)照平均值<0.20；臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15；若樣品OD值<臨界值，則判定為陰性；若樣品OD值≥臨界值，則判定為陽(yáng)性。

1.2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0進(jìn)行分析，用χ2檢驗(yàn)，若P>0.05，則差異不顯著，若P<0.05，則差異顯著，若P<0.01，則差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 弓形蟲(chóng)血清抗體總陽(yáng)性率

969份樣品中79份血清抗體陽(yáng)性，總陽(yáng)性率為8.15% (79/969)。不同地區(qū)和不同種類馬屬動(dòng)物血清抗體陽(yáng)性率不同。

2.2 不同地區(qū)和不同種類馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)抗體

保山地區(qū)和德宏地區(qū)陽(yáng)性率均為10.67% ，紅河地區(qū)弓形蟲(chóng)抗體陽(yáng)性率為2.63%，不同地區(qū)馬屬動(dòng)物血清樣本弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率差異不顯著(P>0.05)(表2)。騾的血清抗體陽(yáng)性率為11.72%，驢陽(yáng)性率為8.92%，馬弓形蟲(chóng)血清抗體陽(yáng)性率為3.03%。不同種類的馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)的陽(yáng)性率差異顯著(P<0.01)(表3)。

表2 不同地區(qū)馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染情況

表3 不同種類馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染情況

3 討論

云南馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)血清抗體陽(yáng)性率與新疆和青海地區(qū)相比較高，而低于吉林、遼寧和內(nèi)蒙古地區(qū)。不同地區(qū)間的陽(yáng)性率不同可能與當(dāng)?shù)氐牡乩憝h(huán)境、氣候和馬屬動(dòng)物的養(yǎng)殖方式、種類以及對(duì)弓形蟲(chóng)的檢測(cè)方法有關(guān)。云南省相較于新疆和青海地區(qū)，差別主要為亞熱帶季風(fēng)氣候，降水較為豐富，這些因素可能有利于弓形蟲(chóng)卵囊在環(huán)境中存活。此外，云南省的馬屬動(dòng)物主要以散養(yǎng)戶為主，多樣的飼養(yǎng)環(huán)境所帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)或許是其感染率較西北地區(qū)更高的原因之一。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，8個(gè)地區(qū)中，保山和德宏的馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染率最高，紅河的馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染率最低。其原因可能是因?yàn)楸Ｉ胶偷潞晡挥谠颇鲜∥髂喜康貐^(qū)，山地地形較多，降水更為豐富，具有較高的氣溫和濕度，有利于弓形蟲(chóng)卵囊在環(huán)境中存活；其次，保山和德宏相比紅河海拔更高，高海拔地區(qū)居民以放牧為主，環(huán)境中野生貓科動(dòng)物相對(duì)較多，作為弓形蟲(chóng)的終末宿主，這也會(huì)增大馬屬動(dòng)物感染弓形蟲(chóng)的風(fēng)險(xiǎn)。

本研究中不同種類馬屬動(dòng)物血清樣本弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率差異極顯著(P<0.01)、騾弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率顯著高于馬和驢；不同地區(qū)的馬屬動(dòng)物血清樣本弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率差異不顯著(P>0.05)，表明品種是影響馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染的重要因素?？赡苁遣煌N類的馬屬動(dòng)物對(duì)于弓形蟲(chóng)的易感性不同。騾的陽(yáng)性率較高，可能是作為馬和驢的種間雜種，其自身基因上對(duì)于弓形蟲(chóng)的易感性較強(qiáng)；也與騾的養(yǎng)殖方式和重視程度的不同有關(guān)。家貓的糞便混在騾的飼料中被其誤食也會(huì)增大騾感染弓形蟲(chóng)病的風(fēng)險(xiǎn)。

此次對(duì)云南部分地區(qū)馬屬動(dòng)物血清通過(guò)ELISA方法調(diào)查發(fā)現(xiàn)，弓形蟲(chóng)病抗體總陽(yáng)性率為8.15%(79/969)，8個(gè)地區(qū)的馬屬動(dòng)物普遍存在弓形蟲(chóng)的感染與流行。其中不同種類馬屬動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染率差異極顯著，騾弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率明顯高于馬和驢；而各個(gè)地區(qū)均存在弓形蟲(chóng)的感染也說(shuō)明弓形蟲(chóng)對(duì)生存環(huán)境具有高度可塑性。

弓形蟲(chóng)作為專性細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲(chóng)，其危害嚴(yán)重且分布廣泛，目前尚無(wú)理想的防治藥物[12]。在養(yǎng)殖業(yè)和旅游業(yè)中，人與馬屬動(dòng)物的直接接觸會(huì)增大弓形蟲(chóng)的感染風(fēng)險(xiǎn)[13]。因此，不僅要在馬屬動(dòng)物中加強(qiáng)防控，保障云南地區(qū)馬屬動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)長(zhǎng)期穩(wěn)定發(fā)展，更要在人群中采取有效措施防范弓形蟲(chóng)病的發(fā)生和流行，從而保障人類健康，有效維護(hù)公共衛(wèi)生安全。