楊祖?zhèn)?，黃 玲，彭 輝，蘇杜威，李 珍，黃進麗，黃雙慶，陳綺夢

（湯臣倍健股份有限公司，廣東珠海 519040）

能量膠是以碳水化合物（糖） 作為能量來源，并添加了各種電解質(zhì)和功能性物質(zhì)，制備成碳水化合物膠體[1]。運動時大量出汗將導致體液（細胞內(nèi)液和外液） 和電解質(zhì)的丟失，使體內(nèi)的水平衡和電解質(zhì)平衡被破壞，影響運動性能[2-3]。能量膠具有熱量高、快速補充能量等優(yōu)點，凝膠中的碳水化合物很快就被吸收到血液中，產(chǎn)生熱量和營養(yǎng)供給人體，幫助延緩肌肉疲勞，提高血糖水平，并提高運動活動性能[4-5]等。因此，能量膠廣泛應用在運動、軍事、旅游和航海等領域[6]。在市場中，我國需要能量膠人群逐年增加，潛在的消費人群對能量膠制品需求十分巨大，具有良好發(fā)展前景[7]。

在人體內(nèi)，維持正常的滲透壓平衡是保證各種物質(zhì)代謝過程，以及組織和器官的機能活動物質(zhì)代謝過程、組織和器官的機能活動得以正常進行的內(nèi)環(huán)境恒定的重要條件之一[8]。各類營養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等都是通過體液運送至體內(nèi)經(jīng)代謝反應和化學變化后供應各器官和組織的需要。滲透壓的大小關系到人體對營養(yǎng)的吸收，因此在研究營養(yǎng)品的營養(yǎng)價值時，除了重視各種營養(yǎng)成分的組成外，還必須充分重視其滲透壓的大小[9]。

溶劑通過半透膜由低濃度溶液向高濃度溶液擴散的現(xiàn)象稱為滲透，阻止?jié)B透所需施加的壓力，即為滲透壓。溶液的滲透壓依賴于溶液中粒子的數(shù)量，是溶液的依數(shù)性之一，通常以滲透壓摩爾濃度來表示，反映的是溶液中各種溶質(zhì)對溶液滲透壓貢獻的總和。

目前，冰點法[10]測定滲透壓以其速度快、結果準確度高、不會對樣品產(chǎn)生破壞等優(yōu)點，成為應用最廣泛的一種測定方法，但冰點法也不適用于所有樣品的檢測，比如高黏性、含有低溶解度的晶鹽、樣品雜質(zhì)多影響結晶的樣品等，即影響冷凍條件的樣品，都不適用冰點法。露點法可以處理冰點法無法處理的樣品，多用于臨床和工業(yè)化學實驗室的半固態(tài)樣品；露點法不需要改變物質(zhì)的物象形態(tài)，可以直接測量植物及動物組織切片的滲透壓，對于樣品中含有懸浮顆粒或黏稠度較大的樣品，也可以輕松得出準確的結果。因為能量膠黏度比較大，不適合采用冰點法?，F(xiàn)階段，對露點法測滲透壓的文獻非常少，也無露點滲透壓相關影響因素考查的報導。對露點法測定滲透壓的影響因素進行了考查[11]，以期為正確使用露點滲透壓儀、提升檢測結果準確性提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

露點滲透壓分析儀（VAPRO 5600），美國Wescor公司產(chǎn)品。

滲透壓標準溶液1000 mmol/kg（OA-100）、100 mmol/kg（OA-010）、290 mmol/kg（OA-029）、SS-033 型濾紙片，美國ELITechGroup 公司提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 露點滲透壓分析儀的校正[12]

按儀器說明書分別取10 μL 濃度為100，290，1000 mmol/kg 標準系列校正滲透壓測定儀，使標準溶液讀數(shù)誤差在100mmol/kg≤±2mmol/kg，290mmol/kg≤±3 mmol/kg，1000 mmol/kg≤±5 mmol/kg。

1.2.2 樣品溶液的測定

測定前將樣品溶液混勻，取10 μL 樣品均勻涂在濾紙片上，迅速用露點滲透壓分析儀測定滲透壓。

2 結果與分析

2.1 露點滲透壓分析儀的穩(wěn)定性考查[13]

露點滲透壓分析儀校正完后，分別于0，2，4，6 h 測定100，290，1000 mmol/kg 標準溶液的滲透壓，每個點測定6 次，計算平均值和偏離值。

露點滲透壓分析儀的穩(wěn)定性考查見表1。

表1 露點滲透壓分析儀的穩(wěn)定性考查

由表1 可知，100，290，1000 mmol/kg 標準溶液的滲透壓在6 h 內(nèi)偏離滿足要求，表明露點滲透壓分析儀在6 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2 不同測試體積對滲透壓檢測的影響

分別取4，6，8，10，12，15μL 濃度為290mmol/kg標準溶液進行測定，每個體積測定量測定6 次，計算平均值和偏離值。

不同測試體積對滲透壓檢測的影響見表2。

由表2 可知，在6～15 μL 的測定體積內(nèi)，對檢測結果影響不大。在試驗過程中發(fā)現(xiàn)，加入4 μL 的溶液不足以將濾紙片全部浸濕，導致結果明顯偏離；6 μL 的量恰好將濾紙片全部浸濕，出現(xiàn)輕微偏離；8～15 μL 可以將濾紙片全部浸濕，未出現(xiàn)偏離。因此，在滲透壓測定過程中取樣量必須要保證濾紙片全部浸濕。

表2 不同測試體積對滲透壓檢測的影響

2.3 濾紙片面積對滲透壓檢測的影響

將濾紙片分別剪去1/10，1/5，1/3 濾紙片面積，取290 mmol/kg 標準點進行測定，每個面積測定6 次，計算平均值和偏離值。

濾紙片面積對滲透壓檢測的影響見表3。

表3 濾紙片面積對滲透壓檢測的影響

由表3 可知，隨著濾紙片面積的缺失，滲透壓的偏離值越來越大，因此在滲透壓測試過程中必須保證濾紙片的完整，同時可以間接地反映出溶液必須要均勻分布在濾紙片上。因為等滲能量膠黏性比較大，在濾紙片上很難自動快速分散開，因此保證樣品均勻分布在濾紙片上顯得尤為重要。

2.4 等待時間對滲透壓檢測的影響

將濃度為290 mmol/kg 標準溶液加入濾紙片上后，分別等待0，10，20，30，60 s 后開始測定，每個時間點測定6 次，計算平均值和偏離值。

等待時間對滲透壓檢測的影響見表4。

由表4 可知，在0～20 s 的等待時間內(nèi)，對檢測結果影響不大，隨著時間的推移，溶液不斷揮發(fā)，滲透壓結果偏高。因此，在滲透壓的檢測過程中，最好能在20 s 內(nèi)完成加樣過程，由于等滲能量膠樣品的黏性比較高，在對樣品分散過程中存在一定的等待時間，可用槍頭使樣品迅速地均勻分散在濾紙片上，加速樣品的分布。

表4 等待時間對滲透壓檢測的影響

2.5 等滲能量膠檢測結果穩(wěn)定性考查

針對等滲能量膠樣品，采用不同時間段對同一樣品進行檢測，計算RSD，考查檢測結果的穩(wěn)定性。

等滲能量膠檢測結果穩(wěn)定性考查見表5。

表5 等滲能量膠檢測結果穩(wěn)定性考查

由表5 可知，在30 d 內(nèi)，等滲能量膠滲透壓檢測結果RSD 為1.0%～2.2%，表明等滲能量膠滲透壓檢測結果穩(wěn)定性良好。

3 結論

露點滲透壓分析儀在6 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好，檢測結果穩(wěn)定，溶液的測試體積、濾紙片面積、加樣等待時間對滲透壓測試有影響。檢測滲透壓時，要迅速測定，保證濾紙片的完整性，加入的溶液體積8～15 μL，且須在濾紙片上均勻分散。露點滲透壓儀性能穩(wěn)定、準確性好、對樣品狀態(tài)要求不高、檢測結果穩(wěn)定，適用于黏性高的等滲能量膠樣品的檢測，由于等滲能量膠高黏性的問題，采用正常的加樣方式會存在加樣時間長、樣品難以分散等問題。因此，針對等滲能量膠樣品，檢測滲透壓要注意以下問題：①加樣時，需要用槍頭將樣品迅速平鋪在濾紙片上，不得有凸起、氣泡、濾紙邊緣未浸到樣品等；②整個操作過程要快速，應在盡可能短的時間內(nèi)進行檢測。