羅 倩 劉澤遠(yuǎn) 劉 陳 娟 童堯堯 任凌霜 伍仕敏

1長(zhǎng)江航運(yùn)總醫(yī)院檢驗(yàn)科 湖北 武漢 430014；2武漢大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 湖北 武漢 430071；3武漢市金銀潭醫(yī)院檢驗(yàn)科 湖北 武漢 430032；4武漢市臨床檢驗(yàn)中心 湖北 武漢 430030

結(jié)核?。╰uberculosis，TB）作為一種以呼吸道傳播為主的慢性傳染病，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康，是當(dāng)前全球重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一［1］。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)布的《2020 年全球結(jié)核病報(bào)告》統(tǒng)計(jì)，2019 年全球估計(jì)新增結(jié)核病患者約1 000 萬(wàn)例，實(shí)際報(bào)告新確診結(jié)核病例為710 萬(wàn)，約44%的新發(fā)病例分布在東南亞地區(qū)，中國(guó)占比約為8.4%，僅次于印度（26%）和印度尼西亞（8.5%），位列第3［2］。

臨床統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，結(jié)核病的治療成功率約為85%［3］，及時(shí)準(zhǔn)確的診斷和治療不僅有助于減少結(jié)核病死亡結(jié)局的發(fā)生，還可以進(jìn)一步減少結(jié)核病的傳播。因此，結(jié)核病的早期診斷對(duì)于結(jié)核病防治具有十分重要的意義。傳統(tǒng)的結(jié)核病診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”是結(jié)核菌培養(yǎng)，但是由于傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，液體培養(yǎng)所需設(shè)備昂貴，且靈敏度相對(duì)較低［4］，無(wú)法滿(mǎn)足臨床對(duì)結(jié)核病診斷的需求。目前，臨床常用的結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)主要包括抗酸染色、培養(yǎng)、巢式實(shí)時(shí)熒光PCR 法（Xpert MTB/RIF）和結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（tuberculosis infection T cell spot test，T-SPOT.TB）等方法，后兩種診斷方法的使用可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間。

本研究通過(guò)回顧分析確診結(jié)核病患者、臨床診斷結(jié)核病患者和健康體檢者抗酸染色、Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，從而研究抗酸染色、Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1研究對(duì)象 回顧分析2017 年1 月至2019 年12 月在武漢市金銀潭醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行抗酸染色涂片、Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 檢 查 的19 410例患者和45 例健康體檢者的檢查結(jié)果，結(jié)合病例資料進(jìn)行研究。

1.1.2納入排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：2017 年1 月至2019 年12 月在武漢市金銀潭醫(yī)院檢驗(yàn)科接受結(jié)核病相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查的患者和健康體檢者。結(jié)核病診斷依據(jù)《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)（WS288-2017）》和中華醫(yī)學(xué)會(huì)《臨床診療指南—結(jié)核病分冊(cè)》，以病原學(xué)檢查為主，同時(shí)結(jié)合患者的流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查、及其他輔助檢查進(jìn)行綜合分析。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①診斷不明或臨床診斷為非肺結(jié)核病患者。②就診時(shí)年齡小于18 周歲的患者。③人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者。排除原因：由于嬰幼兒和艾滋病患者的免疫系統(tǒng)功能不健全，導(dǎo)致這兩類(lèi)人群在接受T-SPOT.TB 檢測(cè)時(shí)相較于一般結(jié)核病人群靈敏度較低。資料的收集遵循知情同意原則。

1.1.3分組情況 排除其中診斷不明確或臨床診斷為非肺結(jié)核病患者8 014 例，排除就診年齡小于18 歲患者974 例和HIV 抗體檢測(cè)陽(yáng)性患者499 例，最終納入研究的人數(shù)為9 968 例。其中，有明確細(xì)菌學(xué)證據(jù)（結(jié)核培養(yǎng)陽(yáng)性）的確診結(jié)核病組患者1 299 例（包括肺內(nèi)結(jié)核和肺外結(jié)核；男性患者969例，女性患者330 例），臨床診斷肺結(jié)核組患者8 624例（男性患者5 872 例，女性患者2 752 例），健康對(duì)照組45 例（男性27 例，女性18 例）。

1.2 方法

1.2.1儀器與試劑 BHC-ⅡB2 二級(jí)生物安全柜（型號(hào)：蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司），顯微鏡（型號(hào)：CX21，日本OLYMPUS 公司），抗酸染色液（珠海貝索生物科技有限公司），GeneXpert MTB/RIF 儀器及相應(yīng)試劑盒（美國(guó)Cepheid 公司），T-SPOT.TB 檢測(cè)試劑（英國(guó)Oxford Immuno-tec 公司）。

1.2.2檢測(cè)方法

1.2.2.1抗酸染色 用接種環(huán)挑取痰液中干酪樣壞死小塊或帶血小塊，制成厚涂片，烘箱干燥15 min后取出染色架，放置于水槽上。趁玻片發(fā)燙時(shí)滴加石炭酸復(fù)紅染液蓋滿(mǎn)痰膜，保持染色5 min（染色期間應(yīng)始終保持痰膜被染色液覆蓋，必要時(shí)可續(xù)加染色液）。然后，用流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去染色液，瀝去標(biāo)本上剩余的水。自痰膜上端外緣滴加3%鹽酸乙醇蓋滿(mǎn)玻片，脫色1 min（如有必要，流水洗去脫色液后，再次脫色至痰膜無(wú)可視紅色為止）。用流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去脫色液，瀝去玻片上剩余的水。滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液，染色30 s 后，用流水自玻片一端輕緩沖洗，沖去復(fù)染液，然后瀝去標(biāo)本上剩余的水。待玻片干燥后置油鏡下觀(guān)察：未脫色細(xì)菌呈紅色為抗酸性細(xì)菌，脫色經(jīng)復(fù)染呈藍(lán)色的細(xì)菌為非抗酸性細(xì)菌。

1.2.2.2Xpert MTB/RIF 采取膜過(guò)濾法提取核酸，通過(guò)超聲破碎細(xì)胞，然后通過(guò)濾膜來(lái)分離蛋白和核酸。視不同樣本情況先進(jìn)行前處理，如痰樣本過(guò)于黏稠，可先加入適量4% NaOH，震蕩混勻后靜置15～20 min，待樣本充分液化后進(jìn)行操作。組織樣本需先加入少量生理鹽水后研磨，至肉眼見(jiàn)樣本為均勻懸液樣，再進(jìn)行操作取待測(cè)樣本約0.5 mL 加入試劑盒提供樣本處理液1.5 mL 中，來(lái)回振搖10～20 次，使其充分混勻后，靜置15 min，取液化后樣品（盡量不含顆粒和塊狀物）1 mL 加入反應(yīng)盒指定孔上機(jī)檢測(cè)（避免氣泡）。試驗(yàn)結(jié)束后軟件可自動(dòng)判讀結(jié)果，判斷待測(cè)樣本中是否檢出結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群，如果檢出，同時(shí)判斷是否檢出Rif Resistance。當(dāng)樣本中含有結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群時(shí)，5 個(gè)目的片段分別擴(kuò)增，儀器的GeneXpert Dx 系統(tǒng)會(huì)測(cè)量熒光信號(hào)和計(jì)算每根探針的Ct 值，得到一個(gè)半定量的結(jié)果。當(dāng)5 支探針均為陽(yáng)性的時(shí)候，即為檢出結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群且對(duì)利福平敏感。如果這5 個(gè)目的片段有突變，就會(huì)有相應(yīng)探針的擴(kuò)增失敗，單根探針的結(jié)果為陰性，則提示檢出結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群且對(duì)利福平耐藥。系統(tǒng)軟件同時(shí)設(shè)定探針中較低的Ct 值為模板起始濃度，如果某根探針擴(kuò)增陽(yáng)性，但Ct 值與起始濃度差大于系統(tǒng)設(shè)定范圍，也會(huì)被判定為利福平耐藥。當(dāng)擴(kuò)增產(chǎn)物濃度過(guò)低，系統(tǒng)計(jì)算值會(huì)處于灰區(qū)，出現(xiàn)耐藥不明確的結(jié)果。

1.2.2.3T-SPOT.TB 檢測(cè) 采集患者外周靜脈血，在室溫下進(jìn)行運(yùn)輸和保存，全程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。結(jié)果判定：如果抗原A 和/或抗原B 有應(yīng)答，檢測(cè)結(jié)果為“有反應(yīng)性”時(shí)，參照以下標(biāo)準(zhǔn)：空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)為0～5 個(gè)時(shí)且（抗原A 或抗原B 孔的斑點(diǎn)數(shù)）-（空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)）≥6；空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)為6～10 個(gè)時(shí)且（抗原A 或抗原B孔的斑點(diǎn)數(shù)）≥2×（空白對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)）。如果不符合上述標(biāo)準(zhǔn)且陽(yáng)性質(zhì)控對(duì)照孔正常時(shí)，檢測(cè)結(jié)果為“無(wú)反應(yīng)性”。當(dāng)陽(yáng)性質(zhì)控對(duì)照孔的結(jié)果為“不確定”且抗原A 和抗原B 孔的結(jié)果均為“無(wú)反應(yīng)性”時(shí)，認(rèn)為該實(shí)驗(yàn)結(jié)果為“并不確定”，需進(jìn)行復(fù)查。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)分別統(tǒng)計(jì)三種檢查方法單獨(dú)檢測(cè)，抗酸染色與GeneXpert MTB/RIF 或T-SPOT. TB聯(lián)合檢測(cè)的結(jié)核陽(yáng)性檢出率，并比較其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值等指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用Microsoft Excel 2019 建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（例）表示，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描 述，計(jì) 數(shù) 資 料 運(yùn) 用χ2檢 驗(yàn) 進(jìn) 行 比 較，P＜0.05 認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 人群一般資料納入的研究對(duì)象被分為確診結(jié)核病組（包括肺內(nèi)結(jié)核和肺外結(jié)核）、臨床診斷肺結(jié)核組和健康對(duì)照組。確診結(jié)核病組共1 299 例患者，其中男性969 例，女性330 例，平均年齡為（47.82±18.46）歲；臨床診斷肺結(jié)核組共8 624 例患者，其中男性患者5 872 例，女性患者2 752 例，平均年齡為（47.08±17.77）歲；健康對(duì)照組共45 例，其中男性27 例，女性18 例，平均年齡為（38.01±13.54）歲。見(jiàn)表1。

表1 研究對(duì)象的一般資料

2.2 三種診斷方法單獨(dú)檢測(cè)結(jié)核病的陽(yáng)性率的比較在確診結(jié)核病組中，抗酸染色、Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率分別為62.4%（811/1 299）、86.7%（1 072/1 236）和98.0%（292/298），與抗酸染色相比，Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 檢測(cè)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=195.7 和χ2=57.4，均P＜0.01）。臨床診斷肺結(jié)核組患者抗酸染色、Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 的陽(yáng)性檢出率分別為16.2%（1 319/8 163）、59.7%（1 231/3 056）和74.8%（2 508/3 352），與 抗 酸 染 色 相 比，Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 檢測(cè)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=736.7 和χ2=3 685.3，均為P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2 單項(xiàng)檢查結(jié)核陽(yáng)性檢出率比較

2.3 抗酸染色和Xpert MTB/RIF 聯(lián)合檢測(cè)診斷效果比較在確診結(jié)核病組和健康對(duì)照組中，分別有1 236 和45 例患者接受了抗酸染色和Xpert MTB/RIF 檢測(cè)。如表3 所示，抗酸染色、Xpert MTB/RIF 檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度分別為63.2%、86.7%和89.6%。聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度與抗酸染色或Xpert MTB/RIF 單獨(dú)檢測(cè)相比，差異有統(tǒng)計(jì) 學(xué) 意 義（χ2=816.2 和χ2=5.0，P＜0.01 和P=0.025）。抗酸染色和Xpert MTB/RIF 單項(xiàng)檢測(cè)靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=182.5，P＜0.01），特異度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？顾崛旧蚗pert MTB/RIF 單項(xiàng)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)特異度均為100%。單項(xiàng)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，抗酸染色、Xpert MTB/RIF 檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值分別為9.0%、21.5% 和26.0%，Xpert MTB/RIF 單獨(dú)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值與抗酸染色相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.9 和χ2=32.1，均P＜0.01）；抗酸染色、Xpert MTB/RIF檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的正確率分別為64.5%、87.2%和90.0%，Xpert MTB/RIF 單項(xiàng)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的正確率與抗酸染色相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=180.4和χ2=237.4，均P＜0.01）。

表3 抗酸染色和Xpert MTB/RIF 聯(lián)合檢測(cè)診斷效果比較[%(n/N)]

2.4 抗酸染色和T-SPOT. TB 聯(lián)合檢測(cè)診斷效果比較在確診結(jié)核病組和健康對(duì)照組中，分別有298 和45 例患者接受了抗酸染色和T-SPOT.TB 檢測(cè)。如表4 所示，抗酸染色、T-SPOT.TB 檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度分別為58.7%、98.0%和98.7%?？顾崛旧?、T-SPOT.TB 檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的特異度分別為100%、84.4%和84.4%。聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度與抗酸染色相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=141.7 和χ2=5.6，P＜0.01 和P=0.018），與T-SPOT. TB 單獨(dú)檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。T-SPOT.TB 單項(xiàng)檢測(cè)的靈敏度、特異度與抗酸染色相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=135.4 和χ2=5.6，P＜0.01 和P=0.018），與T-SPOT. TB 單獨(dú)檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。單項(xiàng)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，抗酸染色、T-SPOT. TB 和聯(lián)合檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值分別為26.8%、86.4%和90.5%，T-SPOT. TB 單獨(dú)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值與抗酸染色相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=52.0 和χ2=57.0，均P＜0.01）；抗酸染色、T-SPOT.TB 和聯(lián)合檢測(cè)的正確率分別為64.1%、96.2%和96.7%，T-SPOT. TB 單獨(dú)檢測(cè)或聯(lián)合檢測(cè)的正確率與抗酸染色相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=111.0 和χ2=116.3，均P＜0.01）。

表4 抗酸染色和T-SPOT.TB 聯(lián)合檢測(cè)診斷效能比較[%(n/N)]

2.5涂陰結(jié)核病患者 Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 檢出效果比較在確診結(jié)核病組中，有455 例涂陰結(jié)核病患者進(jìn)行了Xpert MTB/RIF檢測(cè)，結(jié)果327 例檢測(cè)為陽(yáng)性，128 例檢測(cè)為陰性，陽(yáng)性率為71.6%（327/455）；有123 例涂陰結(jié)核病患者進(jìn)行了T-SPOT.TB 檢測(cè)，結(jié)果為119 例檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，4 例檢測(cè)結(jié)果為陰性，陽(yáng)性率為96.7%?？ǚ綑z驗(yàn)表明，兩種檢測(cè)方法對(duì)于涂陰的結(jié)核病患者靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=34.0，P＜0.01），T-SPOT.TB 檢測(cè)靈敏度更高。

3 討論

我國(guó)作為全球30 個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一，結(jié)核病防控形勢(shì)依然十分嚴(yán)峻，每年報(bào)告新發(fā)結(jié)核病患者約80 萬(wàn)例，位居法定傳染病第2 位［5］。為實(shí)現(xiàn)我國(guó)《遏制結(jié)核病行動(dòng)計(jì)劃（2019—2022 年）》中要求的到2022 年全國(guó)肺結(jié)核發(fā)病率降至55/10 萬(wàn)以下，死亡率控制到3/10 萬(wàn)以下的行動(dòng)目標(biāo)，必須加大篩查力度，最大限度發(fā)現(xiàn)患者?？顾崛旧桥R床最常用的一種結(jié)核病快速診斷方法，具有檢測(cè)時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單、價(jià)格低廉等優(yōu)勢(shì)，但是其檢測(cè)靈敏度相對(duì)較低，通常情況下檢出率僅為30%～50%，假陰性的情況較多。因此，對(duì)于結(jié)核病患者特別對(duì)于多次涂陰的結(jié)核病患者亟需一種更加快捷的聯(lián)合檢測(cè)方法以提高診斷的靈敏度。

Xpert MTB/RIF 是由美國(guó)Cepheid 公司開(kāi)發(fā)的，并獲得世界衛(wèi)生組織推薦的結(jié)核病快速診斷技術(shù)，不僅具有較高的結(jié)核病診斷靈敏度和特異度［6］，同時(shí)還可以快速準(zhǔn)確檢測(cè)出利福平耐藥基因（ropB突變基因），對(duì)臨床結(jié)核病的診斷和治療具有重要意義。除了一般成人肺結(jié)核病人外，Xpert MTB/RIF 檢測(cè)對(duì)于肺外結(jié)核患者［7］、兒童肺結(jié)核患者、艾滋病患者等特殊結(jié)核病患者同樣有著較好的檢出效果。T-SPOT.TB 試驗(yàn)是基于γ 干擾素釋放實(shí)驗(yàn)（TB-IGRA）原理，通過(guò)酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)特異性檢測(cè)受試者體內(nèi)結(jié)核效應(yīng)T 細(xì)胞，從而達(dá)到診斷受試者是否感染結(jié)核桿菌的目的，具有早期、快速、價(jià)廉、生物安全性高和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)?，F(xiàn)有研究表明，其在結(jié)核病的診斷中同樣具有非常高的靈敏度和檢出率，對(duì)于兒童結(jié)核病患者其靈敏度和特異度分別為84.0%和99.1%［8］，對(duì)于合并HIV 感染的結(jié)核病患者其檢測(cè)靈敏度和特異度分別為83.7%和80.2%［9］。

本研究回顧分析了2017 年1 月至2019 年12 月在武漢市金銀潭醫(yī)院住院的19 410 例患者和45 例健康體檢者的抗酸染色、Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 的檢查結(jié)果，共有9 968 例患者納入研究，分為確診結(jié)核病組（包括肺內(nèi)結(jié)核和肺外結(jié)核）、臨床診斷肺結(jié)核組和健康對(duì)照組。結(jié)果表明，在確診結(jié)核病組和臨床診斷肺結(jié)核組中，Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率顯著高于抗酸染色；另外，確診結(jié)核病組抗酸染色、Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率同樣顯著高于臨床診斷肺結(jié)核組和健康對(duì)照組。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Xpert MTB/RIF 檢測(cè)結(jié)核病的靈敏度和特異度分別為86.7%和100%，對(duì)涂陰的結(jié)核病患者陽(yáng)性檢出率為71.6%，靈敏度略低于李秋平等［10］（92.1%）的報(bào)道，而對(duì)于涂陰的結(jié)核病患者陽(yáng)性檢出率則高于楊健等［11］（61.0%）的報(bào)道。T-SPOT.TB 檢測(cè)結(jié)核病的靈敏度和特異度分別為98.0%和84.4%，對(duì)涂陰的結(jié)核病患者陽(yáng)性檢出率為96.7%，靈敏度略高于黎永華等［4］（91.8%）的報(bào)道，與李曉和喬美芳［12］的研究報(bào)道的靈敏度（97.56%）持平，而對(duì)于涂陰的結(jié)核病患者陽(yáng)性檢出率則高于Liu 等［13］（81.4%）的報(bào)道。

在分別使用三種方法單獨(dú)進(jìn)行結(jié)核病診斷時(shí)，相較于抗酸染色，Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB均具有較高的靈敏度，但T-SPOT.TB 檢測(cè)的特異度稍低。 在抗酸染色與Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，相較于單獨(dú)使用抗酸染色可有效提高檢測(cè)的靈敏度和檢出率。但是，聯(lián)合檢測(cè)的檢出效果相較于Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 單獨(dú)檢測(cè)提升并不明顯，主要是由于Xpert MTB/RIF 和T-SPOT. TB 診斷方法自身具有較高的靈敏度，在與抗酸染色聯(lián)合檢測(cè)時(shí)提升空間有限?？顾崛旧谂R床檢驗(yàn)科應(yīng)用廣泛，因此本研究結(jié)果顯示，通過(guò)對(duì)抗酸涂片陰性的疑似結(jié)核病患者進(jìn)行Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 聯(lián)合檢測(cè)，可以在較低的檢測(cè)成本條件下獲得較好的檢出效果，對(duì)于經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)和醫(yī)療資源相對(duì)缺乏地區(qū)的結(jié)核病篩查具有重要意義。需要進(jìn)一步指出的是，雖然本研究顯示，T-SPOT.TB 聯(lián)合痰涂片對(duì)結(jié)核病的輔助診斷更加提高診斷的靈敏度，因此T-SPOT.TB 檢測(cè)本身的陰性預(yù)測(cè)值較高，彌補(bǔ)了抗酸染色陽(yáng)性預(yù)測(cè)值高而陰性預(yù)測(cè)值低的不足，二者聯(lián)合檢測(cè)更加能夠提升診斷效能。

同時(shí)，本研究也存在一定的局限：由于是回顧性研究，加上資料來(lái)源于傳染病醫(yī)院，可納入研究的健康對(duì)照組病例數(shù)相較于病例組較少，這些同期研究的健康人群多是本院職工的體檢結(jié)果。但由于本研究涉及的研究對(duì)象較多、時(shí)間跨度較大，并且數(shù)據(jù)來(lái)源于回顧分析，因此得出的結(jié)論會(huì)更加客觀(guān)、公正、科學(xué)，同時(shí)再一次證實(shí)前期本研究團(tuán)隊(duì)對(duì)IGRA 的前瞻性研究結(jié)論［14］。

綜上所述，本研究結(jié)果表明：在結(jié)核病診斷中，抗酸染色作為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目靈敏度較低，Xpert MTB/RIF 或T-SPOT. TB 檢測(cè)靈敏度明顯高 于 抗 酸 染 色。 采 用 Xpert MTB/RIF 或T-SPOT.TB 聯(lián)合抗酸染色均可顯著提高結(jié)核病診斷的靈敏度，特別是對(duì)于涂陰結(jié)核病患者，聯(lián)合T-SPOT.TB 檢測(cè)可顯著提高診斷效能。