文 李奎 蔚江濤 白俊青 牛偉 李世超 .楊凌核盛輻照技術有限公司;2.中陜核核盛科技有限公司
在食用葛根粉生產(chǎn)制造過程中,需要應用輻照滅菌技術,該技術的應用會對葛根粉的品質產(chǎn)生一定影響。因此,本文以此為研究,通過科學實驗方法,結果顯示,輻照滅菌技術對葛根粉品質的影響,主要集中在微生物存活數(shù)、一般營養(yǎng)成分、異黃酮類成分、物理特性、抗氧化活性方面。其中,不會降低微生物存活數(shù)量,在不同輻照劑量、輻照環(huán)境、輻照對象的條件下,一般營養(yǎng)成分的輻射敏感性存在差異。除在6.0kGy劑量時葛根素略有差異外,其他劑量條件下葛根素含量明顯增加,而且在6.0與8.0kGy輻照劑量條件下達到了最大值,差異顯著(P<0.05)。在溶解度、膨潤力、凍融穩(wěn)定性、物理特性方面,均有積極影響,有利于提高食用葛根粉產(chǎn)品質量,但是,在白度與總的抗氧化性方面并無明顯影響。因此,應在食用葛根粉生產(chǎn)加工時,選擇合適的輻照劑量,以提升產(chǎn)品品質。
葛根植物屬于豆科葛屬,經(jīng)我國衛(wèi)生部批準,可以從藥用與食用途徑對其價值進行開發(fā)利用。實踐經(jīng)驗表明,通過對其塊根的粉碎、分離、過濾、干燥處理后,能制成粉狀可食用葛根粉產(chǎn)品。從主要食用成分看,葛根淀粉含量比較高,而且富含膳食纖維、礦質元素、氨基酸、異黃酮等。從活性成分看,葛根中的異黃酮類成分,可以對心腦血管疾病產(chǎn)生一定的治療功效。由于葛根中含微生物,在生產(chǎn)加工中超標后會產(chǎn)生相應危害,因而需要對其進行輻照滅菌處理。下面先對葛根粉產(chǎn)品生產(chǎn)加工中的電子束輻照技術加以說明。
從葛根粉的主要活性成分看,其特征集中體現(xiàn)在熱不穩(wěn)定性方面,因此在生產(chǎn)加工此類產(chǎn)品時,高溫滅菌方法的應用效用相對不足。因此,在我國質量體系管理標準要求之下,通常采用輻照滅菌方案。從本質上看,輻照技術屬于冷加工技術,能夠對葛根粉產(chǎn)品生產(chǎn)加工時,具有污染的微生物進行相應的控制,在不損害產(chǎn)品主要營養(yǎng)成分與功能的情況下,保障產(chǎn)品質量。以常用的電子束輻照技術為例,其優(yōu)勢是性價比高,具體表現(xiàn)在成本適中、操作簡易、安全可靠、應用效用大等方面。近年來,通過對輻照技術應用經(jīng)驗的總結,逐漸優(yōu)化了電子束輻照殺菌技術,較好地提高了電子束流穩(wěn)定性,擴增了該技術的應用效用。
下面以葛根粉作為實驗對象,采用實驗方法對電子束輻照在葛根粉產(chǎn)品生產(chǎn)加工中的影響進行分析。實驗內容包括材料、儀器、方法、數(shù)據(jù)處理、影響分析,具體操作中主要是選取不同輻照劑量(共計6種:0kGy、2.0kGy、4.0kGy、6.0kGy、8.0kGy、10.0kGy)的電子束輻照,對實驗樣品及對照樣品進行輻照處理,然后展開具體分析。
2.1.1 材料
樣品:食用葛根粉。
對照樣品:大豆苷、葛根素、大豆苷元、D-無水葡萄糖。
分析純:鹽酸、濃硫酸、硫酸鉀、石油醚、氯化鈉。
色譜純:正己烷。
2.1.2 儀器
電子束輻照加工系統(tǒng):本公司實際有的“DZ-10/20”型電子束輻照加工系統(tǒng)。
電子分析天平:MS304s/01。
立式壓力蒸汽滅菌鍋:LDZX-50KBS。
超凈工作臺:BCM-1000。
霉菌培養(yǎng)箱:MJ。超聲波清洗器:KQ-300VDB。
定氮儀蒸餾器:KT 200FOSS凱氏。
水浴恒恒溫振蕩器:SHA-CD。
循環(huán)水式多用真空泵:SHB-Ⅲ。
低溫離心機:Allgera 64。
白度計:WBS-L。
低溫保存箱:DW-40L508。
紫外可見分光光度計:UV-2450。
液相色譜儀:e2695,LC 20AT。
2.2.1 準備樣品
微生物檢測:選用PE透明自封袋封裝食用葛根粉,共計18份,每份50g。
理化指標檢測:同上述方法,選取18份,每份250g。
2.2.2 電子束輻照
專用金屬托盤:厚度3cm到4cm,將樣品均勻置于托盤上。輻照劑量:0 kGy、2.0 kGy、4.0 kGy、6.0kGy、8.0 kGy、10.0 kGy。
參數(shù)設置:(1)電子加速器輸出功率:10kW;(2)電子束能量:10MeV;(3)電子束流掃描速率:220次/s。
輻照控制:用托盤控制電子束下的傳輸速度,輻照完成后室溫條件下進行儲存。
2.2.3 測定內容
測定內容:微生物存活數(shù)、一般營養(yǎng)成分含量、多糖含量、異黃酮類成分含量、物理性能、還原力。下面根據(jù)確定的實驗方法,對多糖含量測定、異黃酮類成分含量測定、物理性能測定、抗氧化活性測定做出說明。
以測定多糖含量為例:(1)稱取0.06gD-無水葡萄糖(5%),將其置入50mL容量瓶,然后加純水至最大刻度值,通過溶解、稀釋、搖勻處理,得到對照品溶液0.12mg/mL。用吸管吸取對照品溶液置于比色管(1mL),具體操作中按照0.8mL、0.7mL、0.6mL、0.5mL、0.4mL、0.3mL、0.2mL的順序進行吸取。對于不能達到比色管容量的通過加純水的辦法使其達到所需標準。(2)稱取0.08g葛根粉放入圓底燒瓶并加純水至100mL,按照稱“重—加熱—回流—提取—放冷—稱重—補重量—搖勻—過濾—吸取”的流程進行操作,最后得到0.5mL濾液。(3)將試驗樣品(葛根溶液)、對照樣品(D-無水葡萄糖溶液)放入比色管(25mL),加水至1mL后,在兩種溶液中各加入2mL苯酚溶液(5%)、7m濃硫酸溶液,每加1次溶液搖勻后,再加入另一種,加完后置于沸水浴進行15min的加熱,冷卻至室溫用紫外可見分光光度計于490nm位置對其吸光度進行測定。
以測定異黃酮類成分含量為例:稱取1kg葛根粉置入容量瓶(50mL),選擇乙醇進行定容處理(30%,V/V)后,將其放在恒溫水?。?0℃)進行超聲提取,過濾后用HPLC分析方法獲得色譜度。高效液相色譜儀相關參數(shù)設置如下:(1)色譜柱:4.6mmx250mm,5um;(2)流動相:水、甲醇;(3)流速:1Ml/min;(4)柱溫:35℃;(5)進樣量:5ul;(6)檢測波長:250nm。以物理性能測定為例:根據(jù)GB/T22427.6-2008中給出的標準方法進行白度測定。溶解度與膨潤力的測定方法如下:(1)通過精確度可以達到0.001g的電子分析天平稱取1g食用葛根粉;(2)將稱取物加入50mL純水之中配置質量分數(shù)為2%的溶液;(3)將水浴恒溫振蕩器溫度調至85℃后,對配置溶液進行恒溫水浴處理,攪拌時間控制為30min;(4)將水浴處理后的溶液置入離心管后,放入低溫離心機進行離心處理,具體參數(shù)設置要求離心時間設定為15min,每分鐘的轉數(shù)設定為3000r;(5)離心完成后,取其上清液進行烘干處理,烘箱溫度設置為105℃;(6)烘干后進行稱重,得到水溶液性葛根粉質量,并將離心管中沉淀部分當作膨脹葛根粉,從而將兩種類型的葛根粉代入溶解度與膨潤力計算公式獲取相關數(shù)據(jù)。
凍融穩(wěn)定性的測定與溶解度及膨潤力的方法相同,具體操作如下:(1)通過精確度可以達到0.001g的電子分析天平稱取1g食用葛根粉;(2)將稱取物加入50mL純水之中配置質量分數(shù)為3%的溶液;(3)沸水浴15min,要求對其溶液體積進行了測定確保加熱時不發(fā)生改變;(4)在實驗室常溫條件下進行冷卻處理,并將其移取到塑料離心管之中,移取物為葛根粉糊;(5)將保存箱的溫度設置為零下20℃保存移取物,具體保存時間以24h為準;(6)將保存的移取物取出后進行解凍處理,并進行離心至有水析出。離心時長設定為20min,每分鐘設置4000r,當無水析出時,需要試驗人員進行反復凍融直到滿足試驗要求;(7)對于離心后的溶液進行濾紙過濾處理,并稱重其中的沉淀物,將具體數(shù)值代入到析水率公式得到相關數(shù)據(jù)。
以抗氧化活性測定為例,重點集中在溶液制備上,方法如下:(1)用電子分析天平稱取2g的食用葛根粉;(2)將稱取物加入80mL乙醇溶液(體積分數(shù)為70%);(3)將水浴恒溫振蕩器溫度調至80℃后,對配置溶液進行避光浸提處理,時間設定為30min;(4)將提取液置于離心管后放入離心機,離心時間設定為10min,每分鐘設置3000r,離心完成后提取上清液即為目標液并放入冰箱進行冷藏備用等。
首先,應用電子束輻照對葛根粉中的微生物進行殺滅處理,根據(jù)輻照原理與實踐經(jīng)驗,微生物存活數(shù)量必定會減少。經(jīng)本次實驗測定結果顯示,初始菌落總數(shù)、霉菌數(shù)、大腸菌群數(shù)分別為2.2×10CFU/g、5.0×10CFU/g、15MPN/g。
其次,按照不同輻照劑量,對其進行測定后,根據(jù)輻照劑量、葛根粉菌落總數(shù)對數(shù)值(lgN)之間存在的“輻照劑量增大,污染微生物存活數(shù)量隨之減少”的基本關系,擬合后得到方程y=-0.3732X+3.4066,R=0.98。求出菌落總數(shù)、霉菌數(shù)、大腸菌群數(shù)相關的D值,得到2.68kGy、1.94kGy、2.17kGy。由于2.68kGy是應用電子束輻照時的標準技術參數(shù),相當于殺滅90%微生物的輻照劑量,此時將該值作為參考值,可知菌落總數(shù)降低了一個數(shù)量級。
通過對不同輻照劑量下葛根粉中的水分、蛋白質、脂肪、灰分、淀粉、多糖、膳食纖維、維生素B、維生素B等一般營養(yǎng)成分進行測定,結果顯示,在不同輻照劑量、輻照環(huán)境、輻照對象的種類條件下,其輻射敏感性存在差異。具體如下:
(1)水分、灰分、蛋白質、淀粉含量,在不同輻照條件下均無顯著差異(P>0.05)。
(2)脂肪含量在輻照后受到了明顯影響,根據(jù)每100g葛根粉含有0.1g脂肪進行對比,輻照樣品顯著高于未進行輻照的樣品(P<0.05),但是,在不同的輻照劑量下并無顯著差異(P>0.05)。
(3)多糖含量在輻照測定條件下高于未進行輻照的樣品含量,差異顯著(P<0.05)。
(4)與其它一般營養(yǎng)成分相比,膳食纖維含量相對減少,差異顯著(P<0.05)。
(5)維生素屬于能量代謝成分,與輻照關系不大,而且在輻照劑量變化的條件下也沒有相關性。
在異黃酮類成分測定方面,以葛根素、大豆苷、大豆苷元為主。例如,葛根作為藥用產(chǎn)品時,主要應用成分為葛根素,這種成分在葛根粉中屬于特有活性成分,含量占到總黃酮含量的1/2以上。因而在評價此類產(chǎn)品質量時,需要將其作為一項重要指標。
根據(jù)本次試驗結果看,除在6.0kGy劑量時葛根素略有差異外,其他劑量條件下含量明顯增加,而且,在6.0與8.0kGy輻照劑量條件下,達到了最大值,差異顯著(P<0.05)。與之相比,大豆苷、大豆苷元在輻照條件下并沒有發(fā)生明顯變化,而且在不同的輻照劑量下亦是如此。因此無顯著差異(P>0.05)。
在葛根粉物理特性測定方面,內容相對較多。而且,每項測定內容均有固定的公式可以進行具體計算,測定數(shù)值相對客觀。
例如,在白度、溶解度、膨潤力、凍融穩(wěn)定性方面,輻照會產(chǎn)生明顯影響。對比不同輻照計量下的物理特性看,除白度的變化值不大外,其它方面均有顯著差異(P<0.05)。
再如,當輻照劑量在2.0kGy到8.0kGy范圍之間時,葛根粉的凍融穩(wěn)定性明顯增強、析水率有所下降。根據(jù)現(xiàn)階段的研究成果看,當溶解度增加的情況下,此類產(chǎn)品的沖調性相對較好。所以在輻照后葛根粉溶解度與膨潤力均增大的情況下,其功能特性有所增加,品質相對提高。
再如,在輻照條件下葛根粉的抗氧化活性,主要表現(xiàn)在DPPH自由基清除能力、羥自由基(OH)清除能力、還原力等方面,根據(jù)本次測定試驗結果看,DPPH自由基在2.0kGy到8.0kGy范圍時清除率相對較高,具有顯著差異(P<0.05)。但是,它與輻照劑量之間并不存在可見的線性關系??傮w上看,輻照對抗氧化活性并無明顯影響。
總之,葛根粉的藥用與食用價值比較高,在此類產(chǎn)品的生產(chǎn)加工中應用電子束輻照技術,不僅可以有效化解熱不穩(wěn)定性產(chǎn)生的滅菌問題,也能提高產(chǎn)品的生產(chǎn)加工效率,擴增企業(yè)可盈利空間。結合上述分析可以看出,輻照量增大后,葛根粉中的微生物存活數(shù)量相對減少,而且不會對其中的一般營養(yǎng)成分含量與主要活性成分等產(chǎn)生負面影響。同時,在增加其凍融穩(wěn)定性的情況下,可以有效保障此類產(chǎn)品質量。因此,在我國經(jīng)濟進入高質量發(fā)展階段后,應進一步增強對電子束輻照殺菌技術的研究,并使其在葛根粉產(chǎn)品生產(chǎn)加工中,發(fā)揮更大的技術效用,以提升其食用功效。