錢珂羽，鄧云天，郭修圣，李冠華

（1.內(nèi)蒙古大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 省部共建草原家畜生殖調(diào)控與繁育國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010070；2.內(nèi)蒙古大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院 牧草與特色作物生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010070）

漆酶最早由日本學(xué)者Yoshida發(fā)現(xiàn)，是一種多銅氧化酶，能夠氧化降解多種酚類和酚胺類化合物，被廣泛應(yīng)用于生物質(zhì)能源、生物基材料、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、生態(tài)修復(fù)、現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、以及醫(yī)藥領(lǐng)域，也被稱為“綠色化學(xué)的藍(lán)色酶”[1]。漆酶在微生物、植物和昆蟲均有發(fā)現(xiàn)，白腐真菌被認(rèn)為是漆酶的重要生產(chǎn)者。學(xué)者們以產(chǎn)漆酶真菌為研究對(duì)象，在新物種發(fā)現(xiàn)、分類系統(tǒng)、起源與進(jìn)化、生態(tài)學(xué)功能、種質(zhì)資源挖掘與保護(hù)、發(fā)酵體系的建立、酶學(xué)性質(zhì)與酶工程、應(yīng)用開發(fā)等進(jìn)行了較深入研究[2-3]。產(chǎn)量低、生產(chǎn)成本高仍然是漆酶廣泛應(yīng)用的限制因素。因此，建立、完善生產(chǎn)工藝，提高生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，就成為漆酶開發(fā)應(yīng)用的關(guān)鍵。

固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵是漆酶生產(chǎn)的主要方式，相較于液態(tài)發(fā)酵，固態(tài)發(fā)酵模擬自然環(huán)境，利于微生物與氧氣接觸，避免產(chǎn)物反饋抑制，具有原料成本低、菌體產(chǎn)酶量大、下游產(chǎn)物回收率高、幾乎無發(fā)酵廢水等優(yōu)點(diǎn)，是漆酶生產(chǎn)的理想方式之一[4]。固態(tài)發(fā)酵是一個(gè)包括固、液、氣三相的生物反應(yīng)過程。其中，固態(tài)基質(zhì)是主體，是影響微生物生長(zhǎng)，熱質(zhì)傳遞和產(chǎn)物代謝的核心因素。木質(zhì)纖維素是地球上最豐富的有機(jī)物，包括了農(nóng)業(yè)廢棄物、林業(yè)廢棄物和工業(yè)加工剩余物等。以木質(zhì)纖維素為固態(tài)基質(zhì)不但能夠?yàn)槲⑸锾峁┨荚?、誘導(dǎo)物和微環(huán)境，而且有利于降低發(fā)酵成本，避免資源浪費(fèi)與環(huán)境污染。

以木質(zhì)纖維素為基質(zhì)固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)酶是當(dāng)前研究方向。MARDETKO N等[5]以玉米芯為固態(tài)基質(zhì)，建立了固態(tài)、液態(tài)順序發(fā)酵工藝，提高了串珠鐮刀菌（Fusarium verticilliodes）木聚糖酶和葡聚糖酶產(chǎn)量；SHARMA A等[6]以富含類黃酮的豆粕、豆腐渣等農(nóng)工業(yè)殘留物為固態(tài)基質(zhì)，發(fā)現(xiàn)能夠顯著提高漆酶產(chǎn)量。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)木質(zhì)素相對(duì)含量是影響漆酶產(chǎn)量的重要因素，改變木質(zhì)素相對(duì)含量可以顯著提高漆酶產(chǎn)量[3]；固態(tài)基質(zhì)孔徑分布直接影響微生物對(duì)于基質(zhì)內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)的利用，提高發(fā)酵效率[7]；在此基礎(chǔ)上建立了氨水預(yù)處理固態(tài)基質(zhì)提高漆酶產(chǎn)量的方法，經(jīng)過氨水預(yù)處理，固態(tài)基質(zhì)理化結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，可消化性顯著增強(qiáng)，漆酶產(chǎn)量提高3.4倍[8]。

此前研究是將木質(zhì)纖維素生物質(zhì)整體作為固態(tài)基質(zhì)，忽略了不同器官或組織化學(xué)性質(zhì)和物理結(jié)構(gòu)的影響，這可能是造成固態(tài)基質(zhì)利用率低，發(fā)酵效率低的重要因素。本研究以硬毛粗蓋孔菌（Funalia trogii）為發(fā)酵菌株，根據(jù)宏觀形態(tài)，將玉米秸稈分成鞘、莖、髓、葉四部分，分別以其為固態(tài)基質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)漆酶，在此基礎(chǔ)上分析固態(tài)基質(zhì)理化結(jié)構(gòu)差別與漆酶產(chǎn)量間的內(nèi)在關(guān)系，以期從本征結(jié)構(gòu)上闡明固態(tài)基質(zhì)對(duì)漆酶發(fā)酵的影響，使漆酶發(fā)酵工藝得到進(jìn)一步優(yōu)化，提高漆酶產(chǎn)量，推動(dòng)固態(tài)發(fā)酵技術(shù)的發(fā)展，為木質(zhì)纖維素資源的轉(zhuǎn)化利用提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌株與原料

硬毛粗蓋孔菌（Funalia trogii）：由實(shí)驗(yàn)室前期分離并保藏。玉米秸稈：采自于內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究試驗(yàn)田。

1.1.2 試劑

3,5-二硝基水楊酸（3,5-dinitrosalicylic acid，DNS）、葡萄糖、磷酸氫二鈉、2,2'-聯(lián)氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽（2,2'-azinobis（3-ethylbenzothia-zoline-6-sulfonicacid）ammonium salt，ABTS）（均為分析純）：天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；硫酸銅（分析純）：天津大茂化學(xué)試劑廠；乙二胺四乙酸二鈉（分析純）：天津永晟精細(xì)化工有限公司；濃鹽酸、濃硫酸（均為分析純）：成都渝榮化工有限公司；丙酮（分析純）：天津富宇精細(xì)化工公司；硼酸鈉、檸檬酸（均為分析純）：天津科茂化學(xué)試劑有限公司。

1.1.3 培養(yǎng)基

種子培養(yǎng)基：麥芽浸粉18 g/L，瓊脂粉17 g/L，葡萄糖5 g/L，pH自然，121 ℃滅菌20 min。

液態(tài)培養(yǎng)基：CuSO40.5 g/L，葡萄糖5 g/L，可溶性淀粉5 g/L，蛋白胨10 g/L，pH 4.5，121 ℃滅菌20 min。

固態(tài)培養(yǎng)基：固態(tài)基質(zhì)2 g，加入液態(tài)培養(yǎng)基8 mL，121 ℃滅菌30 min。

1.2 儀器與設(shè)備

Empyream型X-射線衍射儀：荷蘭帕納科公司；X3F型臺(tái)式冷凍離心機(jī)：賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；AL104型電子分析天平：賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；CM1850型冷凍切片機(jī)、M165C體式顯微鏡成像系統(tǒng)：徠卡微系統(tǒng)有限公司；Axio Scope A1：德國(guó)蔡司公司。

1.3 方法

1.3.1 固態(tài)基質(zhì)處理

玉米成熟后摘除玉米穗，距地面10cm以上處收割秸稈，分離成鞘、莖、髓、葉4部分，自然風(fēng)干，粉碎過40目篩備用。

1.3.2 固態(tài)發(fā)酵

將F.trogii接種于種子培養(yǎng)基，待菌絲體覆蓋平板表面二分之一時(shí)，用7 mm打孔器沿菌落邊緣打孔，獲得菌片。固態(tài)發(fā)酵在100 mL錐形瓶進(jìn)行，接種菌片5個(gè)，29 ℃黑暗，靜置培養(yǎng)12 d，每隔3 d測(cè)定酶活，并測(cè)定固態(tài)基質(zhì)質(zhì)量，計(jì)算質(zhì)量損失率，其計(jì)算公式如下：

1.3.3 漆酶活力測(cè)定

發(fā)酵結(jié)束后，錐形瓶加入40 mL Na2HPO4-NaH2PO4緩沖溶液（25 mmol/L，pH 6.0），玻璃棒打散固態(tài)基質(zhì)，4 ℃條件下靜置24 h。提取液離心（8 000 r/min，20 min），上清液即為粗酶液。殘?jiān)?05 ℃烘干至恒質(zhì)量。漆酶酶活測(cè)定條件：波長(zhǎng)420 nm，1 mmol/L ABTS，pH 3.5，反應(yīng)溫度為室溫（約25 ℃）。漆酶酶活力單位定義為：25 ℃、1 min氧化1 μmol ABTS所需的酶量，為1個(gè)酶活力單位即1 U。

1.3.4 化學(xué)組分測(cè)定

依照范氏法測(cè)定固態(tài)基質(zhì)化學(xué)組分，精確稱取0.5 g固態(tài)基質(zhì)，依次經(jīng)中性洗滌劑，2 mol/L鹽酸，7.34 mol/L硫酸反應(yīng)，每一步反應(yīng)結(jié)束后用蒸餾水沖洗至pH值中性，并用丙酮沖洗濾渣至無色，抽凈丙酮后，105 ℃烘干至恒質(zhì)量，稱質(zhì)量。差值法依次計(jì)算中性洗滌物（neutral detergent soluble，NDS）、半纖維素、纖維素和木質(zhì)素含量。

1.3.5 結(jié)晶度測(cè)定

X射線衍射儀（X'Pert PRO）測(cè)定固態(tài)基質(zhì)結(jié)晶度，測(cè)定條件為：40 kV，40 mA，掃描步長(zhǎng)為0.02°，2?=5°～40°。結(jié)晶度（crystallinity index，CrI）計(jì)算公式如下：

式中：CrI為結(jié)晶度，%；ICr為結(jié)晶區(qū)衍射峰高度，I；Iam為無定形區(qū)衍射峰高度，I。

1.3.6 聚合度測(cè)定

參照GB/T 1548—1989《紙漿粘度的測(cè)定法》中的銅乙二胺法測(cè)定固態(tài)基質(zhì)聚合度（degree of polymerization，DP）。

式中：DP為聚合度；[η]為固態(tài)基質(zhì)特性黏度，mL/g。

1.3.7 酶解試驗(yàn)

稱取固態(tài)基質(zhì)2g，加入40mL檸檬酸緩沖溶液（20mmol/L，pH 4.8），酶用量20 U/g，50 ℃恒溫振蕩水浴48 h，反應(yīng)結(jié)束后，取酶解液離心（8 000 r/min，20 min），DNS法測(cè)定還原糖含量。酶解還原糖得率（reducing sugar yield，RSY）計(jì)算公式如下：

式中：RSY為酶解還原糖得率，mg/g；Rs為樣品被纖維素酶水解后生成的還原糖，mg；ωc為樣品中纖維素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；ωhc為樣品中半纖維素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；M為樣品總質(zhì)量，mg。

1.3.8 菌絲生長(zhǎng)狀況觀察

將固態(tài)基質(zhì)切成大小均一小塊，接在長(zhǎng)好的菌絲邊緣，放在29 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)4 d。分別于2 d、4 d取樣置于體式顯微鏡下觀察。將上述發(fā)酵4 d的樣品用冷凍切片機(jī)切片，厚度為8 μm，用苯胺藍(lán)染液、染色，經(jīng)脫色后于光學(xué)顯微鏡觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米秸稈不同部位對(duì)漆酶產(chǎn)量的影響

不同基質(zhì)固態(tài)發(fā)酵過程中漆酶產(chǎn)量及質(zhì)量損失變化結(jié)果見圖1。

圖1 不同基質(zhì)固態(tài)發(fā)酵過程中漆酶產(chǎn)量（A）及質(zhì)量損失（B）變化Fig. 1 Changes of laccase production (A) and mass loss (B) during solid-state fermentation of different substrates

由圖1A可知，以玉米秸稈不同器官或組織作為固態(tài)基質(zhì)時(shí)，F(xiàn).trogii均能生長(zhǎng)產(chǎn)酶，但漆酶產(chǎn)量影響不同。隨著發(fā)酵進(jìn)行，漆酶產(chǎn)量逐漸增高；鞘漆酶產(chǎn)量最低，3 d后在26.40 U/g波動(dòng)；而髓漆酶產(chǎn)量最高，達(dá)到110.70 U/g（12 d），其次為莖和葉。由圖1B可知，固態(tài)基質(zhì)的質(zhì)量與漆酶產(chǎn)量變化相同，髓基質(zhì)質(zhì)量損失最高，其次為莖，鞘基質(zhì)質(zhì)量損失最低。發(fā)酵初期，固態(tài)基質(zhì)可溶性營(yíng)養(yǎng)物和液體培養(yǎng)基為微生物提供營(yíng)養(yǎng)，隨后營(yíng)養(yǎng)耗盡，微生物需產(chǎn)酶分解底物為自身提供營(yíng)養(yǎng)。由質(zhì)量損失可知，F(xiàn).trogii能夠利用秸稈莖和髓，而對(duì)秸稈葉和鞘利用率較少。

2.2 固態(tài)基質(zhì)理化性質(zhì)對(duì)漆酶產(chǎn)量的影響

2.2.1 固態(tài)基質(zhì)化學(xué)組分的測(cè)定

玉米秸稈不同器官或組織化學(xué)組分測(cè)定結(jié)果見圖2。由圖2可知，不同固態(tài)基質(zhì)化學(xué)成分差異顯著。莖的纖維素（34.33%）和木質(zhì)素（16.73%）含量最高，葉的灰分（5.78%）含量最高，鞘的半纖維素（36.65%）含量最高，而髓含有最高的NDS（26.69%）。一般而言，莖發(fā)揮支撐和保護(hù)作用，更高含量的木質(zhì)素和纖維素有利于提高剛性和強(qiáng)度，同時(shí)抵抗機(jī)械和病原體損傷。鞘主要發(fā)揮保護(hù)作用，更多的半纖維素含量使鞘的硬化組織更厚更硬，提高植物組織硬度，避免蟲害。髓主要發(fā)揮貯存和輸送營(yíng)養(yǎng)作用，含大量海綿狀薄壁細(xì)胞，而更容易被分解利用。

圖2 不同固態(tài)基質(zhì)化學(xué)組分測(cè)定結(jié)果Fig. 2 Determination results of chemical components of various solid substrates

2.2.2 固態(tài)基質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)參數(shù)對(duì)酶解率的影響

CrI、DP和RSY是反映固態(tài)基質(zhì)纖維素可利用性的重要參數(shù)，不同固態(tài)基質(zhì)物理性質(zhì)測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 不同固態(tài)基質(zhì)物理性質(zhì)測(cè)定結(jié)果Table 1 Determination results of physical properties of various solid substrates

由表1可知，莖的CrI（33.85%）和DP（738.72）最高，葉、鞘和髓CrI相近，且顯著低于莖（P＜0.05）；髓的DP（367.47）最低，但RSY（239.44 mg/g）最高；鞘的RSY最低，僅為154.29 mg/g。學(xué)者們發(fā)現(xiàn)CrI影響纖維素RSY，但研究結(jié)果仍有爭(zhēng)議[9-11]。LI F C等[12]認(rèn)為DP是限制酶解率的重要因素，而KAFLE K等[13]研究顯示，酶解速率與DP變化無相關(guān)性。本研究中CrI和DP對(duì)酶解率似乎并未起決定性作用。

2.2.3 固態(tài)基質(zhì)理化性質(zhì)與漆酶產(chǎn)量相關(guān)性分析

進(jìn)一步分析了固態(tài)基質(zhì)理化性質(zhì)與漆酶產(chǎn)量（12 d）的相關(guān)性結(jié)果見圖3。由圖3可知，RSY和木質(zhì)素含量與漆酶產(chǎn)量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），而半纖維素和灰分含量則與漆酶產(chǎn)量呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），其他理化性質(zhì)與漆酶產(chǎn)量間無顯著相關(guān)性。

圖3 固態(tài)基質(zhì)理化性質(zhì)與漆酶產(chǎn)量Pearson相關(guān)性分析Fig. 3 Pearson correlation analysis between physicochemical properties of solid substrate and laccase production

2.3 固態(tài)基質(zhì)上微生物生長(zhǎng)與漆酶產(chǎn)量的關(guān)聯(lián)

不同固態(tài)基質(zhì)中微生物生長(zhǎng)及分布的差異結(jié)果見圖4。

圖4 不同固態(tài)基質(zhì)中微生物生長(zhǎng)及分布的差異Fig. 4 Difference in growth and distribution of microorganisms in various solid substrates

由圖4可知，不同固態(tài)基質(zhì)均可見F.trogii菌絲，且第4天時(shí)菌絲更加濃密；菌絲在髓的生長(zhǎng)速度最快，表現(xiàn)為菌絲分布最濃密，第4天時(shí)菌絲與固態(tài)基質(zhì)幾乎纏繞一起；其次為莖；而鞘和葉上僅有少量菌絲附著，第4天略有增加。ANNEPU S K等[14]報(bào)道了菌絲生長(zhǎng)速率與酶產(chǎn)量的顯著正相關(guān)。ZHOU S等[15]證明菌株利用不同底物作碳源表現(xiàn)出的菌絲生長(zhǎng)狀況不同，生長(zhǎng)量較高的底物其酶活也較高。但是在COMAN C等[16]實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)了漆酶活性與菌絲體生長(zhǎng)之間的負(fù)相關(guān)。本研究與ANNEPU S K等[14-15]的結(jié)果相似，并認(rèn)為菌絲產(chǎn)量與漆酶活性趨于正相關(guān)。

3 討論

漆酶固態(tài)發(fā)酵適宜時(shí)間隨著菌株和培養(yǎng)基組分的不同而異，但是過長(zhǎng)的發(fā)酵時(shí)間不利于漆酶的高效生產(chǎn)。這是因?yàn)榕囵B(yǎng)條件的不穩(wěn)定性和營(yíng)養(yǎng)成分的消耗[17]。GóMEZ J等[18]研究發(fā)現(xiàn)，硬毛革孔菌（Coriolopsis rigida）發(fā)酵過程中，固態(tài)基質(zhì)最初釋放還原糖，4～11 d還原糖逐漸消耗直至消耗殆盡，而漆酶活性不斷上升并于12 d達(dá)到峰值。高酶解還原糖得率意味著固態(tài)基質(zhì)更容易被利用，可為真菌生長(zhǎng)提供更多碳源，利于漆酶生產(chǎn)[8]。微生物對(duì)碳源的利用一方面受其自身磷酸轉(zhuǎn)移酶的影響[19]，另一方面微生物會(huì)調(diào)整其產(chǎn)酶策略，以更好的適應(yīng)固態(tài)基質(zhì)化學(xué)組分變化[20]。GARCíA-TORREIRO M等[21]研究發(fā)現(xiàn)，以靈芝（Ganoderma lucidum）發(fā)酵產(chǎn)漆酶時(shí)，纖維素作碳源漆酶產(chǎn)量最高，而半纖維素作碳源產(chǎn)量最低；OTHMAN A M 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，單糖是哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）S7113發(fā)酵產(chǎn)漆酶的最佳誘導(dǎo)劑，其中葡萄糖作誘導(dǎo)劑時(shí)漆酶產(chǎn)量最高，而多糖（可溶性淀粉/羧甲基纖維素（carboxymethylcellulose，CMC））對(duì)漆酶生產(chǎn)具有抑制作用；YAN L L等[23]報(bào)道稱葡萄糖主要誘導(dǎo)香菇（Lentinula edodes）Lelcc1、Lelcc9、Lelcc8、Lelcc4、Lelcc14基因表達(dá)，纖維素只對(duì)Lelcc1有誘導(dǎo)作用，纖維素加0.1%木質(zhì)素磺酸鈉主要誘導(dǎo)Lelcc5和Lelcc6。DURáN-SEQUEDA D等[24]發(fā)現(xiàn)碳源對(duì)平菇（Pleurotus ostreatus）漆酶基因的促進(jìn)表達(dá)主要表現(xiàn)在Lacc2和Lacc10上。而本研究則認(rèn)為更高的還原糖得率更易于微生物產(chǎn)酶，而具體單糖對(duì)其產(chǎn)酶的影響還有待深入。

木質(zhì)素對(duì)漆酶生產(chǎn)具有誘導(dǎo)作用。ADEKUNLE A E等[25]在變色栓菌（Trametes versicolor）培養(yǎng)基中添加木質(zhì)素，發(fā)現(xiàn)漆酶產(chǎn)量是不添加木質(zhì)素的4.69倍；RODRIGUES E M 等[26]報(bào)道稱木質(zhì)素具有作為漆酶誘導(dǎo)劑的潛力。本研究中漆酶產(chǎn)量的提高可能是F.trogii暴露于木質(zhì)素而對(duì)毒性酚類化合物產(chǎn)生的氧化應(yīng)激反應(yīng)，作為適應(yīng)性反應(yīng)系統(tǒng)的一部分[27]。此外，與木質(zhì)素相關(guān)的芳香化合物及木質(zhì)素衍生物對(duì)漆酶的產(chǎn)生也具有一定誘導(dǎo)效果[28]，主要原因是芳香族化合物能與核易位蛋白形成異源二聚體，然后與異種生物反應(yīng)元件（xenobiotic response element，XRE）結(jié)合，激活靶基因的轉(zhuǎn)錄[28]，其對(duì)漆酶基因的轉(zhuǎn)錄也具有差異性。MOISEENKO K V等[29]報(bào)道稱香蘭素誘導(dǎo)lacE基因的表達(dá)，藜蘆醇誘導(dǎo)lacG和lacF基因的表達(dá)，而香草酸誘導(dǎo)lacC基因的表達(dá)。MIN D Y 等[30]研究發(fā)現(xiàn)，與葉片木質(zhì)素相比，玉米秸稈莖木質(zhì)素顯示出更高的對(duì)香豆酸（p-coumaric acid，pCA）、阿魏酸（ferulic acid，F(xiàn)A）含量，因其對(duì)漆酶的誘導(dǎo)作用，這似乎也可以解釋莖比葉表現(xiàn)出更高的漆酶活性的原因。

從目前研究來看，半纖維素與漆酶活性相關(guān)性直接影響機(jī)制還未知。半纖維素對(duì)漆酶產(chǎn)量的影響主要是兩方面，一方面半纖維素包裹纖維素，抑制葡萄糖的生成[31]，另一方面也可以作為碳源為微生物生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)，不過其影響較復(fù)雜。LU′-CHAU T A等[32]實(shí)驗(yàn)中以半纖維素作碳源時(shí)，靈芝（Ganoderma lucidum）和乳白耙齒菌（Irpex lacteus）降低了半纖維素流的毒性而使漆酶的生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)可行性。本研究表現(xiàn)為負(fù)相關(guān)。半纖維素通過共價(jià)鍵與木質(zhì)素形成了木質(zhì)素-碳水化合物復(fù)合物（lignin-carbohydrate complexes，LCC）[33]，XIE D 等[34]證明LCC具有抗氧化活性，其與碳水化合物部分密切相關(guān)，與木質(zhì)素部分關(guān)系不大。并且發(fā)現(xiàn)與LCC莖和LCC葉相比，LCC鞘具有最高的抗氧化活性和多糖含量。前面提到漆酶的生產(chǎn)可能與氧化應(yīng)激相關(guān)，所以推測(cè)LCC的抗氧化性抑制了漆酶的生產(chǎn)。LCC在植物不同器官結(jié)構(gòu)特征不同，最終表現(xiàn)為不同器官分泌漆酶的能力也不同。

4 結(jié)論

玉米秸稈不同器官或組織化學(xué)組分與物理性質(zhì)差異顯著，其作為固態(tài)基質(zhì)時(shí)產(chǎn)生高度異質(zhì)性，這種固態(tài)基質(zhì)的異質(zhì)性顯著影響微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)酶效率。本研究從固態(tài)基質(zhì)入手，明確固態(tài)基質(zhì)理化性質(zhì)與目標(biāo)產(chǎn)物間的聯(lián)系，改性固態(tài)基質(zhì)，優(yōu)化固態(tài)基質(zhì)配比，是提高固態(tài)發(fā)酵效率的重要手段。