戰(zhàn)武

（山東省棲霞市蘇家店畜牧獸醫(yī)站 265311）

禽霍亂病是一種接觸性傳染病，家禽、野禽、鳥均可感染，發(fā)病季節(jié)不明顯，以夏秋季最多，且多發(fā)生于成年雞，傳染來源主要是400 日齡以上雞群中的帶菌雞。健康雞采食被病雞污染的飼料、飲水、蠅等昆蟲而感染；飼料缺乏維生素、蛋白質(zhì)及礦物質(zhì)營養(yǎng)，濕度增加等是本病誘因。季節(jié)性發(fā)生的原因是由于外界條件，主要受氣候變化而引起。急性發(fā)病時有很高的致死率，慢性發(fā)病時死亡很少，急性病禽有較嚴重的下痢癥狀，所以稱之為禽霍亂。

1 臨床癥狀

禽霍亂臨床以急性型居多，慢性型多不為人注意，潛伏期一般為2～9d。急性病例無任何癥狀就突然發(fā)病而死亡，發(fā)病率、死亡率均較高。較急性的潛伏期為2～3d，主要表現(xiàn)精神委頓、嗜睡、垂翅縮頭、不食、腹瀉、糞便呈灰黃色綠色，肉髯呈紫黑色，體溫升高至43～44℃[1]。慢性病例逐漸消瘦、精神較差、貧血、冠髯蒼白腫大，關(guān)節(jié)腫脹，多見于急性發(fā)病后期，或者是由于毒力較弱的多殺性巴氏桿菌感染所致，死亡率不高。鴨的癥狀與雞相似，病寒戰(zhàn)、怕下水、下腭軟處腫大、舌高度腫脹、眼球下陷(不死，常失明) 流出大量液體。排出綠色、污黃色或清水樣糞便，幾天內(nèi)即死。病程長的可見局部關(guān)節(jié)炎。

2 病理變化

禽霍亂急性與慢性病例在病理變化上有所不同。急性死亡的病雞，腹膜、肌胃、心冠及皮下脂肪出現(xiàn)顯著的出血性變化。肝臟具有特征性變化，呈實質(zhì)性肝炎，稍腫、質(zhì)稍脆，有灰白色無數(shù)小壞死灶布滿表面。慢性死亡病雞臨床癥狀以呼吸道表現(xiàn)嚴重時，有許多黏液滲出物充滿鼻腔與氣管，若局限于冠髯、關(guān)節(jié)等病例，最初為水腫性腫脹，而后形成干酪樣滲出物。

3 實驗室診斷

3.1 病料采集

死于禽霍亂病的雞在全身器官中都可分離出多殺性巴氏桿菌。為預(yù)防雜菌污染，對死亡時間較長的病禽可細菌分離病禽骨髓。慢性禽霍亂病例則采取有病灶的局部材料。

3.2 培養(yǎng)基

血液瓊脂、馬丁湯瓊脂和馬丁湯。

3.3 細菌分離

用鉑金鉺采取少許病料，接種于血液斜面上，37℃培養(yǎng)2h，即可分離出多殺性巴氏桿菌。

4 細菌鑒定

4.1 細菌形態(tài)

病原一般存在于病禽內(nèi)臟、血液、分泌物和糞便中。它是一種卵圓形或短桿狀細菌，大小為0.25～0.6×0.6～2.5μm，常單個存在。

4.2 菌落形態(tài)

直徑2～3mm 呈圓形，光滑隆起、半透明、似奶油，靠近的菌落有互相融合現(xiàn)象，分不清彼此的界限，新分離的菌株皆為此種菌落形態(tài)。

4.3 菌落熒光觀察

將細菌37℃培養(yǎng)18～22h 后，放大810 倍，觀察菌落熒光。當禽霍亂流行時，菌落呈橘紅色熒光，毒力強的菌株在培養(yǎng)基上經(jīng)長期傳代后或由慢性病灶中分離出的菌株，菌落熒光可能出現(xiàn)分化。蘭氏菌落較小，為1～2mm，熒光為蘭氏，毒力弱。其次為楔形變化，橘紅熒光的菌落中出現(xiàn)一條或多條糞樣色彩的楔形熒光，這是菌株不穩(wěn)定的表現(xiàn)，通過機體12 代后，此種楔形變化的菌落即會消失。偶爾可看到粗糙型菌落的熒光，菌落有黃色熒光，表面有黑色、粗糙環(huán)狀紋。此種菌落不穩(wěn)定，仍可變?yōu)楣饣汀㈤偌t色熒光。

橘紅色熒光多屬毒力強的菌落，但并不是絕對的，少數(shù)毒力弱的菌株也出現(xiàn)橘紅色熒光菌落。蘭氏熒光菌落是毒力弱的表現(xiàn)，有時出現(xiàn)黃綠色熒光，也是毒力弱的表現(xiàn)。另一方面，培養(yǎng)基成分、平皿干濕度和培養(yǎng)時間等也在一定范圍內(nèi)影響熒光的色澤。

4.4 莢膜染色

有莢膜的菌體一般具有橘紅色熒光，沒有莢膜的菌體為蘭氏熒光，選橘紅色熒光菌落用鹽水稀釋，在高倍鏡下檢查，菌體周圍的暈圈即為莢膜。

4.5 莢膜型檢查

根據(jù)血清學(xué)分類，多殺性巴氏桿菌可分為4 個莢膜型，能引起雞霍亂病的是莢膜A 型多殺巴氏桿菌，用金色葡萄狀菌在含0.1%血紅素的馬丁瓊脂平皿上劃線，然后將待檢菌株與葡萄球菌線垂直劃線，在37℃保溫箱中培養(yǎng)12～16h 后觀察，觀察要及時，若觀察過遲，則被抑制的菌又可生長。

4.6 生化試驗

多殺性巴氏桿菌能利用葡萄糖與蔗糖產(chǎn)酸，但不產(chǎn)氣，不溶血，在培養(yǎng)基上不生長。多殺性巴氏桿菌有一特點，在15～20℃的環(huán)境中存活時間比2～4℃時長，可保存在普通冰箱內(nèi)，每兩周傳代1 次，若在室溫保存則菌種易發(fā)生變異。

4.7 血清學(xué)檢查

血清學(xué)檢查對急性病雞沒有意義，對慢性病雞有一定意義，目前較常用的是瓊擴試驗。

（1）抗血清制備：可用12～16 周齡的公雞制備，將多殺性巴氏桿菌接種在用含0.1%血紅素的馬丁瓊脂上，37℃恒溫培養(yǎng)24h，用含0.3%福爾馬林的生理鹽水清洗，稀釋成每毫升含20億活菌的濃度，加礦物油乳化制成油乳劑抗原，用此抗原1ml接種于小公雞頸部皮下，3 周后放血，放血前一夜停喂飼料，分離出血清保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）瓊脂擴散試驗抗原的制備：將多殺性巴氏桿菌的濃原菌液接種，37℃培養(yǎng)18～21h，用含0.3%福爾馬林的生理鹽水洗下菌苔，分裝入小試管內(nèi)，放100℃水浴鍋內(nèi)加熱1h，然后離心30min，上清液即可用作瓊擴試驗抗原。

（3）瓊脂擴散試驗：8.5%氯化鈉溶液中加入0.9%～1.0%瓊脂和0.01%硫柳汞，加熱融化后即為瓊擴試驗用瓊脂。用時將瓊脂加熱融化后冷至約46℃時，取6ml 放在25×75mm，玻片上或取1ml 放進直徑9nm 平皿內(nèi)，瓊脂凝固后挖孔，孔徑為4mm，各孔與中央孔相距6mm，中央孔加抗原外圍孔加血清，玻片與平皿放進有濕紗布的盒內(nèi)以防干燥，恒溫培養(yǎng)后有沉淀線者為陽性反應(yīng)。

5 防治措施

5.1 衛(wèi)生管理的預(yù)防

禽霍亂是由病雞或多殺性巴氏桿菌污染物接觸健康雞而引起發(fā)病。只要杜絕多殺性巴氏桿菌進入雞舍，雞就不會發(fā)生禽霍亂病。

雞感染的主要來源有多個方面，主要為病雞或仍帶有病原菌的康復(fù)雞。病雞向外排菌，康復(fù)雞可在某些應(yīng)激因素（如飼料變動、受寒等）影響下突然發(fā)病而向外大量排菌，健康雞被感染易發(fā)病，因此，不同來源的雞群混養(yǎng)很危險，新引進的后備雞應(yīng)放在一個與老雞完全隔離的環(huán)境中飼養(yǎng)，老雞淘汰出售后，雞舍需經(jīng)過徹底清洗和消毒，才可引進新雞。飼養(yǎng)員和被污染的用具也有將病菌帶進雞舍的機會，因此，在進入雞舍前，飼料、用具和衣服等需進行消毒，使病菌沒有進入雞舍的機會。豬、狗、其他家禽和野生動物等均可成為帶菌者而將病菌傳進雞舍，因此，應(yīng)盡可能地防止其他動物有接近雞群的可能性。

5.2 藥物治療和預(yù)防

抗生素對霍亂病的治療有不同程度的效果，療效成功與否取決于及時的治療和恰當?shù)挠盟?，因此，治療前?yīng)取用病死雞分離出的多殺性巴氏桿菌進行藥敏試驗，篩選一種最佳藥物用于治療。

（1）抗生素：青霉素、鏈霉素等按治療劑量和療程用藥，若病菌無抗藥性時均可達到滿意的效果，但捉雞和注射過程麻煩。金霉素和土霉素按0.1～0.2%量混在飼料中，連續(xù)飼喂3～5d，也可達到較好效果。青霉素和鏈霉素混在飼料中投給則無效。

（2）磺胺類藥物：磺胺二甲基嘧啶、磷胺喹惡林和磺胺甲氧嗪等混在飼料中，含量為0.1%～0.5%，或混在飲水中，含量為0.04%～0.1%，連喂2～3d，有良好的療效。大劑量的磺胺連續(xù)飼喂會產(chǎn)生毒性，影響雞的生長機能，降低劑量長期服用。

任何一種藥物都不能長期應(yīng)用，長期應(yīng)用則療效降低需增加藥物用量，這將增加生產(chǎn)成本，同時可能引起雞中毒而導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降。因此，需經(jīng)常更換治療藥物，更換某種藥物前，需對候選藥物作敏感性試驗。但藥物治療不徹底，往往在停止用藥后雞又發(fā)病。

治療病雞的同時，要及時清除死雞與糞便，徹底消毒雞舍、運動場和用具，每天1 次。病雞舍鄰近雞群可用減半量的藥物進行預(yù)防性投藥，以便控制疫情。若疫情不嚴重時，藥物治療量的1/10～1/4 可用于禽霍亂較長期的預(yù)防[3]。

5.3 接種菌苗進行預(yù)防

許多菌苗或疫苗血清型和免疫型一致，血清型不同，其免疫型也不同，但禽霍亂菌苗的情況則與此不同，當用禽霍亂弱毒活菌苗免疫雞時，沒有血清型或免疫型之分，用任何一個禽霍亂弱毒活菌苗免疫均可抵抗不同血清型禽霍亂強毒菌株的攻擊，表現(xiàn)出血清型可以是多個，但免疫型只是1 個。如果用禽霍亂滅活菌苗免疫雞時，則出現(xiàn)另外一種情況，免疫雞只可抵抗與菌苗相同血清型強毒的攻擊，對不同血清型的強毒攻擊時，免疫雞死亡，表明菌苗無效。因此，使用滅活菌苗一定要與流行的禽霍亂強毒菌血清型一致才有效，二者血清型不一致，則菌苗無效。因此，滅活菌苗只能保護與菌苗相同的血清型強毒菌的攻擊，不能保護血清型不同強毒菌的攻擊?；罹鐒t可以保護所有血清型強毒菌的攻擊。

（1）霍亂弱毒活菌苗：活菌苗有一共同的缺點是免疫期短，只有3 個月，且有一定毒力，在某些應(yīng)激因素下，有時會給雞群造成一定的損失，為避免發(fā)生這種意外損失，在雞群免疫前先用10 倍免疫量的活菌苗注射10～20 只雞，觀察3～5d，若雞無嚴重反應(yīng)，再對大群雞進行免疫注射。

（2）禽霍亂滅活菌苗：禽霍亂滅活菌苗的優(yōu)點是安全，但其效果因制苗方法不同而有很大差別，存在免疫型問題，菌苗血清型必須與流行的禽霍亂強毒菌的血清型一致時才有效，否則免疫無效。目前，采用多種血清型的菌株混合制苗，禽霍亂血清多用于禽霍亂的短期預(yù)防，在長途運輸家禽時，皮下或肌肉注射2ml 血清，有效預(yù)防期為10d 左右。

6 結(jié)論

禽霍亂病是家畜常見傳染病之一，在實踐養(yǎng)殖中應(yīng)堅持預(yù)防為主的原則，做好衛(wèi)生管理、藥物治療、接種疫苗，有效降低家畜感染禽霍亂病的概率，減少禽霍亂病給養(yǎng)殖戶帶來的經(jīng)濟損失。