文│韓永平（山東省日照市五蓮縣畜牧獸醫(yī)管理服務中心于里畜牧獸醫(yī)站）

韓勇*（山東省日照市動物疫病預防控制中心）

為了解山東省日照市豬偽狂犬病的流行狀況，更好地開展豬偽狂犬病凈化工作，在2017—2021年選擇4個種豬場連續(xù)5年采集1000份血清進行豬偽狂犬病檢測。結果顯示，2017—2021年4個種豬場偽狂犬群體陽性率和個體陽性率總體呈下降趨勢，但個別原種和父母代豬場陽性率依然較高，需進一步加大凈化力度。

豬偽狂犬病毒可引起豬多種急性傳染病，以發(fā)熱和腦脊髓炎為主要特征，新生仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，妊娠母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等癥狀?？刹捎秘i偽狂犬gE抗體ELISA試驗檢測豬偽狂犬感染情況。

目前豬偽狂犬病已成為危害全球養(yǎng)豬業(yè)最大的傳染病之一，既可水平傳播，也可垂直傳播，給養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴重的危害和經(jīng)濟損失。自非洲豬瘟在我國發(fā)生以來，種豬已成為當前養(yǎng)豬業(yè)的稀缺資源，做好豬病防控，對主要豬病開展凈化，提高豬群健康水平是種豬場亟需解決的問題。

日照市種豬品種較多，既有國外引進的大白、長白等瘦肉型品種，又有地方優(yōu)良品種五蓮黑豬。大白、長白等品種引入國內(nèi)由于飼養(yǎng)環(huán)境、凈化技術等原因，PRV感染不容樂觀。五蓮黑豬是日照市的優(yōu)良地方豬種，因原產(chǎn)于日照市五蓮縣而得名，1975年命名為五蓮黑豬，屬肉脂兼用型。五蓮黑豬具有耐粗飼、繁殖力高、抗病力強、肉質好、雜交優(yōu)勢明顯等特點。五蓮黑豬作為地方豬種先后被列入1999年10月出版的《山東省畜禽品種志》，2010年5月入選山東省畜牧獸醫(yī)局公布的《山東省畜禽遺傳資源保護名錄》。二十世紀八、九十年代，由于外來品種的引進和雜交改良，五蓮黑豬感染PRV的病例逐漸增多，凈化工作刻不容緩。為了解日照市種豬場偽狂犬的流行狀況，2017—2021年選擇4個種豬場連續(xù)開展流行病學調(diào)查工作。

一、材料與方法

1.抽檢方法。群內(nèi)采用流行病學抽樣方式，實驗室檢測考慮檢測方法的敏感性，即檢測到陽性動物，按照中國動物衛(wèi)生與流行病學中心設計Epi Sampling Calculator軟件，以估計流行率的抽樣方法進行抽樣監(jiān)測，抽樣樣本量計算公式為：

其中n為抽樣個數(shù)，CL為置信水平，D為群中的陽性動物數(shù)（等于群內(nèi)個體數(shù)與預定流行率的乘積），N為群內(nèi)個體數(shù)，Se為檢測方法的敏感性。

原種場按照置信水平95%，預期流行率2%，每次采樣不少于100份。父母代場按照置信水平95%，預期流行率5%，每次采樣不少于50份。樣品來源于每個種豬場不少于4棟豬舍的豬，種公豬、育成豬和后備豬要兼顧一定比例。其中大白、長白、五蓮黑豬原種場各1個，大白、長白父母代場2個。每次采集血清200份，采集情況詳見表1。

表1 日照市種豬場采樣情況

2.樣品采樣和處理方法。用促凝血管采集全血2毫升，室溫靜置30分鐘以上，待析出血清后，3000轉/分，離心3～5分鐘，將0.5毫升血清放置于1.5毫升離心管內(nèi)，做好編號。

3.檢測試劑與儀器。豬偽狂犬病毒gE抗體ELISA試劑盒購自武漢科前公司，生物安全柜購自新西蘭公司，超純水純化系統(tǒng)（Cascada）購自美國PALL公司，移液器購自Eppendorf公司，酶標儀購自美國MD公司，離心機購自Sigma公司。

4.實驗室檢測方法。采集的血清進行豬偽狂犬抗體病毒ELISA試驗，檢測PRV-gE抗體陽性率，操作方法按照試劑盒說明書進行。

二、結果與分析

1.監(jiān)測總體情況。2017—2021年，對4個種豬場開展連續(xù)監(jiān)測，共檢測血清樣品1000份。結果顯示，經(jīng)過多年的監(jiān)測凈化，豬偽狂犬總體感染率呈明顯下降趨勢，但個別原種和父母代豬場陽性率仍較高，需繼續(xù)凈化。

2.不同年份豬偽狂犬檢測情況。對2017—2021年監(jiān)測數(shù)據(jù)進行分析，2017—2021年全市檢測場點20個次，檢測樣品1000份次，豬偽狂犬個體陽性率和群體陽性率總體呈下降趨勢（見表2，表3，圖1）。

表2 2017—2021年豬偽狂犬群體陽性情況

表3 2017—2021年豬偽狂犬樣品陽性情況

3.五蓮黑豬和長白大白豬感染情況。對全市4個場多年連續(xù)檢測顯示，五蓮黑豬偽狂犬的群體陽性率和個體樣品率均較高，凈化任務依然艱巨。

三、討論

1.豬偽狂犬病呈現(xiàn)典型的潛伏感染。任何年齡段的豬感染PRV后均能形成潛伏感染，感染PRV的豬終身帶毒。在一定條件下，PRV病毒可以被激活，引起隱性豬的復發(fā)性感染和散毒。袁淑萍等在2017—2019年對河南省1384個場次的41755份豬血清進行gE抗體檢測，gE抗體平均個體陽性率和場群陽性率分別為26.99%和52.53%。其中，種豬場gE抗體平均個體陽性率和場群陽性率分別21.81%、0.92%。

豬偽狂犬病除可水平傳播外還可垂直傳播，其中垂直傳播方式隨著種群繁育會造成病原擴散、危害擴大的繼代效應。因此，從種豬場開展凈化顯得尤為重要。2017—2021年44個種豬場檢測顯示，偽狂犬總體感染率呈明顯下降趨勢，但個別原種和父母代豬場陽性率仍較高，仍需繼續(xù)堅持凈化。

養(yǎng)豬場要從《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營許可證》的種豬場引種，國外引進種豬應符合相關規(guī)定，優(yōu)先從獲得農(nóng)業(yè)部凈化評估認證的種豬場引種。對引進豬做好抽檢，由具備資質的第三方實驗室出具檢測報告。

2.為了解豬場豬偽狂犬感染情況，科學抽樣很關鍵。本研究采用流行病學方式進行群內(nèi)抽樣，采樣科學，在一定程度上能反應支原體的感染狀況。但由于時間物力等原因，僅選取4個種豬場進行監(jiān)測，數(shù)量相對較少，因此，陽性感染率需擴大抽樣群體。另外，由于原種場陽性率較低，僅采樣100份，數(shù)量相對較少，不能最大限度的反映感染情況。

四、總結

從本次持續(xù)監(jiān)測看,五蓮黑豬這一優(yōu)良地方品種在日照市雖然進行了很好地保種，但防控措施不到位，導致五蓮黑豬偽狂犬的感染率仍較高。另外，檢測結果顯示，日照市大白、長白等引進種豬偽狂犬感染率也較高。因此，下一步要把豬偽狂犬病作為豬場凈化的主要病種加以重視。

自2014年以來，日照市在全市大力開展種豬場主要垂直傳播疫病凈化工作，制定適合的凈化方案，開展豬偽狂犬、豬瘟等垂直傳播疫病凈化關鍵技術研究。經(jīng)過多年的監(jiān)測凈化，豬偽狂犬等疫病的群體陽性率和個體陽性率不斷下降，凈化成效明顯。下一步要繼續(xù)加大凈化力度，推動豬偽狂犬病從源頭上得到凈化。