邵 燕，李 敏，孫江漫，馬 婷，尹顯艷，于洪遠，徐 麗

北京航天總醫(yī)院：1.檢驗科；2.科教處，北京 100076

互通性是標準物質(zhì)的一個重要屬性。有報道指出，標準物質(zhì)的互通性是“對于給定標準物質(zhì)的規(guī)定量，由兩個給定測量程序所得測量結(jié)果之間關(guān)系與另一指定物質(zhì)所得測量結(jié)果之間關(guān)系一致程度表示的標準物質(zhì)特性”[1]。標準物質(zhì)與臨床樣本在測量程序間具有互通性是保證臨床患者結(jié)果可溯源的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，也是標準物質(zhì)用于量值傳遞的前提條件。目前標準物質(zhì)互通性評價方法有兩類，分別是2010年和2014年，美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)發(fā)布的文獻[2-3]和2015年、2018年國際臨床化學(xué)與檢驗醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(IFCC)工作組介紹的互通性評價方案[4]和更新方案[5-7]。目前，國內(nèi)外尚沒有文件明確規(guī)定在進行互通性評價時應(yīng)選用哪種方案。由于目前沒有胱抑素C參考測量方法，本研究將兩種常規(guī)檢測方法組成比較對為例，介紹2018年IFCC工作組介紹的互通性評價新方案。

1 材料與方法

1.1儀器 日本日立7170A全自動生化分析儀，德國賽多利斯 LA120S型電子天平，德國艾本德Eppendorf reference移液器。

1.2兩種血清胱抑素C常規(guī)檢測方法基本信息 見表1。

表1 兩種血清胱抑素C常規(guī)檢測方法基本信息

1.3實驗樣本

1.3.1臨床樣本 收集42份0.5～8.0 mg/L的無溶血、乳糜、黃疸的單人份人血清樣本，每份樣本分為兩份，置于-80 ℃冰箱保存，文中記為CS1～CS42。

1.3.2標準物質(zhì) 4個濃度冰凍人血清胱抑素C標準物質(zhì)，編號為GBW(E)091173～091176,認定值±不確定度分別為(0.89±0.1)、(1.82±0.13)、(3.55±0.28)、(5.25±0.29)mg/L,k=2,文中記為RM1～RM4。

1.4測量方法 在日立7170A全自動生化分析儀上建立2個血清胱抑素C常規(guī)檢測系統(tǒng)，所有參數(shù)均由廠家提供。使用廠家提供的校準品校準，配套質(zhì)控品測量結(jié)果在控后進行臨床樣本和標準物質(zhì)的測量。依據(jù)方案要求，為了評價標準物質(zhì)的測量位置對測量結(jié)果的影響(位置效應(yīng))，將標準物質(zhì)按RM1～RM4的順序穿插在42例單人份血清標本中測量，每測量2份血清標本后測量1份標準物質(zhì)，每份實驗樣本重復(fù)測量3次，本研究中設(shè)置的每個濃度標準物質(zhì)的位置數(shù)量p=4。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理

1.5.1繪制臨床樣本的測量標準偏差圖與兩種方法之間的偏倚圖 使用Excel 2019軟件分別計算每種方法測量每份臨床樣本的濃度均值、標準偏差及Ln(濃度)的標準偏差，以濃度均值為X軸、濃度的標準偏差或Ln(濃度)的標準偏差為Y軸繪制臨床樣本的測量標準偏差圖；計算兩種方法測量每份臨床樣本的濃度均值、濃度差值及Ln(濃度)差值，以兩種方法濃度均值為X軸、濃度差值或Ln(濃度)差值為Y軸繪制兩種方法之間的偏倚圖；判斷有無離群值，若有，去除離群值，重新作圖。觀察偏倚圖中偏倚的分散寬度或偏倚隨樣本濃度的變化趨勢，初步判斷用濃度值還是Ln(濃度)值用于后續(xù)數(shù)據(jù)處理。偏倚值相對固定、分散寬度較窄、無趨勢性變化或趨勢性變化較小的情況最理想。

1.5.4標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法之的間偏倚差值(dRM)計算 標準物質(zhì)在兩種方法之間的偏倚為BRM，臨床樣本在兩種方法間的平均偏倚為BCS、移動均值記為BMA，則dRM=BRM-BCS或dRM=BRM-BMA。

1.5.6標準物質(zhì)的互通性評價 互通性評價標準設(shè)為C，可參考臨床允許總誤差制定。若dRM±U(dRM)在0±C范圍內(nèi)則表示有互通性，超出這個范圍則沒有互通性，若范圍有重合則表示無法判斷。為了更直觀地觀察互通性評價結(jié)果，以兩種方法測量標準物質(zhì)或臨床樣本的濃度均值為X軸，標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法間偏倚差值dRM為Y軸做圖，并在圖中標出0±C范圍及每種標準物質(zhì)dRM±U(dRM)。

2 結(jié) 果

2.1臨床樣本的測量標準偏差圖與兩種方法之間的偏倚圖 兩種方法測量臨床樣本的濃度和Ln(濃度)的標準偏差圖所示沒有明顯的離群值，見圖1、2；兩種方法測量臨床樣本的濃度偏倚和Ln(濃度)偏倚沒有明顯的離群值，分散寬度較大，肉眼觀察均有趨勢性，但Ln(濃度)偏倚相對濃度偏倚分散寬度小，所以初步判斷采用Ln(濃度)用于后續(xù)數(shù)據(jù)處理，見圖3。

圖1 A方法臨床樣本結(jié)果標準偏差圖

圖2 B方法臨床樣本結(jié)果標準偏差圖

圖3 兩種方法臨床樣本測量結(jié)果偏倚圖

2.2標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法之間的偏倚差值(dRM) 根據(jù)42份臨床樣本在兩種方法之間的Ln(濃度)偏倚Bi計算平均偏倚BCS為0.029 mg/L，Bi的標準偏差SB為0.037 mg/L，均方遞差的標準差SMSSD為0.015 mg/L，Q為0.155。設(shè)定顯著性水平α=0.05，查詢Q分布表，Q0.05=0.75,Q

表2 標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法之間的偏倚差值

2.3標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度U(dRM)評估結(jié)果 標準物質(zhì)RM1～RM4和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度分別為0.029、0.028、0.028及0.028 mg/L，k=1.9,見表3。

表3 標準物質(zhì)和臨床樣本在兩種方法之間偏倚的不確定度結(jié)果(mg/L)

2.4標準物質(zhì)互通性評價結(jié)果 4個濃度胱抑素C標準物質(zhì)RM1～RM4的dRM±U(dRM)分別為(0.012±0.029)、(0.004±0.028)、(0.015±0.028)、(-0.005±0.028)mg/L，k=1.9,均在互通性評價標準(0.000±0.118)mg/L范圍內(nèi)。見圖4。

圖4 胱抑素C標準物質(zhì)互通性評價圖

3 討 論

互通性是標準物質(zhì)、正確度驗證品或校準品的重要屬性，通過互通性評價不僅可以評價互通性，而且可以同時進行方法學(xué)比較、探究不同方法間的結(jié)果偏倚；測量項目有參考測量方法時可以同時進行常規(guī)測量結(jié)果的量值溯源，因此進行互通性評價是必要的。

根據(jù)既往研究報道，互通性評價方法大致分為兩類[8-14]。一類是EP30-A和EP14-A3的方法,二者均是基于方法學(xué)比較的方法，常以Y預(yù)測值的±95%置信區(qū)間來判斷互通性，評價過程方便快捷，但其受評價方法間一致性的影響較大，兩種方法的一致性越好，標準物質(zhì)越不可能具有互通性，因此導(dǎo)致標準物質(zhì)的互通性評價結(jié)論不可靠；另一類是IFCC工作組2015年和2018年介紹的方法，均是基于被評價標準物質(zhì)在兩種方法之間的偏倚與臨床樣本平均偏倚的一致關(guān)系判斷的。2018年的更新方案更細致、具體，利用標準物質(zhì)在兩種方法之間的偏倚與臨床樣本偏倚的差值是否符合醫(yī)學(xué)預(yù)期需求判斷互通性。

通過研究發(fā)現(xiàn)，IFCC更新方案評價過程較繁瑣，但切實、可行，更符合醫(yī)學(xué)預(yù)期用途。不同待評價物質(zhì)對應(yīng)的偏倚模型、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換及不確定度計算公式可能稍有不同，但評價過程和數(shù)據(jù)處理方法相似，可供讀者參考。在使用標準物質(zhì)作為校準品時，應(yīng)使用不同的方法對標準物質(zhì)的互通性進行評價，以保證互通性評價結(jié)果的可靠性。當不同方法的互通性評價結(jié)果有差異時，應(yīng)分析差異原因，選擇合適的互通性評價方案。